7氯醋酸AS-D萘酚酯酶染色液(AS-DCE)0001

1、紅河州第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科質(zhì)量管理體系文件SOP文件第四篇：第7節(jié)氯醋酸AS-D萘酚酯酶染色液（AS-DCE）文件編號：JYK-LCS-SG-007 版本/修訂號：2012/01生效日期：2012/10/01文件頁數(shù)：21.檢驗(yàn)原理氯醋酸AS-D萘酚能被酯酶水解生成 AS-D萘酚，再與穩(wěn)定的重氮鹽偶聯(lián)，生成不溶性的紅 棕色沉淀定位于細(xì)胞漿中。陽性反應(yīng)通常僅出現(xiàn)于粒細(xì)胞中，故又稱特異性酯酶染色。2主要組成成分組成主要成分甲醛畐U品紅亞硝酸鈉磷酸鹽氯醋酸AS-D萘酚甲基綠2.1、固定劑（A液）2.2、偶氮溶液（B液）2.3、亞硝酸鈉溶液（C液）2.4、磷酸鹽緩沖溶液（D液）2.5、氯醋酸AS-D萘酚

2、溶液（E液）2.6、甲基綠溶液（F液）3. 儲存條件及有效期 有效期：一年（十二個(gè)月）。儲存條件：本試劑盒應(yīng)儲存于28 C低溫環(huán)境。4. 樣本要求 新鮮的骨髓細(xì)胞涂片及血液細(xì)胞涂片。5. 檢驗(yàn)方法42.8ml,至少可同時(shí)放置 8-10張涂片）： 重氮鹽溶液的準(zhǔn)備：B液0.4ml與C液0.4ml徹底混勻，靜置 2分鐘； 染缸（自備染液缸）內(nèi)加入 D液40ml;將重氮鹽溶液倒入染缸內(nèi)，混勻；再加E液2ml入染缸內(nèi)，輕輕混勻。5.1、工作液配制：5.1.1、浸染工作液配制（一份浸染工作液量為5.1.1.1、5.1.1.2、5.1.1.3、5.1.1.4、5.1.2. 滴染工作液配制（一份滴染工作液量

3、為2.14ml）: 使用器材：一次性塑料試管、微量移液器、一次性吸嘴、滴管。操作：取B液20ul、C液20ul混勻，靜置1分鐘；再加 D液2ml、E液100ul，混勻。 注：100Tests中的20mlD液（濃縮緩沖液）用蒸餾水稀釋成200ml緩沖液使用。5.2. 染色步驟：5.2.1、干燥涂片，滴加 A液布滿涂片固定 30秒，蒸餾水沖洗，待干或?yàn)V紙吸干。5.2.2、 滴加或浸入工作液室溫（如冬天室溫低，需用37C孵育）染色1520分鐘，蒸餾水 沖洗，待干。5.2.3、F液復(fù)染12分鐘，蒸餾水沖洗，干后鏡檢。6. 臨床意義臨床上主要用于急性白血病類型的鑒別急性粒細(xì)胞白血病和急性早幼粒細(xì)胞白血病

4、原粒細(xì)-（ + + + ） ； 急 原、幼淋巴細(xì)胞胞NAS DCE染色多呈（+ ）- （ + + ），白血病性早幼粒細(xì)胞呈（+ + ）性單核細(xì)胞白血病 原、幼單核細(xì)胞多呈陰性反應(yīng)；急性淋巴細(xì)胞白血病 呈陰性反應(yīng)。7. 注意事項(xiàng)編寫：楊松錢審核：黃萱批準(zhǔn)：白云輝頁碼：19第四篇：第7節(jié)氯醋酸AS-D萘酚酯酶染色液（AS-DCE）文件編號：JYK-LCS-SG-007 版本/修訂號：2012/01生效日期：2012/10/01文件頁數(shù)：27.1 使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫，用前搖勻。7.2 每次使用后，請迅速蓋好密封保存，以免揮發(fā)影響效果7.3 .應(yīng)由專業(yè)人使用和進(jìn)行判讀.7.4在涂片上兩液混勻時(shí)，動作要輕，以免將陽性顆粒吹散到陰性細(xì)胞上；7.5 制片不能太厚，涂片要新鮮.7.6基質(zhì)液配制過程中要振搖，以促使基質(zhì)溶解.冬天配制時(shí)應(yīng)適當(dāng)加溫（置于37C水箱操作）. 基質(zhì)液現(xiàn)配現(xiàn)用，不能保存,過濾后應(yīng)盡快試驗(yàn)，以免大量沉淀物析出，影響染色效果.8. 參考文獻(xiàn)8.1、 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程M.第3版.南京：東南大