植物細(xì)胞有絲分裂的制片和觀察

1、植物細(xì)胞有絲分裂的制片與觀察,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.掌握植物根尖細(xì)胞有絲分裂制片技術(shù) 2.觀察植物細(xì)胞有絲分裂過程中染色體的形 態(tài)特征,二、實(shí)驗(yàn)原理,1.植物根尖、莖尖等分生區(qū)細(xì)胞能進(jìn)行有絲 分裂 2.在有絲分裂過程中，染色體發(fā)生規(guī)律性動 態(tài)變化 3.染色體可被堿性染料著色，便于觀察 4.根據(jù)顯微鏡下觀察到的染色體特點(diǎn)可識別 有絲分裂不同時期,三、實(shí)驗(yàn)儀器和藥品,1.儀器：顯微鏡、恒溫箱、水浴鍋、計時器、 燒杯、載玻片、蓋玻片、剪刀、 鑷子、滴管、刀片、玻璃皿 2.材料：大蒜 3.藥品：諾卡氏固定液 1mol/L的HCl作為解 離液、卡寶品紅作為染色液,四、實(shí)驗(yàn)流程,1. 大蒜根尖培養(yǎng)及固定：,實(shí)

2、驗(yàn)前3-4d，將大蒜掰成蒜瓣擺在鋪 有四層紗布的托盤里放入溫度為25， 一定濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天換 水兩次待根長到12cm將根剪下用吸 水紙吸干水分,將其放入諾卡氏固定液 （乙醇:冰醋酸=3:1）固定424小時。,固定的作用：殺死細(xì)胞，固定細(xì)胞形態(tài)， 維持染色體的完整性，提 高染色效果,四、實(shí)驗(yàn)流程,1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定,2.裝片制作,（1）解離,目 的：,使組織中的細(xì)胞分離開,操作：,先用95%的酒精漂洗，在HCL中 60水浴5min左右,（c）解離時，細(xì)胞已死亡,（a）解離充分是實(shí)驗(yàn)成功的必備條件,注意：,（b）解離過度，細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞,解離液：,1mol/L的HCl,四、實(shí)驗(yàn)流程,

3、1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定,2.裝片制作,漂洗液：,清水（先置于清水中浸泡2min左右）,目的：,洗去解離液，便于染色,次數(shù)：,2-3次,注意：,若不漂洗,解離過度（HCl作用） 影響染色（HCl與堿性染料反應(yīng)）,（1）解離,（2）漂洗,備注:將漂洗好的根尖放入盛有清水的培養(yǎng)皿中,四、實(shí)驗(yàn)流程,1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定,2.裝片制作,（1）解離,（2）漂洗,（3）取材,部位：,根尖2-3mm,注意：,要去除根尖乳白色根冠,（根尖分生區(qū)）,成熟區(qū),伸長區(qū),分生區(qū),根冠,根尖的結(jié)構(gòu),四、實(shí)驗(yàn)流程,1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定,2.裝片制作,（1）解離,（3）取材,（2）漂洗,（4）染色,操作：,用鑷子尖把大蒜

4、根尖弄碎（或者將根尖均 勻切成三份）,用卡寶品紅染色,68分鐘后， 蓋上蓋玻片,再蓋上一個載玻片，用拇指輕 壓載玻片,隨即用一次性筷子進(jìn)行敲片。,目的：,使細(xì)胞分散開，有利于觀察,注意：,染色時敲片的力度要適中,染色劑：,卡寶品紅染液,時間：,6-8min,（使染色體（質(zhì)）著色）,染色時間過長細(xì)胞全被染色， 無法觀察,染色時間過短染色體顏色過淺， 影響觀察,四、實(shí)驗(yàn)流程,1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定,2.裝片制作,解離漂洗取材染色,3.觀察,（1）低倍鏡觀察：,找到分生區(qū)細(xì)胞,特點(diǎn)：,細(xì)胞呈矩形，排列緊密，有分裂細(xì)胞,（2）高倍鏡觀察：,在低倍鏡的基礎(chǔ)上換用高倍鏡,（3）仔細(xì)觀察：,先找中期，再找其

5、余各時期，注意染色體特點(diǎn),（4）移動觀察：,慢慢移動裝片，完整觀察各個時期,四、實(shí)驗(yàn)流程,1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定,2.裝片制作,解離漂洗取材染色,3.觀察,低倍鏡觀察高倍鏡觀察仔細(xì)觀察移動觀察,注意：,a.觀察時應(yīng)先找到呈矩形的分生區(qū)細(xì)胞，在 一個視野里觀察時，要注意邊觀察邊移動裝片，觀察有絲分裂各個時期。,b.顯微鏡下觀察到的都是死細(xì)胞，不能看到細(xì)胞分裂的動態(tài)變化。,c.在顯微鏡下觀察到間期細(xì)胞的數(shù)目最多,操作要點(diǎn),1.解離：培養(yǎng)好的根尖先用95的酒精漂洗再放入1mol /L的HCl中60水浴5min左右 2.漂洗：先在清水中浸置2min,再用清水洗去解離液2-3 次，最后置于盛有清水的培養(yǎng)

6、皿中 3.取材：用刀片切取根尖2-3mm處的分生區(qū)，并切去乳白 色的根冠 4.染色：用鑷子尖把大蒜根尖弄碎（或者用刀片將根尖 均勻切成三份）,用卡寶品紅染色,68min后， 蓋上蓋玻片,再蓋上一個載玻片，用拇指輕壓載 玻片隨即用一次性筷子進(jìn)行敲片。 5.觀察：首先在低倍鏡進(jìn)行觀察,再到高倍鏡下觀察。,五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果對比圖,間期,前期,中期,后期,末期,后期與末期 的過渡期,六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示,前期,中 期,后 期,末 期,六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示,間期,后期,中期,末期,1、鹽酸的作用是什么？,鹽酸起解離的作用，殺死根尖細(xì)胞，溶解細(xì)胞間質(zhì)，破壞胞間連絲，使細(xì)胞容易發(fā)生分離。,2、清水漂洗的作用目的是什么？,清水漂洗的作用即洗去材料中的解離液, 便于染色。,作用是使細(xì)胞中的染色體著色。因?yàn)槿旧w很容易被這樣的堿性染料染色。,3、卡寶品紅的作用是什么？,4、裝片制作完成，輕輕按壓的作用是什么？,使細(xì)胞相互分離，在載玻片上平鋪成一層，便于觀察。,思考,七、作