2018年自考醫(yī)學類工程的心理學復習筆記第2章

1、AC900+三分群血液分析儀標準操作規(guī)程一、測定原理AC900+三分群血液分析儀采用電阻抗法，檢測原理是：根據(jù)血細胞相對非導電的性質(zhì)， 懸浮有電解質(zhì)溶液中的血細胞顆粒，在通過計數(shù)小孔時可引起電阻的變化為基礎(chǔ)，對血細胞進行計數(shù)和體積測定。1、檢測原理：將等滲電解質(zhì)溶液(被稱為稀釋液，diluents )稀釋的細胞懸液置入一個不導電的容器中，將小孔管(也稱傳感器transducer)插到細胞懸液中。小孔管是電阻抗法 細胞計數(shù)的一個重要的組成部分，其內(nèi)側(cè)充滿了稀釋液， 并有一個內(nèi)電極，外側(cè)細胞懸液中有一個外電極。檢測期間，當電源接通后，位于小孔兩側(cè)的電極產(chǎn)生穩(wěn)定的電流；稀釋液通過小孔的管壁上固有的小

2、孔 (直徑一般100卩m.厚度為75卩m左右)向小孔內(nèi)部流動。此時, 小孔周圍充滿了具有導電性的液體，其電子脈沖是穩(wěn)定的。 如果供給電流I和阻抗R是穩(wěn)定的，根據(jù)歐姆定律通過小孔的電壓V是不變的(這時 V=IR)。當有細胞通過小孔時，由于細胞的導電性質(zhì)比稀釋液要低，在電路中小孔感應區(qū)內(nèi)的電阻的增加，于是瞬間引起了電壓變化而出現(xiàn)一個脈沖信號。電壓增加的變化的程度取決于非傳導的細胞占據(jù)小孔感應區(qū)的體 積，即細胞體積越大，弓I起的脈沖越高，產(chǎn)生的脈沖振幅越高，測定脈沖的大小即可測出細胞體積大小，記錄脈沖的數(shù)量就可測定細胞的數(shù)量。脈沖信號經(jīng)過下列步驟，得出細胞計 數(shù)結(jié)果。(1) 信號發(fā)生器：通過小孔的各

3、種血細胞都能產(chǎn)生電阻信號，信號電平的高低與細胞 的大小成正比。(2) 放大：由于血細胞通過微孔時產(chǎn)生的脈沖訊號非常微弱，不能直接觸發(fā)計數(shù)電路， 因此必須通過電子放大器，將微伏訊號放大為伏級脈沖訊號。(3) 閾值調(diào)節(jié)：在計數(shù)不同細胞時，應調(diào)節(jié)閾值電平，以給出合適的閾值度，使計數(shù) 結(jié)果盡量符合實際水平。(4) 甄別：通過微孔時的各種微粒(血細胞、細胞碎片、雜質(zhì)等)均可產(chǎn)生相應脈沖 訊號，訊號電平(脈沖幅度)與微粒大小成正比。因除血細胞外，血中細胞外，血中細胞碎片、稀釋液中雜質(zhì)微粒均可產(chǎn)生假訊號，使計數(shù)結(jié)果偏高。所謂甄別就是利用甄別器根據(jù)閾值調(diào)節(jié)器提供的參考電平，將低于參考電平的假訊號去掉，以提高細

4、胞計數(shù)的準確性。(5) 整形器：經(jīng)過放大和甄別后的細胞脈沖訊號波形尚不一致必須經(jīng)過整形器作用， 修整為形伏一致標準的平頂波后，才能觸發(fā)電路。(6) 計數(shù)：血細胞的脈沖信號，經(jīng)過放大、甄別、整形后，送入計數(shù)系統(tǒng)；儀器對大 小不同的脈沖進行選擇，區(qū)分出不同類型的細胞并分別進行計數(shù)。2、白細胞計數(shù)和分類計數(shù)原理：根據(jù)電阻抗的原理，不同體積的白細胞通過小孔時產(chǎn) 生的脈沖大小有明顯的差異，依據(jù)這些脈沖的大小，可對白細胞進行分群。經(jīng)過溶血劑處理后的白細胞可以根據(jù)體積大小初步確認其相應的細胞群：第一群是小細胞區(qū)（LYMF）,指細胞體積在35-90fl之間的小細胞區(qū)， 主要分布的是淋巴細胞；第二群是單個核細胞

5、區(qū)，也被稱為中間細胞（ MID），指細胞體積在90-160fl之間的中間細胞區(qū)，主要 包括單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞，核左移的各階段幼稚細胞或白血病時白血細 胞。第三群是大細胞區(qū)，主要是中性粒細胞（ GRAN，指細胞體積在160fl以上的大細胞 區(qū)，主要分布的是中性粒細胞。儀器根據(jù)各亞群占總體的比例計算出各亞群的百分率，如果與該標本的白細胞總數(shù)相乘，即得到各類細胞的絕對值?？梢钥闯觯娮璺ㄖ皇歉鶕?jù)細胞體積的大小，將白細胞分成幾個群體。3、紅細胞數(shù)和血細胞比容測定：絕大多數(shù)血液分析儀使用電阻抗法進行紅細胞計數(shù)和紅細胞比積測定，其原理同白細胞一樣。 紅細胞通過小孔時， 形成的相應的脈沖的

6、多少即紅 細胞的數(shù)目，脈沖的高度代表單個脈沖細胞的體積。脈沖高度疊加經(jīng)換算即可得到紅細胞的比容。稀釋的血液進入紅細胞檢測通道時，其中含有白細胞，因此，紅細胞檢測的各項參數(shù)均含有白細胞因素，但正常血液有形成分中白細胞比例很少約為500： 1-700 : 1，故其影響可忽略不計，但在病理情況下，如白血病，白細胞數(shù)明顯增加而又伴嚴重貧血時，即可使所得各項參數(shù)產(chǎn)生明顯誤差。血細胞比容，通常用紅細胞平均體積（MCV與紅細胞相乘得出紅細胞比積HCT=MC7RBC4、 血紅蛋白測定：當稀釋的血液加入溶血劑后，紅細胞溶解并釋放血紅蛋白，Hb與溶血劑中的某些成分結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白測試系統(tǒng)， 在

7、特定波長（一般在530-550nm）下比色；吸光度的變化與液體中 Hb含量成比例，儀器便可顯示 HGB濃度。不同 系列血液分析儀配套溶血劑配方不同，形成的血紅蛋白衍生物亦不同，吸光度各異但最大吸收峰均接近540nm .這是因為ICSH推薦的氰化高鐵法，HICN最大吸收峰在540nm。校正儀 器必須以HICN值為標準。大多數(shù)系列血液分析儀溶血劑內(nèi)均含有氰化鉀，與血紅蛋白作用 后形成氰化血紅蛋白 （注意不是氰化高鐵血紅蛋白），其特點是顯色穩(wěn)定，最大吸收峰接近 540nm,但吸收光譜與 HICN有明顯的不同。此點在儀器校正時應十分注意。5、 紅細胞其他參數(shù)的檢測：紅細胞平均值，如紅細胞平均體積（ M

8、CV、平均紅細胞血紅蛋白量（MCH、平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC、均是根據(jù)儀器檢測導出（ MCV,或由檢測的紅細胞數(shù)和血紅蛋白含量的檢測數(shù)據(jù)，經(jīng)計算得到，MCH=HGB RBC MCHC=HGB十HCT HCT=MCV RBC紅細胞體積分布寬度（RDW則是由血液分析儀測量細胞體積后獲得的，是反映外周血紅細胞體積異質(zhì)性的參數(shù)，即反映紅細胞大小不等的客觀指標。當紅細胞通進小孔的一瞬間，計數(shù)電路得到一個相應的大小的脈沖，脈沖的高度是由細胞體積大小決定的，不同大小的脈沖的信號分別貯存在儀器內(nèi)裝計算機的不同通道內(nèi)，計算出相應的體積及細胞數(shù)后，統(tǒng)計處理而得RDW值。由于RDW來自十幾秒內(nèi)近萬個紅細胞的

9、檢測數(shù)據(jù)，不但可以克服測量紅細胞直徑時人為制片因素和主觀因素等影響。6、電阻抗法血小板檢測原理血小板（platelet, PLT ）隨紅細胞一起在一個系統(tǒng)中進行檢測，當各種細胞引起電阻變化，產(chǎn)生的脈沖經(jīng)數(shù)字化后，根據(jù)不同的閾值，計算機分別給出血小板和紅細胞數(shù)目。血小板分別儲存于64個通道，直方圖范圍在 2-28fl，。血小板平均體積（mean platelet volume, MPV ）就是PLT體積分布的直方圖的產(chǎn)物。二、鍵盤介紹ENTER鍵用于：進入選擇的菜單、進入菜單選項 :箭頭用于：在菜單中前后移動或進入內(nèi)層菜單；改變光標在數(shù)字中的位置+ （加）-（減）鍵用于：打開關(guān)閉一個功能；增加或

10、減少數(shù)字值。Prime cycle 鍵用于：在Imeasurement”測量菜單下，用試劑沖冼或灌注血球計數(shù)儀。 功能同“ 8.1 ”MEN鍵：用于回到前一個菜單。Ready燈：綠色 =準備狀態(tài)，準備開始下一步分析；紅色=吸入樣本；閃爍紅色=吸液完成，等待下一步操作；燈不亮=介于吸入和準備狀態(tài)之間的。三、樣本收集1、 靜脈血：用注射器將血液收集在有抗凝劑K2EDTA（ 0.07mol/ml血）的度管；停留15分鐘進行分析標本采集后應8小時內(nèi)進行分析。注意：8小時內(nèi)進行分析！2、 毛細血管血：使用微量吸管收集手指20卩l(xiāng)，并立即與4ml的等滲稀釋液一起轉(zhuǎn)移到樣品杯，用上清液反復清冼4-5次?；靹?/p>

11、加蓋。60分鐘內(nèi)進行分析。四、稀釋液的分配菜單“ Dispense ”用于分配4ml的稀釋劑。1、 在主菜單用鍵進入“ 3Dispense ”并按Enter鍵。2、 把一個新的樣本杯置于分配管下，按鍵分配4ml的稀釋劑到計數(shù)杯中。3、按 menu鍵退出。注意：每次（指間隔4小時）第一個分配的稀釋液應棄不用（因不足4ml），可用其作空白！五、測試前儀器的調(diào)試1、 測試前應首先進8.6si ngle cou nt test（單一計數(shù)測試）這一菜單用于檢查儀器計數(shù)的時間，和稀釋液的空白值，計數(shù)時間指RBC和PLT計數(shù)。（1 ）從主菜單進入“ 8 maintenance ”保養(yǎng)菜單并按 ENTERS。

12、（2） 進入8.6Single count test”單一計數(shù)測試。（3）按ENTER鍵盤于始單一計數(shù)。真空泵將稀釋液抽入測量管開始RBC/PLT計數(shù)，計數(shù)時間顯示在屏幕上，范圍應在11.0-15.0sec 之間。（4）按menu鍵退出。注意：如上述操作結(jié)束，單一計數(shù)時間有在上述范圍，則證明儀器計數(shù)孔阻塞，應在“ 8. 5capillary clea ning清冼菜單中執(zhí)行清冼程序反復數(shù)次。2、 每次測試前必須做空白測定，如出現(xiàn)“LO HI時，則說明LED電壓不在4.1-4.5V（勻值在4.2V為最佳）范圍內(nèi)，則應打開機器擋板調(diào)節(jié)電阻（R50）直LED電壓2V即可；如出現(xiàn)TB（ Tube bu

13、bble ）錯誤標志，則說明測量管有氣泡應回到“8 maintenance ”保養(yǎng)菜單或“ 8.6single count test ”單一計數(shù)測試菜單進行單一計數(shù)， 反復執(zhí)行，直至錯誤代 碼消失。完成上述操作再執(zhí)行空白計數(shù)，無錯誤代碼提示即可進行測量，否則結(jié)果不準確。六、樣本的測試1、預稀釋血樣的計數(shù)（1） 從主菜單進入“ 1measurement”并按 Enter鍵。（2） 輕輕混勻樣本，以混合預稀釋樣標本，并用鍵經(jīng)吸液管吸入預稀釋液，當Read y亮紅燈時完成吸液，小心地擦于凈吸液管的外部殘留液。（3）把樣品杯置于 WBC/HG位分析開始。（4）按Enter鍵，用+-鍵輸入ID號，后再按

14、Enter確定。當完成測量時ready亮紅燈。 并按可查看直方圖。（5） 重復預稀釋樣品的操作，從步驟（2） - （ 4）開始！七、樣本儲存血球計數(shù)儀可存儲包括直方圖在內(nèi)的450多個數(shù)據(jù)，如果存儲已滿，儀器會自動刪除最前一個樣本數(shù)據(jù)，在菜單“4smprmvry”中可以按ID號、日期和序號查詢。1、在主菜單按鍵進入“ 4sampre memory ”按Enter鍵2、 按鍵選擇在同的查詢(ID號、日期和序號)條件，然后按Enter鍵，使用+或 鍵輸入ID號并按Enter鍵，使用+或-鍵輸入ID號并按Enter鍵。3、進入4sample memory ”樣本存儲菜單后，可在屏幕上看到當前日期。要完

15、全清除日期就要進入日期區(qū)并按Enter鍵，按鍵就可清除。輸入所需日期。4、 進入4 Sample memory ”樣本存儲菜單時，可以看到1-9999的序號。進入這一區(qū) 域并按鍵清除序號。輸入所需的起止序號。5、 進入4.1view selected samples”按Enter鍵?？稍陲@示屏上查看樣本的結(jié)果。&e668;&e658;鍵可查看方圖，按可查看前一個或后一個結(jié)果，按Enter鍵可打印結(jié)果。八、儀器的校準1、僅在必需時校準，在校準前保證質(zhì)控物和儀器沒有問題儀器出現(xiàn)下述情況時應重新校準儀器：在使用一種新試劑時連續(xù)三次分析兩個試管中任何參數(shù)的平均值超出設(shè)定的范圍時只有參數(shù) RBC MCV

16、 HGB PLT、和WB(可以進行校準2、校準步驟首先對儀器進行大清冼。單一計數(shù)PLT10空白WBC RBC均為“ 0”，無錯誤代碼提示(1) 重新啟動儀器，用于清除“5.2.20prediluted blood”校準菜單的參數(shù)。注意：此步驟不能省略必須執(zhí)行方可進行下步操作。(2) 連續(xù)測定5次校準物。按 MENI鍵返回到主菜單。注意：加樣前應充分混勻全血 質(zhì)控物5分鐘，并確保加樣(20微升)準確無誤！(3) 在主菜單按鍵進入“ 5calibratio n/QC ”。RBC MCV HGB05.4589.81551 4.1384.91282 4.3584.91233 4.4085.11254

17、4.3384.6125MV n 4.33 :484.8:4125:4TV:4.4184.0132% +1-0.9+5.6 &e658;(4) 進入“ 5.2Calib/5.2.2.prediluted blood”校準菜單，上圖是在屏幕上顯示的最后5個測量值。每一行結(jié)果前的數(shù)字表示是否使用該結(jié)果參與計算平均值。1=計算；0=不計算；可用-鍵修改標記，當測定結(jié)果有問題時應改為“0”不參加計算。平均值(MV表示用于分析的樣本個數(shù)(n)的平均值。目標值(TV)表示在需要校準時，由操作者輸入的值。(5) 用和鍵選擇所需參數(shù)，并按Enter鍵。按照已知全血質(zhì)控物的參數(shù)值，用+或-輸入MCV和HGB RB

18、C目標值。在顯示屏的 2/4頁用+或-鍵輸入除了參數(shù) MPV外的PLT 和 WBClo注意：MCV的目標值應在其質(zhì)按物給出的靶值基礎(chǔ)上加15fl進行靶值(TV)的輸入。如：質(zhì)按物給出的 MCV直是90fl則輸入儀器應是 90+15=105fl,應輸入MCV是 105而不是給 出的90o如按質(zhì)控物給出的值進行校準，實際患者的MCV測定值都會低于15fl從而影響HCT MCHC參數(shù)的計算。所以校準時 MCV直應加15fl 。(6) 當所有的參數(shù)校準的參數(shù)校準后，用MENE鍵退出“5.2.2Predi/uted.blood”校準菜單。(7) 在需要將校準值打印出時回答是否打印。(8) 重復上述步驟“(2) ( 5)”完成上述步驟“(2) ( 5)”后，查看測定值，如偏差超過規(guī)定的范圍；則執(zhí)行步驟“6”。(9) 再次測定質(zhì)控物；符合要求即可，完成校準。九、儀器的保養(yǎng)1、每天用完儀器后。執(zhí)行“ 8.2cleaning cycle”清冼程序用去蛋白液或4%次氯酸鈉清冼。(1) 把4ml的清冼劑放入一個樣品杯中置于AC900+儀器的WBC/HG位。(2) 從主菜單進入“ 8 maintenance ”菜單，并按 Enter鍵。(3) 進入8.2cleaning.cycle清冼程序并按 Enter鍵啟動清冼程序。程序?qū)⒊掷m(xù)幾分鐘。(4) 完成后進行空白測定。2、手工清冼轉(zhuǎn)換器，每周一次。(1)