DNA的粗提取和鑒定[講課適用]_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、DNA的粗提取和鑒定 1優(yōu)選課堂 目的要求目的要求 1 1、了解從細(xì)胞中提取、了解從細(xì)胞中提取DNADNA的基本的基本 原理原理 2 2、初步掌握、初步掌握DNADNA的粗提取和鑒定的粗提取和鑒定 的方法的方法 3 3、觀察提取出來(lái)的、觀察提取出來(lái)的DNADNA 2優(yōu)選課堂 實(shí)驗(yàn)思路實(shí)驗(yàn)思路 1、DNA從哪提???從哪提取? 2、怎樣將、怎樣將DNA與細(xì)胞中的其他物質(zhì)分與細(xì)胞中的其他物質(zhì)分 離?離? 3、怎樣鑒定我們提取的、怎樣鑒定我們提取的DNA? 3優(yōu)選課堂 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 1. DNA1. DNA在在NaClNaCl溶液中的溶解度,是隨著溶液中的溶解度,是隨著NaClNaCl的濃度的濃度

2、 的變化而改變的。當(dāng)?shù)淖兓淖兊?。?dāng)NaClNaCl的物質(zhì)的量濃度為的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol0.14 mol L L時(shí)時(shí),DNA,DNA的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶 解在解在NaClNaCl溶液中的溶液中的DNADNA析出。析出。 2.DNA2.DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可 以溶于酒精溶液。利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出以溶于酒精溶液。利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出 含雜質(zhì)較少的含雜質(zhì)較少的DNADNA。 3.DNA3.DNA遇二苯胺(沸水?。?huì)染成藍(lán)色,因此,二苯遇二苯胺(沸水?。?/p>

3、會(huì)染成藍(lán)色,因此,二苯 胺可以作為鑒定胺可以作為鑒定DNADNA的試劑的試劑 4優(yōu)選課堂 5優(yōu)選課堂 實(shí)驗(yàn)材料和用具 實(shí)驗(yàn)材料: 1、雞血細(xì)胞液(510ml); 2、體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液(實(shí)驗(yàn)前置于 冰箱內(nèi)冷卻24h); 3、蒸餾水; 4、質(zhì)量濃度為0g/ml的檸檬酸鈉溶液; (抗凝劑) 5、物質(zhì)的量濃度分別為2mol/L和0015mol/L 的NaCl溶液; 6、二苯胺試劑。 6優(yōu)選課堂 實(shí)驗(yàn)用具:實(shí)驗(yàn)用具:鐵架臺(tái);鐵環(huán);鑷子;三角鐵架臺(tái);鐵環(huán);鑷子;三角 架;酒精燈;石棉網(wǎng);載玻片;玻璃棒;架;酒精燈;石棉網(wǎng);載玻片;玻璃棒; 濾紙;滴管;量筒(濾紙;滴管;量筒(100ml100m

4、l,一個(gè));燒,一個(gè));燒 杯;(杯;(100ml100ml,一個(gè),一個(gè),50ml50ml、500ml500ml各二各二 個(gè));試管(個(gè));試管(20ml20ml,二個(gè));漏斗;試管,二個(gè));漏斗;試管 夾;紗布。夾;紗布。 7優(yōu)選課堂 本實(shí)驗(yàn)中,要往雞血中加入抗凝劑 8優(yōu)選課堂 (1)先將新鮮的雞血離心,獲得雞血細(xì)胞 (2)在雞血細(xì)胞中加入一定量的蒸餾水,同時(shí)用 玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可 9優(yōu)選課堂 10優(yōu)選課堂 11優(yōu)選課堂 12優(yōu)選課堂 13優(yōu)選課堂 14優(yōu)選課堂 15優(yōu)選課堂 16優(yōu)選課堂 17優(yōu)選課堂 18優(yōu)選課堂 19優(yōu)選課堂 20優(yōu)選課堂 21優(yōu)選課堂 22優(yōu)選課堂 23優(yōu)

5、選課堂 24優(yōu)選課堂 25優(yōu)選課堂 26優(yōu)選課堂 27優(yōu)選課堂 28優(yōu)選課堂 29優(yōu)選課堂 30優(yōu)選課堂 31優(yōu)選課堂 32優(yōu)選課堂 33優(yōu)選課堂 34優(yōu)選課堂 35優(yōu)選課堂 5分鐘內(nèi)做出自己的DNA 材料: 萃取出DNA的材料(人) 含有SDS的清潔劑(幾乎大部分都有) 食鹽 水 嫩精(木瓜酵素papain) 筷子 吸管 透明杯子 95%酒精 36優(yōu)選課堂 5分鐘內(nèi)做出自己的DNA 方法: 1. 95%酒精放在冰箱備用。 2. 緩衝液:120ml的水+1又1/4茶匙的鹽+一點(diǎn)點(diǎn)洗髮精 +一點(diǎn)點(diǎn)嫩精,輕輕攪拌後放在冰箱備用。 3. 準(zhǔn)備萃取DNA的材料:取10ml的水漱口1分鐘,吐在 杯子裡,加入20ml的緩衝液,以筷子輕輕攪拌2分 鐘。 4. 用吸管吸取95%的酒精從杯壁慢慢加入杯中。酒精 會(huì)浮在上層,接著就會(huì)出現(xiàn)絲狀物,那就是

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