五味子提取物體外抑菌作用x

1、五味子提取物體外抑菌作用五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill別名北五味子、遼五味 子、山花椒、烏梅子、軟棗子等，為木蘭科五味子屬植物。多年生落 葉木質(zhì)藤本，以野生為主，為常用中藥材。主要以果實入藥，因有甘、 酸、辛、苦、咸五味而得名，有斂肺、滋腎、止汗、生津、止瀉、澀 精等功能?？梢灾委熆人?、哮喘、口渴自汗、盜汗、遺精、久瀉、神 經(jīng)衰弱等癥，也是很好的果酒和飲料的原料門，具有極高的藥用價 值和營養(yǎng)價值，是一種新型的“藥食同源功能性保健食品，其果實在 國際上己成為一種新興食品工業(yè)的重要原料2, 3。本實驗采用濾 紙片法和二倍稀釋法，研究了五味子提取物對4種常見污

2、染菌的抑制 作用，為其進一步開發(fā)利用提供依據(jù)。1資料與方法1.1菌種與培養(yǎng)基試驗菌為金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌、綠 膿桿菌和肺炎克雷伯氏菌，由XXX省臺州醫(yī)院微生物實驗室友情贈送。 牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基按文獻4自制,PH為6.0(用PBS配制5)。1.2五味子提取物的制備五味子飲片購自臨海市醫(yī)藥有限公司， 經(jīng)70瞅共干后研成粉末。取粉末10g用75%乙醇在超聲波清洗器中提 取，反復多次，直至浸出液色淡。將浸岀液濃縮，并定容到10ml, 即lml提取液為lg五味子的提取物6。提取液過0.22pm濾膜除菌， 個貯存?zhèn)溆谩?.3抑菌試驗1.3.1抑菌效力的測定將供試菌從斜而轉(zhuǎn)接到5ml液體培養(yǎng)基，3

3、0囪培養(yǎng)24h,吸取50卩1到5ml液體培養(yǎng)基，30固培養(yǎng)6h后取100卩1 菌液均勻涂布到平板上；再貼上濾紙圓片（e6mm,提取液浸24h后 風干），每皿4片，重復3次。37回倒置培養(yǎng)24h后測定抑菌圈大小, 用無菌水作空口對照，確定抑菌效果。1.3.2最低抑菌濃度（MIC）的測定采用二倍稀釋法7測定提 取物對供試菌的MICo取7支試管，第1支加入10ml提取液，其余 6支各加入5ml無菌水，從第1支吸取5ml提取液移至第2支，混勻 后，再吸取5ml至第3支，以此類推，最后2支試管取出5ml棄去, 每一試管的濃度分別為 2000、500、250、125、62.5、31.3 和 15.6mg/

4、mlo 分別將5ml上述各濃度的提取物與20ml牛肉膏固體培養(yǎng)基混勻，制 成提取物的濃度分別為200、100、50、25、12.5、6.3和3.2mg/ml （w/v）的平板，接種菌液后倒置培養(yǎng)24h觀察，以沒有供試菌生長 的最低濃度為提取物的MIC。1.3.3熱穩(wěn)定性試驗將五味子提取液置于80固水浴、1000水浴和 12血濕熱條件下8熱處理20min,再制成濃度為500mg/ml的提取 液浸泡濾紙片，稍風干后貼在涂有菌液的平板中，測定其抑菌效果。2結果與分析2.1提取物濃度對抑菌效力的影響濾紙片法測定結果顯示，五味 子提取物對4種供試菌的生長均有很強的抑制作用，其中對綠膿桿菌 的抑制作用最強

5、，肺炎克雷伯氏菌其次，大腸桿菌和金黃色葡萄球菌 最弱。表1五味子提取物的濃度對抑菌效率的影響（略）2.2不同菌的MIC提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿 菌、肺炎克雷伯氏菌的MIC值如表2所示。除金黃色葡萄球菌的MIC 為50mg/ml外，其余3種菌均為25mg/ml （與濾紙片法基本一致）。表2五味子提取物的MIC （mg/ml）（略）“一表示無菌生長，“+表示細菌生長2.3提取物的熱穩(wěn)定性試驗提取物經(jīng)3種溫度的熱處理20min后， 仍具有較強的抑菌效力，其抑菌圈直徑與未經(jīng)高溫處理的樣品接近, 其中只有對綠膿桿菌抑制作用，經(jīng)200回處理和濕熱滅菌后有顯著下 降，對金黃色葡萄球菌的抑制作用，經(jīng)濕熱滅菌后有顯著降低；而對 大腸桿菌和肺炎克雷伯氏菌抑制作用，3種處理與對照均無顯著差異（見表3）。說明五味子的抑菌成分具有一定的熱穩(wěn)定性。表3熱處理對五味子提取物抑菌效力的影響（略）不同字母表示PV0.05水平顯著，ns為不顯著3結論經(jīng)反復實驗，結果表明五味子提取物的濃度在31.31000mg/ml 范圍內(nèi)，對4種供試菌的抑制效應依次為：綠膿桿菌;肺炎克雷伯氏 菌;大腸桿菌;金黃色葡萄球菌。濾紙片瓊脂擴散法結果顯示，除金 黃色葡萄球菌MIC為62.5mg/ml夕卜，其余3種供試菌MIC均為 31.3mg/ml；采用二倍稀釋法測得的MI