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1、南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)管理中心機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué) 實(shí)驗(yàn)報(bào)告日期:實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名 稱小鼠基本操作技術(shù)、乏氧性缺氧、血液性缺氧成績實(shí)驗(yàn)人員撰寫報(bào)告人 : 小組成員 :專業(yè)年級(jí)信 息* 年級(jí)* 專業(yè)第 *實(shí)驗(yàn)室第 * 組1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模▌?wù)必簡潔) (1)了解缺氧的分類 (2)復(fù)制不同類型缺氧模型 (3)觀察不同類型缺氧時(shí)呼吸節(jié)律和皮膚黏膜顏色的變化規(guī)律,了解不同類 型缺氧的表現(xiàn)特征2. 材料與方法2.1 材料或/ 和動(dòng)物動(dòng)物:成年小白鼠,雌雄不拘材料:藥品:鈉石灰、甲酸、濃硫酸、 5%亞銷酸鈉、 1%亞甲藍(lán) 器材:密封廣口瓶、一氧化碳發(fā)生裝置、酒精燈、注射器及針頭、 粗剪刀、組織鑷等2.2 方法
2、(即實(shí)驗(yàn)步驟)(1)乏氧性缺氧1)觀察記錄小白鼠正常呼吸頻率、深度和皮膚、黏膜顏色等指標(biāo); 2)將小白鼠放入裝有鈉石灰的密封廣口瓶中,塞緊瓶塞;3)每 3 分鐘重復(fù)觀察上述指標(biāo) 1次,如有其它變化,隨時(shí)記錄,直至動(dòng)物死亡。( 2) 血液性缺氧1) 一氧化碳中毒性缺氧 準(zhǔn)備一氧化碳發(fā)生裝置; 將一只小鼠放入廣口瓶中,觀察其正常表現(xiàn)后與一氧化碳發(fā)生裝置連 接; 用量杯先取甲酸 3ml 放于試管中,再沿試管壁緩慢加入濃硫酸 2ml ,塞 緊瓶塞; 觀察并記錄呼吸頻率、深度和皮膚、黏膜顏色各項(xiàng)指標(biāo)的改變。2) 亞硝酸鈉中毒性缺氧 選取體重相近的小鼠 2 只,觀察正常指標(biāo); 分別通過腹腔注射 5亞硝酸鈉
3、 0.3 ml/ 只; 隨后立即取其中 1 只小白鼠腹腔內(nèi)注入 1亞甲藍(lán)溶液 0.3 ml ;另 1 只立即注入生理鹽水 0.3 ml ; 觀察并記錄呼吸頻率、深度和皮膚、黏膜顏色各項(xiàng)指標(biāo),比較 2 只小白鼠 的表現(xiàn)及死亡時(shí)間。3. 結(jié)果與討論3.1 正常情況下的小鼠: 狀況良好,呼吸頻率大約在 *次/min, 呼吸幅度適中, 此時(shí)皮膚黏膜呈健康的粉紅色。3.2 在乏氧性缺氧實(shí)驗(yàn)中, 放在鈉石灰的小鼠一開始呈平靜的狀態(tài), 后面逐 漸狂躁,后抽搐,最后死亡??裨陼r(shí)呼吸頻率約為 *次/min ,在后期呼吸頻率 減慢,大約*次/min ;呼吸幅度加深,此時(shí)皮膚黏膜呈青紫色。 死亡時(shí)間:*min 。
4、具體結(jié)果如表 13.3 在CO中毒性缺氧實(shí)驗(yàn)中,小鼠 * ,呼吸頻率 * ;呼吸頻率 * ,皮膚黏 膜呈櫻桃紅。死亡時(shí)間: *min 。具體結(jié)果如表 23.4 亞硝酸鈉中毒性缺氧3.4.1 亞硝酸鹽 +亞甲藍(lán)組:剛注射亞甲基藍(lán)后小鼠狀態(tài)正常,隨后表現(xiàn)安 靜,死亡時(shí)四肢顫動(dòng)3.4.2 亞硝酸鹽 +生理鹽水組: 注射生理鹽水后傷口有血流出,死亡過程 與亞硝酸鹽 +亞甲藍(lán)組相似,但是存活時(shí)間減半。皮膚黏膜呈淡棕褐色。具體 結(jié)果如表 3表1乏氧性缺氧呼吸頻缺氧類觀測指呼吸幅皮膚黏存活時(shí)狀況率(次型標(biāo)度膜顏色間/min )正常良好 *適中粉紅/一開始呈平靜缺氧( *min )的狀態(tài), *加深青紫色*mi
5、n乏氧性后面逐缺氧漸狂躁。呼吸逐缺氧漸減弱,*變淺青紫色*min( *min )后抽搐,最后死表 2 CO 中毒性缺氧呼吸頻 缺 氧 類 觀 測 指 呼 吸 幅 皮 膚 黏 存 活 時(shí) 狀況 率 ( 次型 標(biāo) 度 膜顏色 間/min )適中粉紅/*櫻桃紅*min正常 良好一開始 很平靜,缺氧 酒 精 燈 (*min ) 加熱后,CO 中 毒出現(xiàn)明 性顯躁動(dòng)缺氧接近死缺氧亡 時(shí) 小 * 櫻桃紅 *min ( *min )鼠劇烈抽搐表 3 亞硝酸鈉中毒性缺氧呼吸頻 缺 氧 類 觀 測 指 呼 吸 幅 皮 膚 黏 存 活 時(shí) 狀況 率 ( 次型 標(biāo) 度 膜顏色 間/min )亞硝酸 亞甲藍(lán) 較 注
6、射 * 暗紅色 *min鈉中毒(*min ) 前安靜性缺氧活躍度亞甲藍(lán)恢復(fù)正暗紅色*min( *min )常較注射前安靜,生理鹽且注射淡棕褐水部位有色*min( *min )血液流出。生理鹽劇烈抽水搐,后死/棕褐色*min( *min )亡3.2 討論氧在體內(nèi)代謝必須通過四個(gè)環(huán)節(jié),即肺從外界環(huán)境攝取,與紅細(xì)胞中血 紅蛋白結(jié)合,通過血液循環(huán)的運(yùn)輸,以及細(xì)胞線粒體的利用。任何一個(gè)環(huán)節(jié) 出現(xiàn)異常,都有可能導(dǎo)致機(jī)體氧的供應(yīng)減少或利用障礙而發(fā)生缺氧。3.2.1 乏氧性缺氧小鼠進(jìn)入瓶中,隨著活動(dòng),瓶中氧氣被消耗,小鼠吸入氣體氧分壓下降, 致使肺泡氧分壓降低,動(dòng)脈血和靜脈血中氧合血紅蛋白含量降低,脫氧血紅蛋
7、白數(shù)量增多,細(xì) 胞呼吸作用減弱,小鼠進(jìn)入平靜狀態(tài),加大呼吸頻率以試圖獲取更多氧氣, 減少活動(dòng)以優(yōu)先提供氧氣給重要生命器官。隨著氣體氧分壓進(jìn)一步減少,小 鼠進(jìn)入應(yīng)急狀態(tài),腎上腺素大量分泌,小鼠開始躁動(dòng)不安,試圖逃離。最后 隨著供氧不足,小鼠死亡。由于毛細(xì)管內(nèi)氧合血紅蛋白含量較低,脫氧血紅 蛋白數(shù)量較多,皮膚黏膜呈紫紺。3.2.2 一氧化碳中毒性缺氧 實(shí)驗(yàn)中小鼠呼吸頻率先變快后減慢至消失,皮膚黏膜由紅潤變?yōu)闄烟壹t, 是因?yàn)?CO中毒型缺氧屬于血液性缺氧, 是由于血紅蛋白數(shù)量減少或性質(zhì)改變, 導(dǎo)致血液攜帶氧的能力降低或血紅蛋白結(jié)合的氧不容易釋放所引起的缺氧。 CO是含碳物質(zhì)未完全燃燒而產(chǎn)生的一種窒息
8、性氣體,可與血紅蛋白結(jié)合而使 血紅蛋白失去攜氧能力,抑制紅細(xì)胞的糖酵解,增加與氧的親和力,致使小 鼠皮膚黏膜呈櫻桃紅色;因?yàn)?CO中毒型缺氧屬于等張性缺氧,呼吸系統(tǒng)的代 償不明顯,小鼠的呼吸應(yīng)該為逐漸減弱直至死亡,而實(shí)驗(yàn)中小鼠呼吸逐漸加 快之后逐漸減慢直至死亡, 推測原因是因?yàn)閺V口瓶與大氣相通, CO濃度較低, 小鼠產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致,當(dāng)使用酒精燈加熱后小鼠很快出現(xiàn)呼吸減慢而死亡;3.2.3 亞硝酸鈉中毒性缺氧 亞硝酸鈉中毒性缺氧為血液性缺氧。血紅蛋白中的二價(jià)鐵( Fe2+)可在亞 硝酸鹽等氧化劑作用下被氧化而形成高鐵血紅蛋白。二價(jià)鐵變成三價(jià)鐵因與 羥基牢固結(jié)合而失去攜氧能力,加之血紅蛋白分子的四個(gè)二價(jià)鐵中有一部分 氧化為三價(jià)鐵后還能使剩余的二價(jià)鐵與氧的親和力增高,即通過變構(gòu)效應(yīng)使 氧離曲線左移,血紅蛋白結(jié)合和釋放的氧量都減少,導(dǎo)致組織缺氧。高鐵血 紅蛋白呈棕褐色,小鼠
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