液相提高靈敏度的方法

1、液相增加柱效、提高靈敏度的小訣竅,資料收集：,生化 多肽- 5988-6316EN 升溫對于反相 HPLC分離強疏水肽的影響 (B27) Polypeptide,流動相: A: 含0.05%三氟乙酸的水 B: 含0.05%三氟乙酸的乙腈 2% B / min 進樣量: 100L (50g的6M脲/5%乙酸) UV: 210 nm 流速: 1 mL/min 室溫,液相色譜柱: ZORBAX StableBond-C18 色譜柱尺寸: 4.6 x 250 mm 5m,室溫 300C 400C 500C 600C 700C,提高柱溫，可增加柱效（提高靈敏度,環(huán)保,樣品: 除草劑 流動相: 52/48

2、 0.1 M乙酸鈉/甲醇, pH 6 流速: 0.45 mL/min 溫度: 40, 90 檢測: UV,除草劑: 柱溫的影響 Herbicides: Effect of Column Temperature,1. 西瑪津 2. 敵草隆 3. 撲滅津 4. 撲滅凈 5. 異丙甲草胺,1. Simazine 2. Diuron 3. Propazine 4. Prometryn 5. etolachlor,液相色譜柱: Zorbax StableBond-C18 色譜柱尺寸: 4.6 x 150 mm, 5m,40,90,提高柱溫，可增加柱效（提高靈敏度,生物制藥,液相色譜柱: Zorbax 3

3、00 StableBond-C3 色譜柱尺寸: 4.6 x 150 mm, 5m,肽類/蛋白質(zhì): 升溫對分離的影響 Peptides/Proteins: Effect of Elevated Temperature,樣品: 多肽 流動相: A = 5: 95, 乙腈 : 水, 0.10%三氟乙酸 (V/V%) B = 95: 5, 乙腈 : 水, 0.085%三氟乙酸 (V/V%) 梯度: 在 20 min內(nèi) 15-53%, 后運行時間 12 min 流速: l.0 mL/min 溫度: 室溫 -60 檢測: UV 215 nm,1. 亮氨酸腦啡呔 2. 血管緊張素II 3. 核糖核酸酶A 4

4、. 牛胰島素 5. 細胞色素C 6. 溶菌酶 7. 肌紅蛋白 8. 碳酸酐酶,1.Leucine Enkephalin 2. Angiotensin II 3. Rnase A 4. Insulin(BOV) 5. Cytochrome C 6. Lysozyme 7. Myoglobin 8. Carbonic anhydrase,提高柱溫， 可增加柱效 （提高靈敏度,生物制藥,液相色譜柱: Zorbax StableBond-C8 色譜柱尺寸: 150 mm, 5m,減小毛細管內(nèi)徑來提高 低濃度樣品的檢測靈敏度 Reducing Capillary ID to Improve Sensit

5、ivity for Concentration-Limited Samples,流動相: 60%乙腈/40%水 流速: 內(nèi)徑 0.3 mm-4 uL/min 內(nèi)徑 0.5 mm-10 uL/min 內(nèi)徑 1.0 mm-50 uL/min 內(nèi)徑 4.6 mm-1.0 uL/min 溫度: 室溫 檢測器: UV 254 nm 樣品: 200 ng聯(lián)二苯 (100 nl,減小柱徑，可增加柱效（提高靈敏度,色譜柱技術(shù) 5988-6454EN 使用小體積色譜柱對于檢測器響應時間的重要性 (TE32,液相色譜柱: ZORBAX StableBond-C18 色譜柱尺寸: 4.6 x 15 mm 3.5m,

6、流動相: 乙腈: 1%甲酸=32: 68 UV: 254 nm 流速: 1.0 mL / min. 30C 進樣量: 5 L,響應時間: 4.0秒 響應時間: 2.0秒 響應時間: 1.0秒 響應時間: 0.5秒 響應時間: 0.1秒,1.尿嘧啶 2.乙酰水楊酸 3.N-乙酰苯胺,1.Uracil 2.Acetylsalicylic acid 3.Acetanilide,縮短檢測器響應時間，可增加柱效 （提高靈敏度,色譜柱技術(shù) ：不同硅膠類型比較 (TE1,流動相: 含0.05%甲醇的二氯甲烷,液相色譜柱,toluene benzanilide phenol benzyl alcohol,Zo

7、rbax Sil Spherisorb Zorbax Rx-Sil,甲苯 N-苯甲酰苯胺 苯酚 苯甲醇,使用高純硅膠， 可增加柱效 （提高靈敏度,有機化學 5988-6366EN pH對苯胺取代物分析的影響 (ORCH1,流動相 25mM磷酸: 甲醇=58: 42 流速: 1 mL/min 22C,液相色譜柱: ZORBAX StableBond-C18 色譜柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5m,對位甲氧基苯胺 間位苯甲胺 3-氨基-苯甲腈 對位氯苯胺 間位氯苯胺 鄰位氯苯胺,pH: 2.5 pH: 7.0,改變流動相pH， 可增加柱效 （提高靈敏度,生化 肽 5988-6293EN 三氟

8、乙酸濃度對于反相肽的分離的影響 (B10) Peptide,流動相: A: 水和三氟乙酸 B: 乙腈和三氟乙酸 0 - 30% B （30 min.內(nèi)） 流速: 1 mL/min UV: 254 nm 進樣量: 6uL 十肽菌素標樣S1-S5（疏水性有略微差異） 40C,液相色譜柱: ZORBAX 300 SB-C8 色譜柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5m,1.0%三氟乙酸,0.05%三氟乙酸,0.25%三氟乙酸,改變流動相pH， 可增加柱效 （提高靈敏度,食品分析 5988-6360EN 流動相強度對單糖和二糖分離的影響 (FD4,流動相: 乙腈/水如圖 流速: 1 mL/min 示差

9、折光檢測器,液相色譜柱: ZORBAX NH2 色譜柱尺寸: 4.6 x 250 mm 5m,果糖 葡糖 蔗糖 Palatinose 海藻糖 異麥芽糖,乙腈/水 70/30 乙腈/水 75/25,改變有機相%， 可增加柱效 （提高靈敏度,色譜柱技術(shù) 5988-6468EN 有機改性劑和pH對于選擇性的影響 (TE5,流動相: 25 mM磷酸緩沖液 流速: 1.0 mL/min. 22C,液相色譜柱: ZORBAX StableBond-CN 色譜柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5m,anisidine m-toluidine 4-cl-aniline 3-aminobenzonitrile

10、 3-cl-aniline 2-cl-aniline,甲氧基苯胺 間位苯甲胺 4-氯-苯胺 3-氨基苯甲腈 3-氯-苯胺 2-氯-苯胺,42%甲醇 ：58%緩沖液 30%甲醇 ：70%緩沖液,pH 2.6,pH 3.0,改變有機相%， 可增加柱效 （提高靈敏度,色譜柱技術(shù) 5988-6453EN ZORBAX Eclipse系列色譜柱的選擇性 (TE31,液相色譜柱: ZORBAX Eclipse XDB-Phenyl 色譜柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5m,流動相: 甲醇 : 水=70: 30 UV: 254 nm 流速: 1.0 mL / min. 室溫,Zorbax Eclipse

11、 XDB-苯基 Zorbax Eclipse XDB-C8 Zorbax Eclipse XDB-C18,1.尿嘧啶 2.苯酚 3.4-氯-硝基苯 4.甲苯 5.萘,1.Uracil 2.Phenol 3.4-Cl-nitrobenzene 4.Toluene 5.Naphthalene,改變鍵合相， 可增加柱效 （提高靈敏度,生物制藥,液相色譜柱: Zorbax Extend-C18 色譜柱尺寸: 2.1 x 150 mm, 5um,三氟乙酸和氫氧化銨用于肽類 RP-HPLCESI-MS分離的選擇性比較 Selectivity Comparison of TFA and NH4OH for

12、Peptide RP-HPLCESI-MS Analysis,流速: 0.25 mL/min. 溫度: 25 梯度: 5-60% B in 20 min. LC/MS: 正離子, ESI- Vf 70V, Vcap 4.5 kV, N2- 35 psi, 12 L/min., 300 樣品: 4L (各50 ng,三氟乙酸條件: A- 0.1%三氟乙酸水溶液 B-0.085%三氟乙酸 80%的乙腈溶液,NH4OH條件: A- 20 mM NH4OH水溶液 B- 20 mM NH4OH 80%的乙腈溶液,改變有機添加劑， 可增加柱效 （提高靈敏度,生化 肽 十肽菌素 5988-6299EN 酸對

13、于反相肽的分離的影響(B16) decapeptide,液相色譜柱: ZORBAX 300 SB-C8 色譜柱尺寸: 4.6 x 150 mm 5m,十肽菌素 S1 十肽菌素 S2 十肽菌素 S3 十肽菌素 S4 十肽菌素 S5,decapeptide S1 decapeptide S2 decapeptide S3 decapeptide S4 decapeptide S5,0.1% 三氟乙酸,0.025 M H3PO4,改變有機添加劑 可增加柱效 （提高靈敏度,流動相: A: 含相應的酸的水相 B: 含相應的酸的乙腈 0%-30% B（30 min.內(nèi)） 進樣量: 6L肽標樣 UV: 254 nm 流速: 1 mL/min 40C,色譜柱技術(shù) 流動相對色譜的影響(TE40,液相色譜柱: ZORBAX Eclipse XDB-C8 色譜柱尺寸: 4.6 x 50 mm 3.5m,UV: 254 nm 流速: 1 mL/ min. 室溫,Uracil Butylparaben Naphthalene Dipropylphthalate Acenaphthene,尿嘧啶 尼帕爾金丁酯 萘 二丙基鄰苯二甲酸酯 苊,刻度混合: Dial-