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1、計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適用性檢查記錄培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家規(guī)格批號(hào)胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基R2A瓊脂培養(yǎng)基胰酪大豆胨瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基R2A瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基1. 檢查方法:中國(guó)藥典2015版四部非無(wú)菌藥品微生物限度檢查法:微生 物計(jì)數(shù)法(通則1105)。2. 驗(yàn)證用儀器型號(hào)及編號(hào):立式蒸汽滅菌鍋:型號(hào) 編號(hào): 生化培養(yǎng)箱 型號(hào) 編號(hào):霉菌培養(yǎng)箱:型號(hào) 編號(hào): 3. 菌液制備:驗(yàn)證用菌種第()代接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的新鮮培養(yǎng)物至胰酪大豆 胨液體培養(yǎng)基上,于3035C培養(yǎng)1824h;上述培養(yǎng)物用PH7.0氯化鈉蛋
2、白胨緩 沖液10倍遞增稀釋至1ml含菌數(shù)為50100cfu的菌懸液備用。接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基上, 于2025C培養(yǎng)2 3天;上述培養(yǎng)物用PH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液10倍遞增稀釋至1ml含菌數(shù)為50 100cfu的菌懸液備用。將黑曲霉菌菌懸液用PH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液10倍遞增稀釋至1ml含菌數(shù)為50100cfu的菌懸液備用。4. 培養(yǎng)基配制按相應(yīng)培養(yǎng)基產(chǎn)品說(shuō)明分別配制胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基、R2A瓊脂培養(yǎng)基、胰酪大豆胨瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基、沙氏 葡萄糖瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基、R2A瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基,并按照相應(yīng)的滅
3、菌方式滅菌備用。5、培養(yǎng)基計(jì)數(shù)適用性檢查5.1胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查分別接種不大于100cfu的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌、 白色念珠菌、黑曲霉菌的菌懸液置直徑90mm的無(wú)菌平皿中各2皿,另一個(gè)皿不接 種菌作為空白對(duì)照。傾注20ml溫度不超過(guò)45C熔化的胰酪大豆胨瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基, 混勻,凝固。將接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的平皿倒置于 30-35E的生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)不超過(guò) 3天,計(jì)數(shù);將接種白色念珠菌、黑曲霉菌的平 皿倒置于30-35r的生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)不超過(guò) 5天,計(jì)數(shù)。被檢培養(yǎng)基同法操作。結(jié) 果見(jiàn)表1。表1培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果菌種類型被檢培養(yǎng)基(cfu
4、)對(duì)照培養(yǎng)基(cfu)A/B (%)被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)與大小對(duì)比皿1皿2平均A皿1皿2平均B金黃色 葡萄球菌枯草芽抱桿菌銅綠假單胞菌白色念珠菌黑曲霉菌5.1.1檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn):被檢培養(yǎng)基的菌落數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基的菌落數(shù)比較,比值在0.5-2.0之間,且菌落形態(tài)大小與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落一致。判該培養(yǎng)基的適用性檢查符合規(guī)定。5.1.2結(jié)果判定:5.1.3 結(jié)論:5.2沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查分別接種不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉菌的菌懸液置直徑 90mm的無(wú) 菌平皿中各2皿,另一個(gè)皿不接種菌作為空白對(duì)照。傾注 20ml溫度不超過(guò)45C熔 化的沙氏葡萄糖對(duì)照瓊脂培養(yǎng)基,混勻,凝固
5、。將平皿倒置于20-25C的霉菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)不超過(guò)5天,計(jì)數(shù)。被檢培養(yǎng)基同法操作。結(jié)果見(jiàn)表 2。表2培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果菌種類型樣品培養(yǎng)基對(duì)照培養(yǎng)基A/B(%)被檢培養(yǎng)基的菌 洛與對(duì)照培養(yǎng)基上 的菌落形態(tài)、大小 對(duì)比皿1皿2平均A皿1皿2平均B白色念珠菌黑曲霉5.2.1檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn):被檢培養(yǎng)基的菌落數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基的菌落數(shù)比較,比值在 0.5-2.0之間,且菌落形態(tài)大小與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落一致。判該培養(yǎng)基的適用性檢查符合規(guī)定。5.2.2結(jié)果判定:5.2.3 結(jié)論:5.3玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查。分別接種不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉菌的菌懸液置直徑 90mm的無(wú) 菌平皿中各2皿,另一個(gè)皿不
6、接種菌作為空白對(duì)照。傾注 20ml溫度不超過(guò)45C熔 化的玫瑰紅鈉對(duì)照瓊脂培養(yǎng)基,混勻,凝固。將平皿倒置于 20-25 E的霉菌培養(yǎng)箱 培養(yǎng)不超過(guò)5天,計(jì)數(shù)。被檢培養(yǎng)基同法操作。 結(jié)果見(jiàn)表3表3培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果菌種類型樣品培養(yǎng)基對(duì)照培養(yǎng)基A/B(%)被檢培養(yǎng)基的菌 洛與對(duì)照培養(yǎng)基上 的菌落形態(tài)、大小 對(duì)比皿1皿2平均A皿1皿2平均B白色念珠菌黑曲霉5.3.1檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn):被檢培養(yǎng)基的菌落數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基的菌落數(shù)比較,比值在 0.5-2.0之間,且菌落形態(tài)大小與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落一致。判該培養(yǎng)基的適用性檢查符合規(guī)定。5.3.2結(jié)果判定: 5.3.3 結(jié)論: 5.4 R2A瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查分別接種不大于100cfu的銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的菌懸液置直徑90mm 的無(wú)菌平皿中各2皿,另一個(gè)皿不接種菌作為空白對(duì)照。傾注20ml溫度不超過(guò)45C 熔化的R2A瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基,混勻,凝固。將平皿倒置于30-35E的生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)不超過(guò)3天,計(jì)數(shù)。被檢培養(yǎng)基同法操作。結(jié)果見(jiàn)表 4。表4培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果菌種類型樣品培養(yǎng)基對(duì)照培養(yǎng)基A/B(%)被檢培養(yǎng)基的菌 洛與對(duì)照培養(yǎng)基上 的菌落形態(tài)、大小 對(duì)比皿1皿2平均A皿1皿2平均B銅綠假單胞菌枯草芽抱桿菌5.4.1檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn):被檢培養(yǎng)基的菌落數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基的菌落數(shù)比較,比值在 0.5-2
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