景區(qū)實(shí)習(xí)報(bào)告(共3篇)_第1頁
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文檔簡介

1、景區(qū)實(shí)習(xí)報(bào)告(共3篇) 第1篇:鄭景實(shí)_報(bào)告實(shí)_報(bào)告班級(jí):會(huì)計(jì)13班學(xué)號(hào):05171d08姓名:鄭景一、實(shí)_時(shí)間.07.16- .01.15二、實(shí)_地點(diǎn)鴻富錦精密電子天津有限公司三、實(shí)_目的 本次實(shí)_的目的在于通過理論與實(shí)際的結(jié)合、個(gè)人與社會(huì)的溝通,進(jìn)一步培養(yǎng)自己的業(yè)務(wù)水平、與人相處的技巧、團(tuán)隊(duì)協(xié)作精神、待人處事的能力等,尤其是觀察、分析和解決問題的實(shí)際工作能力,以便提高自己的實(shí)踐能力和綜合素質(zhì),希望能幫助自己以后更加順利地融入社會(huì),投入到自己的工作中。一般來說,學(xué)校的生活環(huán)境和社會(huì)的工作環(huán)境存在很大的差距,學(xué)校主要專注于培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)_能力和專業(yè)技能,社會(huì)主要專注于員工的專業(yè)知識(shí)和業(yè)務(wù)能力。要

2、適應(yīng)社會(huì)的生存要求,除了要加強(qiáng)課堂上的理論知識(shí)外,還必須要親自接觸社會(huì)參加工作實(shí)踐,通過對社會(huì)工作的了解指導(dǎo)課堂學(xué)_。實(shí)際體會(huì)一般公司職員的基本素質(zhì)要求,以培養(yǎng)自己的適應(yīng)能力、組織能力、協(xié)調(diào)能力和分析解決實(shí)際問題的工作能力。實(shí)_在幫助應(yīng)屆畢業(yè)生從校園走向社會(huì)起到了非常重要的作用,因此要給予高度的重視。通過實(shí)_,讓自己找出自身狀況與社會(huì)實(shí)際需要的差距,并在以后的學(xué)_期間及時(shí)補(bǔ)充相關(guān)知識(shí),為求職與正式工作做好充分的知識(shí)、能力準(zhǔn)備,從而縮短從校園走向社會(huì)的心理適應(yīng)期。四、實(shí)_內(nèi)容(過程)最初一周,我們學(xué)_了公司的企業(yè)文化,對公司進(jìn)行了初步的了解。在各位工程師的細(xì)心講解下我們初步懂得了生產(chǎn)工藝流程。培

3、訓(xùn)過后我被分到了生產(chǎn)c-9成型車間,跟隨生產(chǎn)線上的線長進(jìn)行實(shí)地的學(xué)_。對于生產(chǎn)來說,安全始終是重中之重,良好的安全意識(shí)是進(jìn)行安全生產(chǎn)的首要前提。首先車間主任對我們進(jìn)行了一些安全和以及在實(shí)_過程中的安全事項(xiàng)和需注意的項(xiàng)目。比如上班,不允許穿涼鞋進(jìn)廠;進(jìn)廠必須穿工作服;禁止在廠里吸煙,夜里值班不準(zhǔn)喝酒,進(jìn)廠后衣服不準(zhǔn)敞開,外套不準(zhǔn)亂掛在身上,不得背背包進(jìn)廠;人在廠里不要成堆,不要站在生產(chǎn)主干道上,進(jìn)出車間都要排隊(duì)走好自成一列;在沒有線長的允許情況下,不準(zhǔn)亂按按扭、開關(guān)。進(jìn)入車間后最初的工作是瑣碎的,因?yàn)楣旧性诮ㄔO(shè)階段,辦公室和各個(gè)生產(chǎn)車間都還沒有竣工。我們開始的工作就是打掃一下馬路衛(wèi)生,清除道路

4、兩旁的雜草,排除車間的積水等等。也許有人認(rèn)為這些工作是沒有技術(shù)含量的低下工作,恥于去干。但是作為我們最初的團(tuán)隊(duì)完全沒有這般的心態(tài)。因?yàn)槲艺J(rèn)為,無論你做的是什么職業(yè),一定會(huì)有人瞧不起,不喜歡,不過那是別人的事,不要讓它影響了你的心情。如果你對自己不認(rèn)可,瞧不起正在做的事,你就沒辦法把事情做好,也會(huì)讓別人瞧不起。五、實(shí)_體會(huì) 憶起在富士康的日子是充實(shí)的,值得的。在這里我們有歡樂,當(dāng)然也有疲憊,這也更加讓我懂得怎樣去成為一個(gè)合格乃至優(yōu)秀的員工。每次遇到艱難的工作,我都是第一個(gè)沖上去,我想年輕人只有比別人付出一倍甚至幾倍的努力,才能得到自身應(yīng)得的和想要的回報(bào)。只有自己能為企業(yè)創(chuàng)造更多的價(jià)值,才能夠有更

5、好的機(jī)遇。所以每次干活時(shí)我都把工作當(dāng)一種特殊的享受來對待,每次工作做事都特別有激情,全然不知?jiǎng)诶?。盡管每次都被他們譏笑太傻,可是我還是一貫堅(jiān)持,我想吃虧是福,勤奮的人才最值得尊重。通過這幾個(gè)月的實(shí)_,我認(rèn)為:(1)團(tuán)結(jié)就是力量。正謂人齊泰山移,眾人劃槳開大船。一個(gè)人的力量終究是忽微的,團(tuán)隊(duì)抱成一團(tuán)的力量才是最強(qiáng),團(tuán)結(jié)起來才能夠無堅(jiān)不摧,共同成長共同進(jìn)步。(2)態(tài)度決定一切。你的態(tài)度,決定了你做事的結(jié)果。所以事無大小,凡事都要認(rèn)真對待,保持良好積極的心態(tài),才能夠在激烈的競爭中得以脫穎。(3)自信勤奮寬容。面對難題,擁有足夠的信心和勇氣的人不會(huì)退縮。勞動(dòng)光榮,勤奮的人最為值得尊重。只有比別人更加努

6、力、更加勤奮,才能比別人走的更遠(yuǎn)成功的更快。金無足赤,人無完人,寬以待人包容別人的不足。所謂海納百川,有容乃大?;仡檶?shí)_生活,感觸很深,收獲頗豐。通過實(shí)_我更加認(rèn)識(shí)到實(shí)踐是檢驗(yàn)真理的唯一標(biāo)準(zhǔn),只學(xué)不實(shí)踐,那么所學(xué)的就等于零,理論應(yīng)該與實(shí)踐相結(jié)合。另一方面,實(shí)踐可為以后找工作打基礎(chǔ)。我感覺實(shí)踐是大學(xué)生活的第二課堂,是知識(shí)常新和發(fā)展的源泉,是檢驗(yàn)真理的試金石,也是大學(xué)生鍛煉成長的有效途徑。一個(gè)人的知識(shí)和能力只有在實(shí)踐中才能發(fā)揮作用,才能得到豐富、完善和發(fā)展。大學(xué)生成長,就要勤于實(shí)踐,將所學(xué)的理論知識(shí)與實(shí)踐相結(jié)合一起,在實(shí)踐中繼續(xù)學(xué)_,不斷總結(jié),逐步完善,有所創(chuàng)新,并在實(shí)踐中提高自己的各方面知識(shí)、能

7、力、技術(shù)等因素融合成的綜合素質(zhì)和能力,為自己事業(yè)的成功打下良好的基礎(chǔ)。通過這段時(shí)間的實(shí)_,學(xué)到一些在學(xué)校里學(xué)不到的東西。因?yàn)榄h(huán)境的不同,接觸的人與事不同,從中所學(xué)的東西自然也就不一樣。我們不只要學(xué)好學(xué)校里所學(xué)到的知識(shí),還要不斷從生活實(shí)踐中學(xué)_其他的知識(shí),不斷地從各方面武裝自已,才能在競爭中突出自已,表現(xiàn)自已。要學(xué)會(huì)從實(shí)踐中學(xué)_,從學(xué)_中實(shí)踐。此次實(shí)_我認(rèn)識(shí)到很多工作常識(shí),意志得到了鍛煉,對我以后的學(xué)_和工作將有很大的影響。紙上得來終覺淺,絕知此事須躬行。做事不可以眼高手低,往往看似簡單的東西想要做好并不容易,只有親身實(shí)踐才能知其根本,才會(huì)做出理想的成績。在實(shí)_時(shí)我們要將所學(xué)的理論知識(shí)與實(shí)踐結(jié)合

8、起來,培養(yǎng)勇于探索的創(chuàng)新精神、提高動(dòng)手能力,加強(qiáng)社會(huì)活動(dòng)能力,嚴(yán)肅認(rèn)真的學(xué)_態(tài)度,為走上工作崗位打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。由于是初次實(shí)_,所以有的工作做的很慢,也挺辛苦,不過在同事和同學(xué)的的關(guān)心和幫助下不斷進(jìn)步和成長,也充分感受到公司這個(gè)大家庭的團(tuán)結(jié)和溫暖,于是我決定就算再苦再累我也要堅(jiān)持下去,所以工作起來反而覺得輕松了許多。所以通過虛心請教,在線長的指導(dǎo)幫忙協(xié)助下,我很快的適應(yīng)了這份工作。 在過去的幾個(gè)月里,我在同事的幫助與關(guān)懷下,認(rèn)真學(xué)_、努力工作,能力有了很大的提高,個(gè)人綜合素質(zhì)也有了全面的發(fā)展,但我知道還存在著一些缺點(diǎn)和不足。認(rèn)識(shí)到工作經(jīng)驗(yàn)的缺乏,所以我必須積極努力工作。在實(shí)_的這段時(shí)間里,雖然

9、有時(shí)候工作很苦很累,但是感到更加的充實(shí),我從中體會(huì)到了做人做事的道理。在今后的工作和學(xué)_中,我還要更進(jìn)一步嚴(yán)格要求自己,虛心向優(yōu)秀的同事學(xué)_,繼續(xù)努力改正自己的缺點(diǎn)和不足,爭取在思想、工作、學(xué)_和生活等方面取得更大的進(jìn)步。作為大學(xué)生涯的最后一課,實(shí)_不僅重要更有其獨(dú)特性,正是通過實(shí)_,讓我逐漸掌握怎樣把學(xué)校教給我的理論知識(shí)恰當(dāng)?shù)剡\(yùn)用到實(shí)際工作中,讓我慢慢褪變學(xué)生的浮躁與稚嫩,真正地接觸這個(gè)社會(huì),漸漸地融入這個(gè)社會(huì),實(shí)現(xiàn)我邁向社會(huì)獨(dú)立成長的第一步,站在時(shí)間的這一端倒回去看,六個(gè)月的實(shí)_經(jīng)歷教會(huì)我許許多多的東西,無論是對我以后的職業(yè)生涯還是對于我的人生來說,都是有益的。感觸挺深的,總結(jié)起來,那就是

10、要認(rèn)認(rèn)真真做事,對自己負(fù)責(zé)。用姜汝祥博士的話來說就是:從依附型向獨(dú)立型轉(zhuǎn)變,堅(jiān)守原則去執(zhí)行;從服從型向主動(dòng)型轉(zhuǎn)變,積極主動(dòng)去執(zhí)行;從個(gè)體型向團(tuán)隊(duì)型轉(zhuǎn)變,協(xié)同一致去執(zhí)行;從避責(zé)型向守責(zé)型轉(zhuǎn)變,承擔(dān)責(zé)任去執(zhí)行;從封閉型向分享型轉(zhuǎn)變,開放心態(tài)去執(zhí)行.第一、我們要學(xué)會(huì)自己獨(dú)立,不養(yǎng)成依賴的_慣。社會(huì)是一個(gè)復(fù)雜的社會(huì),適者生存也是社會(huì)一成不變的潛規(guī)則,當(dāng)我們還是學(xué)生,我們可以躲在溫室里,可以依賴,也可以無條件地索取,一旦踏入社會(huì),我們就必須讓自己獨(dú)立起來,要學(xué)會(huì)選擇,學(xué)會(huì)自己作主,沒有誰可以幫誰一輩子,社會(huì)是一個(gè)競爭的社會(huì),我們處的時(shí)代講究優(yōu)勝劣汰,不能獨(dú)立,勢必就要被社會(huì)淘汰.所以,我們要學(xué)會(huì)擺脫依賴

11、的心理,讓自己慢慢獨(dú)立,自己為自己負(fù)責(zé)。第二、在物欲縱流的現(xiàn)代社會(huì),要做到不隨波逐流,保持真我,堅(jiān)持做自己。社會(huì)是一個(gè)大染缸,形形色色的人都有,不公平的現(xiàn)象也會(huì)有。社會(huì)終究是社會(huì),它不是校園,也不若校園里的一切那么簡單明了,單純透明。社會(huì)充斥了成人之間的明爭暗斗,面對這些我們無力改變的狀況,我們能做的,就是堅(jiān)持自我,不隨波逐流。臺(tái)灣著名的作家劉墉說過,在我們每個(gè)人的心里,都應(yīng)該有這么一座堡壘,在平時(shí)的時(shí)候可能顯示不出其重要性,但是,一旦遇到特殊情況,我們可以一退再退,但是,退到不能再退,我們誓與堡壘共存亡。這也就是告訴我們,什么叫原則。在工作中,我們可以忍受,可以退避,但是,我們不能放棄我們自

12、己的原則,我們要堅(jiān)持做自己,端正做人,專心做事。第三、工作的時(shí)候,要做到眼看四方,耳聽八方,也就是要眼到手也到。工作的事情,要主動(dòng)地去做,而做任何的事情,都要勤快。作為一個(gè)新人,在這個(gè)新的環(huán)境里,勤快一點(diǎn)總是沒錯(cuò)的.論輩分,同事都是我們的長輩,論資歷,我們又都只是初出毛廬,沒有一點(diǎn)社會(huì)工作經(jīng)驗(yàn),出于對前輩們的尊重,也是為自己創(chuàng)造學(xué)_的機(jī)會(huì),辦公室的小事我們都要主動(dòng)勤快地去做,不要認(rèn)為自己主動(dòng)多做一些事情就是自己吃虧,其實(shí),事情做的比別人多并不一定就是自己吃虧了,有時(shí)候恰恰相反,我們做的愈多,我們得到的學(xué)_機(jī)會(huì)就愈多,便愈能鍛煉我們自己。我們的主動(dòng)積極會(huì)給我們創(chuàng)造更好的環(huán)境和更多的機(jī)會(huì),只有去做

13、,去付出,才會(huì)有收獲。第四、營造良好的人際關(guān)系網(wǎng),有助于你的工作順利進(jìn)行.俗話說,朋友多了路好走。你對別人怎么樣,別人也是同等地回應(yīng)你的。你對別人好,只要是會(huì)感恩的人,都會(huì)記在心里的。我們無論身處在怎樣的環(huán)境里,我們都應(yīng)該和身邊的人搞好關(guān)系,不輕易交惡,但要真誠地待人。敵人是很容易樹立的,朋友也是要誠心才能相交的。在工作中,我們會(huì)遇到很多的人,也許,某些人只是公司合作的來往伙伴,也許,某些人只是走走過場,但是,無論,我們面對什么樣的人,微笑,真誠,是留給別人最好的印象。而且,同在一個(gè)辦公環(huán)境里,和同事相處得融洽,會(huì)讓自己的工作發(fā)揮得更出色。一個(gè)人的力量無論再怎么強(qiáng)大,終究還是有限的,然而一個(gè)團(tuán)

14、隊(duì)的力量卻可以無限量的大,在這個(gè)團(tuán)隊(duì)里,我們每個(gè)人都可以有自己的主見,而能使這些主見變成現(xiàn)實(shí)的則是我們的團(tuán)體。凡是強(qiáng)大的團(tuán)體,都是個(gè)體犧牲后能夠得回報(bào)的團(tuán)體。身為團(tuán)隊(duì)的一員,我們更要團(tuán)結(jié),互幫互助。當(dāng)我們擁有良好的人際關(guān)系網(wǎng),那么,許多的事情處理起來會(huì)相對容易的多,即使是自己一個(gè)人的獨(dú)立工作,也會(huì)有很多人愿意幫助你協(xié)助你,這會(huì)讓我們的工作做得更加出色,同時(shí)也在這個(gè)團(tuán)隊(duì)里共同成長。第五、自己為自己的行為負(fù)責(zé),要做一個(gè)敢于承擔(dān)責(zé)任的人。沒有誰必須要為我們自己的行為負(fù)責(zé)任,能為我們自己行為負(fù)責(zé)的人,只有我們自己。很多的時(shí)候,我們難免會(huì)犯錯(cuò)誤,遇到這種情況的時(shí)候,我們要做的,不是逃避,也不是搪塞,而是

15、主動(dòng)站起來承擔(dān)。在努力改正這個(gè)錯(cuò)誤的同時(shí),自己為自己負(fù)起責(zé)任來。第2篇:維景實(shí)_報(bào)告遠(yuǎn)通維景酒店實(shí)_報(bào)告郁永大家好,我是09旅游管理的郁永。很高興今天能夠站在這里與大家分享我的實(shí)_經(jīng)歷。我實(shí)_的單位是_遠(yuǎn)通維景國際大酒店。酒店是由_大地遠(yuǎn)通集團(tuán)公司投資興建,由香港港中旅集團(tuán)維景酒店管理有限公司管理的國際五星酒店。維景這個(gè)名字大家應(yīng)該不陌生,包括唐山紫天鵝維景、國豐維景都是由港中旅集團(tuán)管理的。維景的意思是mertor park都市花園的意思,給人一種很唯美的感覺!實(shí)_半年時(shí)間,我一直在管家部工作,通俗的說就是客房部。實(shí)_結(jié)束了,由于一些人事變動(dòng)再加上我一心想留在酒店,被調(diào)到宴會(huì)工作十天,之后又因

16、為人事變動(dòng)調(diào)到大堂吧,工作了兩個(gè)多月。實(shí)_生活也算是比較豐富吧,今天就給大家分享一下??头抗ぷ鞑皇谴蠹蚁胂蟮拇驋叻块g那么簡單,一天工作我們要完成很多任務(wù)。早晨7:50集合,主管開一個(gè)10分鐘的短會(huì),總結(jié)昨天工作疏忽的地方還有今天主意事項(xiàng),然后領(lǐng)鑰匙、房表上樓。我們那里的工作標(biāo)準(zhǔn)是一天13間房,客房是一個(gè)很細(xì)致的工作,細(xì)節(jié)很重要,怎么重要呢?房間配置的東西一樣不能少。比如,便簽夾要放三張便簽紙,少一張被領(lǐng)班查出來,就要放下手頭工作去改錯(cuò),直到可以放房了這間房的工作才算完成。所以在工作時(shí)候必須認(rèn)真再認(rèn)真。做房同時(shí)還要謹(jǐn)記以下幾件事:早10點(diǎn)敲門收洗衣,查看客人是否將要送洗的衣服放入洗衣袋,洗衣單是

17、否填完整,二者缺一不可;中午吃飯換布草,以臟換新,清點(diǎn)好數(shù)量,方巾枕袋一個(gè)不能少;下午3點(diǎn)房間補(bǔ)水果,vip房水果由餐飲部派人單獨(dú)來送,樓層服務(wù)員要與其一同進(jìn)入房間,包括客人開保險(xiǎn)柜之類的事樓層服務(wù)員都要與其他部門人一同進(jìn)入,即保證客人財(cái)產(chǎn)安全也少了很多糾紛;最后在下班前收拾好工作間、整理工作車,為第二天工作做準(zhǔn)備。這些工作看起來很繁瑣,等工作時(shí)間久了認(rèn)真去學(xué)了,就能游刃有余。用我一同學(xué)的口頭禪就是:不大點(diǎn)事兒!白班工作三個(gè)月后,因?yàn)樯现邪嘁粏T工離職,我頂替他開始上中班。中班工作量存在不穩(wěn)定性,工作量大小與房間出租率是成正比的。中班工作做房壓力小了很多,更多的任務(wù)是為房間客人送東西,包括一些額

18、外的枕頭、被子、加濕器、毛巾等等,也會(huì)去幫客人解決一些問題調(diào)空調(diào)溫度、看上網(wǎng)以及保險(xiǎn)柜的使用等等。這樣每天我們都會(huì)接到很多任務(wù),工作的時(shí)候會(huì)準(zhǔn)備一個(gè)小本,把接到的任務(wù)都記錄下來,兩個(gè)人看所有樓層任務(wù)很重,要考驗(yàn)協(xié)調(diào)能力,在最短的時(shí)間內(nèi)完成手頭工作,并且保證不出差錯(cuò)。白班重視細(xì)節(jié),中班就要講效率,因?yàn)槟悴恢涝谀愦驋叻块g的時(shí)候會(huì)有多少任務(wù)派發(fā)給你,你也不知道在你抱著加濕器給客人去送的時(shí)候,樓上正有人等你開門呢。當(dāng)然有的時(shí)間段是比較清閑的,勞逸結(jié)合慢慢的也適應(yīng)了這里的工作??头抗ぷ骶徒榻B到這里,至于宴會(huì)我只學(xué)了個(gè)皮毛就不在這班門弄斧了。大堂吧工作兩個(gè)多月,能夠獨(dú)立上班,能夠讓大堂吧正常運(yùn)作不出大的

19、紕漏,完成了主管交給的任務(wù)。同時(shí)也認(rèn)識(shí)了很多洋酒、學(xué)會(huì)了調(diào)酒做咖啡??偨Y(jié)一下我的實(shí)_經(jīng)歷吧!我是在不斷犯錯(cuò)中成長起來的,大錯(cuò)沒有小錯(cuò)不斷,沒有領(lǐng)導(dǎo)的包容我也學(xué)不了這么多的東西。至于我自己,我不能保證從不犯錯(cuò),但我可以做到錯(cuò)了,不會(huì)再犯。做錯(cuò)了印象很深,下次做事會(huì)很小心,慢慢的就會(huì)發(fā)覺做事越來越謹(jǐn)慎,錯(cuò)誤也會(huì)越來越少。給大家講兩件事一件是我犯的最大的錯(cuò)誤,一件是自我感覺做的出色的地方、我知道在座的各位同學(xué)最想聽的是,我們實(shí)_到底學(xué)到了什么,實(shí)_到底能夠帶給我們什么東西。第一專業(yè)技能。半年時(shí)間足夠你去熟悉,然后慢慢勝任這份工作。同時(shí)酒店人事部會(huì)定期進(jìn)行培訓(xùn),可以了解其他部門是如何運(yùn)作的,各部門的分

20、工合作,以及酒店服務(wù)的基本禮節(jié)。第二我們都學(xué)會(huì)了成長。成熟談不上,但我們都懂事了很多,我想出來實(shí)_以后,沒有人再跟家里要生活費(fèi),更多的是想著我們能攢多少錢為父母做些什么。我們也不再孩子氣,不會(huì)整天生活在抱怨中,不會(huì)因?yàn)橐恍┈嵥樾∈聼┬模睦沓惺苣芰ψ儚?qiáng)了。第三對于我自己我懂得了朋友的重要性,更加注重同學(xué)情誼。而自己的交際能力也得到了提高,能夠與部門員工還有領(lǐng)導(dǎo)相處融洽,是自我感覺值得驕傲的地方。與人交往,將心比心,你為別人做得多,他們更會(huì)照顧你,學(xué)到的東西也會(huì)更多。對于即將參加實(shí)_的大三同學(xué)來說,實(shí)_生活是陌生的,你們會(huì)有很多疑惑也在擔(dān)心很多事情。每個(gè)酒店待遇都不一樣,至少我覺得在維景工作的時(shí)

21、候,那里的員工很照顧實(shí)_生,我們跟他們沒有利益沖突,抱著一個(gè)學(xué)_的心態(tài)很多人都愿意教你幫助你,也希望你們實(shí)_生活一帆風(fēng)順,學(xué)到更多的東西來充實(shí)自己!第3篇:程景 實(shí)_報(bào)告 定稿專業(yè)實(shí)_總結(jié)動(dòng)物科技學(xué)院動(dòng)醫(yī)071班17號(hào)程景一、實(shí)_的基本概況我于年3月1日至年5月20日在山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院獸醫(yī)臨床實(shí)驗(yàn)室實(shí)_,期間由李宏全老師擔(dān)任實(shí)_指導(dǎo)教師。在這段時(shí)間里,我參與了實(shí)驗(yàn)室的一些日常工作,培養(yǎng)了自己的動(dòng)手能力,還幫忙其它實(shí)驗(yàn)的完成,培養(yǎng)自己的科學(xué)思維,同時(shí)在老師的指導(dǎo)下完成了畢業(yè)論文,掌握了論文的寫作模式、方法和思路。二、實(shí)_感受(一)成績與收獲1、對pcr的了解pcr是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(pol

22、ymerase chain reaction)的簡稱,是一種體外酶促合成特異dna片段的專用儀器,在人工合成引物介導(dǎo)下反復(fù)進(jìn)行熱變形-退火-延伸而擴(kuò)增dna的循環(huán)過程。因其具有特異性強(qiáng),靈敏度高,對標(biāo)本的純度要求低,簡便、快速等特點(diǎn), pcr技術(shù)迅速成為分子生物學(xué)的一項(xiàng)常規(guī)手段,并得到了廣泛的實(shí)際應(yīng)用。pcr方法模仿體內(nèi)dna復(fù)制過程,首先使dna變性,兩條鏈解開,即將模板dna置于9495的高溫下,使雙鏈dna的雙鏈解開變成單鏈dna;然后使引物模板退火,將反應(yīng)體系的溫度降低到4565左右,引物能分別與變性后的兩條模板鏈堿基互補(bǔ)配對;將反應(yīng)體系調(diào)整到dna聚合酶作用的最適溫度,dna聚合酶隨

23、即以4種dntp為底物,在引物的引導(dǎo)下合成與模板互補(bǔ)的dna新鏈。重復(fù)此過程,dna即以指數(shù)方式擴(kuò)增。1988年耐熱的taqdna聚合酶在棲熱水生菌中被分離出來后,pcr技術(shù)逐步成熟起來。近年來,在實(shí)際工作和運(yùn)用中,以基本原理為基礎(chǔ)又發(fā)展出了很多新型的pcr技術(shù)。如:反向 pcr( inverse pcr)用于擴(kuò)增位于已知序列兩側(cè)的一段未知序列;不對稱 pcr( asymmetric pcr)通過在反應(yīng)體系中加入不等量的一對引物從而獲得單鏈產(chǎn)物;重組 pcr ( recombinant pcr)可以把兩個(gè)不相鄰的dna片段重組在一起的pcr法。除此之外還有套式引物 pcr ( nested p

24、rimer pcr)、免疫 pcr( immunopcr)、加端pcr (addspecific pcr)、原位pcr ( in situ pcr) 等。逆轉(zhuǎn)錄pcr( reverse transcription pcr,簡稱rt - pcr)。逆轉(zhuǎn)錄pcr是一種能檢測細(xì)胞內(nèi)低豐度特異性rna的方法。其原理是原理是:提取組織或細(xì)胞中的總rna,以其中的mrna作為模板,采用oligo(dt)或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cdna。再以cdna為模板進(jìn)行pcr擴(kuò)增,而獲得目的基因或檢測基因表達(dá)。rt-pcr技術(shù)靈敏而且用途廣泛,可用于檢測細(xì)胞中基因表達(dá)水平,細(xì)胞中rna病毒的含量和直接克隆特定基

25、因的cdna序列。rt-pcr主要用于對表達(dá)信息進(jìn)行檢測或定量,分析基因的轉(zhuǎn)錄水平。另外,這項(xiàng)技術(shù)還可以用來檢測基因表達(dá)差異或克隆cdna而不必構(gòu)建cdna文庫。rt-pcr比其他包括northern印跡、rnase保護(hù)分析、原位雜交及s1核酸酶分析在內(nèi)的rna分析技術(shù),更靈敏,更易于操作。2、對紅細(xì)胞免疫的了解以往認(rèn)為,紅細(xì)胞只參與呼吸功能,沒有免疫功能。事實(shí)上,紅細(xì)胞有許多與免疫有關(guān)的物質(zhì),如cr1、cr3、cd58、cd59、daf、sod,數(shù)目眾多,自成系統(tǒng)。紅細(xì)胞是血循環(huán)中最重要的固有免疫細(xì)胞。紅細(xì)胞有識(shí)別、黏附、濃縮、殺傷抗原、清楚循環(huán)免疫復(fù)合物的能力,參與機(jī)體免疫調(diào)控,并有完整的

26、自我調(diào)控系統(tǒng),許多疾病免疫發(fā)病機(jī)制中,紅細(xì)胞天然免疫缺陷占有很重要的地位。已有越來越多的研究證實(shí)紅細(xì)胞天然免疫功能的變化與許多疾病的發(fā)生、發(fā)展及病理過程密切相關(guān),尤其是e-cr1基因多態(tài)性分布及其表達(dá)變化與許多疾病的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切,如自身免疫性疾病、傳染病、血液病等。20世紀(jì)50年代,nelson等首次發(fā)現(xiàn)了紅細(xì)胞具有免疫黏附功能,此功能有促進(jìn)白細(xì)胞吞噬的作用。人紅細(xì)胞能與特異調(diào)理過的梅毒螺旋體及肺炎球菌結(jié)合,從而推測紅細(xì)胞膜存在兔免疫黏附受體,免疫復(fù)合物同該受體結(jié)合,促進(jìn)白細(xì)胞對其的吞噬,是宿主防御機(jī)制的一部分。20世紀(jì)60年代證實(shí)了這種人紅細(xì)胞所具有的免疫黏附功能是通過型補(bǔ)體受體(cr1

27、)實(shí)現(xiàn)的;20世紀(jì)70年代在人的紅細(xì)胞膜上首次分離并純化了該受體;20世紀(jì)80年代初,siegel等首次提出了紅細(xì)胞免疫系統(tǒng)的新概念。紅細(xì)胞作為天然免疫的一個(gè)構(gòu)成部分,是機(jī)體自身免疫平衡的穩(wěn)定的重要基礎(chǔ),它在整體免疫反應(yīng)這種具有以下作用。增強(qiáng)吞噬作用;清楚循環(huán)免疫復(fù)合物;識(shí)別和攜帶抗原;免疫調(diào)節(jié)作用;效應(yīng)細(xì)胞的作用。3、試驗(yàn)用動(dòng)物的取樣以及血液的前期處理耳緣靜脈采血4ml于含有edta抗凝劑的一次性真空采血管中,置于4備用;取出血液加入等體積(4ml)的生理鹽水對犬的血細(xì)胞進(jìn)行等體積稀釋;按1:3比例加入紅細(xì)胞裂解液,輕柔的顛倒混勻3-6次,4靜置10分鐘;_rpm,4離心5分鐘,棄上清加入4

28、ml生理鹽水懸浮沉淀,按1:2的比例將此懸液緩慢加入到淋巴細(xì)胞分離液表面,注意不要使兩者混合;4,2500rpm離心15分鐘;離心后,該液分為四層,取第二層環(huán)狀乳白色細(xì)胞層于另一新ep管中;4,3000rpm離心5分鐘,棄上清。4、rna的提取向ep管中的細(xì)胞沉淀加入1ml trizol;旋渦振蕩器上充分混勻,靜置5min;再加入200l氯仿,混勻后靜置2min,于4,13,000rpm離心15min;小心吸取上清(大約500l)與另一個(gè)干凈的ep中;加入等體積的異丙醇,顛倒混勻后靜置10min,于4,13,000rpm離心10min;倒掉異丙醇加入1ml 70%預(yù)冷的酒精洗掉多余的異丙醇,于4,10,500rpm離心5min;倒掉酒精將提取的rna風(fēng)干,約10分鐘左右至半透明(不可全干);加入40l的rnase free dh2o,充分溶解,-80保存?zhèn)溆?/p>

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