微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用

1、考考 綱綱 原原 生生 態(tài)態(tài) 1.微生物的分離和培養(yǎng)微生物的分離和培養(yǎng) 2.某種微生物數(shù)量的測定某種微生物數(shù)量的測定 3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用培養(yǎng)基對微生物的選擇作用 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 1培養(yǎng)基培養(yǎng)基 (1)概念：人們按照微生物對概念：人們按照微生物對_的不同需求，的不同需求， 配制出供其生長繁殖的配制出供其生長繁殖的_。 營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì) 營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì) 水、碳源、氮源、無機(jī)鹽水、碳源、氮源、無機(jī)鹽 pHpH 氧氣氧氣 固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 分類分類 標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn) 培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點(diǎn)特點(diǎn)用途用途 根據(jù)根據(jù)

2、 物理物理 性質(zhì)性質(zhì) 液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基不加凝固劑不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn) 半固體半固體 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 加凝固劑，如瓊脂加凝固劑，如瓊脂 觀察微生物的運(yùn)觀察微生物的運(yùn) 動(dòng)、分類、鑒定動(dòng)、分類、鑒定 固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂加凝固劑，如瓊脂 微生物分離、鑒微生物分離、鑒 定、活菌計(jì)數(shù)定、活菌計(jì)數(shù) 根據(jù)根據(jù) 用途用途 選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基 培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物 質(zhì)，以質(zhì)，以抑制抑制不需要的微生不需要的微生 物的生長，物的生長，促進(jìn)促進(jìn)所需要的所需要的 微生物的生長微生物的生長 培養(yǎng)、培養(yǎng)、分離出特分離出特 定微生物定微生物 鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基 根據(jù)微生物的

3、代謝特點(diǎn)，根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)， 在培養(yǎng)基中加入某種指在培養(yǎng)基中加入某種指示示 劑或化學(xué)藥品劑或化學(xué)藥品 鑒別鑒別不同種類的不同種類的 微生物微生物 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基礎(chǔ)知識(shí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基礎(chǔ)知識(shí) 1 1培養(yǎng)基培養(yǎng)基 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 【練習(xí)鞏固練習(xí)鞏固】(2010全國卷全國卷改造改造)某細(xì)菌固體培養(yǎng)基某細(xì)菌固體培養(yǎng)基 的組成成分是的組成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、葡萄糖、 尿素、瓊脂和蒸餾水，其中凝固劑是尿素、瓊脂和蒸餾水，其中凝固劑是_，碳，碳 源是源是_，氮源是，氮源是_。已知只有能合成。已知只有能合成 脲酶的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長，故該培養(yǎng)基屬

4、于脲酶的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長，故該培養(yǎng)基屬于 _培養(yǎng)基。從同化作用類型的角度看，用該培養(yǎng)培養(yǎng)基。從同化作用類型的角度看，用該培養(yǎng) 基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于_。 異養(yǎng)型異養(yǎng)型 瓊脂瓊脂 葡萄糖葡萄糖尿素尿素 選擇選擇 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 煮沸消毒法煮沸消毒法 灼燒滅菌灼燒滅菌 條件條件結(jié)果結(jié)果常用的方法常用的方法 消消 毒毒 滅滅 菌菌 較為溫和較為溫和 的物理或的物理或 化學(xué)方法化學(xué)方法 僅殺死僅殺死物體表面或內(nèi)部物體表面或內(nèi)部 的對人體有害的的對人體有害的部分微部分微 生物生物(不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法、巴氏煮沸消毒法、巴氏 消毒法、紫外線或消毒法、紫外

5、線或 化學(xué)藥物消毒法化學(xué)藥物消毒法 強(qiáng)烈的理強(qiáng)烈的理 化因素化因素 殺死殺死物體內(nèi)外物體內(nèi)外所有的微所有的微 生物生物，包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子 灼燒滅菌、干熱滅灼燒滅菌、干熱滅 菌、高壓蒸汽滅菌菌、高壓蒸汽滅菌 2無菌技術(shù)無菌技術(shù) 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 3純化大腸桿菌的原理與方法純化大腸桿菌的原理與方法 (1)原理：原理： 在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞， 使其長成單個(gè)的菌落，使其長成單個(gè)的菌落， 這個(gè)菌落就是純化的細(xì)菌

6、菌落。這個(gè)菌落就是純化的細(xì)菌菌落。 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 比較比較平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 原理原理 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn)缺點(diǎn) 適用適用 范圍范圍 考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 通過接種環(huán)在瓊脂固體培通過接種環(huán)在瓊脂固體培 養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作， 將聚集的菌種逐步稀釋分將聚集的菌種逐步稀釋分 散到培養(yǎng)基上。在數(shù)次劃散到培養(yǎng)基上。在數(shù)次劃 線后培養(yǎng)，可以分離到由線后培養(yǎng)，可以分離到由 一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼 可見的子細(xì)胞群體，即菌可見的子細(xì)胞群體，即菌 落落 將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，將菌液進(jìn)行一系列的梯度

7、稀釋， 然后將不同稀釋度的菌液分別然后將不同稀釋度的菌液分別 涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面， 進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的 菌液里，聚集在一起的微生物菌液里，聚集在一起的微生物 將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能 在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 可以觀察菌落特征，可以觀察菌落特征， 對混合菌進(jìn)行分離對混合菌進(jìn)行分離 可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征 不能計(jì)數(shù)不能計(jì)數(shù) 吸收量較少，較麻煩，平板吸收量較少，較麻煩，平板 不干燥效果不好，容易蔓延不干燥效果不好，容易蔓延 適用于好氧菌適用于好

8、氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌 (2)純化微生物的接種方法：純化微生物的接種方法： 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 平板劃線法純化大腸桿菌時(shí)不同階段灼燒接種環(huán)的平板劃線法純化大腸桿菌時(shí)不同階段灼燒接種環(huán)的 目的不同目的不同 (1)第一次操作：第一次操作： 殺死接種環(huán)上原有的微生物。殺死接種環(huán)上原有的微生物。 (2)每次劃線之前：每次劃線之前： 殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃 線的菌種直接來源于上次劃線的末端。線的菌種直接來源于上次劃線的末端。 (3)劃線結(jié)束后：劃線結(jié)束后： 殺

9、死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和 感染操作者。感染操作者。 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) (1)培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌。(2013江蘇江蘇)( ) (2)轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線。轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線。 (2013江蘇江蘇)( ) (3)接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (2013江蘇江蘇)( ) (4)培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次。培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次。 (2013江蘇江蘇)( ) (5)

10、在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌。在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌。 (2011重慶重慶)( ) (6)在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長，向在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長，向 液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長。液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長。 (2011重慶重慶)( ) (7)對新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是高壓蒸汽滅菌鍋。對新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是高壓蒸汽滅菌鍋。 實(shí)驗(yàn)前需對超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒處理。實(shí)驗(yàn)前需對超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒處理。 (2010山東山東)( ) (8)用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓

11、滅菌用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌 后倒平板。后倒平板。 (2009安徽安徽)( ) 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 D D 題組一微生物的培養(yǎng)題組一微生物的培養(yǎng) 1(2015北京市東城區(qū)聯(lián)考北京市東城區(qū)聯(lián)考)細(xì)菌需要從外界吸收細(xì)菌需要從外界吸收 營養(yǎng)物質(zhì)并通過代謝來維持正常的生長和繁殖。下營養(yǎng)物質(zhì)并通過代謝來維持正常的生長和繁殖。下 列與此有關(guān)的說法正確的是列與此有關(guān)的說法正確的是 () A乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源是相同的乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源是相同的 B氮源不可能作為細(xì)菌的能源物質(zhì)氮源不可能作為細(xì)菌的能源物質(zhì) C瓊脂是細(xì)菌生長和繁殖中不可缺少的一種物質(zhì)瓊脂是細(xì)菌生長和繁

12、殖中不可缺少的一種物質(zhì) D以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長出的不都是尿以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長出的不都是尿 素分解菌素分解菌 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 題組一微生物的培養(yǎng)題組一微生物的培養(yǎng) 2隨著科技的發(fā)展，微生物在生產(chǎn)活動(dòng)中得到了廣泛隨著科技的發(fā)展，微生物在生產(chǎn)活動(dòng)中得到了廣泛 應(yīng)用。下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述，正確的是應(yīng)用。下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述，正確的是() A青霉素就是抗生素，在青霉菌的培養(yǎng)過程中不用嚴(yán)青霉素就是抗生素，在青霉菌的培養(yǎng)過程中不用嚴(yán) 格滅菌格滅菌 B培養(yǎng)基中加入的瓊脂可以作為微生物的碳源培養(yǎng)基中加入的瓊脂可以作為微生物的碳源 C為了避免污染，在微生物培養(yǎng)過程中，操作人員的為

13、了避免污染，在微生物培養(yǎng)過程中，操作人員的 手必須經(jīng)過嚴(yán)格滅菌手必須經(jīng)過嚴(yán)格滅菌 D在菌種選育過程中可以利用人工誘變等手段在菌種選育過程中可以利用人工誘變等手段 D D 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 成分成分含量含量成分成分含量含量 NaNONaNO3 33 g3 gFeSOFeSO4 40.01 g0.01 g K K2 2HPOHPO4 41 g1 g(CH(CH2 2O)O)30 g30 g 瓊脂瓊脂15 g15 gH H2 2O O1 000 mL1 000 mL MgSOMgSO4 47H7H2 2O O0.5 g0.5 g青霉素青霉素0.10.1萬單位萬單位 題組一微生物的培養(yǎng)題組一微生

14、物的培養(yǎng) 3下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 A.依物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；依用途劃依物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；依用途劃 分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基 B由培養(yǎng)基的原料可知，所培養(yǎng)微生物的同化作用類型由培養(yǎng)基的原料可知，所培養(yǎng)微生物的同化作用類型 是異養(yǎng)型，培養(yǎng)的微生物可以是酵母菌或毛霉是異養(yǎng)型，培養(yǎng)的微生物可以是酵母菌或毛霉 C本培養(yǎng)基中青霉素的添加滿足了微生本培養(yǎng)基中青霉素的添加滿足了微生物生長對特物生長對特 殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求 D若用該培養(yǎng)基分離能分解尿素的細(xì)菌

15、，應(yīng)除去青霉素若用該培養(yǎng)基分離能分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)除去青霉素 和和NaNO3，并應(yīng)加入尿素，并應(yīng)加入尿素 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 題組一微生物的培養(yǎng)題組一微生物的培養(yǎng) 1篩選微生物的原理篩選微生物的原理 人為提供有利于目的菌株生長的條件人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、包括營養(yǎng)、 溫度、溫度、pH等等)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長。，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長。 因此，可以通過配制選擇培養(yǎng)基、控制培養(yǎng)條因此，可以通過配制選擇培養(yǎng)基、控制培養(yǎng)條 件等選擇目的微生物。件等選擇目的微生物。 2選擇培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)原理和功能選擇培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)原理和功能 根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某

16、些物根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某些物 理、化學(xué)因素理、化學(xué)因素(如溫度、如溫度、pH等等)的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng) 基為選擇培養(yǎng)基?；鶠檫x擇培養(yǎng)基。 此類培養(yǎng)基能使混合菌株中的目的菌株變?yōu)閮?yōu)此類培養(yǎng)基能使混合菌株中的目的菌株變?yōu)閮?yōu) 勢菌，從而提高該菌的篩選效率。勢菌，從而提高該菌的篩選效率。 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 題組一微生物的培養(yǎng)題組一微生物的培養(yǎng) 3選擇培養(yǎng)基應(yīng)用實(shí)例選擇培養(yǎng)基應(yīng)用實(shí)例 序號(hào)序號(hào)改變的條件改變的條件分離的目的菌分離的目的菌 1 2 3 4 5 加入青霉素加入青霉素 加入高濃度的食鹽加入高濃度的食鹽 缺乏氮源缺乏氮源 石油作為唯一碳源石油作為唯一碳源 高

17、溫環(huán)境高溫環(huán)境 酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌 金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌 固氮微生物固氮微生物 分解石油的微生物分解石油的微生物 耐高溫微生物耐高溫微生物 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 題組二微生物純化的方法分析題組二微生物純化的方法分析 4有關(guān)平板劃線操作正確的是有關(guān)平板劃線操作正確的是 () A使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中 不再滅菌不再滅菌 B打開含菌種的試管后要通過火焰滅菌，取出打開含菌種的試管后要通過火焰滅菌，取出 菌種后要馬上塞上棉塞菌種后要馬上塞上棉塞 C將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三 至五條平行

18、線即可至五條平行線即可 D最后將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)最后將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) D D 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 題組二微生物純化的方法分析題組二微生物純化的方法分析 5苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降 解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解 廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了能降解利用苯廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了能降解利用苯 酚的細(xì)菌菌株篩選的主要步驟如下圖所示，為土壤樣品。酚的細(xì)菌菌株篩選的主要步驟如下圖所示，為土壤樣品。 下列

19、相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是() A圖中圖中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源 B如果要測定如果要測定中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法 C若圖中若圖中為對照實(shí)驗(yàn)，則其中應(yīng)以苯酚作為唯一的碳源為對照實(shí)驗(yàn)，則其中應(yīng)以苯酚作為唯一的碳源 D使用平板劃線法可以在使用平板劃線法可以在上獲得上獲得單菌落單菌落 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 題組二微生物純化的方法分析題組二微生物純化的方法分析 微生物純化的三種途徑微生物純化的三種途徑 (1)單菌落挑取法：單菌落挑取法： 利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體利用平

20、板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體 平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利 用單菌落挑取的方法獲得目的微生物。用單菌落挑取的方法獲得目的微生物。 (2)選擇培養(yǎng)法：選擇培養(yǎng)法： 利用選擇培養(yǎng)基對微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲利用選擇培養(yǎng)基對微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲 得目的微生物。得目的微生物。 (3)鑒定培養(yǎng)法：鑒定培養(yǎng)法： 利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特 征，然后篩選目的微生物。征，然后篩選目的微生物。 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 考點(diǎn)二微生物的分離與數(shù)量測定考點(diǎn)二微生物的分離與數(shù)量測定 1土壤中分

21、解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) (1)分離原理分離原理 土壤中細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芡寥乐屑?xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡?合成合成_，這種物質(zhì)在把尿素分解成無機(jī)物的過程，這種物質(zhì)在把尿素分解成無機(jī)物的過程 中起到中起到_作用。作用。 (2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用_法。法。 (3)實(shí)驗(yàn)流程實(shí)驗(yàn)流程 土壤取樣土壤取樣 _微生物的培養(yǎng)與觀微生物的培養(yǎng)與觀 察察細(xì)菌的細(xì)菌的_。 脲酶脲酶 催化催化 稀釋涂布平板稀釋涂布平板 樣品的稀釋樣品的稀釋 計(jì)數(shù)計(jì)數(shù) 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 考點(diǎn)二微生物的分離與數(shù)量測定考點(diǎn)二

22、微生物的分離與數(shù)量測定 2分解纖維素的微生物的分離分解纖維素的微生物的分離 (1)纖維素酶纖維素酶 組成：纖維素酶是一種組成：纖維素酶是一種_，一般認(rèn)為它至，一般認(rèn)為它至 少包括三種組分，即少包括三種組分，即_。 作用：作用： 葡萄糖葡萄糖 復(fù)合酶復(fù)合酶 C C1 1酶、酶、C CX X酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 (2)(2)纖維素分解菌的篩選纖維素分解菌的篩選 原理：原理： 纖維素分解菌纖維素分解菌 篩選方法：篩選方法：_染色法，即通過是否產(chǎn)生染色法，即通過是否產(chǎn)生 _來篩選纖維素分解菌。來篩選纖維素分解菌。 培養(yǎng)基：以培養(yǎng)基：以_為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。為唯一碳源

23、的選擇培養(yǎng)基。 紅色復(fù)合物紅色復(fù)合物透明圈透明圈 剛果紅剛果紅 透明圈透明圈 纖維素纖維素 考點(diǎn)二微生物的分離與數(shù)量測定考點(diǎn)二微生物的分離與數(shù)量測定 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程： 土壤取樣：富含土壤取樣：富含_的環(huán)境的環(huán)境 選擇培養(yǎng)：選擇培養(yǎng)：用用_培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度 _：制備系列稀釋液：制備系列稀釋液 涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 挑選產(chǎn)生挑選產(chǎn)生_的菌落的菌落 纖維素纖維素 選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基 梯度稀釋梯度稀釋 透明圈透明圈 考點(diǎn)二微生物的分離與數(shù)量測定考點(diǎn)二微生

24、物的分離與數(shù)量測定 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 考點(diǎn)二微生物的分離與數(shù)量測定考點(diǎn)二微生物的分離與數(shù)量測定 (1)分離微生物所用的選擇培養(yǎng)基一定是固體培養(yǎng)分離微生物所用的選擇培養(yǎng)基一定是固體培養(yǎng) 基，因?yàn)榫渲荒茉诠腆w培養(yǎng)基上形成?；?yàn)榫渲荒茉诠腆w培養(yǎng)基上形成。 (2)平板劃線法只適合用于微生物的提純，不適合平板劃線法只適合用于微生物的提純，不適合 進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且在最后一次劃線的末端處的菌種進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且在最后一次劃線的末端處的菌種 最純。最純。 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 考點(diǎn)二微生物的分離與數(shù)量測定考點(diǎn)二微生物的分離與數(shù)量測定 (1)要從土壤中分離獲取纖維素分解菌，應(yīng)選用以纖維素為要從土壤中分

25、離獲取纖維素分解菌，應(yīng)選用以纖維素為 唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。(2013太原五中月考太原五中月考)( ) (2)在纖維素分解菌培養(yǎng)過程中，對培養(yǎng)基和接種環(huán)常采用在纖維素分解菌培養(yǎng)過程中，對培養(yǎng)基和接種環(huán)常采用 的滅菌方法分別是高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌。的滅菌方法分別是高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌。 (2013許昌二次調(diào)研許昌二次調(diào)研)( ) (3)透明圈是剛果紅與纖維素形成的復(fù)合物，可根據(jù)是否出透明圈是剛果紅與纖維素形成的復(fù)合物，可根據(jù)是否出 現(xiàn)透明圈來判斷有無纖維素分解菌?，F(xiàn)透明圈來判斷有無纖維素分解菌。 (2011山東改山東改 編編)( ) (4)測定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用

26、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。測定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。 (2010山東山東)( ) (5)在在“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”的實(shí)驗(yàn)中，確定對照組無菌后，的實(shí)驗(yàn)中，確定對照組無菌后， 選擇菌落數(shù)在選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。 (2009安徽安徽)( ) (6)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使 所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還 應(yīng)保證待測樣品稀釋的比例合適。應(yīng)保證待測樣品稀釋的比例合適。 (2009高

27、考寧夏高考寧夏 卷卷)( ) 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 題組三對分離分解尿素細(xì)菌及纖維素分解菌的篩選分析題組三對分離分解尿素細(xì)菌及纖維素分解菌的篩選分析 1欲從土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌，下列實(shí)驗(yàn)欲從土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌，下列實(shí)驗(yàn) 操作中，不正確的是操作中，不正確的是 () A將土壤用無菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋將土壤用無菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋 B同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個(gè)平板同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個(gè)平板 C可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照 D用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選

28、出分解尿素 的細(xì)菌的細(xì)菌 D D 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 題組三對分離分解尿素細(xì)菌及纖維素分解菌的篩選分析題組三對分離分解尿素細(xì)菌及纖維素分解菌的篩選分析 2(2015泰州質(zhì)檢泰州質(zhì)檢)利用農(nóng)作物秸稈為原料可生產(chǎn)乙醇，利用農(nóng)作物秸稈為原料可生產(chǎn)乙醇， 生產(chǎn)過程中可采用微生物將秸稈水解或用酶水解，其主生產(chǎn)過程中可采用微生物將秸稈水解或用酶水解，其主 要技術(shù)流程如下圖所示，下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是要技術(shù)流程如下圖所示，下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是 A可用剛果紅染色法篩選過程可用剛果紅染色法篩選過程所需的纖維素分解菌所需的纖維素分解菌 B過程過程加入的纖維素酶是葡萄糖苷酶加入的纖維素酶是葡萄糖苷酶 C酒精發(fā)酵接種的酵母菌需在無氧條件下發(fā)酵酒精發(fā)酵接種的酵母菌需在無氧條件下發(fā)酵 D酒精發(fā)酵前需對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌酒精發(fā)酵前需對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 微生物的培養(yǎng)及科學(xué)應(yīng)用 項(xiàng)目項(xiàng)目土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離 分解纖維素的微生物的分離分解纖維素的微生物的分離 方法方法 使用以尿素為唯一氮源的使用以尿素為唯一氮源的 選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng) 利用富含纖維素的選擇利用富含纖維素的選擇 培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng) 原理原理 土壤中不能分解尿素