臨床微生物標(biāo)本的正確采集與運(yùn)送ppt課件

臨床微生物標(biāo)本的選擇、正確采集和運(yùn)輸、選擇、前言、“準(zhǔn)確病因診斷”、“有針對(duì)性的病因治療”以及微生物標(biāo)本的正確采集和運(yùn)輸是準(zhǔn)確病因診斷的前提。選擇、標(biāo)本采集的重要性，1、病原微生物能否成功檢測(cè)，一半的因素取決于標(biāo)本采集和運(yùn)輸是否令人滿意；2.仔細(xì)的樣本收集和有效的運(yùn)輸可以有效地降低分離微生物的難度。1、標(biāo)本采集的原則、選擇、盡快采集，應(yīng)在應(yīng)用抗生素前或停藥后一周采集，若不能停藥，應(yīng)在下次應(yīng)用抗生素前采集；2、掌握標(biāo)本檢驗(yàn)指征；3.選擇正確的收集容器；4.采用正確的采集方法，進(jìn)行無(wú)菌采集：無(wú)菌位置的標(biāo)本應(yīng)嚴(yán)格按照無(wú)菌技術(shù)操作，其他標(biāo)本應(yīng)盡可能避免標(biāo)本外的細(xì)菌污染；5、收集足夠的標(biāo)本；選擇不同的采集時(shí)間和樣本類型；6.妥善儲(chǔ)存和運(yùn)輸：樣品應(yīng)在收集后立即提交檢查。采集和運(yùn)輸血液標(biāo)本采集和運(yùn)輸尿液標(biāo)本采集和運(yùn)輸糞便標(biāo)本采集和運(yùn)輸呼吸道標(biāo)本采集和運(yùn)輸皮膚軟組織感染標(biāo)本采集和運(yùn)輸常見(jiàn)標(biāo)本采集和運(yùn)輸方法選擇血液標(biāo)本采集和運(yùn)輸血液標(biāo)本采集和運(yùn)輸適應(yīng)癥選擇血液標(biāo)本1。當(dāng)出現(xiàn)下列癥狀之一時(shí)(臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)操作規(guī)范)發(fā)熱(t 38)或低溫(t 36)，普通患者可作為采血的重要指征；冷靜。白細(xì)胞增加(計(jì)數(shù)10109/L，尤其是當(dāng)細(xì)胞核向左移動(dòng)時(shí))；皮膚和粘膜出血；昏迷。多器官衰竭；血壓下降；C反應(yīng)蛋白升高和呼吸困難；血液病患者的粒細(xì)胞增多癥(成熟多形核白細(xì)胞1109/l)；或者當(dāng)同時(shí)具有上述幾個(gè)身體體征時(shí)，應(yīng)采集血培養(yǎng)物用于臨床疑似菌血癥。(1)當(dāng)懷疑新生兒敗血癥時(shí)，除發(fā)熱或低溫外，很少培養(yǎng)細(xì)菌。尿液和腦脊液應(yīng)同時(shí)培養(yǎng)。(2)老年菌血癥患者可能沒(méi)有發(fā)熱或低溫。如果伴有身體不適、肌痛或中風(fēng)，則可能是感染性心內(nèi)膜炎。還應(yīng)采用血液培養(yǎng)。(3)骨髓培養(yǎng)和血液培養(yǎng)與檢查指征基本一致。有指征時(shí)，血培養(yǎng)是臨床常規(guī)血液感染的主要方法。然而，當(dāng)骨髓炎或長(zhǎng)期使用抗生素時(shí)，骨髓培養(yǎng)的陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于血培養(yǎng)。血液標(biāo)本容器的采集方法：血液培養(yǎng)瓶注：提前從冰箱中取出血液并重新加熱。1.皮膚消毒程序：嚴(yán)格執(zhí)行以下三步法：用75%酒精擦拭穿刺部位皮膚，等待30秒；用1-2%碘酊30秒或碘伏60秒，在穿刺處畫(huà)一圈消毒，消毒直徑 5厘米；(3)將75%酒精去碘干燥。對(duì)碘過(guò)敏的人將會(huì)用酒精消毒60秒，血液將會(huì)在干燥后被收集。(1) 75%的酒精擦拭血液培養(yǎng)瓶的橡膠塞或蓋子60秒鐘，并讓其干燥；用無(wú)菌棉簽清除橡皮塞表面殘留的酒精，并注入血液。選擇，3，血液標(biāo)本采集方法，3，抽取血液后，不要換針，直接放入血液培養(yǎng)瓶中，輕輕攪拌，防止血液凝固。如果同時(shí)進(jìn)行需氧和厭氧培養(yǎng)，樣本應(yīng)首先接種到厭氧瓶中，然后注入到需氧瓶中，以防止空氣注入到厭氧瓶中。(4)采血套數(shù)和血量：一般情況：推薦2套，每套4瓶，分不同部位，每套包括一個(gè)需氧培養(yǎng)瓶和一個(gè)厭氧培養(yǎng)瓶；采血量和培養(yǎng)基量：1:5 1:10為宜；成人：8 10毫升/瓶；兒童：1 5ml/瓶；過(guò)多或過(guò)少的血液都不利于細(xì)菌繁殖因?yàn)榘l(fā)燒時(shí)血液中可能沒(méi)有細(xì)菌。(五)采血和抽血時(shí)間；(五)采血時(shí)間；(4)特殊全身或局部感染的采血和培養(yǎng)建議：疑似急性原發(fā)菌血癥、分枝桿菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎或肺炎患者應(yīng)在不同地點(diǎn)采集2-3套血樣；(2)不明原因發(fā)熱，如潛伏性膿腫、傷寒、漏熱，應(yīng)先采集2-3套標(biāo)本，待體溫估計(jì)升高前24-36小時(shí)采集2套以上；(3)疑似菌血癥或真菌病，但血培養(yǎng)連續(xù)陰性，應(yīng)改變血培養(yǎng)方法，選擇其他類型的培養(yǎng)瓶，如高滲培養(yǎng)瓶、抗生素吸附培養(yǎng)瓶和結(jié)核桿菌培養(yǎng)瓶，以獲得稀有或營(yíng)養(yǎng)豐富的微生物；對(duì)于疑似細(xì)菌性心內(nèi)膜炎，應(yīng)在1 2小時(shí)內(nèi)采集3套血樣。如果24小時(shí)后為陰性，應(yīng)收集3套以上。5、采血點(diǎn)：靜脈采血，一個(gè)靜脈點(diǎn)只能采集一組血培養(yǎng)標(biāo)本，采集的第二組是代替靜脈穿刺點(diǎn)；除非懷疑有冠狀動(dòng)脈BSLS，否則不能從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置處取血。6.血液培養(yǎng)瓶的保存：及時(shí)送檢。如果它們不能在常溫下保存，不要冷藏它們，因?yàn)橐恍┨籼薜募?xì)菌會(huì)在冰箱的溫度下死亡。如果天氣寒冷，應(yīng)該采取保溫措施。當(dāng)采集多套和多點(diǎn)時(shí)，采集的時(shí)間和位置應(yīng)在培養(yǎng)瓶上標(biāo)明，但標(biāo)簽不應(yīng)粘貼在條形碼上，否則儀器無(wú)法識(shí)別。入選、血液標(biāo)本病原菌、血液標(biāo)本常見(jiàn)病原菌：血液標(biāo)本病原菌以細(xì)菌為主(以需氧菌為主)。厭氧菌(真菌也占相當(dāng)大的比例)，偶有支原體；醫(yī)院內(nèi)菌血癥的常見(jiàn)病原菌包括金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌、肺孢子蟲(chóng)、其他腸桿菌、銅綠假單胞菌、不動(dòng)桿菌、厭氧菌、真菌等。血液樣本的選擇、采集和運(yùn)輸，社區(qū)感染引起菌血癥的常見(jiàn)病原菌：肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腸球菌、綠色鏈球菌、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、流感嗜血桿菌、厭氧菌和真菌明顯稀少。尿液標(biāo)本的選擇、微生物檢查、尿液標(biāo)本的選擇、檢驗(yàn)適應(yīng)癥，有典型的尿路感染癥狀；肉眼血尿或膿尿；常規(guī)尿檢顯示白細(xì)胞增加和/或亞硝酸鹽陽(yáng)性。無(wú)明顯發(fā)熱及其他局部癥狀；留置導(dǎo)管患者出現(xiàn)發(fā)熱；膀胱排空功能受損；泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。(1)在使用抗生素之前；或停藥后一周，如果抗菌藥物不能停止，應(yīng)在下次用藥前使用。(2)一般來(lái)說(shuō)，從早上開(kāi)始第一次收集尿液(或尿液在膀胱中停留幾個(gè)小時(shí))，以及(3)當(dāng)臨床癥狀明顯時(shí)收集。(1)清潔中段尿收集方法：晨尿5 10 ml，最常用且易污染；醫(yī)務(wù)人員的指導(dǎo)：指導(dǎo)病人睡前少喝水，早上起床，用肥皂水清洗生殖器，從前到后擦干。開(kāi)始排尿，握住杯子的外側(cè)，但不要觸摸杯子的邊緣。丟棄尿液的前部和后部，從中部取出尿液，填充半個(gè)試管，小心擰緊杯蓋并立即送去檢查，并在1小時(shí)內(nèi)接種。恥骨上膀胱穿刺：金標(biāo)準(zhǔn)，疼痛，主要用于厭氧菌培養(yǎng)或標(biāo)本采集困難的嬰兒。(3)導(dǎo)尿：未留置導(dǎo)尿者可能會(huì)引起二次感染，一般不建議采用導(dǎo)尿法采集微生物標(biāo)本。留置導(dǎo)管：應(yīng)使用75%酒精或碘伏對(duì)導(dǎo)管進(jìn)行兩次消毒(在接頭上方，消毒長(zhǎng)度至少為5厘米)，然后使用無(wú)菌注射器抽取樣本進(jìn)行檢查。不允許從尿液收集袋中收集，也不允許打開(kāi)導(dǎo)管和u型管之間的連接定期夾尿管者應(yīng)打開(kāi)并放棄取出前段尿液，取中段尿液，仔細(xì)選擇并保存尿液微生物標(biāo)本：(1)用無(wú)菌容器盛裝標(biāo)本，標(biāo)本應(yīng)立即送檢，及時(shí)接種，并安全運(yùn)輸，防止溢出和污染；(2)如果不能立即進(jìn)行接種，可將標(biāo)本保存在4 8的冰箱中，但不得超過(guò)8小時(shí)。(3)防腐劑或消毒劑不得添加到尿液中。(1)正常參考值：無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)；(2)細(xì)菌學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)：膀胱穿刺尿液：細(xì)菌有意義；清潔尿液中段：菌落計(jì)數(shù)：革蘭氏陰性菌105/ml，革蘭氏陽(yáng)性菌濃度104/ml；但是，如果未留置導(dǎo)尿管的患者無(wú)尿路感染的臨床表現(xiàn)，則要求尿液中培養(yǎng)兩次的細(xì)菌數(shù)105個(gè)/ml，且同一細(xì)菌為致病菌。當(dāng)細(xì)菌定量培養(yǎng)計(jì)數(shù)103/ml時(shí)，導(dǎo)尿采集尿樣有意義。尿液培養(yǎng)中最常見(jiàn)的致病菌：大腸桿菌約占60 80%。其他：腸球菌、非發(fā)酵菌、變形桿菌、淋球菌、葡萄球菌、結(jié)核分枝桿菌、支原體、衣原體等。選擇不合格的尿液樣本，1)同一種標(biāo)本培養(yǎng)出4種以上的細(xì)菌，應(yīng)視為標(biāo)本采集或處理不當(dāng)受到污染；(2)檢驗(yàn)容器不合格；(3)檢查時(shí)間超過(guò)2小時(shí)。糞便微生物標(biāo)本的選擇、采集和運(yùn)輸、選擇、糞便標(biāo)本檢驗(yàn)適應(yīng)癥、急慢性腹瀉；有或無(wú)發(fā)熱無(wú)痛性大量水樣便或水樣便伴有腹瀉和嘔吐，疑似食源性疾病；腹瀉患者經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期抗生素治療；嬰兒熱性驚厥。疑似中毒性細(xì)菌性痢疾。(1)收集容器：一次性無(wú)菌盒(2)收集時(shí)間：盡可能在急性期或發(fā)病早期及應(yīng)用抗菌藥物前，在不同時(shí)間收集2-3份樣品，可提高病原菌的分離率；選擇、收集方法、自然排便方法：標(biāo)本收集時(shí)取2-3克帶膿、粘液和組織碎片的糞便，取1-3毫升液體糞便作為絮狀物，直接放入容器或保存液或運(yùn)輸培養(yǎng)基中。糞便標(biāo)本的選擇、收集和運(yùn)輸：直腸拭子法：一般用于排便困難的患者或兒童。方法：用肥皂水沖洗肛門(mén)，將棉簽插入肛門(mén)。成人約4 5厘米，兒童約2 3厘米與直腸粘膜直接接觸，輕輕旋轉(zhuǎn)，棉簽必須放在滅菌容器中進(jìn)行檢查。食物中毒患者也可采取食物、嘔吐物、胃液培養(yǎng)。糞便標(biāo)本的選擇、收集和運(yùn)輸：標(biāo)本運(yùn)輸：糞便標(biāo)本應(yīng)立即送檢，運(yùn)輸過(guò)程安全、防溢、防污染，在溫室條件下不得超過(guò)2h。不合格標(biāo)本：糞便標(biāo)本放置2小時(shí)以上；(2)直腸拭子未放置在用于檢查的運(yùn)輸介質(zhì)中；(3)尿液混合在運(yùn)輸?shù)臉?biāo)本中；標(biāo)本已經(jīng)干燥。(1)位置：上呼吸道：喉上方；(2)下呼吸道：氣管、支氣管和肺泡(2)檢查項(xiàng)目：細(xì)菌、真菌和結(jié)核桿菌的痰培養(yǎng)；真菌和結(jié)核菌涂片、選擇、微生物檢查和上呼吸道標(biāo)本檢查的適應(yīng)癥、伴有感冒的細(xì)菌性咽扁桃體炎和伴有鼻竇炎的咽痛等。上呼吸道標(biāo)本的選擇、采集方法、咽拭子：患者漱口、拔舌、經(jīng)舌根至咽后壁或懸雍垂，并涂片數(shù)次。注意拭子，避免接觸口腔和舌粘膜。鼻咽拭子：通過(guò)鼻腔進(jìn)入鼻咽，輕輕旋轉(zhuǎn)和擦拭，然后取出，然后從另一個(gè)鼻腔收集標(biāo)本。在采集過(guò)程中避免了唾液污染，標(biāo)本被快速送去檢驗(yàn)。注意：最好在早上起床后收集。痰標(biāo)本的選擇、微生物檢查、檢查適應(yīng)癥：咳嗽、咳痰、咯血、呼吸困難、發(fā)熱伴白細(xì)胞增多、胸痛。支氣管鏡檢查：氣管抽吸：環(huán)甲膜穿刺兒童胸壁穿刺痰液抽吸注射：用彎曲的壓舌板推回舌頭，將試件伸入咽部，當(dāng)刺激咳嗽時(shí)，將彈出的肺或氣管分泌物粘在拭子上檢查。痰標(biāo)本采集時(shí)，首選晨痰，并應(yīng)立即送檢，以防細(xì)菌死亡。如不能及時(shí)送檢，應(yīng)存放在4冰箱中，并選擇痰標(biāo)本評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。同一病原體連續(xù)兩次從篩查痰中分離(鱗狀上皮細(xì)胞涂片鏡檢25/肉眼，或兩者之比1:2.5)。從痰液定量培養(yǎng)中分離出致病菌濃度106cfu/ml。(3)從痰液或下呼吸道樣本中分離出通常不在呼吸道中定居的細(xì)菌或其他特殊病原體。選擇呼吸道不合格標(biāo)本，咽拭子、咳痰、吸出分泌物進(jìn)行厭氧菌培養(yǎng)無(wú)意義，應(yīng)采用氣管穿刺法收集標(biāo)本；(2)痰液樣本為水樣和唾液樣本；(3)檢查時(shí)間超過(guò)2h；(4)同時(shí)，兩個(gè)相同的試樣在同一地點(diǎn)或同一天。選定，化膿和傷口樣本的微生物檢查，選定，1。適應(yīng)癥：典型特征為局部感染、紅腫熱痛伴或不伴全身癥狀、疑似急性化膿性皮膚和軟組織感染，包括癤、癰、蜂窩織炎、丹毒、褥瘡感染、乳房膿腫及其他傷口感染，如術(shù)后切口感染、燒傷感染、臍炎等。收集方法：組織塊：嚴(yán)格消毒皮膚和手術(shù)區(qū)，以手術(shù)或侵入性技術(shù)獲得的標(biāo)本為最佳；收集盡可能多的組織；置于無(wú)菌容器或厭氧輸送系統(tǒng)中進(jìn)行檢查，如果樣品量少，加入少量無(wú)菌生理鹽水進(jìn)行檢查。(2)膿腫；開(kāi)放性傷口：在抽吸開(kāi)放性傷口前，用無(wú)菌生理鹽水擦拭表面分泌物，以避免污染，并盡可能吸深膿液進(jìn)行檢查。b .閉合性膿腫：在抽吸、穿刺和抽取膿液或分泌物進(jìn)行檢查之前，用2 3%碘酊和75%酒精對(duì)周圍皮膚進(jìn)行消毒，或在切開(kāi)和排出膿液時(shí)進(jìn)行收集和檢查。其他標(biāo)本的選擇、微生物學(xué)檢查、標(biāo)本的選擇、收集和運(yùn)輸，如胸水、腹水、膽汁、心包液、骨髓液等。1.消毒后，用穿刺針收集至少1毫升標(biāo)本，注入無(wú)菌瓶中。如果不能防止凝血，應(yīng)在試管中加入滅菌的肝素。涂片：革蘭氏染色，耐酸.真菌檢查和培養(yǎng)：常見(jiàn)細(xì)菌、結(jié)核、真菌、厭氧菌(？)在室溫下放置15分鐘到實(shí)驗(yàn)室，如果只做真菌培養(yǎng)，只能放4保存，不超過(guò)24 h。運(yùn)輸過(guò)程安全，防止溢出和污染。2.腦脊液：用于檢測(cè)真菌或抗酸桿菌時(shí)，應(yīng)2ml。1、根據(jù)感染部位選擇、采集結(jié)核標(biāo)本，采集標(biāo)本：常見(jiàn)痰液等。2.痰標(biāo)本