EAG中文說明書

1、EAG使用手冊SYNTECH SYNTECH 2004Hilversum; The NetherlandsReproduction of text and/or drawings is permittedfor perso仃自I use. The use orf reproducLons in publicationsis on期 allowed if correct reference is made to SYNTECH目錄：引言4昆蟲觸角電位儀5歷史昆蟲觸角電位信號昆蟲觸角電位信號記錄儀的工作原理7輸入電路系統(tǒng)昆蟲觸角電位信號的品質(zhì)實行記錄9準(zhǔn)備微量移液管 調(diào)節(jié)頂端 填充 電極的制備 觸

2、角的裝備 觸角制備的另一種方法 電導(dǎo)膠刺激物的制備 14 控制源參考源昆蟲觸角電位儀的基本儀器 16記錄系統(tǒng)18昆蟲觸角電位信號外型的記錄昆蟲觸角電位的峰值劑量的測量規(guī)格化昆蟲觸角電位信號響應(yīng) 平均昆蟲觸角電位信號響應(yīng) 氣象色譜儀 -昆蟲觸角電位儀聯(lián)用系統(tǒng)昆蟲觸角電位信號連續(xù)的記錄 20氣流的分導(dǎo)20 文獻2021sen sillLimdendmesporesantennaaxonsantennaAmPrfirreceptor X cel Isreceptor6. ceilsolfactory sersillaAntennal Stru cture arid Ar rangement of O

3、l fa ctory Sens-illSttnului mi喰in球iAIR-k STIMULUSPrinciple cf Elect roan ten nogram (EAG)Recording引言昆蟲觸角電位儀是一種可以廣泛的用于實驗昆蟲學(xué)研究的生物測量儀器，它 能夠檢測到昆蟲觸角嗅覺反應(yīng)。這個方法主要以 Sch neider在1957的發(fā)現(xiàn)為基礎(chǔ)， 他記錄了在性激素的刺激下昆蟲觸角基部到頂部的微小電壓的起伏。雖然比昆蟲觸 角電位信號更精密的理論還沒有被發(fā)現(xiàn)，但是它是根據(jù)昆蟲觸角上的嗅覺神經(jīng)元細 胞電微分引起電壓波動做出的一般假定。昆蟲觸角電位信號的振幅會隨著刺激的不斷加強而變大直到達到最

4、大值。振幅進一步地由刺激的性質(zhì)、昆蟲的種類、性別以及其他一些不確定的因素決定。因為缺少堅實的理論依據(jù)，EAG應(yīng)該被認為是一種經(jīng)驗的方法，它提供了一 些實際的數(shù)值，但是無法提供有關(guān)昆蟲嗅覺感受器理論的基本原理方面的數(shù)據(jù)。然 而這些實際的數(shù)值還是值得考慮的。昆蟲觸角電位的測定方法有很多方面的用途， 諸如篩選生物活性化合物、純化提取物、識別功能段、遴選活性復(fù)合物、集中的野 外測量以及作為氣相色譜儀的檢測器。EAG的記錄在工藝上相對簡單，不需要復(fù)雜的使用儀器。然而EAG信號的質(zhì) 量則取決于一些不能很好地被識別的因素，大部分的昆蟲需要輕巧地即時的操作。這個介紹的目的是描述基本的方法，給出實際的線索和情報

5、，提供設(shè)備上的見 解，指導(dǎo)實驗科學(xué)家們具體使用 EAG記錄儀。因為實際的原因，有關(guān)電信號及其 加工處理就沒有必要介紹了，對很熟悉電子學(xué)的人來說，這些都相對簡單。雖然基本原理上是一樣的，但是 EAG記錄方法上還是有許多不同之處的。大 部分昆蟲，昆蟲在形態(tài)上的差異需要在記錄工藝上有所改變和創(chuàng)造。強烈推薦查閱處理一種昆蟲的原稿文獻， 雖然不是現(xiàn)代的處理記錄工藝，作為 一個基礎(chǔ)的生物測定的方法，EAG技術(shù)還是被Roelofs推薦的。symbol for Voltage SourcesymbolforResistor:a, IRVlWA * 亠 *.1 2 R R1 2 N電壓電源（V）和電阻（R）每個

6、細胞都可被認為是一個觸角上嗅細胞組成了的符號電源和電阻器的復(fù)合體電源和電阻的陣列J5?VA新鮮觸角的電阻能夠達到兆歐姆級別， 當(dāng) 觸角凋亡的時候還會變大在刺激下觸角產(chǎn)生的電壓范圍是幾微伏 到幾毫伏所有的觸角電阻（R1-RN ）和電壓源（V1-VN ）可以簡化為一個觸角的電阻（ RA）和電壓（VA）關(guān)于昆蟲觸角電位信號系統(tǒng)歷史在EAG作為一個實用的生物測量系統(tǒng)之前，法國和德國的一些實驗團隊（1953-1956）試圖用不同昆蟲的觸角、刺激物電極、放大器以及示波鏡來測量昆蟲 觸角對刺激的電位反應(yīng)。他們的設(shè)備相當(dāng)簡陋，他們還是檢測到了氣體刺激導(dǎo)致的 噪音的增大。隨后的幾年，昆蟲觸角的微小電位能夠被記錄

7、，這個現(xiàn)象被命名為昆 蟲觸角電位（EAG）、（Schneider, 1957； Schneider et，1967）,隨后類似的嗅覺電 位圖和視網(wǎng)膜電位圖被制成，這些都是用來記錄器官上的神經(jīng)元對刺激的反應(yīng)。昆蟲觸角電位信號昆蟲觸角電位信號是一種可以被適當(dāng)?shù)膬x器測量的電壓偏差，它發(fā)生于受到適宜刺激昆蟲觸角的基部到頂部之間。每個嗅覺感受器細胞都可以被認為是一個電壓 源和電阻的集合體。整個觸角包含了無數(shù)的嗅覺感受器細胞，組成了一個電壓與電 阻復(fù)合體的串聯(lián)陣列。觸角的電壓是相當(dāng)小的，電阻則是比較高的，有幾兆歐姆。 當(dāng)實驗時觸角變干，這個電阻一般還會增大，觸角的頂部相對于基部會變成負的。 電壓變動的幅度

8、的范圍為微伏（10-6v）到毫伏（10-3v）。對于一個給定的種及性別 的昆蟲，觸角的反應(yīng)取決于以下一些因素：1）刺激物的屬性；2）刺激物的強度（濃縮程度）；3）觸角所處的環(huán)境；4）制備物的存活時間；5）上一次刺激的數(shù)量和強度；6）放大器輸入信號的質(zhì)量此外，溫度、濕度也會對反應(yīng)有影響；甚至昆蟲的生理性狀也會對反應(yīng)有一定 的影響刖：削：觸角觸角的電學(xué)示意圖口昔大放大器的電子示意圖AMPLIFIERAFITENMA1VC LT AGE source (% generates CURRENT!IJ in inputcir&uit 祕wi 帕 thr&ugh inlivrinjl ritor (R |

9、and ampi ifier mister |R-input rt&i&taneft ar amplifierOhms Law: V -1 x RVoltage accross Anten n Time 図差的信號和噪音比率好的信號與噪音的比率基線向上的漂流ghzrQed objectsElectromagntlic noiu （呦 EQ HzeaG言號的質(zhì)量EAG言號的絕對值范圍是幾微安到幾毫安。然而更重要的是 EAG言號與不可避 免的背景噪音間的比率：我們叫它信號噪音比率（S/N比率）。如果噪音比EAG言號 還大，測量就沒有意義了 ，就算EAG言號能夠達到毫安級。也就是說，如果噪音只 有微

10、伏不到，就算EAG言號只有幾微伏也是很好測量的。因此系統(tǒng)的噪音必須保持在最低水平，不能抑制到真實的EAG言號。這里是EAG 系統(tǒng)的一些噪音的來源：1）發(fā)生在觸角和放大器輸入電路中的阻抗中的噪音2）發(fā)生在觸角中的生物噪音3）發(fā)生在外部，影響電路的噪音4）信號傳輸中的延時減速：漂移第一種噪音典型的來源是觸角和放大器的質(zhì)量；現(xiàn)代的放大器不會對EAG記錄產(chǎn)生任何噪音，可以被忽略的。而觸角電阻產(chǎn)生的噪音只有通過使用強壯昆蟲的新 鮮觸角來抑制。生物學(xué)噪音可能由觸角里面或者靠近觸角的肌肉活動引起，但是它的結(jié)構(gòu)是相 當(dāng)復(fù)雜的；這種噪音可以通過適當(dāng)操作以及選擇最合適的處理特別觸角的方法來減 到最小。外環(huán)境造成的

11、噪音能夠通過對記錄系統(tǒng)的適當(dāng)設(shè)計來控制。最強的外部噪音是由試驗裝置旁邊的電力系統(tǒng)（110V60Hz 220V50HZ發(fā)出的電磁輻射引起的。EAG系統(tǒng)的輸入電路對這種輻射是易受影響的，這是因為放大器輸入電路和觸角很高的 輸入電阻。由兩種方法可以減少這個噪音：1）將記錄裝置放進電磁屏蔽中，叫作法拉第籠子。2） 用一個電磁濾波器，它能夠阻擋噪音，但能通過EAG言號。最后一種噪音，漂變，相當(dāng)難處理的現(xiàn)象。由于信號的漂變是逐漸偏移記錄或 顯示器的，所以必須不停的進行重排。漂變在長時間記錄中是特別明顯的問題，比 如用于氣相色譜儀昆蟲觸角電位儀連用系統(tǒng)（GC-EAG中。幸運的是，通過適當(dāng) 的電子濾波可以相對

12、簡單的消除漂變?！白詣踊€控制”在大多數(shù)SYNTECEAG放大 器和記錄系統(tǒng)中都會附贈。其他引起外源噪音的原因有觸角周圍的氣流（已經(jīng)被證實為觸角上的機械性刺 激感受器）、混合纖維上的靜電、操作上的運動、光波、濕度的突然變化（空調(diào)的使 用）。小心操作以避免所有這些干擾。記錄操作準(zhǔn)備微量移液管因為EAG記錄儀接觸觸角的基部和頂部通常是由玻璃微電極制成。 使用金屬電 極組合鹽溶液是不被推薦的，因為這種電極中的電化學(xué)反應(yīng)會引起噪音。合適的毛 細玻璃管（1-2.5mm外徑）用微電極的拉手斷成一個好外型的尖端，或者在火焰上 手工拉制。調(diào)節(jié)尖端機器拉制的玻璃電極的尖端用于 EAG是非常合適的。因此可以在鉗子

13、的幫助下 小心的折斷頂端，留出足夠?qū)挼膬?nèi)徑使其能夠插入切下的觸角。調(diào)節(jié)尖端的時候， 可以在顯微操作儀下觀察觸角和移液管的尖端。折斷微量移液管的尖端使其直徑略大于觸角的直徑不要把它放進鑷子中間用一小滴鹽溶液把尖端弄濕裝填微量移液管里面填充了一些導(dǎo)電的液體。最常用的是 0.1N的KCL然而比較 復(fù)雜的林格氏溶液經(jīng)常用于昆蟲處理中。為了防止水分蒸發(fā)導(dǎo)致移液管尖端KCL結(jié)晶，以致產(chǎn)生壞的EAG言號，可以在KCL溶液中加入少量的聚乙烯吡咯烷酮 （PVP; 搖勻靜置直到溶液澄清。PVP是非常大的分子（分子量360, 000）能夠在溶液表面 形成薄膜以防止蒸發(fā)。EAG用的移液管有一個相對寬的尖端，他們浸入鹽

14、溶液中會因為毛細現(xiàn)象自然 的充滿尖端。只能填充到離尖端10-15mm 一般只在準(zhǔn)備觸角之前灌注毛細電極管?！?口開噌常 Heei訊 小jni ij piierSECTION eF ELECTRODE HLOERinisrf HrifhQosirp*ob?.：3 = =n= E.tC-COz cic-r - 5 r-ijis：*/8# pie*r friTQ 許nU* 屁丿口卩De WOT connecr ecvMci hcafir to曠2冃劌電極的制備SYNTEC不銹鋼的電極固定器、電極線以及玻璃電極管的使用方法在下面的插 圖中展示。安裝在探頭上的不同的電極不是接地的。它們是接在位于探頭中的

15、第一 個放大器的輸出電路上，這也形成了一個防護裝置。就是這個防虛假動作電路組成 了一個有效的針對雜波干擾的屏蔽并且排除了電路中滲漏電流造成的影響。 實踐證明在大多數(shù)情況下， AgCl 外罩是不需要的，因為探頭的輸入窗口允許 400mV勺電壓偏移。觸角的安裝下面描述一下將觸角安裝在微電極勺頂端之間。 最常用勺方法就是把絲狀觸角 勺頂端插入微電極勺頂端，步驟如下 :1) 用小剪刀或者解剖刀將觸角從昆蟲頭上切下2) 將觸角放到實體顯微鏡勺視野下3) 在顯微鏡下將微電極勺頂端靠近觸角4) 用小鑷子將微電極勺頂端折斷5) 比較微電極頂端勺開口和觸角基部處勺直徑，使得微電極勺內(nèi)徑剛好比觸 角基部勺外徑大一

16、點6) 小心勺滑動觸角基部使其進入微電極頂端，注意鑷子不要夾到觸角，這將 使觸角受到損傷7) 將觸角頂端切掉一小段8) 在視野內(nèi)滴入一小滴鹽溶液(含有 PVP)9) 用解剖針將鹽溶液弄濕觸角頂端 弄濕觸角頂端是為了使其更好勺接觸記錄電極10) 將帶有觸角勺玻璃電極插入電極固定器上11) 觸角頂端準(zhǔn)備微電極，這邊電極勺頂部應(yīng)該只能讓觸角頂端進入。微電極 頂端帶一個角度折斷會比較容易使觸角進入。12) 移動兩個電極，使觸角頂端和電極頂端靠近一點13) 把觸角頂端弄進微電極頂端，可以用解剖針或頭發(fā)絲幫助14) 檢查插入觸角時微電極中是否有氣泡形成。 一個小小勺氣泡都會阻斷電路， 造成EAG言號記錄的

17、異常。15) 觀察記錄儀，如果觸角和電極勺連接比較好，就會看到一條相對穩(wěn)定勺基 線。根據(jù)觸角形態(tài)上的不同， 步驟需要進行改變以適應(yīng)蠅類和甲蟲類的非常短的球 棒狀觸角。這種觸角很難從頭上不被損傷的切下。在這種情況下，觸角被留在 切下的頭上， 然后頭部安在微電極的頂端。 然后球棒狀的觸角正對記錄電極的 頂端。不用切去觸角頂端，觸角末端和微電極的連接就能記錄EAG言號。在這種情況下，微電極頂端的大小能夠和觸角末端直徑一樣大。更換新的觸角，移液管需要清潔或更換。如果在鹽溶液中加入了 PVP最好 每次觸角檢測中都更換移液管。Air bubble: blocking electrFcal c&nlact!

18、Aif gsp:blc ck in g elecir lea.) contact!ExciBed antemna IbeTAwn micropipettesEks rnpHe off mounting a club-shaped antenn aAnlenna 匕dirts拭Ed us ing droplets of electrically conductive gelExample 6f 曲應(yīng)pop* lionM ultip I* Ante FifliM mgunud two metal electrodes using cnndnictivegeiTip sire adju5Eed to

19、 let h&ad passF but bl&k in 書也t B&dy_ SI355 WflOl catton plugDispowiNt platt ic pipettt tip另一種處理觸角的方法整個昆蟲制備離體觸角的存活時間是很有限的，受很多因素決定，一般從幾分鐘到一至兩個小時。如果只有少量的昆蟲，或者需要較長時間的記錄（像是用于GC-EAG,把觸角留在昆蟲上會比較有利。完整昆蟲的制備沒有標(biāo)準(zhǔn)的方法。在記錄微電極插入觸 角的基部和頂部之前需要將昆蟲固定。昆蟲可以用粘膠或者細銅絲固定在小平臺上。 另一個方法就是把昆蟲塞進一個吸管的尖端，吸管尖端的直徑要剛好使昆蟲的頭露出，身體被卡在吸管里

20、面。 全蟲的制備中，一個微電極連接觸角被切開的頂端，另一個插入觸角的基部。一定要將基電極插入觸角的基部，以避免活體組織的電干擾，比如觸角的肌肉。電導(dǎo)膠 還一個非常好的方法就是使用一種電導(dǎo)膠固定離體的觸角。這種膠在微量移液 管中可以代替鹽（KCI）溶液，或者用于金屬電極上粘住觸角的末端。 不像水性鹽溶 液，導(dǎo)電膠能夠粘住不易粘水的昆蟲觸角，它能很容易的和觸角形成一個連接。一 小滴膠就能把觸角安在金屬（銀或者不銹鋼）電極上。實踐證明合適的導(dǎo)電膠（Spectra 360 ，Parker，Oran ge， N.J .USA）不會對 EAG反 應(yīng)產(chǎn)生信號干擾。而且 對處理大量的樣品有很大的優(yōu)勢。 好的膠

21、體不會很快變干， 能夠持續(xù)一個小時以上。刺激物的制備刺激源 標(biāo)準(zhǔn)的巴斯德移液管中插入一小片濾紙，濾紙上滴有待測的化合物，做成一個 實用的刺激源，步驟如下：1）將一片濾紙（1X 5cm）折成之字形，部分插入巴斯德移液管中2）用移液管吸取一定數(shù)量（ 10-100 微升）的溶劑（正乙烷）其中含有一些濃 縮的待測化合物于濾紙上3）溶劑能夠在幾分鐘內(nèi)蒸發(fā)， 這一步不需要不揮發(fā)的溶劑， 但是這個溶劑又能 很好的被濾紙吸收4）濾紙完全地推進巴斯德移液管中5）在巴斯德移液管壁貼上刺激內(nèi)含物和數(shù)量的標(biāo)記刺激源一般會制備成含刺激物的十分之一。數(shù)量一般是皮克（1pg =10-12g）,毫微克（1ng= 10-9g）

22、或者微克（1 u g= 10-6g）。為了濾紙上達到這個 精確量，濃縮液會在一定體積的溶劑中制備。舉個例子，一個刺激源含有 1ug 測試化合物，就是100ug的溶劑中要含有1ug的測試化合物，從10ug/ml的原 液中吸取100ug體積的溶劑。濃縮的原液可以儲放在冰箱中。性激素通常會溶解在正乙烷中， 植物揮發(fā)物一般溶解在石蠟油中。 必須小 心操作不要污染巴斯德移液管壁和溶劑及測試化合物的出口。對照源 要使用三個對照移液管：1）干凈的巴斯德移液管 目的：檢測移液管是否污染2）只有濾紙的移液管 目的：檢測濾紙是否污染3）只有溶劑的濾紙的移液管 目的：檢測溶劑是否污染參考源在EAG信號的記錄過程中，

23、觸角的敏感性會逐漸下降。為了監(jiān)控這個下降趨勢 需要在一個記錄時間內(nèi)準(zhǔn)備一個參考刺激。參考化合物可以是任何能夠引起EAG信號的化合物。參考反應(yīng)也可以用于規(guī)范一倍或多倍記錄時間的數(shù)據(jù)Pi*ce of folded filter pulperinsert fitter pperpartly in pnipeheApply stjuiiulu &ompound dis&olved in solutionAllow th olvnt to evap-o ratePusti filter paperinside Pasteuir pipetieAWTENMASiimuhis source preparat

24、ionusing Pa&ceur pipettesPROBEBasicStimulation and Recording arrangement基本的EAG使用儀器一個EAG系統(tǒng)由以下基本元件組成：1）觸角的制備和可控的記錄電極2）放大器和信號電子學(xué)處理3）信號顯示和記錄系統(tǒng)4）刺激物應(yīng)用系統(tǒng)ad 1）：在一個常規(guī)的EAG系統(tǒng)中，觸角被放置在兩個玻璃電極間。最近使用電導(dǎo) 膠的電極被發(fā)展起來了，不銹鋼電極取代玻璃電極直接和第一放大器連接起來了。ad 2）：存在許多種EAG放大器。它們都能提供很高的輸入電阻，10-1000倍。大 多數(shù)放大器有一個基線調(diào)節(jié)器（減偏調(diào)節(jié)）；Syntech EAG放大器

25、和計算機界面都建 立了濾波器自動或手控基線控制消除噪音。ad 3）:古典的EAG記錄系統(tǒng)利用示波鏡顯示信號，記錄儀記錄EAG反應(yīng)。振幅可從記錄紙帶上測量出來。現(xiàn)代的 EAG系統(tǒng)運用電腦顯示、記錄和分析函數(shù)。ad 4）：在記錄EAG信號的時候，觸角要被恒定的濾過的潮濕的氣流包圍。氣流通 常被調(diào)整在25-50cm/s。待測刺激物就經(jīng)過一個小孔進入指向觸角的管子中被混合 于恒定氣流中。測試氣流的噴出時間通常微0.3s到0.5s，使觸角受到足夠刺激達到最大電壓差；更長的時間也不會導(dǎo)致更大的結(jié)果，但是可能會使觸角在記錄時段 內(nèi)麻痹或靈敏度下降。只有在測量一個刺激下EAG信號反應(yīng)的形狀的情況下，刺激可以持

26、續(xù)1-2s。GAS CHRGMATCGFIAPHCoupled chromatography - electroantennograph jc detect ion GC-EADIDA-C Signal Gcnnection BmIIIIIIIO mCo nnHt io Faraday ag*3 microMope, bap plJtP etc.Central groundStart pedal switchdifferent electrode hoMerind ftcffftt *|pc(rod helatrH j midifierMixing tub*PROBE cableSTIMULU

27、SOUTfat rar panel of C S-05)toSTIMULUSinpul r?cf ptacl?on IDAC signal bc.x記錄系統(tǒng)記錄EAG的外形單獨的測試樣品，化合物或者提取物活性，會在一個測試時間內(nèi)進行比較，以 致所有的化合物運用于一個或更多觸角測試。在測量時間的起始段，對照刺激源曾 列好（潔凈空氣，只有濾紙的巴斯德移液管，以及只滴了溶劑的移液管）。在規(guī)則的 時間間隔內(nèi)，或者交互的測試化合物，參考刺激都會用到。為使觸角恢復(fù)并且防止 感覺細胞的適應(yīng)，刺激間隔至少要有 30s。強的刺激要求更長的間隔。EAG的峰值個體EAG反應(yīng)的最大（負的）振幅可以在圖表中測量和展示出

28、來。 從參考刺激 引起的振幅下降趨勢可以清楚的得出觸角靈敏度如何在時間上降低的。反應(yīng)劑量的測量為了建立某種化合物的活性范圍，應(yīng)用一個遞增濃度的刺激，表現(xiàn)在刺激源的 量上。一般情況，濃度十倍進制。從劑量反應(yīng)曲線上，可以得到敏感閾和觸角對一 個化合物的飽和水平的信息。規(guī)格化EAG反應(yīng)為了補償記錄過程中觸角敏感性的下降，EAG反應(yīng)的最大值會和參考的反應(yīng)作 相關(guān)表達。在這個規(guī)格化的過程中，對參考物的反應(yīng)會 100除述。對參考中值的下 降趨勢用線性內(nèi)插法修正兩個相鄰值。 Syntech的EAG軟件會自動地計算規(guī)格化后 的值。FID TriceExa m 口 I巳 ofGC-EAD recordingIO

29、AC：Sifnll CennHectiiBa3耐P J-TEST STIMULUSANALOG(1 V rinfcisignjI 口LrtSTARTctmnnan-dligna.1 口 utEfFLUIMTMIXING W8EEMBLVAINTBNNAL PREP4R: 4TIONCOMPUTER, with INTERFACE CAROSTIMIULUS CONTROLLIPRINTERSTART PEDALCTo spplv test puff!拉平EAG反應(yīng)EAG記錄時間可以重復(fù)幾次使結(jié)果平均。如果觸角存活的時間允許，可以在一個記錄時間段內(nèi)，對另一種刺激進行呈示。在任何情況下，測量的EA

30、G反應(yīng)都需要用一個參考進行修正規(guī)范。原因兩點：1）在測試時間內(nèi)，觸角的敏感性會逐漸下 降；2）在觸角個體之間其敏感性還是有較大不同的。氣相色譜儀一觸角電位儀聯(lián)用系統(tǒng)（GC-EAG現(xiàn)代高分解能的氣相色譜儀是一個能夠?qū)⑤^小量的混合化合物分離的儀器。但是，監(jiān)控洗提部分的物理化學(xué)探頭對有生物活性的化合物是沒有選擇性的。然而,昆蟲觸角就是一個高度選擇性的、高度敏感的儀器，這個探測系統(tǒng)用來進行生物測 定。結(jié)合了 GC的分離能力，EAG技術(shù)充分利用了兩個儀器的分析能力。為了使昆蟲觸角成為氣相色譜儀的探測器需要把層析柱流出物接到觸角上。操作上，我們把層 析柱流出物分成兩支：一支進入標(biāo)準(zhǔn)探頭（一般為 FID）,

31、另一支經(jīng)過一個合適的運 輸管噴到觸角上。為了防止?jié)饪s物在運輸途徑中冷凝，運輸管需要能夠加熱到 GC 的最高溫度。離開加熱的運輸管后, 流出物將被混合到一股恒定的濾過的潮濕的空氣流中, 然后噴到標(biāo)準(zhǔn)EAG裝置的觸角上。在GC運行的時候，觸角暴露在抽提的化合物中；然而，只有能夠刺激觸角上 感受器細胞的化合物才能引起反應(yīng)。觸角上的信號和 FID 的信號會被同時監(jiān)控和記 錄，兩個信號是同步的。連續(xù)EAG記錄在連續(xù)的EADS錄中，觸角暴露于色譜圖的峰值提取物中， 然后從觸角發(fā)出的 信號被連續(xù)的記錄。沒有自動基線控制，觸角發(fā)出的信號就會在一段時間后跑出顯 示屏，所以自動基線控制在GC-EAD系統(tǒng)中是非常有用的。然而基線修正不能太強烈 了：應(yīng)該有足夠的時間跟隨洗提峰。自動基線控制的效果可以通過控制系統(tǒng)的時間 常數(shù)來調(diào)整。時間常數(shù)的值越大，一個特定的信號偏量回歸為零的時間就越長。時 間常數(shù)就是將原始偏差減去 63%偏差所需的時間。使用很短的噴氣引起 EAG信號， 最好使用1-3秒的時間常數(shù)。然而，記錄氣相色譜儀的流出物的 EAG信號，時間常 數(shù)通常設(shè)定在 5-10 秒（