分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)：熒光分光光度法測(cè)定硫酸奎寧含量.ppt_第1頁(yè)
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1、實(shí)驗(yàn)二十八 熒光分光光度法測(cè)定硫酸奎寧含量,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1掌握熒光分光光度法的基本原理 2學(xué)會(huì)使用F- 4500熒光分光光度計(jì),二、方法原理,利用熒光分析方法，測(cè)定能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)含量，對(duì)不能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)，可以利用某些具有能發(fā)生熒光基團(tuán)的有機(jī)試劑，與非熒光物質(zhì)形成較純的熒光化合物，然后進(jìn)行測(cè)定，是一種高靈敏度的分析方法。,定性依據(jù)： 激發(fā)光光譜 熒光光譜,定量依據(jù)： 當(dāng) l c0.05時(shí),將括號(hào)項(xiàng)近似處理后： F= 2.3 I0 l c = Kc,定量方法,標(biāo)準(zhǔn)曲線法： 配制一系列標(biāo)準(zhǔn)濃度試樣測(cè)定熒光強(qiáng)度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，再在相同條件下測(cè)量未知試樣的熒光強(qiáng)度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出濃度. 比較法：

2、 在線性范圍內(nèi)，測(cè)定標(biāo)樣和試樣的熒光強(qiáng)度，比較.,熒光儀器組成： 激發(fā)光源、樣品池、雙單色器系統(tǒng)、檢測(cè)器。 特殊點(diǎn)：有兩個(gè)單色器，光源與檢測(cè)器通常成直角。,三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,（一）硫酸奎寧激發(fā)光譜的繪制 用0.05 mol/L硫酸溶液為參比溶液，用10 mg/L的硫酸奎寧溶液作為測(cè)定液。 固定熒光波長(zhǎng)為443 nm，從300 nm到400 nm，每間隔10 nm測(cè)定一次熒光相對(duì)強(qiáng)度。以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，熒光相對(duì)強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出激發(fā)光譜圖，指出最大激發(fā)波長(zhǎng)max為345 nm。,（二）硫酸奎寧熒光光譜的繪制 用10 mg/L的硫酸奎寧溶液作為測(cè)定液。 從380 nm到600 nm，每隔20 nm測(cè)定一次熒光相對(duì)強(qiáng)度。以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，熒光相對(duì)強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出熒光光譜圖，指出最大發(fā)射波長(zhǎng)max為445 nm。,（三）直接比較法測(cè)定測(cè)定硫酸奎寧含量,式中： CX待測(cè)液的濃

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