

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文檔簡(jiǎn)介
1、1,2,學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)的基本技術(shù),實(shí)驗(yàn)原理 1.配制培養(yǎng)基時(shí)要注意原料的選擇和調(diào) 節(jié)適宜的PH 2.配制好的培養(yǎng)基必須經(jīng)過(guò)滅菌,滅菌是指殺死一定環(huán)境中的所有微生物細(xì)胞、芽孢和孢子。 3.對(duì)不同的材料,應(yīng)當(dāng)采取不同的滅菌方法:培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法,而接種環(huán)則用火焰灼燒法,方法步驟:,一、細(xì)菌的培養(yǎng)技術(shù):,1、培養(yǎng)基的配制:,1、稱量,2、溶化,3、調(diào)PH,4、培養(yǎng)基的分裝,5、加棉塞,6、包扎,加入材料(蛋白胨、牛肉膏、瓊脂等)加熱溶化,1mol/L的NaOH溶液,PH試紙,7476,棉塞能防止雜菌污染,保證通氣良好。不能太松、不難太緊,2/3在管內(nèi),5,6,1,正確,7,2、滅菌,開鍋
2、加水 放入待滅菌的材料:管口向上,豎放,不能太擠 加蓋 排出鍋內(nèi)冷空氣:達(dá)49Kpa時(shí),排氣兩次 維持:98 Kpa,20min 排氣:鍋內(nèi)壓力降為0時(shí),才能排氣,8,3、擱置斜面,將鍋內(nèi)試管等取出,在冷卻至50時(shí),擱置 斜面,斜面長(zhǎng)度不能超過(guò)試管總長(zhǎng)度的1/2,9,4、接種,洗凈雙手,用酒精擦拭 等手上酒精揮發(fā)以后,點(diǎn)燃酒精燈 接種,左手夾住菌種試管和接種斜面試管,擰松棉塞,10,接種環(huán)灼燒滅菌,右手無(wú)名指和小指夾住棉塞(不能放下), 灼燒管口一周,11,接種環(huán)伸入試管內(nèi),在末長(zhǎng)菌的部位冷卻, 后挑取少量菌體,立即抽出,12,在火焰旁迅速將接種環(huán)由斜面底部向外輕輕 畫蛇形細(xì)線,13,抽出接種
3、環(huán),再用火焰灼燒管口,并在火焰 上方將棉塞塞上,熄滅酒精燈 填寫標(biāo)簽,14,5、培養(yǎng),25 C 57天 37 C 24小時(shí),1不同微生物生長(zhǎng)所要求的最適溫度不同。請(qǐng)就測(cè)定大腸桿菌生長(zhǎng)最適溫度的實(shí)驗(yàn)回答下列問(wèn)題: (1)配制的相應(yīng)培養(yǎng)基可屬于 。 A天然培養(yǎng)基 B半固體培養(yǎng)基 C液體培養(yǎng)基 D伊紅一美藍(lán)選擇培養(yǎng)基,課堂練習(xí),AC,(2)依次按稱量、溶化、調(diào)pH、分裝(每管5ml)、 、包扎的順序,完成培養(yǎng) 基的配制,再用 (方法) 滅菌后,取8支試管,分別標(biāo)明20、28、37、45四種溫度,每種溫度2管。,加棉塞,高壓蒸氣滅菌法,(3)向每管中接人處于 期的大腸桿 菌菌液0lml,混勻。在相應(yīng)溫
4、度下培養(yǎng) 24h。,對(duì)數(shù),(4)測(cè)定結(jié)果顯示,45下的菌體最少,因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)的 等發(fā)生了不可逆的破壞。,蛋白質(zhì)和核酸,(2008理綜天津卷)31、(16分) 莠去津是一種含氮的有機(jī)化合物,它是廣泛使用的除草劑之一。 莠去津的作用機(jī)理之一是阻斷光反應(yīng)中的電子傳遞過(guò)程,影響NADP形成,進(jìn)而影響在中進(jìn)行光合作用的暗反應(yīng)過(guò)程,最終抑制雜草生長(zhǎng)。,NADPH,葉綠體基質(zhì),從使用莠去津農(nóng)田中,選到了能遺傳的耐莠去津雜草,將它與敏感莠去津植株雜交,結(jié)堅(jiān)果見下表:,由表推斷,控制該耐藥性狀的基因位于。,細(xì)胞質(zhì)中,某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察
5、計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。 (1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了_和_。除此之外,培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_和_。 (2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,應(yīng)該采用的方法是_ 。,氮源,碳源,無(wú)機(jī)鹽,水,高壓蒸汽滅菌,(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于_ _ 中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠,還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種_作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。,(4)培養(yǎng)20小時(shí)后,觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落,這說(shuō)明湖水樣品中有_種細(xì)菌。一般說(shuō)來(lái),菌落總數(shù)越多,湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_。,恒溫培養(yǎng)箱,無(wú)菌水,多,高,(5)如果提高培養(yǎng)基中Na
6、Cl的濃度,可以用于篩選耐_細(xì)菌,這種培養(yǎng)基被稱為_ 。,鹽,選擇性培養(yǎng)基,22,16在光亮處用一種培養(yǎng)液分別培養(yǎng)綠藻和酵母菌,其結(jié)果如右圖,造成這種結(jié)果的原因是培養(yǎng)液中 A缺少無(wú)機(jī)鹽 B含氧量太高 C缺少有機(jī)養(yǎng)分 D不含二氧化碳,C,17右圖是細(xì)菌的生長(zhǎng)速度曲線,根據(jù)曲線回答下列問(wèn)題: (1)活細(xì)菌數(shù)量最多時(shí)對(duì)應(yīng)的是曲線中的 段。 總菌數(shù)目(包括死菌和活菌)最多的時(shí)期對(duì)應(yīng)曲線中的 段。,(2)3段中生長(zhǎng)速度下降的原因是 。,3,4,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗;有害代謝產(chǎn)物的積累,Ph 值變化,(3)調(diào)整期出現(xiàn)的原因是細(xì)菌接種到新的培養(yǎng)基上后,需要重新合成必需的酶,輔酶或某些必需中間代謝產(chǎn)物,以適應(yīng)新環(huán)境,這種調(diào)節(jié)方式屬 。,酶合成的調(diào)節(jié),(4)處于對(duì)數(shù)期的微生物,代謝旺盛,生長(zhǎng)迅速,如果用作菌種,可在短時(shí)間內(nèi)得到大量微生物,以縮短發(fā)酵周期,曲線中屬于這一時(shí)期的是 段。,2,3(重慶)下列有關(guān)大腸桿菌的敘述,正確的是 A大腸桿菌以復(fù)制方式進(jìn)行繁殖
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