高效液相HPLC常見(jiàn)故障分析及其排除方法

1、2021/4/13,整理課件,高效液相色譜（HPLC） 常見(jiàn)故障分析及其排除方法,2021/4/13,整理課件,宗 旨,集三十余年使用與維護(hù)儀器之經(jīng)驗(yàn) 匯各國(guó)儀器常見(jiàn)故障之點(diǎn)滴 -奉獻(xiàn)給祖國(guó)的棟梁,1,2021/4/13,整理課件,HPLC流程結(jié)構(gòu)有機(jī)結(jié)合緊密相關(guān),2,流動(dòng)相,輸液泵,7725i,色譜柱,檢測(cè)器,色譜工作站,在線過(guò)濾器,保護(hù)柱,溶劑濾頭,2021/4/13,整理課件,相對(duì)檢測(cè)器本底低 UV與檢測(cè)條件相呼應(yīng) 190nm-220nm近紫外區(qū)注意事項(xiàng) 樣品濃度與檢測(cè)器靈敏度 PH值對(duì)色譜柱影響 機(jī)械雜質(zhì)、有機(jī)雜質(zhì) 脫氣-脫氣裝置質(zhì)量,3,流動(dòng)相,2021/4/13,整理課件,有關(guān)流動(dòng)

2、相常見(jiàn)故障現(xiàn)象,泵前輸液管有氣泡 脫氣 清洗溶劑濾頭 檢查輸液管是否破損 過(guò)濾膜用錯(cuò)- 保留時(shí)間變化-揮發(fā)-吸收,4,2021/4/13,整理課件,5,輸液泵,輸液泵,出口單向伐,入口單向伐,柱 塞 桿,壓力波動(dòng) 壓力很低,漏液 壓力很低,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,6,故障分析排除判斷法,實(shí)用 快速 經(jīng)濟(jì) 可靠,2021/4/13,整理課件,7,流動(dòng)相,輸液泵,7725i,色譜柱,檢測(cè)器,色譜工作站,10MPa,9.9MPa,0.5MPa,0.0MPa,壓差,0.1,9.4,0.5,MPa,壓力從何處產(chǎn)生?,2021/4/13,整

3、理課件,進(jìn)樣伐-7725i,進(jìn)樣模式 1 部分充滿定量管而不浪費(fèi)樣品 2 完全充滿定量管 MBB（Make-Before-Break) 斷流前之動(dòng)作 帶（i）后綴意味著有內(nèi)置式觸發(fā)開(kāi)關(guān) 不推薦用戶長(zhǎng)時(shí)間最高壓力下工作 定量管體積 0.1微升-10毫升 最高壓力 35-49MPa,8,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/1

4、3,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,色譜柱,如何選擇色譜柱? 1 柱效 塔板數(shù)/米 總塔板數(shù) 250毫米 70000 17000 200毫米 70000 14000 150毫米 70000 10500 2 柱填料 C18 C8 C6 NH CN 3 ,9,2021/4/13,整理課件,色譜柱維護(hù),色譜柱安裝 保護(hù)柱安裝 平衡色譜柱 反向柱（C18）用甲醇 乙腈10-20倍 柱體積平衡 2504.6柱體積約4毫升 注意柱前柱后死體積 連接件 1: SUS 一卡就死 卡過(guò)就斷 不同柱死體積不同 2:PEEK 承受壓力有限 3:SU

5、S-PEEK 優(yōu)于1 2,10,2021/4/13,整理課件,色譜柱損壞現(xiàn)象,柱效減低 峰型變矮變寬 保護(hù)柱失效 分析柱污染 柱前柱后死體積 分析柱頭塌陷 色譜峰出現(xiàn)肩峰 何謂肩峰? 柱連接管斷在柱頭里 色譜柱受震動(dòng) 您的色譜柱是否在病態(tài)運(yùn)行,11,2021/4/13,整理課件,樣品前處理-保護(hù)色譜柱,液液萃取 液固萃取 固相萃取 上樣 純化 洗脫 洗柱 固相萃取裝置-自動(dòng)化富集 SPE預(yù)處理柱 子彈頭式 針管式 12孔 24孔式 氮吹儀 -濃縮樣品 12孔 24孔式,12,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,

6、2021/4/13,整理課件,檢測(cè)器,氘燈損壞 噪聲大 檢測(cè)池污染 噪聲大 檢測(cè)池有氣泡 噪聲尖大 接地線 噪聲大 壓力過(guò)大 噪聲大 參比池污染 噪聲大 檢測(cè)池漏液 噪聲大 您的檢測(cè)器噪聲如何?,13,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,消耗品,流動(dòng)相 國(guó)產(chǎn)甲醇7元/瓶 國(guó)產(chǎn)乙腈38元/瓶 進(jìn)口甲醇210元/瓶4L 進(jìn)口乙腈450元/瓶4L 氘燈 SPD-10AVP 3200元/只/2000小時(shí) SPD-10AVP用國(guó)產(chǎn) 1500元/只/2000小時(shí) 管接頭 SUS-PEEK接頭 保護(hù)柱 國(guó)產(chǎn)550元/套（三柱芯） 分析柱 國(guó)產(chǎn)1100元/只,14,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,2021/4/13,整理課件,202