牡丹皮乙醇提取工藝研究論文_優(yōu)秀論文

1、 牡丹皮乙醇提取工藝研究論文【摘要】目的：探討牡丹皮提取工藝的最佳條件。方法：采用正交實(shí)驗(yàn)法, 以芍藥苷含量為指標(biāo), 用高效液相法測定。結(jié)果：提取次數(shù)和乙醇濃度對(duì)提取效果有非常顯著性和顯著性影響。結(jié)論：最佳工藝條件為5倍量75%的乙醇提取3次, 每次1h?！娟P(guān)鍵詞】牡丹皮；正交設(shè)計(jì)；提取工藝；芍藥苷；高效液相色譜法牡丹皮為毛茛科植物牡丹(PaeoniasuffruticosaAndr.)的干燥根皮, 具有清熱涼血, 活血化瘀的功效。牡丹根皮中含芍藥苷、氧化芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、丹皮酚、丹皮酚苷、丹皮酚原苷和丹皮酚新苷等成分。藥理實(shí)驗(yàn)表明, 芍藥苷體內(nèi)、體外均能抑制ADP或膠原誘導(dǎo)的血小板聚集1

2、, 應(yīng)屬牡丹皮抗缺血性中風(fēng)的主要有效成分之一。本文采用正交實(shí)驗(yàn)法, 以HPLC法測定的芍藥苷的提取量為指標(biāo), 對(duì)牡丹皮乙醇提取工藝進(jìn)行優(yōu)選, 為牡丹皮的開發(fā)應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1儀器和試藥高效液相色譜儀：日本島津10Avp高效液相色譜儀(LC10Atvp雙泵, SPDM10Avp二極管陣列檢測器, SIL10Advp自動(dòng)進(jìn)樣器, CTO10Avp柱溫箱);HypersilODS填料色譜柱(ID4.6250mm)(大連依利特化學(xué)儀器有限公司);分析天平：LIBRORL16ODTP分析天平(日本島津)、AE240分析天平(瑞士METTLER);芍藥苷對(duì)照品(07369710)：中國藥品生物制品檢定

3、所(為含量測定用)。牡丹皮藥材(購自四川省電江藥材基地, 經(jīng)鑒定為牡丹皮正品), 所用乙腈為色譜純, 其余試劑為分析純。2提取工藝研究2.1方法本文采用乙醇加熱回流法對(duì)牡丹皮進(jìn)行提取, 選擇回流次數(shù)、乙醇濃度、回流時(shí)間和乙醇用量等4個(gè)主要影響因素, 每個(gè)因素選取3個(gè)水平。選用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)法進(jìn)行實(shí)驗(yàn), 選定的因素水平表見表1。表1因素水平表（略）2.1.1色譜條件經(jīng)試驗(yàn), 確定流動(dòng)相為乙腈水(20：80), 流速1ml/min, 柱溫40, 測定波長為230nm進(jìn)樣量4l。2.1.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品2.40mg, 置25ml量瓶中, 用甲醇溶解并稀釋至刻度, 搖勻,

4、即得(每1ml中含芍藥苷96g)。2.2供試樣品溶液的制備精密稱取9份牡丹皮藥材粗粉50g, 按L9(34)表各試驗(yàn)號(hào)規(guī)定方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn), 提取液分別濃縮并轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶, 用適量乙醇稀釋至刻度, 搖勻, 靜置, 即得樣品溶液。精密吸取上述樣品溶液各1ml, 分別置25ml容量瓶中, 用乙醇稀釋至刻度, 搖勻, 濾過, 即得供試樣品溶液。2.3供試樣品溶液測定及結(jié)果精密吸取供試樣品溶液與對(duì)照品溶液各4l, 注入液相色譜儀, 測定, 計(jì)算出供試樣品溶液中芍藥苷的濃度, 結(jié)果見表2；方差分析見表3。表2正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果（略）由以上結(jié)果可知, 牡丹皮乙醇提取的最佳工藝條件確定為A3B2C1D

5、1, 即5倍量75%乙醇提取3次, 每次1h。表3方差分析（略）3小結(jié)3.1芍藥苷為牡丹皮中主要活性成分之一, 其含量測定方法較多, 如毛細(xì)管區(qū)帶電泳法2, 薄層掃描法3, 高效液相色譜法4-5等。筆者采用HPLC法進(jìn)行實(shí)驗(yàn), 并進(jìn)行了相應(yīng)的方法學(xué)試驗(yàn)。結(jié)果表明本法各方面符合中華人民共和國藥典(2005版)和中藥新藥研制的有關(guān)規(guī)定。在試驗(yàn)中, 根據(jù)牡丹皮含量測定結(jié)果, 制定了牡丹皮中芍藥苷的含量限度, 為控制實(shí)驗(yàn)用牡丹皮藥材的質(zhì)量提供了依據(jù)。本文所選含量測定方法操作簡單, 結(jié)果準(zhǔn)確, 重現(xiàn)性好。3.2關(guān)于芍藥苷含量測定方法中流動(dòng)相的選擇, 曾選用乙腈水(10：90、20：80、30：70)和甲

6、醇水(20：80、30：70、40：60)等依次進(jìn)行實(shí)驗(yàn), 結(jié)果顯示乙腈水(20：80)作流動(dòng)相時(shí), 牡丹皮供試品色譜中芍藥苷與雜質(zhì)峰可達(dá)基線分離, 峰形對(duì)稱, 且保留時(shí)間適宜, 故采用乙腈水(20：80)作為流動(dòng)相。3.3有文獻(xiàn)記載以水提醇沉法提取丹皮中芍藥苷6, 但考慮到芍藥苷醇溶性優(yōu)于水溶性, 在前期實(shí)驗(yàn)中經(jīng)比較, 水提醇沉提取物中芍藥苷得率低于乙醇提取物, 且其操作較繁, 故本文直接采用乙醇提取法, 正交實(shí)驗(yàn)得出最佳提取工藝條件為乙醇濃度75%, 乙醇用量為藥材量的5倍, 加熱回流時(shí)間為1h, 回流次數(shù)為3次。致謝；河南省駐馬店市藥品檢驗(yàn)所【參考文獻(xiàn)】1洪濤, 張家勛, 李嘉玨, 等.中國野生牡丹研究(一)J.中草藥,1994,(4):16.2沈保安.藥材牡丹皮的原植物芍藥屬一新種J.植物分類學(xué)報(bào), 1997, 35(4):360.3洪德元, 潘開玉, 謝中穩(wěn).銀屏牡丹花王牡丹的野生近親J.植物分類學(xué)報(bào), 1998, 36(6):515.4黃泰康.常用中藥成分與藥理手冊M.北京：中國醫(yī)藥科技出版社