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文檔簡介
1、實 驗 二 細菌形態(tài)和結(jié)構(gòu)觀察() (細菌的簡單染色和革蘭氏染色,一、實驗目的 1、觀察細菌菌落征。 2、掌握細菌簡單染色、革蘭氏染色技術(shù)。 3、在油鏡下觀察細菌個體形態(tài),二、實驗原理,1、細菌菌落特征 2、細菌基本形態(tài) 3、細菌革蘭氏染色機理,共有特征:濕潤,較光滑,較透明,較粘稠,易挑取,質(zhì)地均勻,顏色多樣,菌落正反面及邊緣與中央顏色一致。 特有特征: 有鞭毛:菌落大而平坦,邊緣多缺刻、不規(guī)則 有糖被:菌落大,透明,呈蛋清狀 有芽孢:菌落外觀粗糙,“干燥”,不透明且表面多褶,基本形態(tài):球狀,桿狀,螺旋狀。 其它形態(tài): 星形,方形,帶柄狀,畸形,衰退形,G:細胞壁厚,內(nèi)肽聚糖含量高,且交聯(lián)度
2、大,網(wǎng)孔小,不含脂類。 G :細胞壁薄,內(nèi)肽聚糖含量低,交聯(lián)度小,網(wǎng)孔大,脂類含量高,革蘭氏染色過程:初染媒染脫色復染,三、實驗材料,1、菌種:大腸桿菌(Escherichia coli)、枯草芽孢桿菌(B.subtilis)、金黃色葡萄球菌(S.aureus)(培養(yǎng)1824 h的菌落平板各一個)。 2、染液 (1)簡單染色:呂氏美藍染液或齊氏石炭酸復紅染液。 (2)革蘭氏染液:草酸銨結(jié)晶紫染液、革蘭氏碘液、95%乙醇、番紅染液。 3、其他物品:普通光學顯微鏡、載玻片、接種環(huán)、鑷子、酒精燈、無菌水、吸水紙、香柏油、香柏油、二甲苯、擦鏡紙,四、實驗步驟,1、菌落形態(tài)觀察: 2、細菌簡單染色: 3
3、、細菌革蘭氏染色,注意:菌落顏色、濕度、形狀、大小、透明度、顏色、邊緣是否規(guī)則等特征,染色過程: 涂片干燥固定染色(1min)水洗干燥鏡檢 注意事項: 涂片:取菌量不能太大 干燥:自然干燥 水洗:水流不能直接沖在涂菌處,細菌革蘭氏染色過程,涂片干燥固定初染(草酸銨結(jié)晶紫染色1min)水洗媒染(碘液沖洗后覆蓋1min)水洗脫色(95乙醇脫色至流下乙醇無色為止)立即用水沖洗復染(番紅染色23min)水洗干燥鏡檢,染色結(jié)果,金黃色葡萄球菌革蘭氏染色結(jié)果,染色結(jié)果,大腸桿菌革蘭氏染色結(jié)果,染色結(jié)果,金黃色葡萄球菌和大腸桿菌混合菌樣的革蘭氏染色結(jié)果,染色結(jié)果,枯草芽孢桿菌革蘭氏染色結(jié)果,實 驗 要 求,每個同學必須做枯草芽孢桿菌簡單染色涂片。 每組同學必須做金黃色葡萄球菌或大腸桿菌革蘭氏染色涂片。 每組同學必須做枯草芽孢桿菌革蘭氏染色涂片,五、實驗報告,1、記錄三種菌的革蘭氏染色結(jié)果,繪出菌體細胞形態(tài)。 2、要得
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