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文檔簡(jiǎn)介

1、.實(shí)驗(yàn)一、小腸平滑肌生理特性的觀察與分析一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 觀察溫度、乙酰膽堿、腎上腺素等藥物對(duì)離體家兔小腸平滑肌的作用;2. 觀察消化道平滑肌的一般生理特性及分析理化環(huán)境改變對(duì)其舒縮活動(dòng)的影響。二、實(shí)驗(yàn)原理消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一樣,也具有興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性,有些也具有自律性。相比之下消化道平滑肌的興奮性低,收縮慢,伸展性大,具有緊張性收縮, 對(duì)化學(xué)物質(zhì)、溫度變化及牽張刺激較敏感等特性。小腸離體后,置于適宜的溶液中,觀察其收縮活動(dòng)及環(huán)境變化的影響,觀察分析上述生理特性。三、實(shí)驗(yàn)材料1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:家兔2、 器械、藥品:電熱恒溫水浴鍋、浴槽、張力換能器(量程為25g以下)、BL-410生物

2、記錄系統(tǒng)、L型通氣管、道氏袋、注射器、培養(yǎng)皿、溫度計(jì)、燒杯、螺 絲夾、三維調(diào)節(jié)器、臺(tái)氏液、0.01%去甲腎上腺素、0.01%乙酰膽堿、1mol/L NaOH溶液、lmol/L HCl溶液、2%CaCl2溶液。四、實(shí)驗(yàn)方法和步驟1、標(biāo)本制備流程:擊昏家兔:用木槌猛擊兔頭枕部,使其昏迷。剖開(kāi)腹腔快速取出腸管:立即剖開(kāi)腹腔,找出胃幽門(mén)與十二指腸交界處,快速取長(zhǎng)2030cm的腸管,先將與該腸管相連的腸系膜沿腸緣剪去,置于供氧臺(tái)氏液中輕輕漂洗,把腸內(nèi)容物基本洗凈。制作離體腸標(biāo)本:將腸管分成數(shù)段,每段長(zhǎng)2-3cm,兩端各系一條線,保存于供氧的38左右的臺(tái)氏液中2、儀器安裝與調(diào)試實(shí)驗(yàn)安裝(如圖):恒溫水浴鍋

3、控制加熱,恒溫工作點(diǎn)定在38。將充滿氧氣的道氏袋與通氣鉤相連接,將腸段一端系在通氣管鉤上,另一端與張力換能器相連??刂仆饬?,使氧氣從通氣管前端呈單個(gè)而不是成串逸出。儀 器調(diào)試:BL-410系統(tǒng)的使用,選擇“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”中的“消化實(shí)驗(yàn)”選中“消化道平滑肌生理特性”。相關(guān)參數(shù)設(shè)置的參考值:時(shí)間常數(shù)tDC,高頻濾波 F30Hz,顯速4.00s/div,增益100g。用鼠標(biāo)左鍵單擊工具條上的“開(kāi)始”按鈕,調(diào)節(jié)參數(shù)至波形幅度、密度適當(dāng),待收縮曲線穩(wěn)定后,單 擊記錄按鈕。觀察項(xiàng)目現(xiàn)象及解釋1待標(biāo)本穩(wěn)定后,記錄小腸平滑肌收縮的對(duì)照曲線。2乙酰膽堿的作用 用滴管吸入0.01%乙酰膽堿向灌流浴槽內(nèi)滴12滴。觀察

4、到明顯效應(yīng)后,立即從排水管放出浴槽內(nèi)含乙酰膽堿的臺(tái)氏液,加入新鮮溫臺(tái)氏液,由此反復(fù)3次,以洗滌或稀釋殘留的乙酰膽堿,使之達(dá)到無(wú)效濃度,待小腸運(yùn)動(dòng)恢復(fù)后進(jìn)行下一項(xiàng)。3腎上腺素的作用 按上述方法將0.01%腎上腺素加入浴槽內(nèi)12滴,觀察小腸運(yùn)動(dòng)的反應(yīng)。當(dāng)效果明顯后,立即更換臺(tái)氏液。4氯化鈣的作用 加2%CaC12溶液23滴入灌流浴槽內(nèi),觀察其反應(yīng),效果明顯后迅速?zèng)_洗。5鹽酸的作用 加12滴1mol/L HCl溶液入浴槽內(nèi),觀察其反應(yīng)。6氫氧化鈉的作用 在(5)基礎(chǔ)上加等容量的1mol/L NaOH溶液入浴槽內(nèi),觀察其反應(yīng)。按上述方法更換臺(tái)氏液,反復(fù)沖洗。7溫度的影響 將浴槽內(nèi)臺(tái)氏液放出,注入25臺(tái)

5、氏液,觀察平滑肌收縮有何改變,當(dāng)效應(yīng)明顯后再換入38臺(tái)氏液,持續(xù)一段時(shí)間后,再換入42臺(tái)氏液,觀察收縮活動(dòng)的變化(亦可根據(jù)室溫的具體情況選做其中的一項(xiàng))。五、注意事項(xiàng)1. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須保證標(biāo)本的供氧(通氣)及浴槽內(nèi)臺(tái)氏液的恒溫(38),以維持標(biāo)本活性。2. 灌流浴槽內(nèi)的液面高度應(yīng)保持恒定。3. 放大器零點(diǎn)調(diào)好后不要再移動(dòng)旋鈕,以免影響基線。4. 上述各藥液加入的量系參考數(shù)據(jù),效果不明顯者可以添加。5. 每次實(shí)驗(yàn)效果明顯后立即放掉含藥液的臺(tái)氏液,并沖洗多次,以免平滑肌出現(xiàn)不可逆反應(yīng)。6各項(xiàng)處理必須有處理標(biāo)記。六、相關(guān)知識(shí)家兔小腸平滑肌以胃幽門(mén)與十二指腸交界處的腸管活動(dòng)最好,對(duì)生物化學(xué)因素也較敏

6、感,所以選取用此處腸管作標(biāo)本。七、實(shí)驗(yàn)討論:1、 正常情況下,我們觀察到離體小腸平滑肌在臺(tái)氏液中可以自動(dòng)地、緩慢地收縮,但其節(jié)律性很不規(guī)則。小腸平滑肌自律性產(chǎn)生的離子基礎(chǔ)尚未完全清楚,目前認(rèn)為, 它的產(chǎn)生可能與細(xì)胞膜上生電性鈉泵的活動(dòng)具有波動(dòng)性有關(guān),當(dāng)鈉泵的活動(dòng)暫時(shí)受抑制時(shí),膜便發(fā)生去極化;當(dāng)鈉泵活動(dòng)恢復(fù)時(shí),膜的極化加強(qiáng),膜電位便又回到原 來(lái)的水平。2、在浴槽中加入0.01%乙酰膽堿 (Ach )2滴(約0.2ml)后,可見(jiàn)離體腸管活動(dòng)增強(qiáng),描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變快,幅度增加。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的機(jī)理,目前認(rèn)為與消化道平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生動(dòng)作電位的 離子基礎(chǔ)是Ca2+的內(nèi)流有關(guān)。乙酰膽堿可與肌膜上的M受體

7、結(jié)合,使得兩類(lèi)通道開(kāi)放:一類(lèi)為電位敏感性Ca2+專(zhuān)用通道,另一類(lèi)為特異性受體活化Ca2+ 專(zhuān)用通道。前一類(lèi)通道對(duì)Ach敏感,小劑量Ach即引起開(kāi)放;后一類(lèi)通道對(duì)Ach相對(duì)不敏感,只有大劑量Ach才會(huì)引起開(kāi)放。這兩類(lèi)通道開(kāi)放都使得肌漿中 Ca2+增高,進(jìn)而激活肌纖蛋白肌凝蛋白ATP系統(tǒng),使平滑肌收縮,肌張力增加。3、 在浴槽中加入0.01%腎上腺素2滴(約0.2ml)后,可見(jiàn)離體腸管活動(dòng)減弱,描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變慢,幅度減小以及基線下移。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的機(jī)理, 目前認(rèn)為與腸肌細(xì)胞膜上存在和兩中受體,受體又分為抑制型受體和興奮型受體有關(guān)。腎上腺素作用于抑制型受體,引起腸肌膜上一種特異性受體活 化,

8、使K+外流增多,細(xì)胞膜發(fā)生超極化,腸肌興奮性降低,肌張力下降。同時(shí),腎上腺素還作用于受體,它的激活引起腸肌細(xì)胞膜中的cAMP合成增 多,cAMP激活腸肌膜及肌漿網(wǎng)上Ca2+泵活動(dòng),使肌漿中Ca2+濃度降低,亦使肌張力降低; 受體激活后還促使K+及Ca2+外流增加,加速膜的超極化,促進(jìn)了腸肌肌張力的減低。4、在浴槽中加入2%氯化鈣溶液2滴后,離體腸管活動(dòng)增強(qiáng),描記曲線出現(xiàn)收縮幅度增加。這是因?yàn)榧尤肼然}后,細(xì)胞外液Ca2+濃度升高,則Ca2+內(nèi)流增加,使得細(xì)胞內(nèi)液中Ca2+濃度升高,Ca2+與鈣調(diào)蛋白結(jié)合增加,促進(jìn)了橫橋的激活。因而收縮力增加。5、 在浴槽中加入1mol/L鹽酸溶液2滴后,離體腸

9、管活動(dòng)減弱,描記曲線出現(xiàn)收縮幅度降低,頻率變慢。出現(xiàn)這一現(xiàn)象,目前認(rèn)為其原因在于:細(xì)胞外H+升高 時(shí),Ca2+通道的活性受到抑制,使得Ca2+內(nèi)流減少。 H+升高能干擾肌肉的代謝和肌絲滑行的生化過(guò)程: H+能與Ca2+競(jìng)爭(zhēng)鈣調(diào)蛋白的結(jié)合位點(diǎn)而使肌球蛋白ATP酶活性降低(近期有理論認(rèn)為是直接抑制作用而非競(jìng)爭(zhēng)作用);使肌原纖維對(duì)Ca2+的敏感性和 Ca2+從肌質(zhì)網(wǎng)的釋放量減少。6、在加鹽酸使平滑肌收縮減弱的基礎(chǔ)上,再加2滴NaOH于浴槽中,則腸管活動(dòng)出現(xiàn)相反的情況,即腸管活動(dòng)增強(qiáng)。原因在于NaOH可以中和H+,改變了細(xì)胞外液的PH值,PH過(guò)高、過(guò)低,收縮幅度及張力都會(huì)降低,最適PH時(shí)收縮效果最好。

10、7、 浸浴小腸腸管的臺(tái)氏液溫度以3840為宜,低于或高于這個(gè)溫度,都會(huì)影響結(jié)果。因?yàn)槟c管平滑肌對(duì)溫度改變極為敏感,當(dāng)溫度降到30以下時(shí),由于代 謝水平的降低,興奮性減弱,可出現(xiàn)收縮曲線基線下移,頻率變慢,收縮幅度變小。有時(shí)可能會(huì)見(jiàn)到基線先上移后下降的現(xiàn)象。這是因?yàn)榻禍乇旧韺?duì)腸管是一種刺 激,也可短暫地加強(qiáng)代謝活動(dòng),所以肌張力升高。當(dāng)溫度高于40時(shí),由于酶活性提高,各離子通道活性增加,使得基線上移,收縮頻率增高,幅度增加。當(dāng)然, 如果臺(tái)氏液溫度過(guò)高(50以上),可因蛋白變性,使腸管收縮功能消失。八、結(jié)論:1、消化道平滑肌具有自律性,但其收縮緩慢,節(jié)律性不規(guī)則。2、消化道平滑肌具有一定的緊張性。3

11、、消化道平滑肌的活動(dòng)易受溫度、PH值及其它化學(xué)因素、藥物因素的影響。【基本原理】哺乳動(dòng)物的胃腸平滑肌具有自動(dòng)節(jié)律性收縮、伸展性、緊張性和對(duì)理化刺激較敏感等生理特性。這些特性對(duì)維持消化管一定壓力,保持胃腸等一定的形態(tài)和位置,適合于消化管內(nèi)容物的理化變化具有生理意義。在整體內(nèi)受中樞神經(jīng)系統(tǒng)和體液因素的調(diào)節(jié)。本實(shí)驗(yàn)觀察及記錄哺乳動(dòng)物等離體腸段的一般特性及在一些藥物作用下引起的各種效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)二、化學(xué)因素對(duì)心臟活動(dòng)的影響一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 理解K+,Ca2+及腎上腺素、乙酰膽堿、阿托品對(duì)心臟活動(dòng)的影響。2. 掌握離體心臟標(biāo)本的制備方法。3. 記錄信號(hào)同時(shí)打標(biāo)記的方法。4. 觀察內(nèi)環(huán)境理化因素的相對(duì)恒定對(duì)維

12、持心臟正常節(jié)律活動(dòng)的重要作用。 二、實(shí)驗(yàn)原理1. 心臟的正常節(jié)律性活動(dòng)的維持需要一個(gè)適宜的理化環(huán)境,如鉀、鈉、鈣濃度比例,適宜的酸堿度和溫度。在體內(nèi)心臟還受植物神經(jīng)雙重支配,交感神經(jīng)興奮時(shí),其末梢釋放去甲腎上腺素,使心肌收縮力加強(qiáng),傳導(dǎo)加速,心率加快;而迷走神經(jīng)興奮時(shí),其末梢釋放乙酰膽堿,使心房肌收縮力減弱,心率和傳導(dǎo)減慢。2. 蟾蜍心臟離體后,用理化特性近似于血漿的任氏液灌流,在一定時(shí)間內(nèi),可保持節(jié)律性收縮和舒張。改變?nèi)问弦旱慕M成成分,心臟的活動(dòng)就會(huì)受到影響。三、實(shí)驗(yàn)討論由實(shí)驗(yàn)所記錄的曲線結(jié)果可以看出,改變蟾蜍離體心臟的灌流液成份,可影響其心臟的舒縮節(jié)律和幅度。 1.用任氏液灌流心臟, 可以

13、保持較長(zhǎng)時(shí)間的節(jié)律性舒縮活動(dòng)。這是因?yàn)槿问弦旱闹饕x子成份、滲透壓、PH值和蟾蜍Cell外液相近, 為蛙心提供了一個(gè)適宜的理化環(huán)境。 2、用065%NaCL溶液灌流心臟, 其心跳減弱。 心肌的收縮活動(dòng)是由Ca+觸發(fā)的, 由于心肌細(xì)胞的肌漿網(wǎng)不發(fā)達(dá), 故心肌收縮的強(qiáng)弱與細(xì)胞外Ca+濃度呈正比。 用065%NaCL 溶液灌蛙心,灌注液中缺乏Ca+,以致心肌動(dòng)作電位2期內(nèi)流Ca+減少, 心肌收縮活動(dòng)也隨之減弱。3.用高鉀任氏液灌注心臟時(shí), 心跳明顯減弱, 甚至出現(xiàn)心臟停到舒張狀態(tài)。因?yàn)榧?xì)胞外K+濃度增高時(shí),導(dǎo)致(1)、K+與Ca+有競(jìng)爭(zhēng)性拮抗作用,K+可抑制細(xì)胞膜對(duì)Ca+,的轉(zhuǎn)運(yùn), 使進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)Ca

14、+,減少, 心肌的興奮-收縮耦聯(lián)過(guò)程減弱, 心肌收縮力降低;(2)動(dòng)作電位3期K+外流增加,平臺(tái)期縮短,使平臺(tái)期Ca+內(nèi)流減少,收縮力減弱。當(dāng)細(xì)胞外K+濃度顯著增高時(shí), 膜內(nèi)外的鉀離子濃度梯度減小, 靜息電位的絕對(duì)值過(guò)度減小(膜內(nèi)達(dá)55mv左右時(shí),Na+通道失活), 心肌的興奮性完全喪失, 心肌不能興奮和收縮, 停止于舒張狀態(tài)。長(zhǎng)時(shí)間用, 心臟最終會(huì)停止收縮。4.用高Ca+任氏液灌流蛙心時(shí), 心收縮力增強(qiáng), 舒張不完全, 以致收縮基線上移。 在Ca+,濃度高的情況下, 會(huì)停止在收縮狀態(tài), 這種現(xiàn)象稱(chēng)之為” 鈣僵”。 心肌的舒縮與心肌肌漿網(wǎng)中Ca+濃度高低有關(guān)。 當(dāng)鈣離子濃度升高到一定水平(10

15、-5M) 時(shí), 作為鈣受體的肌鈣蛋白結(jié)合了足夠的Ca+,就引起了肌鈣蛋白分子構(gòu)型的改變, 從而觸發(fā)了肌絲滑行, 肌纖維收縮。 當(dāng)鈣離子濃度降低至10-5M時(shí), 鈣離子與肌鈣蛋白解離, 心肌隨之舒張, 如果鈣離子濃度持續(xù)升高, 鈣離子與肌鈣蛋白結(jié)數(shù)量不斷增加, 甚至達(dá)到只結(jié)合不解離的程度, 致使心肌持續(xù)收縮(鈣僵)。5. 向蛙心插管中加去甲腎上腺素后, 可見(jiàn)蛙心收縮增強(qiáng), 心臟舒張完全, 描記的心搏曲線幅度明顯增大、心跳加快、曲線密度明顯變大。 其原因是去甲腎上腺素與心肌細(xì)胞膜上的 受體相結(jié)合, 從而激活肌漿網(wǎng)釋放的Ca+也增多。 同時(shí)靜脈竇4期去極化速度加快, 故心肌舒縮增強(qiáng), 心跳加快。 6

16、. 在任氏液內(nèi)滴加乳酸, 心跳減弱, 其原因是H+進(jìn)入心肌內(nèi)膜后, 可降低Ca+與肌鈣蛋白的親和力, 促使Ca+的解離。 7. 在上述灌流液中加入與乳酸同當(dāng)量的NaOH, 心肌的舒縮逐漸恢復(fù)。 其原因是NaOH中和了乳酸, 解除了Ca+與肌鈣蛋白親和力的抑制8. 任氏液內(nèi)滴加Ach, 蛙心收縮減弱, 收縮曲線基線下移, 心率減慢, 最后心跳停止于舒張狀態(tài)。 原因是Ach與心肌細(xì)胞膜M受體相結(jié)合, 一方面提高心肌細(xì)胞膜K+的通透性, 促使K+外流, 導(dǎo)致(1) 靜脈竇復(fù)極時(shí)K+外流增多, 最大復(fù)極電位絕對(duì)值增大;Ik衰減過(guò)程減弱, 自動(dòng)除極速度減慢。 導(dǎo)致靜脈竇自得律性降低, 心律減慢。(2)

17、復(fù)極過(guò)程中K+外流增加, 動(dòng)作電位2,3期縮短, Ca+進(jìn)入心肌細(xì)胞內(nèi)減少, 使心肌收縮減弱; 另一方面Ach可直接抑制Ca+通道, 減少Ca+內(nèi)流, 進(jìn)而使心肌收縮減弱。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)論由此可以看出:蟾蜍離體心臟對(duì)細(xì)胞外液離子濃度的改變,酸堿,NE,Ach敏感。實(shí)驗(yàn)三、紅細(xì)胞滲透脆性測(cè)定、影響血液凝固的因素及血型鑒定(一)、紅細(xì)胞滲透脆性的測(cè)定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)測(cè)定紅細(xì)胞滲透脆性的方法。2、加深對(duì)細(xì)胞外液滲透張力在維持紅細(xì)胞正常形態(tài)與功能重要性方面的理解。3、觀察不同因素對(duì)紅細(xì)胞滲透脆性的影響。二、實(shí)驗(yàn)原理將紅細(xì)胞懸浮于等滲NaCI液中,其形態(tài)不變。若置于低滲NaCI溶液中則發(fā)生膨脹破裂

18、,此現(xiàn)象稱(chēng)為紅細(xì)胞滲透脆性。但紅細(xì)胞對(duì)低滲鹽溶液具有一定抵抗力,其大小可用NaCI溶液濃度的高低來(lái)表示。將血液滴入不同濃度的低滲NaCI溶液中,開(kāi)始出現(xiàn)溶血現(xiàn)象的NaCI溶液濃度為該血液紅細(xì)胞的最小抵抗力(正常為0.42-0.46%NaCI溶液)。出現(xiàn)完全溶血現(xiàn)象時(shí)的NaCI溶液濃度為該紅細(xì)胞的最大抵抗力(正常為0.28-0.32%NaCI溶液)。前者代表紅細(xì)胞的最大脆性(最小抵抗力),后者代表紅細(xì)胞最小脆性(最大抵抗力)。生理學(xué)上將能使懸浮于其中的藥細(xì)胞保持正常形態(tài)的溶液稱(chēng)為等張溶液,不能跨過(guò)細(xì)胞膜的微粒所形成的力,但等滲溶液并不一定是等張溶液(如1.9%的尿素溶液)。三、材料與方法1. 實(shí)

19、驗(yàn)對(duì)象:家兔2. 器械藥品:試管架、小試管45支、載玻片、蓋玻片注射器、8號(hào)注射針頭、棉簽,1%NaCI溶液、0.85%氯化鈉溶液、蒸餾水,1.9%尿素溶液、地塞米松、皂甙。3. 方法與步驟:配制不同濃度的低滲NaCI溶液 取口徑相同的干潔小試管36支,分別編號(hào)排列在三個(gè)試管架上,按下表分別向各試管內(nèi)加入1%NaCI溶液和蒸餾水混勻,配制從0.68-0.24%12種不同濃度的NaCI低滲溶液,每管總量均為2.5ml。試劑 試管編號(hào)1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 121%NaCl(ml) 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 0.

20、6蒸溜水(ml) 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9NaCl濃度% 0.68 0.64 0.60 0.56 0.52 0.48 0.44 0.40 0.36 0.32 0.28 0.24四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果皂甙(ml)另取9支小試管,在三個(gè)試管架中分別編號(hào)13-15,分別加入0.85%NaCI溶液、1.9%尿素和蒸溜水2.5ml。采集標(biāo)本 家兔麻醉后,仰臥固定于兔手術(shù)臺(tái)上,分離一側(cè)頸總動(dòng)脈或股動(dòng)脈插管備放血用(具體方法參見(jiàn)第 章)。依次向15支試管內(nèi)各加1滴,輕輕顛倒混均,切忌用力振蕩。先觀察13、14、15管的變化,其他12管在室溫下放置1

21、小時(shí)。五、觀察指標(biāo)血液溶血情況,其現(xiàn)象可分為以下幾種:1、試管內(nèi)液體完全變成透明紅色,說(shuō)明紅細(xì)胞完全破裂,稱(chēng)為完全溶血。2、試管內(nèi)液體下層為混濁紅色,上層無(wú)色透明,表示部分紅細(xì)胞沒(méi)有破壞,稱(chēng)為不完全深血。3、試管內(nèi)液體下層為混濁紅色,上層無(wú)色透明,說(shuō)明紅細(xì)胞完全沒(méi)有破壞。六、觀察項(xiàng)目1、觀察不同濃度低滲NaCI 混合液的顏色和透明度。2、比較第一個(gè)試管架第13、14、15管的溶血情況及第二、第三個(gè)試管架中與第一個(gè)試管架中對(duì)應(yīng)試管的溶血情況并分析其原因。七、注意事項(xiàng)1、每支試管內(nèi)血液滴入量應(yīng)準(zhǔn)確無(wú)誤(只加一滴)。2、確保每支試管NaCI溶液的濃度、容量一致。3、小試管必須清潔、干燥。4、觀察結(jié)果

22、時(shí)應(yīng)以白色為背景。八、實(shí)驗(yàn)討論1. 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示升高溫度血液凝固過(guò)程加快,而當(dāng)試管浸入冰水中時(shí),血液凝固過(guò)程減慢,這表明血液凝固的過(guò)程受溫度的影響。血液凝固過(guò)程是一種發(fā)生在血漿中由許多因素參與的復(fù)雜的生物化學(xué)連鎖反應(yīng)過(guò)程,而溫度可以影響生化反應(yīng)過(guò)程,在一定范圍內(nèi),隨著溫度的增加,生化反應(yīng)的速度加快,血液凝固需要的時(shí)間就縮短。反之,亦然。2. 實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),試管中加入棉花后血液凝固所需的時(shí)間縮短,而用石蠟油潤(rùn)滑試管內(nèi)表面后血液凝固所需的時(shí)間延長(zhǎng)。接觸面的粗糙程度影響血小板的粘附、聚集。激活的血小板為凝血因子提供磷脂表面,參與內(nèi)外源性凝血途徑因子X(jué)和凝血酶原的激活;血小板表面結(jié)合有許多凝血因子,可

23、加速凝血過(guò)程,血小板激活釋放的內(nèi)容物,可增加纖維蛋白的形成。 3. 實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),試管中加入肝素后血液不凝固。肝素(1)增強(qiáng)抗凝血酶III的活性,(2)可刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞大量釋放TFPI和其它抗凝血物質(zhì);(3)肝素還可增強(qiáng)纖溶。(二)、影響血液凝固的因素一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康谋緦?shí)驗(yàn)以發(fā)生血液凝固的時(shí)間為指標(biāo),向血液中加入或去掉某些因素或改變某些條件(如溫度等),以觀察對(duì)血液凝固的影響。二、實(shí)驗(yàn)原理血液流出血管后很快就會(huì)凝固。血液凝固分為內(nèi)源性凝血系統(tǒng)與外源性凝血系統(tǒng)是指在組織因子的參與下血液凝固的過(guò)程。本實(shí)驗(yàn)直接從動(dòng)物動(dòng)脈放血,由于血液幾乎沒(méi)有和組織因子接觸,其凝血過(guò)程主要由內(nèi)源性凝血系統(tǒng)所發(fā)動(dòng)。血液凝固

24、受許多因素的影響,凝血因子可直接影響血液凝固過(guò)程。溫度、接觸面的光滑程度等也可影響血液凝固過(guò)程。三、材料與方法 1.實(shí)驗(yàn)對(duì)象:家兔2.器材藥品:小燒杯、帶橡皮刷的玻棒或竹簽(或小號(hào)試管刷)、清潔試管10支、秒表、水浴裝置一套、冰塊、棉花、石蠟油、肝素或草酸鉀、生理鹽水。3.方法與步驟:動(dòng)物準(zhǔn)備 家兔麻醉后,仰臥固定于兔手術(shù)臺(tái)上,行一側(cè)頸總動(dòng)脈或股動(dòng)脈插管,備取血用。試管的準(zhǔn)備 取8支干凈的小試管,按表7-2準(zhǔn)備各種不同的實(shí)驗(yàn)條件。(三)、影響血液凝固的因素一、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 不加其它物質(zhì)放棉花少許用石蠟油潤(rùn)滑試管內(nèi)表面保溫于37?C水浴糟中冰水中加肝素8單位加草酸鉀1-2mg肺組織浸液1ml二、觀察指標(biāo):凝血時(shí)間三、觀察項(xiàng)目1、取兔動(dòng)脈血10ml,注入兩個(gè)小燒杯內(nèi),一杯靜置,另一杯用帶有橡皮刷的玻棒或竹簽(也可用小號(hào)試管刷)輕輕攪拌,數(shù)分鐘后,玻棒或竹簽上結(jié)成紅色血團(tuán)。用水沖洗,觀察纖維蛋白形狀。然后比較兩杯的凝血情況。2、準(zhǔn)備好的每支試管中滴入兔血1ml,觀察血液是否發(fā)生凝固及發(fā)生凝固的時(shí)間。四、注意事項(xiàng)1、加強(qiáng)分工合作,記時(shí)須及時(shí)、準(zhǔn)確。最好由一位同學(xué)負(fù)責(zé)將血液加入試管,其它同學(xué)各掌握1-2支試管,每隔半分鐘觀察

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