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文檔簡介
1、高中生物 課題2 多聚酶鏈式反應擴增dna片段導學案 新人教版選修1高中生物 課題2 多聚酶鏈式反應擴增dna片段導學案 新人教版選修1 編輯整理:尊敬的讀者朋友們:這里是精品文檔編輯中心,本文檔內容是由我和我的同事精心編輯整理后發(fā)布的,發(fā)布之前我們對文中內容進行仔細校對,但是難免會有疏漏的地方,但是任然希望(高中生物 課題2 多聚酶鏈式反應擴增dna片段導學案 新人教版選修1)的內容能夠給您的工作和學習帶來便利。同時也真誠的希望收到您的建議和反饋,這將是我們進步的源泉,前進的動力。本文可編輯可修改,如果覺得對您有幫助請收藏以便隨時查閱,最后祝您生活愉快 業(yè)績進步,以下為高中生物 課題2 多聚
2、酶鏈式反應擴增dna片段導學案 新人教版選修1的全部內容。8課題2 多聚酶鏈式反應擴增dna片段導學案 課題課題2多聚鏈式反應擴增dna片段課型新授課時1教師復備欄(學生筆記)【學習目標】站得高-明確學習目標(一)知識與技能:1、了解pcr技術的基本操作2、理解pcr的原理3、討論pcr的應用(二)過程與方法:在多聚酶鏈式反應擴增dna片段的實驗過程中,應避免外源dna污染,嚴格控制溫度等反應條件(三)情感、態(tài)度與價值觀:通過對pcr實驗的操作及結果分析,培養(yǎng)學生嚴謹?shù)目茖W態(tài)度和實事求是的科研精神 【學習重點和難點】重點:pcr的原理和pcr的基本操作 難點:pcr的原理【學法指導】啟發(fā)式教學
3、,拓展視野,感受科學技術的重要價值.?!局R鏈接】復習舊知,以舊帶新1、固定化技術中常用的載體有 、 、 、 和 等.2、dna析出時,最適宜的鹽濃度是 。3、固定化技術包括 法、 法和 法。4、果膠酶的種類包括 酶、 酶和 酶等.5、粗提取的dna,在 的條件下,用 檢驗,被當成 .【學習內容】一、 自主學習:起步穩(wěn)夯實基礎促發(fā)展 學生閱讀教材p5863,完成下列學案(一)、基礎知識一、pcr原理:1、在用pcr擴增dna時,dna的復制過程與細胞內 類似.細胞內參與dna復制的組成成分有 、 、4 種 、 酶、引物。它們的作用依次是 雙鏈、提供 、 的原料、 、使dna聚合酶能夠從引物 端
4、開始連接 .2、dna的兩條鏈是 的,為了明確地表示 dna的方向,通常將dna的羥基端( )稱為 端,而磷酸基團的末端稱為 端。dna聚合酶不能從 開始合成dna,而能從 延伸dna鏈,因此,dna復制需要 。當引物與dna母鏈通過 結合后,dna聚合酶就能從引物的開始延伸,因此dna的合成方向總是從子鏈的向延伸。3、在dna的復制過程中,進行dna復制的前提是 。這個過程可以通過控制 來實現(xiàn)。在80-100的溫度范圍內,dna的雙螺旋結構 將 ,雙鏈 ,這個過程叫做 。當溫度緩慢降低后,兩條彼此分離的dna鏈又會重新 成雙鏈。這叫做dna的 ,4、pcr利用了dna的 原理,通過控制 來控
5、制雙鏈的解聚與結合。pcr 反應需要在一定的 中才能進行,需提供: 、 分別與兩條模板鏈相結合的兩種 ,四種 ,耐熱的 酶,同時通過控制 使dna復制在 反復進行。二、pcr的反應過程: pcr一般要經歷 多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為 、 和 三步。在循環(huán)之前常要進行一次 ,以便增大分子模板dna 的概率.從第二輪循環(huán)開始,上一次循環(huán)的產物也作為 與反應,并且由 延伸而成的dna單鏈會與 結合,進行dna的延伸,這樣,dna聚合酶只能特異地復制處于兩個 之間的dna序列,使這段固定長度的序列呈指數(shù)擴增. (二)實驗操作:在pcr實驗中通常要用到 ,它是一種薄壁塑料管,總容積為 。具體操作時,用
6、器,按照書中旁欄的配方在微量離心管中依次加入各組分,再參照書中表格設計好pcr儀的循環(huán)程序就可以了。(三)操作提示:1、為避免外源dna等因素的污染,pcr實驗中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進行 。2、pcr所用的緩沖液和酶應分裝成小份,并在20儲存。使用前,將所需試劑從冰箱拿出,放在冰塊上 。3、在微量離心管中添加反應成分時,每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭必須 。二、合作探究:走得歡-探索中收獲,收獲中提升 【整理學案】:構建網絡,內化知識多聚酶鏈式反應擴增dna片段pcr原理dna的復制需要 、原料、 、引物dna的變性和復性受溫度影響pcr過程 延伸操作步驟配
7、制pcr反應體系移入離心管放入pcr設置工作參數(shù)dna 測定含量稀釋調零測定并讀數(shù)計算【達標測評】步步高-鞏固成果,對答如流1dna分子復制時,解旋的兩條鏈中( )a僅一條作為復制模板 b兩條鏈作為模板并復制出兩個不同的dna分子c兩條鏈作為模板并復制出兩個相同的dna分子d兩條鏈作為模板,各自合成一條子鏈,然后兩條母鏈重新結合為原來的雙螺旋分子,兩條新鏈結合成一個全新的dna分子2。下列關于dna復制過程的正確順序是( )互補堿基對之間氫鍵斷裂互補堿基對之間形成氫鍵dna分子在解旋酶的作用下解旋以解旋后的母鏈為模板進行堿基互補配對子鏈與母鏈盤旋成雙螺旋狀結構a b c d3.下列各項過程中,
8、遵循“堿基互補配對原則的有( )dna復制rna復制轉錄翻譯逆轉錄a b c d4.實驗室內模擬生物體dna的復制必需的一組條件是( )酶游離的脫氧核苷酸atpdna分子mrnatrna適宜的溫度適宜的酸堿度a b c d5.利用pcr技術,把一個雙鏈dna分子當作第一代,經過3次循環(huán),在第四代dna分子中,有幾條第一代脫氧核苷酸的長鏈?( )a 2 b 4 c 8 d 16,6。關于dna分子的敘述中,正確的是( )a .dna的兩條鏈是極性相同,同向平行 b.dna的兩條鏈是極性相同,反向平行c.dna的兩條鏈中極性不同,反向平行的 d。dna的兩條鏈是極性不同,同向平行7。假設pcr反應
9、中,只有一個dna的片段作為模板,請計算在30次循環(huán)后,反應物中大約有多少這樣的dna片段( )a 215 b 230 c 260 d 2318.dna的合成方向總是( )延伸。a從dna分子的左端向右端 b從dna分子的右端向左端c從子鏈的5,端向3,端 d從子鏈的3,端向5,端9。要使pcr反應在體外的條件下順利地進行,需要嚴格的控制( )a 氧氣的濃度 b酸堿度 c溫度 d 大氣的濕度10。dna分子經pcr反應循環(huán)一次后,新合成的那條子鏈的脫氧核苷酸的序列應與( )a模板母鏈相同 b非模板母鏈相同 c兩條模板母鏈相同 d兩條模板母鏈都不相同【學后反思】答案: cdada cbccb課后
10、習題1pcr過程與細胞內的dna復制過程相比,主要有兩點不同,它們是()pcr過程需要的引物是人工合成的單鏈dna或rnapcr過程不需要dna聚合酶pcr過程中dna的解旋不依靠解旋酶,而是通過對反應溫度的控制來實現(xiàn)的pcr過程中,dna不需要解旋,直接以雙鏈dna為模板進行復制abcd解析:選c。pcr過程與細胞內的dna復制過程相比較,主要有兩點不同:(1)pcr過程需要的引物是人工合成的單鏈dna或rna,長度通常為2030個核苷酸。(2)pcr過程中,dna解旋不依賴解旋酶,而是通過對反應溫度的控制來實現(xiàn)的.2dna的復制需要引物,其主要原因是()a可加快dna的復制速度 b引物可與
11、dna母鏈堿基互補配對結合c引物的5端有助于dna聚合酶延伸dna鏈ddna聚合酶只能從3端延伸dna鏈解析:選d。引物的作用是結合在模板dna上提供dna延伸的起始位點,而dna聚合酶的作用是從引物的3端開始催化dna鏈的延伸。3pcr利用了dna的熱變性原理,pcr儀實際上也是一種能自動調控溫度的儀器。下列對pcr過程中“溫度的控制”的說法,錯誤的是()apcr反應需要高溫,是為了確保模板是單鏈b延伸的溫度必須大于復性溫度,而小于變性溫度c要用耐高溫的dna聚合酶 d需要耐高溫的解旋酶解析:選d.pcr是體外dna擴增技術,dna雙鏈的解開不需要解旋酶,而是靠高溫使其變性解體。復性前,在耐
12、高溫的taq dna聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補配對原則合成新的dna,因此延伸的溫度要大于復性溫度但小于變性溫度。4從第二次循環(huán)開始,復制的dna片段呈_擴增()a直線 b指數(shù) c對數(shù) d不變答案:b(緊扣教材,思考感悟)1一個dna片段做模板,30次循環(huán)后,反應物中大約有多少個同樣的dna片段?(教材p63)答案:pcr反應中的目的片段一般以2n的方式積累,其中n是反應循環(huán)次數(shù)。一個dna片段在30次循環(huán)后的反應物中大約有10億個這樣的片段,即2n2301073741824.2如何設計引物?(教材p63)答案:pcr引物是根據(jù)需要擴增的目的dna的堿基序列來設計的.1pcr利用了dna的哪種
13、特性原理,來控制dna的解聚與結合()a特異性b穩(wěn)定性 c熱變性 d多樣性答案:c2(2011年聊城高二檢測)在實驗室內模擬生物體內的dna復制,需要哪些條件()來源:xkb1。com酶游離的脫氧核苷酸atpdna分子引物trna適宜的溫度適宜的酸堿度a b c d解析:選d。在實驗室內模擬dna復制時,需要dna聚合酶催化合成dna子鏈;四種脫氧核苷酸為合成子鏈的原料;dna母鏈為dna復制的模板;還需要引物、較高的溫度、適宜的酸堿度等.3dna擴增過程中,dna片段經若干次擴增,與其數(shù)目的理論值變化相符的圖是()解析:選c。pcr反應中dna的擴增數(shù)目和生物體內的dna復制是類似的,即1個
14、dna分子復制一次,產生2個dna分子,復制2次,產生4個dna分子,呈指數(shù)擴增,開始有一個dna分子為模板,經過n次復制后得到的dna分子的數(shù)量為2n,與曲線c相符合.來源:xkb1。com4(2011年宿州高二檢測)下列操作過程的敘述中錯誤的是()apcr反應中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進行高壓滅菌bpcr所用的緩沖液和酶應分裝成小份,并在20 儲存cpcr所用的緩沖液和酶從冰箱拿出之后,迅速融化d在微量離心管中添加反應成分時,每吸取一種試劑后,移液器上的吸液槍頭都必須更換解析:選c。為了防止外源dna等因素的污染,pcr反應中所用的微量離心管、槍頭、緩沖液及蒸
15、餾水等,在使用前要進行高壓滅菌;還要將所用的緩沖液和酶分裝成小份;并且使用一次性吸液槍頭,則a、b、d項都正確.在使用前,將pcr所需試劑從冰箱內拿出來,放在冰塊上緩慢融化,則c項錯誤。5標準的pcr過程一般分為變性、復性、延伸三大步,這三大步需要的溫度依次是()a92 、50 、72 b72 、50 、92 c50 、92 、72 d80 、50 、72 解析:選a。當溫度上升到90 (9096 )以上時,雙鏈dna解聚為單鏈,稱之為變性;當溫度下降到50 (4060 )左右時,兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈dna結合;當溫度上升到72 (7075 )時,溶液中的四種脫氧核苷酸(a、t、
16、c、g)在taq dna聚合酶的作用下,根據(jù)堿基互補配對原則合成新的dna鏈,稱為延伸。6當引物與dna母鏈通過堿基互補配對結合后,dna聚合酶就能開始延伸dna子鏈,則延伸的方向是()來源:xkb1。coma從5端延伸dna子鏈bdna的合成方向總是從5端向3端延伸c子鏈延伸的方向是53或35ddna的合成方向總是從3端向5端延伸解析:選b。本題考查多聚酶鏈式反應擴增dna片段的有關知識,同時考查學生對pcr原理的理解。pcr擴增的過程中子鏈延伸的方向是由dna聚合酶決定的,由于dna聚合酶只能從3端延伸dna鏈,而不能從頭開始,因此dna的合成方向總是從5端向3端延伸。7如圖為dna變性和
17、復性示意圖,下列相關說法正確的是()a向右的過程為加熱(80100 )變性的過程b向左的過程是dna雙鏈迅速致冷復性xkb1。comc變性與在生物體內解旋過程的條件、實質都相同d圖中dna片段共有4個游離的磷酸基、4個3端答案:a8在pcr的實驗操作中,下列說法正確的是()在微量離心管中添加各種試劑時,只需要一個槍頭離心管的蓋子一定要蓋嚴用手指輕彈離心管壁離心的目的是使反應液集中在離心管的底部a bc d解析:選c。在微量離心管中添加反應成分時,每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭都必須更換,以確保實驗的準確性;蓋嚴離心管口的蓋子,防止實驗中外源dna污染;用手指輕輕彈擊管的側壁,使反應液混合均勻;離心目的是使反應液集中在離心管的底部,提高反應效果.9復性溫度是影響pcr特異性的較重要因素。變性后溫度快速冷卻至4060 ,可使引物和模板發(fā)生結合。pcr的結果可不考慮
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