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法醫(yī)人類學(xué) 余艦副教授 第五章一人骨或多人骨檢驗 教學(xué)目的要求1 掌握和熟悉 骨骼的形態(tài)學(xué)檢查 人類學(xué)指標檢查 血清學(xué)檢查 2 了解 分子生物學(xué)檢查 教學(xué)內(nèi)容骨骼的形態(tài)學(xué)檢查 人類學(xué)指標檢查 X線檢查 血清學(xué)檢查 骨骼型物質(zhì)的檢驗步驟 解離 試管法 解離 抽提法 凝集 抑制試驗 分子生物學(xué)檢查 形態(tài)學(xué)方法 人類學(xué)指標 影像學(xué)方法 免疫學(xué)方法 生物學(xué)方法 檢驗方法 第一節(jié)骨骼的形態(tài)學(xué)檢查首先檢查骨骼數(shù)量是否齊全 觀察有無重復(fù) 左右是否對稱 成人骨骼總數(shù)206塊 嬰幼兒因軟骨未骨化及骨性連接尚未形成故可有270塊之多 在總數(shù)上確定后 再觀察骨骼的大小 形態(tài) 顏色以及骨骼之間相互連接的吻合狀況 一般而言 數(shù)量完整的人體骨骼通過形態(tài)學(xué)復(fù)原及檢驗不難識別 但須注意檢查并考慮到多趾 指 重手等畸形的情況 案例 某菜地挖出492塊尸骨碎片 經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察和比對 其中人骨骼為433塊 計有顳骨8 額骨7 頂骨和下頜骨各4 上頜骨5 枕骨3 鎖骨8 肩胛骨9 肱骨6 尺骨7 橈骨5 椎體27 肋骨50 骶骨1 髖骨5 髂骨3 坐骨3 恥骨1 股骨8 脛骨6 腓骨6 尸骨碎片256 右側(cè)顳骨5 髖骨2對半 髂骨1對半等確定為5具尸體的骨骼 其中有1對半兒童髂骨 2個混合牙列的下頜骨 判定有2名兒童 返回 第二節(jié)人類學(xué)指標檢查如果大體形態(tài)學(xué)檢查尚難以將多人骨區(qū)分開時 可借用人類學(xué)指標的檢查進行識別 如首先對重要的有價值的骨骼如骨盆 顱骨 四肢長骨等進行性別 年齡 身高的檢驗鑒定 再將相應(yīng)的骨骼歸類排列 返回 第三節(jié)X線檢查人類學(xué)上 X線檢查骨骼干骺端鈣化愈合的狀況推斷年齡 具體方法將在有關(guān)章節(jié)中介紹 依據(jù)這一原理 同樣可用于多人骨的區(qū)別 特別是當只有極少量骨骼 并且大體形態(tài)學(xué)特征不明顯或僅憑肉眼無法鑒別時 使用x線檢查 在許多情況下 比如骨骼的年齡差異 骨骼發(fā)育的差異等 可能會達到滿意的區(qū)別效果 如果死者生前有較完整的骨骼X線攝片檔案 常??梢宰鞒鐾徽J定的推斷 返回 第四節(jié)血清學(xué)檢查當遺留骨骼量少 尤其是受各種因素影響使骨骼遭到破壞 無法從形態(tài)學(xué) 人類學(xué)和X線檢查來區(qū)別是一人骨還是多人骨時 血清學(xué)血型的檢查是一較經(jīng)典的區(qū)別方法 骨骼和毛發(fā)是人體組織中保存型物質(zhì)最穩(wěn)定且時間最長的組織 據(jù)報道 保存2000余年的長沙馬王堆漢墓女尸的毛發(fā)和骨骼中均檢出了型物質(zhì) 骨骼型物質(zhì)的檢驗步驟如下 1 將遺骨水煮 小于30min 去除雜質(zhì) 晾干 2 鋸取骨骼10g左右 磨成粉末狀備檢 3 骨粉須乙醚脫脂 蒸發(fā)干燥 4 型物質(zhì) A B H 的檢驗方法有以下四種 解離 骨粉粘貼法 解離 試管法 解離 抽提法及凝集 抑制試驗 凝集 抑制試驗用得較多 具體方法如下 1 用上述方法提取骨骼中型物質(zhì) 2 25ul抽取液 在瓷板上用生理鹽水作倍量稀釋 三列 每列6凹 3 每列分別加抗A 抗B和抗H血清25ul 效價1 4或1 8 4 室溫下4小時后加入相應(yīng)A B H0 2 紅細胞懸液1滴 5 鏡下檢驗 返回 第五節(jié)分子生物學(xué)檢查自1985年Jeffreys報道在法醫(yī)學(xué)實踐中成功地運用人類遺傳基因脫氧核糖核酸 DNA 的分子生物學(xué)檢測技術(shù)進行個體識別以來 DNA分析技術(shù)已被廣泛地應(yīng)用于親子鑒定 性別鑒定 個體同一認定等實際案例中 隨著科技的發(fā)展和研究的不斷深化 DNA分析技術(shù)不僅在方法學(xué)上有所進展 如多位點和單位點的DNA指紋技術(shù) DNA體外擴增技術(shù) 線粒體DNA mtDNA 直接測序技術(shù)等 而且DNA分析技術(shù)的檢樣也從開始的血液發(fā)展到包括陳舊性骨骼在內(nèi)的幾乎所有人體組織 且不論其新鮮與否 DNA分析技術(shù)有幾大優(yōu)勢 其一 目前應(yīng)用mtDNA直接測序的方法已有成功地從7000年前的人體骨骼和牙齒中提取了DNA片段并進行個體識別的報道 其二 DNA分析技術(shù)不僅能輕易地區(qū)別人骨 只要條件合
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