免疫學(xué)指標(biāo)應(yīng)用的研究進(jìn)展

1、免疫學(xué)指標(biāo)應(yīng)用的研究進(jìn)展這篇論文主要介紹的是免疫學(xué)指標(biāo)應(yīng)用的研究進(jìn)展的相關(guān)內(nèi)容，本文作者就是通過(guò)對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是以關(guān)節(jié)滑膜炎為特征等內(nèi)容做出詳細(xì)的闡述與介紹，特推薦這篇優(yōu)秀的文章供相關(guān)人士參考。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎;血清免疫學(xué);白細(xì)胞介素;綜述類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoidarthritis，RA)為一種病因未明的慢性、以炎性滑膜炎為特征的系統(tǒng)性疾病。RA疾病的活動(dòng)期一般有血小板、血沉、C-反應(yīng)蛋白(C-reactiveprotein，CRP)、補(bǔ)體水平升高，類風(fēng)濕因子(rheumatoidfactor，RF)、抗瓜氨酸化蛋白抗體(anticitrul-linatedproteina

2、ntibodies，ACPA)及抗核抗體陽(yáng)性等表現(xiàn)。最新的2010年RA分類標(biāo)準(zhǔn)和評(píng)分系統(tǒng)納入了新的炎癥標(biāo)志物指標(biāo)，提高了診斷的敏感性，為早期診斷和治療提供了重要依據(jù)1。同時(shí)，除了經(jīng)典的免疫學(xué)檢查外，隨著RA免疫機(jī)制研究的深入，有更多的免疫學(xué)指標(biāo)被發(fā)現(xiàn)及應(yīng)用，本文對(duì)RA的主要免疫學(xué)指標(biāo)及其新進(jìn)展進(jìn)行綜述。1蛋白類1.1血清淀粉樣蛋白A血清淀粉樣蛋白A(serumamyloidA，SAA)是一種急性時(shí)相蛋白，由肝臟產(chǎn)生，主要通過(guò)與血漿中的HDL結(jié)合發(fā)揮其生物活性。既往許多研究表明SAA在多種自身免疫性疾病中表達(dá)升高，尤其當(dāng)系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus，SL

3、E)、關(guān)節(jié)炎患者和正常人相比時(shí)，SSA在RA患者中表達(dá)水平更高，并且與疾病活動(dòng)度、CRP、血沉呈正相關(guān)2。研究表明，SSA在RA中的作用機(jī)制可能是通過(guò)P38有絲分裂蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase，MAPK)信號(hào)通路來(lái)影響B(tài)類型清道夫受體的表達(dá)，從而促進(jìn)血管的生成3。還有研究顯示，SAA比CRP更能反映RA的疾病活動(dòng)度4。提示SAA可能是與RA疾病活動(dòng)度相關(guān)性更高的生物學(xué)指標(biāo)。1.2正五聚蛋白3正五聚蛋白3(pentraxin3，PTX3)在1992年被發(fā)現(xiàn)，它含381個(gè)氨基酸，屬于正五聚蛋白超家庭。PTX3為一種急性期反應(yīng)蛋白，主要由肝細(xì)胞以外的多種細(xì)胞

4、產(chǎn)生，正常情況下以備用形式儲(chǔ)存在中性粒細(xì)胞的特殊顆粒中，當(dāng)出現(xiàn)組織損傷及微生物感染等炎性反應(yīng)時(shí)才釋放出來(lái)，發(fā)揮其組織修復(fù)及重構(gòu)作用5-6。因其與心血管疾病有密切關(guān)系而備受關(guān)注，但最近研究發(fā)現(xiàn)，其在自身免疫性疾病，如RA、系統(tǒng)性硬化癥、小血管的血管炎等疾病中呈高表達(dá)7。ACPA及RF陽(yáng)性的患者關(guān)節(jié)液中PTX3水平明顯高于ACPA及RF陰性的患者;關(guān)節(jié)液PTX3水平與疾病活動(dòng)度、局部炎癥標(biāo)記物呈正相關(guān)8，提示在關(guān)節(jié)液中PTX3的升高與RA疾病發(fā)生發(fā)展有一定的相關(guān)性及特異性。還有研究表明，SAA可通過(guò)PTX3誘導(dǎo)RA患者滑膜的炎癥和免疫反應(yīng)，共同促進(jìn)疾病的發(fā)生發(fā)展9。1.3葡萄糖-6磷酸異構(gòu)酶葡萄糖

5、-6磷酸異構(gòu)酶(glucose-6phosphateisomerase，G6PI)是一種多功能物質(zhì)，存在于真核生物、細(xì)菌和原核生物中，具有多種免疫學(xué)活性，其主要生物學(xué)功能是對(duì)6-磷酸葡萄糖和6-磷酸果糖之間的轉(zhuǎn)化起催化作用。2001年Schaller等10在其建立的T細(xì)胞受體轉(zhuǎn)基因小鼠關(guān)節(jié)炎模型(該模型的關(guān)節(jié)炎類似于人類的RA)中檢測(cè)到持續(xù)產(chǎn)生的G6PI抗體。之后的研究發(fā)現(xiàn)，RA組的血清和關(guān)節(jié)液中G6PI的酶活性及水平均高于骨關(guān)節(jié)炎組及正常對(duì)照組11。在RA活動(dòng)期患者的血清中抗G6PI抗體呈高水平表達(dá)且與疼痛和腫脹關(guān)節(jié)數(shù)呈正相關(guān)12，但抗G6PI抗體在RA、SLE和干燥綜合征中均可表達(dá)，缺乏疾

6、病特異性。G6PI通過(guò)刺激成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞的增殖、抑制細(xì)胞凋亡及增加促炎因子的分泌等途徑在RA的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用13。1.4腦信號(hào)蛋白7A腦信號(hào)蛋白7A(semaphorin7A，Sema7A)是一個(gè)首先在神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的胞外信號(hào)分子。它是腦信號(hào)蛋白家族中唯一的糖基化磷脂酰肌醇錨定蛋白，同時(shí)也可以分泌到細(xì)胞外基質(zhì)中，在多種組織中表達(dá)14。以往研究表明，它在免疫系統(tǒng)疾病(如多發(fā)性硬化病、接觸性超敏反應(yīng)、實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎、韋格納肉芽腫病和RA等疾病)中有免疫調(diào)節(jié)作用15-16。最近研究發(fā)現(xiàn)，在RA患者血液和關(guān)節(jié)液中Sema7A分子分泌增多，分泌型Sema7A增加了輔助性T細(xì)胞(h

7、elperTcell，Th)1/Th17細(xì)胞因子的分泌而且可以上調(diào)T細(xì)胞群中受體的表達(dá)，是RA一種很好的生物學(xué)標(biāo)記物，同時(shí)實(shí)驗(yàn)表明抗Sema7A抗體減慢了膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(collagen-inducedarthritis，CIA)小鼠模型的疾病進(jìn)展，提示它在疾病的發(fā)病中可能起關(guān)鍵作用，是一個(gè)可能的治療靶點(diǎn)17。1.5IgG4根據(jù)結(jié)構(gòu)及生物學(xué)作用，IgG可分為4個(gè)亞型即IgG1至IgG4。IgG4亞型的一些生物學(xué)作用最近才被發(fā)現(xiàn)，且其對(duì)免疫系統(tǒng)各種效應(yīng)細(xì)胞感受器的作用不同，目前已備受關(guān)注。研究顯示，在RA、SLE等自身免疫性疾病中發(fā)現(xiàn)IgG4型自身抗體或IgG4陽(yáng)性漿細(xì)胞的浸潤(rùn)18-19。目前

8、對(duì)IgG4的研究主要集中在自身免疫性胰腺炎、淚腺炎、涎腺炎、腎病等疾病，而IgG4與RA關(guān)系的研究報(bào)道較少。有研究顯示，RA患者炎癥部位IgG4高表達(dá)，而且其水平高低與RA病情有一定的相關(guān)性，提示IgG4可能參與了RA的發(fā)病，可作為疾病活動(dòng)度的新指標(biāo)，同時(shí)發(fā)現(xiàn)在RA中IgG4與抗環(huán)瓜氨酸肽抗體具有相關(guān)性20。IgG4可能成為一個(gè)研究RA發(fā)生發(fā)展的新的切入點(diǎn)。2細(xì)胞因子目前與RA有關(guān)的細(xì)胞因子中，研究比較透徹的有白介素(interleukin，IL)-1、IL-6、IL-17等因子，近年來(lái)越來(lái)越多的新的細(xì)胞因子被發(fā)現(xiàn)及研究，許多因子相應(yīng)的抗體已進(jìn)入動(dòng)物試驗(yàn)研究階段。2.1IL-20IL-20是I

9、L-10家族里的一個(gè)成員，由活化單核細(xì)胞產(chǎn)生，能夠促進(jìn)腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor，TNF)-α等炎癥因子的分泌，促進(jìn)細(xì)胞角質(zhì)化21。IL-20和相關(guān)細(xì)胞因子(如IL-19、IL-24)組成IL-20亞細(xì)胞因子家族，通過(guò)IL20R1/IL-20R2(型)受體異質(zhì)二聚體誘導(dǎo)細(xì)胞反應(yīng)，而IL-20、IL-24也通過(guò)IL-22R1/IL-20R2(型)受體復(fù)合體發(fā)出信號(hào)。既往研究表明，在幾種人類疾病，包括牛皮癬、RA、動(dòng)脈粥樣硬化和骨質(zhì)疏松癥中均有IL-20的表達(dá)失調(diào)22。與其他風(fēng)濕類疾病相比，RA患者中單核細(xì)胞表達(dá)IL-20的水平與關(guān)節(jié)滑膜液的量呈正相關(guān)23。體

10、外實(shí)驗(yàn)證實(shí)IL-20對(duì)中性粒細(xì)胞具有趨化作用，同時(shí)促進(jìn)單核細(xì)胞的趨化蛋白、IL-6等細(xì)胞因子的表達(dá)，從而對(duì)RA的發(fā)病發(fā)展起到促進(jìn)作用24。最新研究表明RA患者使用抗IL-20m抗體治療時(shí)不存在安全性和耐受性方面的問(wèn)題25。由此可見(jiàn)IL-20在RA的診斷、預(yù)后及治療上有很大的應(yīng)用前景。2.2IL-21IL-21是2000年發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞因子，主要是由活化的CD4+T細(xì)胞，如Th17細(xì)胞、濾泡輔助T細(xì)胞、自然殺傷T細(xì)胞合成和分泌。IL-21在RA患者血清中表達(dá)水平升高，并與RF、CCP密切相關(guān)，提示IL-21可能是RA發(fā)病機(jī)制的環(huán)節(jié)之一26。同時(shí)IL-21被證實(shí)不僅在RA患者血清中高表達(dá)，在滑膜液

11、中也呈現(xiàn)高表達(dá)27。在早期RA中IL-6和IL-21與B細(xì)胞的活化標(biāo)記、抗體的產(chǎn)生和疾病的進(jìn)展相關(guān)28。Ignatenko等29研究結(jié)果顯示，對(duì)照組人群和RA患者對(duì)NNC0114-0005(抗IL-21抗體)單劑量的耐受性良好，且其作用機(jī)制是中和細(xì)胞因子。以這一試驗(yàn)為基礎(chǔ)，許多探索抗IL-21抗體療效的試驗(yàn)已經(jīng)展開(kāi)。Carbone等30研究發(fā)現(xiàn)，在RA患者中，由B細(xì)胞產(chǎn)生的IgG4，IL-21是個(gè)強(qiáng)大的誘導(dǎo)物。目前IL-21在風(fēng)濕類疾病中也是一個(gè)研究熱點(diǎn)。2.3IL-33IL-33屬于IL-1家族的一種細(xì)胞因子，其特征是有強(qiáng)大的促炎作用31。Liew等32研究證實(shí)，其主要在成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞

12、和上皮細(xì)胞中表達(dá)，在炎癥過(guò)程中這些細(xì)胞受到損傷時(shí)會(huì)釋放IL-33。體外實(shí)驗(yàn)表明IL-33不僅能介導(dǎo)Th2細(xì)胞免疫、促進(jìn)巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、IL-6和粒細(xì)胞集落刺激因子的分泌，還可刺激小鼠成纖維細(xì)胞分泌嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子及IL-633，這些因子均在RA中發(fā)揮一定的作用。有研究結(jié)果顯示，RA患者滑膜液中IL-33顯著高于骨關(guān)節(jié)炎患者，且與疾病活動(dòng)度、血沉、RF、IgM和IgG抗體、葡萄糖磷酸異構(gòu)酶以及免疫球蛋白呈正相關(guān)，同時(shí)與血清及滑膜液中的IL-33呈正相關(guān)34。還有實(shí)驗(yàn)表明，IL-33在RA合并間質(zhì)性肺病患者血清中的表達(dá)高于單純RA患者，且在治療前后其濃度水

13、平不同，提示IL-33可作為RA合并間質(zhì)性肺病發(fā)病的預(yù)測(cè)及判斷預(yù)后的參考指標(biāo)之一35。2.4IL-34IL-34是2008年Lin等36發(fā)現(xiàn)的一種新型細(xì)胞因子，可由多種細(xì)胞分泌，其功能與巨噬細(xì)胞集落刺激因子(macrophagecolony-stimulatingfactor，M-CSF)相似，并且共用一個(gè)受體，其在破骨細(xì)胞生成過(guò)程中可完全取代M-CSF并參與一個(gè)新的生成破骨細(xì)胞的不經(jīng)典通路37。IL-34在各種炎癥中起到重要作用，可能與其上調(diào)全血中的IL-6和其他因子水平有關(guān)38。有研究顯示，RA患者的血清和滑膜液中IL-34水平明顯高于骨關(guān)節(jié)炎患者和正常健康人，其在RA的炎癥發(fā)展和骨破壞中

14、發(fā)揮一定作用39，提示IL-34抗體有望為RA的免疫治療提供新思路40，但其在RA發(fā)病中的具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步探討和闡明。2.5IL-35IL-35是一個(gè)具有免疫抑制作用的IL-12家族中的一員，由調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatoryTcell，Treg)分泌，由EB病毒誘導(dǎo)基因3編碼蛋白和IL-12鏈的P35亞基組成41。研究顯示，RA患者的Treg細(xì)胞數(shù)量和功能均存在不同程度的異常，并且與疾病活動(dòng)度相關(guān)42。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，IL-35可通過(guò)促進(jìn)Treg細(xì)胞增殖并抑制Th17細(xì)胞反應(yīng)，從而顯著減輕CIA的嚴(yán)重程度43。最新研究顯示，處于RA活動(dòng)期的患者血清IL-35濃度低于RA緩解期的患者和健康人，提示其有可能成為疾病活動(dòng)度的新指標(biāo)44。IL-35治療CIA大鼠可改善其體內(nèi)的關(guān)節(jié)炎癥狀，抑制成纖維樣滑膜細(xì)胞的增殖，在體外能促進(jìn)成纖維樣滑膜細(xì)胞的凋亡，從而抑制RA的進(jìn)程45。以上研究為IL-35治療RA提供一定的理論依據(jù)，但也有研究表明在早期未規(guī)律治療患者的血清中IL-35水平高于RA及骨關(guān)節(jié)炎患者，且其在RA患者關(guān)節(jié)液中顯著升高46。因此，IL-35對(duì)RA發(fā)生