環(huán)氧乙烷殘留量的測定

1、 環(huán)氧乙烷的綜述 環(huán)氧乙烷（EO）為一種最 簡單的環(huán)醚。低溫時為無色 易流動液體，沸點10.4， 在該溫度以上為無色氣體。 EO液體在室溫下易揮發(fā)，有 醚味。 環(huán)氧乙烷的綜述 環(huán)氧乙烷滅菌環(huán)氧乙烷滅菌 EO具有頑強的擴散和穿透能力，對細菌 芽孢、真菌和病毒等各種微生物均有滅殺 作用，屬于廣譜滅菌劑。 環(huán)氧乙烷的綜述 環(huán)氧乙烷對人體的危害 （1）急、慢性毒性 （2）三致作用 （3）急性中毒與局部刺激 （4）神經(jīng)系統(tǒng)損害與慢性毒性 （5）生殖毒性 醫(yī)療器械環(huán)氧乙烷的接觸量限度 參照標準：參照標準：ISO10993-7:2008 環(huán)氧乙烷殘留量分析方法 一 、 比色分析法 二 、 氣相色譜法 環(huán)氧乙

2、烷殘留量測定環(huán)氧乙烷殘留量測定 比色分析法比色分析法 檢測依據(jù)、原理檢測依據(jù)、原理 一、檢測依據(jù)一、檢測依據(jù) GB/T 14233.1-2008 醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗方法 第1部 分：化學分析方法 二、原理二、原理 環(huán)氧乙烷在酸性條件下水解成乙二醇，乙二醇經(jīng)高碘酸氧化生成 甲醛，甲醛與品紅-亞硫酸試液反應產(chǎn)生紫紅色化合物，通過比 色分析可求得環(huán)氧乙烷含量。 溶液配制溶液配制 三、溶液配制三、溶液配制 0.1mol/L鹽酸:取9mL鹽酸稀釋至1000mL。 高碘酸溶液（5g/L）:稱取高碘酸0.5g，溶于水，稀釋至100mL。 硫代硫酸鈉溶液（10g/L）：稱取硫代硫酸鈉1.0g，溶于水

3、，稀 釋至100mL。 亞硫酸鈉溶液（100g/L）：稱取10.0g無水亞硫酸鈉，溶于水， 稀釋至100mL。 品紅-亞硫酸試液：稱取0.1g堿性品紅，加入120mL熱水溶解， 冷卻后加入10%亞硫酸鈉溶液20mL、鹽酸2mL，置于暗處。試 液應無色，若發(fā)現(xiàn)有微紅色，應重新配置。 溶液配制溶液配制 三、溶液配制三、溶液配制 乙二醇標準貯備液：取一個外部干燥、清潔的50mL容量瓶，加 水約30mL，精確稱重。精確量取0.5mL乙二醇，迅速加入瓶中， 搖勻，精確稱重。兩次稱重之差即為溶液中所含乙二醇的重量， 加水至刻度，混勻，按下式計算其濃度： C= m/50 1000 式中： C - 乙二醇標準

4、貯備液濃度，單位為克每升（g/L） m-溶液中乙二醇的質(zhì)量，單位為克（g） 乙二醇標準溶液（濃度C1=C10-3）：精確量取標準貯備液 1.0mL，用水稀釋至1000mL。 樣品浸提方法樣品浸提方法 四、四、樣品浸提方法樣品浸提方法 取樣品上有代表性的部分，截為5mm長碎片，稱取2.0g置于容器 中，加0.1mol/L鹽酸10mL，室溫放置1h，作為供試液。 對于容器類樣品，可加0.1mol/L鹽酸至公稱容量，在371 下恒溫1h，作為供試液。 步驟步驟 五、五、步驟步驟 取五只納氏比色管，分別精確加入0.1mol/L鹽酸2mL，再精確加 入0.5mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL

5、、2.5 mL乙二醇標準溶液。 另取一只納氏比色管，精確加入0.1mol/L鹽酸2mL作為空白對照。 于上述各管中分別加入高碘酸溶液（5g/L）0.4mL，搖勻，放置 1h。然后分別滴加硫代硫酸鈉溶液（10g/L）至出現(xiàn)的黃色恰好 消失。再分別加入品紅-亞硫酸試液0.2mL，用蒸餾水稀釋至 10mL，搖勻，3537條件下放置1h，于560nm波長處以空 白液作為參比，測定吸光度。繪制吸光度-體積標準曲線。 精確量取供試液2.0mL于納氏比色管中，按上述步驟操作，以測 得的吸光度從標準曲線上查得試液相應的體積。 結(jié)果計算結(jié)果計算 絕對含量絕對含量 六、六、結(jié)果計算結(jié)果計算 環(huán)氧乙烷殘留量用絕對含

6、量或相對含量表示： WEO=1.775VC1m 式中：WEO -單位產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷絕對含量，mg V -標準曲線上找出的供試液相應的體積，mL C1 -乙二醇標準溶液濃度，g/L m -單位產(chǎn)品的質(zhì)量，g 結(jié)果計算結(jié)果計算 相對含量相對含量 六、六、結(jié)果計算結(jié)果計算 計算樣品中環(huán)氧乙烷相對含量： CEO=1.775VC1103 式中：CEO -單位產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷相對含量，g/L V -標準曲線上找出的供試液相應的體積，mL C1 -乙二醇標準溶液濃度，g/L 結(jié)果計算結(jié)果計算 （容器類）絕對含量（容器類）絕對含量 六、六、結(jié)果計算結(jié)果計算 對于容器類樣品，按下式計算容器中環(huán)氧乙烷絕對含量： W

7、EO=0.335VC1V1 式中： WEO-單位產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷絕對含量，mg V-標準曲線上找出的供試液相應的體積，mL C1-乙二醇標準溶液濃度，g/L V1-單位樣品的公稱容量，mL 結(jié)果計算結(jié)果計算 （容器類）單位體積含量（容器類）單位體積含量 六、六、結(jié)果計算結(jié)果計算 對于容器類樣品，按下式計算單位體積中環(huán)氧乙烷含量： CEO=0.335VC1103 式中： CEO-樣品中單位體積中環(huán)氧乙烷含量，mg/L V-標準曲線上找出的供試液相應的體積，mL C1-乙二醇標準溶液濃度，g/L 環(huán)氧乙烷殘留量檢測環(huán)氧乙烷殘留量檢測 -色譜法 （GC-HS) 氣相色譜法 1 氣相色譜法簡述 氣相色譜

8、法系采用氣體為流動相（載氣）流 經(jīng)裝有填充劑的色譜柱進行分離測定的色譜方法。 物質(zhì)或其衍生物氣化后，被載氣帶入色譜柱進行 分離，各組分先后進入檢測器，用記錄儀、積分 儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜信號。 氣相色譜儀由載氣源、進樣部分、色譜柱、 柱溫箱、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。進樣部分、 色譜柱和檢測器的溫度均在控制狀態(tài)。 氣相色譜法 1.1 載氣源載氣源 氣相色譜法的流動相為 氣體，稱為載氣，氦、氮和氫可用作載氣， 可由高壓瓶或高純度氣體發(fā)生器提供，經(jīng) 過適當?shù)臏p壓裝置，以一定的流速經(jīng)過進 樣器和色譜柱；根據(jù)供試品的性質(zhì)和檢測 器種類選擇載氣，除另有規(guī)定外，常用載 氣為氮氣。 氣相色譜法 1.2

9、進樣部分 進樣方式一般可采用溶液直接 進樣、氣體進樣。 溶液直接進樣采用微量注射器、微量 進樣閥或有分流裝置的氣化室進樣。采用 溶液直接進樣時，進樣口溫度應高于柱溫 30 50 ；進樣量一般不超過數(shù)微升； 柱徑越細，進樣量應越少，采用毛細管柱 時，一般應分流以免過載。 氣相色譜法 頂空進樣適用于固體和液體供試品中揮 發(fā)性組分的分離和測定。將固態(tài)或液態(tài)的 供試品制成供試液后，置于密閉小瓶中， 在恒溫控制的加熱室中加熱至供試品中揮 發(fā)性組分在非氣態(tài)和氣態(tài)達至平衡后，由 進樣器自動吸取一定體積的頂空氣注入色 譜柱中。 氣相色譜法 1.3 色譜柱 色譜柱為填充柱或毛細管柱。 極性大小分：強極性，弱極性

10、，非極性 氣相色譜法 新填充柱和毛細管柱在使用前需老化 以除去殘留溶劑及低分子量的聚合物， 色 譜柱如長期未用，使用前應老化處理，使 基線穩(wěn)定。 氣相色譜法 1.4 柱溫箱 由于柱溫箱穩(wěn)定的波動會影響色譜 分 析結(jié)果的重現(xiàn)性，因此柱溫箱精度應在 1，且溫度波動小于每小時0.1。溫 度控制系統(tǒng)分為恒溫和程序升溫兩種。 氣相色譜法 1.5 檢測器 適合氣相色譜法的檢 測器 火焰離子化檢測器（FID） 熱導檢測器（TCD） 氮磷檢測器（NPD） 火焰光度檢測器（FPD） 電子捕獲檢測器（ECD） 檢測EO選擇的檢測器是？選擇的毛細管柱？ 氣相色譜法 1.6 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 可分為記錄儀、積分儀以及計算

11、機工作站 等。 氣相色譜法 2 原理 在一定溫度下，用萃取劑水 萃取樣品 中所含環(huán)氧乙烷（EO），用頂空氣相色譜 法測定環(huán)氧乙烷含量。 氣相色譜法 3. 測定方法 3.1 取環(huán)氧乙烷標準品適量（怎么取法？），制 成六個濃度的標準溶液，各取10ml，制備六個濃 度的標準品試樣。 3.2 當標準品試樣達到氣液平衡時，不同濃度的 液體對應于不同濃度的氣體，取平衡后的氣體， 注入進樣器，記錄環(huán)氧乙烷的峰高（或面積）。 氣相色譜法 3.3 根據(jù)不同濃度的標準溶液對應的峰高 （或面積） ，繪制峰高（或面積） 濃度 標準曲線。 3.4 取樣品適量，配制成樣品試樣，同法測 定峰高（或面積） ，以測得的峰高（或

12、面積） 從標準曲線上查得相應的標準溶液的濃度。 3.5 根據(jù)公式，計算出環(huán)氧乙烷殘留量。 氣相色譜法 4 氣相色譜儀條件 4.1 氫火焰離子檢測器： 4.2 色譜柱：所用色譜柱應能使試樣中 雜質(zhì)和環(huán)氧乙烷完全分開，并有一定的 耐水性。（通常選用非極性柱，比如OV- 1) 氣相色譜法 4.3 儀器各部位溫度 a）氣化室200 b）檢測室250 4.4 氣流量 a）N2 2.0ml/min b）H2 40 ml/min c）空氣 400ml/min 氣相色譜法 5 環(huán)氧乙烷標準貯備液的制備（稱重法） 取外部干燥的50ml容量瓶，加水約30ml，加 瓶塞，稱重，精確到0.1mg。用注射器注入約 0.

13、6ml環(huán)氧乙烷，不加瓶塞，輕輕搖勻，蓋好瓶塞， 稱重，前后兩次稱重之差，即為溶液中所含環(huán)氧 乙烷的重量。加水至刻度再將此溶液稀釋成1 10-2g/L作為標準貯備液。 在移取標準液最好在冰水浴中進行 氣相色譜法 6 樣品試樣制備 6.1 將樣品長碎塊，取2.0g放入萃取容器 中，加5.0ml水浸提，浸提時間（1h)與溫 度（37或25）根據(jù)樣品的特性來定。 氣相色譜法 7 試驗步驟 7.1 用儲備液配制1 10-3g/L 1 10-2g/L六個系列濃度的標準溶液。各取 10ml按6.2方法處理。 用玻璃注射器依次從 平衡后的標準樣和試樣中迅速取1ml上部氣 體，注入進樣器，記錄環(huán)氧乙烷的峰高 （或面積）。 氣相色譜法 注 1 在一個分析中盡量一人操作，并使用同一只 1ml玻璃注射器； 2 注射器預先恒溫到樣品相同溫度； 3 每次注意環(huán)氧乙烷保留時間的變化，以防進 樣氣化墊漏氣； 4 每個樣品（包括標樣）在盡可能短的時間內(nèi) 分析三次，三次分析中必須有兩次結(jié)果相差不大 于5%，否則此樣品應重新進行分析。 氣相色譜法 7.2 用標準樣所測數(shù)據(jù)，繪出標準曲 線（X：EO濃