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文檔簡(jiǎn)介
1、 專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 酵裝置要清洗干凈;每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。 1 果酒和果醋的制作課題00 35C?25C?制作葡萄醋時(shí),為什么要將溫度控制在303制作葡萄酒時(shí),為什么要將溫度控制在180左右最適合酵母菌繁殖,因此需要將溫度控制在其最 20C溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。1果酒制作的原理00 ,因此要將溫度控制在3035C。適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長(zhǎng)溫度為(1)人類利用微生物發(fā)酵制作果酒,該過(guò)程用到的微生物是 , 3035C 4制葡萄醋時(shí),為什么要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣? 它的代謝類型是 ,與異化作用有關(guān)的方程式有 醋酸菌是好氧菌,再將酒精變成醋酸
2、時(shí)需要養(yǎng)的參與,因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。 。 P4: 生活狀態(tài):進(jìn)行發(fā)酵,產(chǎn)生大量 。 同學(xué):每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋,不要完全揭開瓶蓋;制醋時(shí),再將瓶蓋打開,蓋上一層紗布,進(jìn)A)果酒制作條件 (2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來(lái)源是。 行葡萄醋的發(fā)酵。 來(lái)防止發(fā)酵液被污染,因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌 PH呈 ;酵母菌生長(zhǎng)的最適溫度是 ; (3)紅色葡萄酒呈現(xiàn)顏色的原因是:酒精發(fā)酵過(guò)程中,隨著 的提高,紅色葡萄皮的 B同學(xué):分析果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通 過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接?色。進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈 充氣口:是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接
3、充氣泵進(jìn)行充氣用的; )在 、的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖,而絕大多數(shù)其它微4( 排氣口:是在酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出二氧化碳的;生物都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。 2果醋的制作原理出料口:是用來(lái)取樣的。排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。使用該裝置。 )果醋發(fā)酵菌種是 ,新陳代謝類型 (1 (2)當(dāng)氧氣和糖源充足時(shí)醋酸菌將糖分解成 ,當(dāng)糖源不足時(shí)醋酸菌將 變?yōu)?制酒時(shí),應(yīng)該關(guān)閉充氣口;制醋時(shí),應(yīng)將充氣口連接氣泵,輸入氧氣。 課題2 腐乳的制作 。再變成醋酸,其反應(yīng)式 1.制作原理3操作過(guò)程應(yīng)注意的問(wèn)題 (1)經(jīng)過(guò)微生物的發(fā)酵,豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的
4、 和 ,脂肪被分解成 1()為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用 消毒。 和 )葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),要留出大約(2 的空間。 ,因而更利于消化吸收。 (2)腐乳的發(fā)酵有多種微生物參與,如 、 、 、 對(duì)可通過(guò) d制作葡萄酒時(shí)將溫度嚴(yán)格控制在3() ,時(shí)間控制在左右, 等,其中 起主要作用的是 。它是一種絲狀 ,常見 、 、 發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測(cè)。 、 (4)制葡萄醋的過(guò)程中,將溫度嚴(yán)格控制在 ,時(shí)間控制在 d,并注意適時(shí)在 上。 菌種直接接種在豆腐上, 條件下,將優(yōu)良 )現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的 充氣。 3( 這樣可以避免其他菌種的 酒精的檢驗(yàn)4 ,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。 )檢驗(yàn)試劑:1(。2. 腐乳
5、制作的實(shí)驗(yàn)流程: 。條件下,反應(yīng)呈現(xiàn) )反應(yīng)條件及現(xiàn)象:在(2 密封腌制。 讓豆腐長(zhǎng)出 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)3. 制作果酒、果醋的實(shí)驗(yàn)流程5.,自然條件下毛霉的菌種來(lái)自空氣中( 挑選葡萄1 )在豆腐上長(zhǎng)出毛霉時(shí),溫度控制在 的。 近瓶口的加鹽量要隨著擺放層數(shù)的加高而)(2 果醋 果酒將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊分層加鹽, , ,同時(shí)也能 表層要。加鹽的目的是使豆腐塊失水,利于 ;鹽的濃度過(guò) 的生長(zhǎng)。鹽的濃度過(guò)低, 旁欄思考題P4 。 你認(rèn)為應(yīng)該先洗葡萄還是先除去枝梗,為什么?1高, 同時(shí)也與豆腐 它能左右,鹵湯中酒精的含量應(yīng)控制在3() 應(yīng)該先沖洗葡萄,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污
6、染的機(jī)會(huì)。 微生物的生長(zhǎng), ;酒精含量過(guò) 形成有關(guān)。酒精含量過(guò)高, 乳獨(dú)特的 你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?2 。香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味,同時(shí)也有低,需要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)行全面的考慮,因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。例如:榨汁機(jī)、發(fā) 作用。 1 (4)瓶口密封時(shí),最好將瓶口 ,防止瓶口污染。 質(zhì)亞硝胺,亞硝胺對(duì)動(dòng)物有致畸和致突變作用。 3泡菜制作大致流程:原料處理 裝壇 P6旁欄思考題 成品 (1)配制鹽水:清水和鹽的比例為 ,鹽水 1.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí),解釋豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事? 后備用。 (2)裝壇:蔬菜裝至 豆腐上生長(zhǎng)的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說(shuō)是直立菌絲,在豆
7、腐中還有匍匐菌絲。 時(shí)加入香辛料,裝至 時(shí)加鹽水,鹽水要 , 蓋好壇蓋。壇蓋邊沿水槽中 ,保證壇內(nèi) 2.王致和為什么要撒許多鹽,將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)? 環(huán)境。 (3)腌制過(guò)程種要注意控制腌制的 、 和 鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。 。溫度 過(guò)高、食鹽用量不足10%、 過(guò)短,容易造成 , 3你能總結(jié)出王致和做腐乳的方法嗎? 。 4測(cè)亞硝酸鹽含量的原理是 讓豆腐長(zhǎng)出毛霉加鹽腌制密封腌制。 。 將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的 進(jìn)行比較,可以大致 P7旁欄思考題 出泡菜中亞硝酸鹽的含量。我們平常吃的豆腐,哪種適合用來(lái)做腐乳?1. 測(cè)定步驟:配定溶液 制備樣品處理液 含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳
8、。用含水量過(guò)高的豆腐制腐乳,不易成形。 吃腐乳時(shí),你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對(duì)人體有2.P9旁欄思考題: 害嗎?它的作用是什么?為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶? ,它能形成腐乳的“體”,使腐乳成 “皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲(匍匐菌絲)酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用。抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌的生長(zhǎng),因此含有抗生素形?!捌ぁ睂?duì)人體無(wú)害。 的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。P8 練習(xí)P10旁欄思考題:為什么要隨豆腐層的加高而增加鹽的含量?為什么在接近瓶口的表面要將鹽厚鋪 1. 腌制腐乳時(shí),1為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜,不宜多吃腌制蔬菜? 一些?
9、 有些蔬菜,入小白菜和蘿卜等,含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過(guò)久發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)越接近瓶口,雜菌污染的可能性越大,因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量,在接近瓶口的表或者煮熟后存放太久時(shí),蔬菜中的硝酸鹽會(huì)被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。面,鹽要鋪厚一些,以有效防止雜菌污染。 2為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜?你認(rèn)為這層白膜是怎么形成的? 怎樣用同樣的原料制作出不同風(fēng)味的腐乳?(可以不看)2形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液營(yíng)養(yǎng)豐富,其表面氧氣在酒和料上作變動(dòng) 含量也很豐富,適合酵母菌繁殖。紅腐乳:又稱紅方,指在后期發(fā)酵的湯料中,配以著色劑紅曲,釀制而成
10、的腐乳。 P12白腐乳:又稱白方,指在后期發(fā)酵過(guò)程中,不添加任何著色劑,湯料以黃酒、白酒、香料為主釀練習(xí): 2目前大致包括糟方、使其呈現(xiàn)不同的風(fēng)味特色,你能總結(jié)果酒、果醋、腐乳、泡菜這幾種發(fā)酵食品在利用微生物的種類和制作原理方面的不同嗎?在釀制過(guò)程中因添加不同的調(diào)味輔料,制而成的腐乳,你能總結(jié)出傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的共同特點(diǎn)嗎?油方、霉香、醉方、辣方等品種。 果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵,青腐乳:又稱青方,俗稱“臭豆腐”,指在后期發(fā)酵過(guò)程中,以低度鹽水為湯料釀制而成的腐乳, 果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變成醋酸的代謝,具有特有的氣味,表面呈青色。 腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等
11、酶類,醬腐乳:又稱醬方,指在后期發(fā)酵過(guò)程中,以醬曲(大豆醬曲、蠶豆醬曲、面醬曲等)為主要輔 泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵。 料釀制而成的腐乳。 傳統(tǒng)的發(fā)酵技術(shù)都巧妙的利用了天然菌種,都為特定的菌種提供了良好的生存條件,最終的發(fā)酵課題3 制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量 產(chǎn)物不是單一的組分,而是成分復(fù)雜的混合物。專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 情況狂下,將葡萄糖分解為乳酸。在自然 ,在1乳酸菌代謝類型為 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 界中分布廣泛,在 、 、 、 內(nèi)都有分布。常見的乳酸菌有 和 兩種,其中 和 1根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基可以分為 。 常用于生產(chǎn)酸奶。 2亞硝酸鹽為 四類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),
12、另外還 、 、 ,易溶于 ,在食品生產(chǎn)中用作 。一般不會(huì)危害人體 、 培養(yǎng)基一般都含有2 健康,但當(dāng)人體攝入硝酸鹽總量達(dá) 、 需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì) g時(shí),會(huì)引起中毒;當(dāng)攝入總量達(dá)到 以及 的要求。 g時(shí),會(huì) 引起死亡。在特定的條件下,如 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是3 、 。 和 的作用下,會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物 2 4消毒是指 P18平板劃線操作的討論 1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒 滅菌是指 5日常生活中常用的消毒方法是 ,此外,人們也常使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒,如用 、 接種環(huán)嗎?為什么? 等。常用的滅菌方法有 、 、 ,此外,實(shí)驗(yàn)室里還用 或 操作
13、的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接 進(jìn)行消毒。 種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端,從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。 , , , 6制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟是 劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。 。 , 2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線? 。平板劃線 7微生物接種的方法中最常用的是 和 以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。 。稀釋涂布平板 是指 3.在作第二次以及其后的劃
14、線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線? 。 法指 劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù) 8菌種的保藏:目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。長(zhǎng)成后, ,在合適的溫度下培養(yǎng), (1)臨時(shí)保藏:將菌種接種到試管的 P19涂布平板操作的討論個(gè)月,轉(zhuǎn)移一次新的培養(yǎng)基。 3 冰箱中保藏,以后每6放入 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求,想一想, 或產(chǎn)生變異。 缺點(diǎn)是:保存時(shí)間 ,菌種容易被 第 法,放在 2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作? 冷凍箱中保存。 2()長(zhǎng)期保存方法: 應(yīng)從操作的
15、各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何 其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。 P15旁欄思考題:P20無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外,還有什么目的?六、課題成果評(píng)價(jià) 1.無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。 培養(yǎng)基的制作是否合格 如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1旁欄思考題:P16 2 d后無(wú)菌落生長(zhǎng),說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要,請(qǐng)選擇合適的方法。 2.培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿(1) 接種操作是否符合無(wú)菌要求 如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基
16、本一致,并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn),則說(shuō)明接 玻棒、試管、燒瓶和吸管)(2種操作是符合要求的;如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說(shuō)明接種過(guò)程中,無(wú)菌操作還未達(dá)到要求,)(3 實(shí)驗(yàn)操作者的雙手 需要分析原因,再次練習(xí)。 )需要消毒。)需要滅菌;()、(1233.是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄 P17倒平板操作的討論 培養(yǎng)左右時(shí),才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到1.50 12 h與24 h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同,及時(shí)觀察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn),并能觀察到其他一些細(xì)微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。 度?P20練習(xí) 可以用手觸摸盛有培
17、養(yǎng)基的錐形瓶,感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板1. 了。提示:可以從微生物生長(zhǎng)需要哪些條件的角度來(lái)思考。例如,微生物的生長(zhǎng)需要水、空氣、適宜的溫度,食品保存可以通過(guò)保持干燥、真空的條件,以及冷藏等方法來(lái)阻止微生物的生長(zhǎng)。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰? 2.提示:可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)行總結(jié)歸納。例如,這三種培養(yǎng) 通過(guò)灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。技術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營(yíng)養(yǎng),但無(wú)土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無(wú)菌的條件,而其他兩種平板冷凝后,為什么要將平板倒置?3. 技術(shù)都要求嚴(yán)格的無(wú)菌條件。平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的
18、培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使 3.培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。 提示:這是一道開放性的問(wèn)題,答案并不惟一,重點(diǎn)在于鼓勵(lì)學(xué)生積極參與,從不同的角度思考問(wèn)題。例如,正是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的,微生物學(xué)才可能發(fā)展成為一門獨(dú)立的學(xué)科;在倒平板的過(guò)程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)4.巴斯德實(shí)驗(yàn)中用到的加熱滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn),而這一滅菌原理也適用于食品的微生物嗎?為什么? 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。保存等。 3 土壤中分解尿
19、素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)課題2 P22旁欄思考題 1.想一想,如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)?選擇分解尿素細(xì)菌 之后,才能被植物吸收利用。 分解成 1尿素只有被 答:統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計(jì) 培養(yǎng)基。 3個(gè)平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值,然后按 惟一氮源,按物理性質(zhì)歸類為 的培養(yǎng)基特點(diǎn): 課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算。 。此項(xiàng)技術(shù)的自動(dòng) 2PCR( )是一種在體外將 P22 聚合酶。 化,要求使用耐高溫的DNA63實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是:人為提供有利于 生長(zhǎng)的條件(包括 兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù),在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù) 10的培養(yǎng)集中,得到以
20、下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果:1.第一位同學(xué)在該濃度下涂布了一個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230,同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。等) ;2.第二位同學(xué)在該濃度下涂布了三個(gè)平板 4選擇培養(yǎng)基是指 。 第一位同學(xué)只涂布了一個(gè)平板,沒(méi)有設(shè)置重復(fù)組,因此結(jié)果不具有說(shuō)服力。第二位同學(xué)考慮到設(shè) 。即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng) 5常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是 置重復(fù)組的問(wèn)題,涂布了3個(gè)平板,但是,其中就能推測(cè)出樣 。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差太遠(yuǎn),說(shuō)明在操作基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的 過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤,因此,不能簡(jiǎn)單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值。品中大約含有多少活菌。為
21、了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在 P22設(shè)置對(duì)照 。利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān) 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)公式是 A 也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同,可能的解釋有兩種。一是由于土樣不同,二是由于培養(yǎng)基污染或 鍵是 。另外, 操作失誤。究竟是哪個(gè)原因,可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明。實(shí)驗(yàn)方案有兩種。一種方案是可以由其他同學(xué)用 6一般來(lái)說(shuō),統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目 。這是因?yàn)?與A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如果結(jié)果與A同學(xué)一致,則證明A無(wú)誤;如果結(jié)果不同,則證明A同 而不是活菌數(shù)來(lái)表示。 。因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問(wèn)題。另一種方案是將A同學(xué)配制的培
22、養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn) ,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。對(duì) 7設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是 行培養(yǎng),作為空白對(duì)照,以證明培養(yǎng)基是否受到污染。通過(guò)這個(gè)事例可以看出,實(shí)驗(yàn)結(jié)果要有說(shuō)服力, 未滿 照實(shí)驗(yàn)是 , 。滿足該條件的稱為 對(duì)照的設(shè)置是必不可少的。 。 足該條件的稱為 P24旁欄思考題 ,具體的實(shí)驗(yàn)步驟 、 和 8實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括的內(nèi)容有: 、 為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度?測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素 以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。的細(xì)菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎? 在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中, 。 不同種類的微生物,9往往需要不同的培養(yǎng) 和培養(yǎng) 這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量(單位:株/
23、kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上層樣本中: 可落,菌隔一般每24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次落數(shù)目選取菌數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記這樣果作為結(jié),錄好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2 185萬(wàn),放線菌數(shù)約為477萬(wàn),霉菌數(shù)約為23.1萬(wàn)。因此,為獲得不同 。 以 類型的微生物,就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離,同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地提供選擇培養(yǎng)的條件。 ”之稱,同其他生物環(huán)境相比,土壤中微生 土壤有“10 P25 結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 。 物 、 1培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落 潮濕土壤中生長(zhǎng)。 11土壤中的微生物約 是細(xì)菌,細(xì)菌適宜在酸堿度接近 對(duì)照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng),說(shuō)明培養(yǎng)基沒(méi)有被雜菌污染。牛肉膏
24、培養(yǎng)基的菌落數(shù) 的稀釋度不同。 土壤中微生物的數(shù)量不同,分離不同微生物采用的 目明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目,說(shuō)明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。 一般來(lái)說(shuō),在一定的培養(yǎng)條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括菌落122樣品的稀釋操作是否成功 等方面。 和 、 的 、 如果得到了2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30300的平板,則說(shuō)明稀釋操作比較成功,并能夠進(jìn)行 在進(jìn)行多組實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)注意做好標(biāo)記,其目的是13 。 菌落的計(jì)數(shù)。 對(duì)所需的微生物進(jìn)行初步篩選,只是分離純化菌種的第一步,要對(duì)分離的菌種進(jìn)行一步的鑒143重復(fù)組的結(jié)果是否一致 定,還需要借助 的方法。 如果學(xué)生選取的是同一種土樣,統(tǒng)計(jì)的
25、結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠(yuǎn),教師需要引導(dǎo)學(xué)生一 氨會(huì)使培養(yǎng)基的 將尿素分解成了 在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中,15細(xì)菌合成的 。起分析產(chǎn)生差異的原因。 PH , 。因此,我們可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基 變化來(lái)判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。 堿性 P26練習(xí) 升高,指示劑將 為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入 在以 指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后,如果PH 2.提示:反芻動(dòng)物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微 變 ,說(shuō)明該細(xì)菌能夠 。生物多為厭氧菌,接觸空氣后會(huì)死亡,因此分離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基外, 4 還應(yīng)參照厭氧菌的培養(yǎng)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。 的另一缺點(diǎn)是:有些微生物
26、具有降解色素的能力,它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)降解剛果紅形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。 課題3 分解纖維素的微生物的分離 2.為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?1纖維素是 類物質(zhì), 在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng) 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,此外,木材、 作物秸稈等也富含纖維素。 這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。 2纖維素酶是一種 酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即 、 P29 六、課題成果評(píng)價(jià) 正是在這 。 1.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落:對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中
27、沒(méi)有菌落 和 ,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成 三種酶的協(xié)同作用下,纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng),同樣,也可以為人類 如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說(shuō)明可能獲得了分解纖維素的微生物。生長(zhǎng)則說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格。 所利用。2.分離的結(jié)果是否一致:由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量,因此最容易分直接對(duì)微生物進(jìn) 3篩選纖維素分解菌可以用 離得到的是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同,學(xué)生也可能得到真菌和放線菌等不同的分離結(jié)果。 法,這種方法能夠通過(guò) 行篩選。 可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成 ,但并不和水解后的 P30 練習(xí) 分解纖維素,從而使菌
28、落周圍形 2.答:流程圖表示如下。 發(fā)生這種反應(yīng)。纖維素分解菌能產(chǎn)生 和 。 土壤取樣選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來(lái)確定)梯度稀釋 成 4分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程圖如下: 梯度稀釋 將菌懸液涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基上挑選單菌落發(fā)酵培養(yǎng) 專題三 植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 。 課題1 菊花的組織培養(yǎng) 的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的發(fā)酵 為確定得到的菌是否是纖維素分解菌,還學(xué)進(jìn)行5 方法有 發(fā)酵和 發(fā)酵。測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的 進(jìn)行定量測(cè)定。 1有某種生物全套 的任何一個(gè)活細(xì)胞,都具有發(fā)育成 的能力,即每個(gè)生物細(xì)胞 都具有 。但在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中
29、并不表現(xiàn)出來(lái),這是因?yàn)樵?條件下, 通過(guò)基因的 P28旁欄思考題 ,構(gòu)成不同組織和器官。 2. 植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用有:實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的 2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同? ;培育 作物;制作 種子;培1.本實(shí)驗(yàn)的流程與課題 育作物 以及細(xì)胞產(chǎn)物的 2本實(shí)驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一 等。 3. 細(xì)胞分化:個(gè)體發(fā)育中細(xì)胞在 氮源的選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。本課題通過(guò)選擇培養(yǎng),使纖維素分解菌得到增殖后,再 上出現(xiàn) 差異的過(guò)程。 4. 愈傷組織是通過(guò) 形成的,其細(xì)胞排列 將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。 ,高度 呈 狀態(tài)的 為什么要在富
30、含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?2. 細(xì)胞。 5. 植物組織培養(yǎng)的過(guò)程可簡(jiǎn)單表示為:由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對(duì)提高,因此 誘導(dǎo)叢芽 (脫分化) 愈傷組織 ) ( (生長(zhǎng)) 移栽生根新個(gè)體 從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。 將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?3.6.材料:植物的種類、材料的 將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。和 等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般 選擇 作材料。左右腐殖土壤中。10 cm一般應(yīng)將紙埋于深約 7. 旁欄思考題P29營(yíng)養(yǎng):常用的
31、培養(yǎng)基是 培養(yǎng)基,其中含有的大量元素是 ,微量元素 是這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?你打算選用哪一種方法?想一想,1(兩種剛果紅染色法的比 ,有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。 較)、 、 等植物激素,其 和 激素:在培養(yǎng)基中需要添加8. 方法一是傳統(tǒng)的方法,缺點(diǎn)是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜;其優(yōu)點(diǎn)是這樣等都影響結(jié)果。,光照條 PH PH9.環(huán)境條件:、等環(huán)境條件。菊花組培所需為,溫度為 顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。 方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,不存在菌落混雜問(wèn)題,缺點(diǎn)是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀。件為 ,計(jì)算用粉類物質(zhì),可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微
32、生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透 10. 配制各種母液:將各種成分按配方比例配制成的濃縮液。使用時(shí)根據(jù)母液的 明圈較為模糊,因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二稀釋。 量,并加 5 2.、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液,你打算做幾組重復(fù)?你打算設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎?11. 配制培養(yǎng)基:應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、 答:教師可以安排學(xué)生分組,做不同的材料或配方,最后分別匯報(bào)成果。但每種材料或配方至少,原因是菊花莖毫升。在菊花組織培養(yǎng)中,可以不添加 并用 定容到 要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過(guò)滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,與接
33、種操作后的段組織培養(yǎng)比較容易。 錐形瓶一同培養(yǎng),用以說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格,沒(méi)有被雜菌污染。滅菌:采取的滅菌方法是 。 12. (二)練習(xí)發(fā)酵操作 13答:植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差,對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織1.13.1前期準(zhǔn)備:用 消毒工作臺(tái),點(diǎn)燃酒精燈。注意所有接種工作都必須在酒精燈旁進(jìn) 培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長(zhǎng),如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)物一旦受到微生物。 行,器械使用前后都要用火焰灼燒 朝上,每個(gè)錐形瓶接種 個(gè)外植體。的污染,就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄,因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作。接種操作:接種過(guò)程中插入外植體時(shí)13.2 答:外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行
34、組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好,容 2.外植體接種與細(xì)菌接種相似之處是 。 中進(jìn)行,并定期進(jìn)行消毒,保持適宜的 和 。 易誘導(dǎo)脫分化和再分化。13.3培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)該放在 課題2 月季的花藥培養(yǎng),讓其在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日,然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后 13.4移栽前應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的 1. 等環(huán)境中生活一段時(shí)間,進(jìn)行壯苗。最后進(jìn)行露將幼苗移植到 天栽培。(n) 個(gè)精子 ) ( 小孢子母細(xì)胞(2n )分裂 )分裂 ( ( 課題成果評(píng)價(jià) )細(xì)胞(n ( (一)對(duì)接種操作中污染情況的分析 ( )細(xì)胞(n) ( )時(shí)期(n) 4 3d后,在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng)物會(huì)表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。請(qǐng)
35、學(xué)生適時(shí)統(tǒng)計(jì)污染接種 )細(xì)胞核(n ( n)細(xì)胞核( ( )期() 單核( n 率,分析接種操作是否符合無(wú)菌要求。 (二)是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化 ( )分裂 雙核期 n)期( 單核( 觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果,看看是否培養(yǎng)出了愈傷組織,記錄多長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)出愈傷組織。統(tǒng)計(jì)更換培養(yǎng)基后愈 傷組織進(jìn)一步分化成根和芽的比例和時(shí)間。等階段?;ǚ凼怯苫ǚ勰讣?xì)胞經(jīng) 和 (三)是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄 育被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷2. 、 而形成的,因此花粉是 做好統(tǒng)計(jì)和對(duì)照,填好結(jié)果記錄表,培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度。從實(shí)驗(yàn)的第一步開始就要求學(xué)生做好過(guò) 。 個(gè)花粉。 個(gè)精子;一個(gè)小孢子母細(xì)胞可以產(chǎn)生 實(shí)驗(yàn)記錄,可以讓
36、學(xué)生分組配制不同培養(yǎng)基,如誘導(dǎo)愈傷或直接分化叢芽的培養(yǎng)基,然后做不同配方3.在正常情況下, 在一枚花藥中可以產(chǎn)生 產(chǎn)生花粉植物的兩種途徑的比較。 4. (四)生根苗的移栽是否合格 ) 脫分化 ( 花藥中的花粉 生根苗移栽技術(shù)的關(guān)鍵是既要充分清洗根系表面的培養(yǎng)基,又不能傷及根系。一般使用無(wú)土栽培 ) 脫分化 ( 5%可以向培養(yǎng)基質(zhì)噴灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為培養(yǎng)基質(zhì)要提前消毒,的辦法。的高錳酸鉀,12 并用塑料薄膜覆蓋 花藥中的花粉 叢芽 是:主要因素中多受種因素影響,其才能移栽。新移栽的組培苗要在溫室過(guò)渡幾天,等壯苗后再定植大田或進(jìn)行24 hh。掀開塑料薄膜后影高成功株導(dǎo)5. 誘花粉植能否成及誘導(dǎo)功率的低,
37、 盆栽。學(xué)生可以在課后統(tǒng)計(jì)自己移栽的成活率,看看移栽是否合格。 等。和 答案和提示 材料的選擇:6. (一)旁欄思考題、盛花期、晚花期)的花藥;從花藥來(lái)看,應(yīng)當(dāng)選擇( 初花期 、雙核期、萌發(fā)期)的花粉;從花粉來(lái)看,應(yīng)當(dāng)選擇(四分體期、培養(yǎng)基的配方有哪MS中微生物培養(yǎng)基的配方相比,2你能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎?同專題1.單核期 、略微開放、完全盛開)的花蕾。從花蕾來(lái)看,應(yīng)當(dāng)選擇(完全未開放 些明顯的不同?確定花粉發(fā)育時(shí)期,此時(shí)需要對(duì)花粉細(xì)胞核進(jìn)行染色,最常用的染色選擇花藥時(shí)一般通過(guò) 7.答:微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽;蔗糖提供碳源,同時(shí)能夠維持細(xì)胞 色。 色和 ,它們分別
38、可以將細(xì)胞核染成劑是 和 的滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn) 8. 在使用焙花青鉻釩溶液時(shí),需要首先將花藥用 處理培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)MS生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同,20min。該試劑的配制方法是將 機(jī)營(yíng)養(yǎng),無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類。 按體積比為的比例混合均勻。 6 消毒后的花蕾,要在 條件下除去花萼、花瓣。剝?nèi)』ㄋ帟r(shí),一是注意不要損傷花藥,原因9. ;二是要徹底除去花絲,因原 是 。 是 10. 剝?nèi)〉幕ㄋ幰⒖探臃N到 上。 個(gè)花藥?;ㄋ幣囵B(yǎng)利用的培養(yǎng)基是每個(gè)培養(yǎng)瓶接種
39、,幼苗形成之前(需要、不需要)光照。在花藥培養(yǎng)基中,溫度為 培養(yǎng)基,pH為 ;在用量最高的激素是 ;在誘導(dǎo)叢芽或胚狀體培養(yǎng)基中,用量最高的激素是 誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中,用量最高的激素是 。 上進(jìn)行前者還要轉(zhuǎn)移到20 培養(yǎng)30d后,花藥開裂,長(zhǎng)出 或釋放出胚狀體。11. 并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上。通過(guò)愈傷組織形成的植株,常分化培養(yǎng)成再生植株;后者要盡快 的變化,因而需要鑒定和篩選。常會(huì)出現(xiàn) 課題成果評(píng)價(jià) (一)選材是否恰當(dāng) 概念: 選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。學(xué)生應(yīng)學(xué)會(huì)通過(guò)顯微鏡觀察處于適宜發(fā)育期的花粉。 原理:細(xì)胞的全能性 基礎(chǔ): (二)無(wú)菌技術(shù)是否過(guò)關(guān) 如果出現(xiàn)了污染現(xiàn)象,說(shuō)明某些操作步驟,
40、如培養(yǎng)基滅菌、花蕾消毒或接種等有問(wèn)題。 條件: 脫分化 再分化 (三)接種是否成功 幼苗植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程: 外植體 愈傷組織 胚狀體 要適時(shí)轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基,如果接種的花藥長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體,花藥培養(yǎng)的第一步就成功了。菊 花 以便愈傷組織或胚狀體進(jìn)一步分化成再生植株。 外植體的選擇的 答案和提示組 營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等影響植物組織培養(yǎng)的因素: 織 (一)旁欄思考題培 植物激素的用法 為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難?養(yǎng) 答:花瓣松動(dòng)后,微生物就可能侵入到花藥,給材料的消毒帶來(lái)困難。 pH、光照等溫度、植物 (二)練習(xí) 栽培接種 移栽 培養(yǎng) MS實(shí)驗(yàn)操作: 制備培養(yǎng)基 外植體消毒組 1.答:
41、AAsusuAasusu代紫色甜玉米的基因型組成可能為或。如果運(yùn)用常規(guī)育種方法,將F2F2織培 代中的紫色甜玉米與白色甜玉米(aasusu)進(jìn)行測(cè)交,可以選擇出基因型為AAsusu純種紫色甜玉米。粉母細(xì)胞減數(shù)分裂小孢子母細(xì)胞四分體時(shí)期花被子植物花粉的發(fā)育: 養(yǎng) 但這種方法比較繁瑣,耗時(shí)也較長(zhǎng),需要至少三年的選種和育種時(shí)間。如果利用花藥培養(yǎng)的技術(shù),在 單核期雙核期精子 代產(chǎn)生的花粉中就可能有F1Asu的組合,再將花粉植株進(jìn)行染色體加倍,就可以直接得到紫色甜玉米月 產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑:季 AAsusu的純合體()。這種方法可以大大縮短育種周期。 分化 脫分化的 2.答:植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培
42、養(yǎng)技術(shù)的相同之處是:培養(yǎng)基配制方法、無(wú)菌技術(shù)及接種操作 胚狀體 花藥中的花粉 誘導(dǎo)叢芽花 移栽生根藥 再分化 等基本相同。兩者的不同之處在于:花藥培養(yǎng)的選材非常重要,需事先摸索時(shí)期適宜的花蕾;花藥裂 脫分化培 花藥中的花粉 叢芽愈傷組織 開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時(shí)更換培養(yǎng)基;花藥培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格。這些養(yǎng) 都使花藥培養(yǎng)的難度大為增加。 主要因素:材料的選擇與培養(yǎng)基的組成 影響花藥培養(yǎng)的因素: 重要因素:選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期 低溫處理和接親本植株的生長(zhǎng)條件、影響因素: 種密度等 5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)專題 材料的選?。捍_定花粉發(fā)育時(shí)期的方法 7 實(shí)驗(yàn)操作: 材料的消毒:
43、接種和培養(yǎng): (一)DNA的粗提取與鑒定 (2)要提取洋蔥等的DNA時(shí),加入洗滌劑后,動(dòng)作要,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟地操作。 1. 實(shí)驗(yàn)原理(3)加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí),動(dòng)作要,以免,導(dǎo)致DNA提取生物大分子的基本思路是。分子不能形成絮狀沉淀。 等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的粗提取而言,就是要利用與、對(duì)于DNA(4)二苯胺試劑要,否則會(huì)影響鑒定的效果。 ,去除其他成分。的差異,提取DNA(5)當(dāng)NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時(shí),隨濃度的升高,DNA的溶解度;當(dāng)NaCl溶 DNA的溶解性(1)液濃度高于0.14mol/L時(shí),隨濃度升高,DNA的溶解度。 和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的溶液中溶解度不同,利用這一特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)腄NA 鹽濃度就能使充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的。專題六 植物有效成
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