食品中有毒有害物質(zhì)的檢測(cè)介紹

1、 食品中有害元素的測(cè)定食品中有害元素的測(cè)定 1 食品中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定食品中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定2 食品中黃曲霉素的測(cè)定食品中黃曲霉素的測(cè)定3 食品中亞硝基化合物的測(cè)定食品中亞硝基化合物的測(cè)定4 食品中苯并芘的測(cè)定食品中苯并芘的測(cè)定5 白酒中甲醇的測(cè)定白酒中甲醇的測(cè)定6 動(dòng)物性食品中獸藥殘留測(cè)定動(dòng)物性食品中獸藥殘留測(cè)定 7 有害物質(zhì) 自然界中，按其原來的用途正常使用導(dǎo)致人體生理 機(jī)能、自然環(huán)境或生態(tài)平衡遭受破壞的物質(zhì)或含有 該物質(zhì)的物料。 有毒物質(zhì) 凡是以小劑量進(jìn)入機(jī)體，通過化學(xué)或物理化學(xué)作用 能夠?qū)е陆】凳軗p的物質(zhì)。 有害物質(zhì) 普通有害物質(zhì) 有毒物質(zhì) 致癌物質(zhì) 危險(xiǎn)物質(zhì) 食品中的有害物質(zhì) 生物性

2、有害物質(zhì) 黃曲霉、李斯特菌、口蹄疫病毒 化學(xué)性有害物質(zhì) 有害元素、農(nóng)藥殘留、黃曲霉毒素 亞硝基化合物、甲醇、獸藥殘留、苯并芘 物理性有害物質(zhì) 金屬屑、石子、動(dòng)物排瀉物 農(nóng)藥、獸 藥使用不 當(dāng) 食品中有害物質(zhì)的 主要來源 加工、貯 藏、運(yùn)輸 污染 特定食品 加工工藝 包裝材料 環(huán)境污染 食品原料 固有毒素 第一節(jié) 食品中有害元素的測(cè)定 食品中有毒有害元素主要有鉛、鎘、汞、砷等； 主要來源是工業(yè)“三廢”、化學(xué)農(nóng)藥、食品加 工輔料等方面的污染； 有害元素污染食品后，隨食品進(jìn)入體內(nèi)，會(huì)危 害人體健康，甚至致人終身殘廢或死亡； 檢測(cè)食品中有害元素的意義： 可以分析食品中有害元素的種類及含量； 可以防止有

3、害元素危害人體健康； 可以為加強(qiáng)食品生產(chǎn)和衛(wèi)生管理提供依據(jù)。 1.1 鉛的測(cè)定 鉛污染現(xiàn)狀 隨著工業(yè)化和交通運(yùn)輸業(yè)的迅猛發(fā)展，鉛污染已由 職業(yè)環(huán)境擴(kuò)展到日常環(huán)境，成為人類文明中最嚴(yán)重 的環(huán)境污染物之一； 我國(guó)兒童鉛中毒流行率很高，零鉛工程亟待啟動(dòng)； 鉛的毒性 鉛是多系統(tǒng),多親和性毒物，通過呼吸、進(jìn)食、皮 膚吸收進(jìn)入人體，具有嗜胎盤和嗜神經(jīng)性，尤其影 響少年兒童智商和正常發(fā)育； 鉛進(jìn)入人體，不被消化吸收，不會(huì)自主排出體外， 需要排鉛制劑干預(yù)。 1.1 鉛的測(cè)定 鉛的測(cè)定方法 原子吸收分光光度法 雙硫腙比色法 鉛的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn) GB/T 5009.122003 食品中鉛的測(cè)定 GB/T 5009.75

4、2003 食品添加劑中鉛的測(cè)定 1.1.1 原子吸收分光光度法測(cè)鉛 原理 鉛元素經(jīng)原子化后，在283.3nm處有最大吸收，而且吸 光度大小與鉛含量成正比。 試劑 硝酸與高氯酸（5+1）混合酸，0.5mol/L硝酸溶液， 1mg/ml鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液，100g/ml鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液。 儀器 原子吸收分光光度計(jì)，鉛燈，電熱板，馬福爐。 操作步驟 樣品消化 樣品濕法消化 固體樣品 液體樣品 樣品干法消化 1.1.1 原子吸收分光光度法測(cè)鉛 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 儀器條件設(shè)置 測(cè)定波長(zhǎng)283.3nm，等電流、狹縫寬度、空氣乙炔流量和時(shí) 間程序設(shè)置均參照儀器說明書調(diào)至最佳狀態(tài)。 樣品測(cè)定 結(jié)果計(jì)算 m Vcc X )(

5、 21 式中：X樣品中鉛的含量(mg/Kg或mg/mL) c1測(cè)定用樣液中鉛的含量(g/mL) c2試劑空白液中鉛的含量(g/mL) V樣品處理液的總體積(mL) m樣品質(zhì)量或體積(g或mL) 1.1.2 雙硫腙比色法測(cè)鉛 原理 樣品消化后在pH值為8.59.0時(shí)，鉛離子與雙硫腙生 成紅色配合物，溶于三氯甲烷，在波長(zhǎng)510nm處有最 大吸收。加入檸檬酸銨、氰化鉀、鹽酸羥胺等，防止 銅、鐵、鋅等離子干擾，與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。 試劑 氨水(1+1)、鹽酸(1+1)、1g/L 酚紅指示劑、200g/L 鹽 酸羥胺溶液、200g/L 檸檬酸銨溶液、 100g/L氰化鉀溶 液、三氯甲烷、5mg/mL 淀粉指

6、示液、硝酸(1+99)、 0.5g/L雙硫腙三氯甲烷溶液、雙硫腙使用液、硝酸 硫酸混合液(4+1)、1mg/ml鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液，10g/ml鉛 標(biāo)準(zhǔn)使用液。 儀器 分光光度計(jì) 1.1.2 雙硫腙比色法測(cè)鉛 操作步驟 樣品預(yù)處理 樣品灰化 測(cè)定 結(jié)果計(jì)算 1000)/( 1000)( 12 21 VVm mm X 式中：X樣品中鉛的含量(mg/Kg或mg/L) m1測(cè)定用樣品消化液中鉛的質(zhì)量(g) m2試劑空白液中鉛的質(zhì)量(g) m樣品質(zhì)量或體積(g或mL) V1樣品消化液的總體積(mL) V2測(cè)定用樣品消化液體積(mL) 1.2 鎘的測(cè)定 鎘的測(cè)定方法 原子吸收分光光度法 228.8nm 分光光

7、度法 樣品消化后在堿性溶液中，鎘離子與6溴苯并噻唑 偶氮萘酚生成紅色配合物，溶于三氯甲烷，在波長(zhǎng) 585nm 處有最大吸收。 鎘的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn) GB/T 5009.152003食品中鎘的測(cè)定 1.3 汞的測(cè)定 汞的測(cè)定方法 冷原子吸收分光光度法 253.7nm 雙硫腙比色法 樣品消化后在酸性條件下，汞與雙硫腙氯仿溶液生 成雙硫腙汞在氯仿溶液中呈橙黃色，在波長(zhǎng)492nm 處有最大吸收。 汞的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn) GB/T 5009.172003食品中總汞和有機(jī)汞的測(cè) 定 1.3 砷的測(cè)定 砷的測(cè)定方法 銀鹽法 樣品消化后，以碘化鉀、氯化亞錫將高價(jià)砷還原為 三價(jià)砷，然后與鋅粒和酸產(chǎn)生的新生態(tài)氫生成砷化 氫，經(jīng)銀鹽

8、溶液吸收后，形成紅色膠體，在波長(zhǎng) 520nm處有最大吸收。 砷斑法 砷的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn) GB/T 5009.112003食品中總砷和無機(jī)砷的測(cè) 定 第二節(jié) 食品中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 概述 農(nóng)藥：用于預(yù)防、消滅或者控制危害農(nóng)業(yè)、林業(yè)的病、 蟲、草及其他有害生物，以及調(diào)節(jié)植物、昆蟲生長(zhǎng)的藥 物總稱。 農(nóng)藥殘留：指農(nóng)藥本身及代謝產(chǎn)物等在環(huán)境、動(dòng)植物或 食品中的殘留現(xiàn)象。 殘留量：就是殘留的數(shù)量，單位mg/Kg或g/Kg。 目前，全世界使用的農(nóng)藥品種有上千種，其中絕大部分 為化學(xué)合成農(nóng)藥。 農(nóng)藥按用途可分為殺蟲劑、殺菌劑、除草劑、殺螨劑、 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、殺鼠藥等。 農(nóng)藥按化學(xué)成分可分為有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類

9、、有機(jī) 氯類、擬除蟲菊酯類、苯氧乙酸類、有機(jī)錫類等。 食物中農(nóng)藥殘留數(shù)量超過最大殘留限量時(shí)經(jīng)對(duì)人體和 動(dòng)物產(chǎn)生不良影響。 2.1 食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 有機(jī)氯農(nóng)藥(OCPs)是具有殺蟲活性的氯代烴的總稱； OCPs分為滴滴涕及其類似物、六六六和環(huán)戊二烯 衍生物，均為神經(jīng)毒性物質(zhì)； 常見的OCPs有滴滴涕、六六六、林丹、氯丹、硫 丹、毒殺芬、七氯、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑等； 滴滴涕六六六 表71我國(guó)主要食品中DDT和BHC殘留限量標(biāo)準(zhǔn) 食品種類食品種類 指標(biāo)指標(biāo) BHC (mg/Kg)DDT (mg/Kg) 糧食糧食(成品糧食成品糧食)、麥乳精、麥乳精(含乳固體飲料含乳固體飲料) 0.

10、30.2 肉：脂肪含量在肉：脂肪含量在10以下以下(以鮮重計(jì)以鮮重計(jì)) 0.40.2 脂肪含量在脂肪含量在10以上以上(以脂肪計(jì)以脂肪計(jì)) 4.02.0 魚：魚：(其他水產(chǎn)品參照魚其他水產(chǎn)品參照魚) 2.01.0 蔬菜、水果、干食用菌蔬菜、水果、干食用菌 0.20.1 綠茶和紅茶綠茶和紅茶 0.40.2 牛乳、鮮食用菌、蘑菇罐頭牛乳、鮮食用菌、蘑菇罐頭 0.10.1 蛋蛋(去殼去殼) 1.01.0 蛋制品蛋制品按蛋折算按蛋折算 乳制品乳制品按牛乳折算按牛乳折算 表72 WHO建議的DDT和BHC在某些食品中允許殘留量標(biāo)準(zhǔn) 食品種類食品種類DDT (mg/Kg) 食品種類食品種類 BHC (mg

11、/Kg) 瓜果、蔬菜瓜果、蔬菜 7.0 萵苣、畜肉脂肪萵苣、畜肉脂肪 2.0 熱帶水果熱帶水果 3.5 水果、蔬菜水果、蔬菜 0.5 全脂奶全脂奶 0.05 奶脂、甜菜根及葉、米、奶脂、甜菜根及葉、米、 蛋蛋(去殼去殼) 0.1 蛋類蛋類(去殼去殼) 0.5 馬鈴薯馬鈴薯 0.05 2.1 食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 食品中有機(jī)氯農(nóng)藥的測(cè)定采用氣相色譜法或薄層 色譜法； 最為常用的氣相色譜電子捕獲檢測(cè)器(GC-ECD)， 具有靈敏度高、分離效果好、定量準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。 有機(jī)氯農(nóng)藥的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)： GB/T5009.146-2003 植物性食品 中有機(jī)氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多種 殘留的測(cè)定； GB/T50

12、09.162-2003 動(dòng)物性食品 中有機(jī)氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多種 殘留的測(cè)定； 2.1.1 動(dòng)物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的 測(cè)定 原理 樣品處理后，用氣相色譜法測(cè)定。在一定溫度下，載 氣攜帶氣化后的樣品，通過色譜柱，被逐一分離，隨 即通過電子捕獲器，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。 20種有機(jī)氯農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分色譜圖種有機(jī)氯農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分色譜圖 1.BHC 2. BHC 3. BHC 4.五氯硝基苯五氯硝基苯 5.BHC 6.七氯七氯 7.艾氏劑艾氏劑 8.除螨酯除螨酯9.環(huán)氧七氯環(huán)氧七氯 10.殺螨酯殺螨酯 11.狄氏劑狄氏劑 12.p,p-DDE 13. p, p-DDD

13、 14. o, p-DDT 15 .p, p-DDT 16.胺菊酯胺菊酯17.氯菊酯氯菊酯 18.氯氰菊酯氯氰菊酯19. 氰戊菊酯氰戊菊酯20.溴氰菊酯溴氰菊酯 2.1.1 動(dòng)物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 試劑 丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)乙烷、正乙烷，重 蒸 石油醚，沸程3060，分析純重蒸； 氯化鈉、無水硫酸鈉； 凝膠，Bil-beads S-X3,200400目； 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品； 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制； 儀器 氣相色譜儀電子捕獲檢測(cè)器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 凝膠凈化柱 302.5cm玻璃層析柱 玻璃層析柱 2.1.1 動(dòng)物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 操作要點(diǎn) 提取與分配 凈化 將樣品濃縮液過凝膠柱，

14、用乙酸乙酯環(huán)乙烷(1+1)溶液 洗脫，棄去035ml流分，收集35 70ml流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 至約1ml，再經(jīng)凝膠柱凈化收集35 70ml流分，蒸發(fā)濃縮， 用氮?dú)獯党軇┮允兔讯ㄈ葜?ml。 測(cè)定 氣相色譜條件： 色譜柱：涂以O(shè)V-101,0.25m,30m0.32mm,石英彈性毛細(xì)管柱 柱溫：程序升溫 進(jìn)樣口溫度：270 檢測(cè)器：電子捕獲檢測(cè)器(ECD)，300 載氣流速：氮?dú)?N2)：1ml/min；尾吹：50ml/min 2.1.1 動(dòng)物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 程序升溫 色譜分析 分別量取1l混合標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品凈化液注入氣相色譜儀，以 保留時(shí)間定性，以樣品和標(biāo)準(zhǔn)峰高或峰面積比較定

15、量。 結(jié)果計(jì)算 60,1min170235280,10min 40/min2/min40/min 1000 1000 1 21 Vm Vm X 式中 X樣品中各農(nóng)藥的含量(mg/Kg) m1 被測(cè)樣液中各農(nóng)藥的含量(ng) m 樣品質(zhì)量(g) V1 樣液進(jìn)樣體積(L) V2 樣液最后定容體積(mL) 2.1.2 植物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 原理同2.1.1 試劑 石油醚(沸程3060)，苯，丙酮，乙酸乙酯，重 蒸 弗羅里硅土， 620灼燒4h后備用，用前140烘 2h，趁熱加5水滅活，層析用； 無水硫酸鈉 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品與標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。 儀器 氣相色譜儀電子捕獲檢測(cè)器 電動(dòng)振蕩器、組織搗

16、碎機(jī)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 布氏漏斗(直徑80mm)、抽濾瓶(200mL) 250mL分液漏斗、 100mL具塞三角瓶 層析柱 2.1.2 植物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 樣品制備 糧食樣品粉碎過20目篩備用； 蔬菜樣品除去非可食部分備用。 操作方法 提取 凈化 準(zhǔn)確吸取樣品2mL,加入以淋洗過的無水硫酸鈉+弗羅里硅土 層析柱中，用100mL石油醚+乙酸乙酯(95+5)洗脫，收集洗脫 液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮近干，用少量石油醚多次溶解殘?jiān)诳?度離心瓶中，最終定容至1.0mL，備測(cè)。 測(cè)定 色譜條件 涂以O(shè)V-101,15m0.25mm,石英彈性毛細(xì)管柱 氣體流速：氮?dú)?N2)40ml/min；尾吹：60

17、ml/min；分流比 1：50 2.1.2 植物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 溫度：柱溫自180 升至230 保持30min；檢測(cè)器及進(jìn)樣 溫度為250 。 色譜分析 分別吸取1l樣液和混合標(biāo)準(zhǔn)溶液注入氣相色譜儀，以保留 時(shí)間定性，以樣品和標(biāo)準(zhǔn)峰高或峰面積比較定量。 計(jì)算結(jié)果 KX mVH VEh si sii 1 2 有機(jī)氯和擬除蟲菊酯標(biāo)準(zhǔn)色譜圖有機(jī)氯和擬除蟲菊酯標(biāo)準(zhǔn)色譜圖 1.BHC 2. BHC 3. BHC 4. BHC 5. 七氯七氯 6.艾氏劑艾氏劑 7. p,p-DDE 8. o, p-DDT 9. p, p-DDD 10. p, p-DDT 11.三氟氯氰菊酯三氟氯氰菊酯 1

18、2. 二氯苯醚菊酯二氯苯醚菊酯13. 氰戊菊酯氰戊菊酯14. 溴氰菊酯溴氰菊酯 2.2食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測(cè)定 有機(jī)磷農(nóng)藥(OPPs)是含有C-P鍵或C-O-P,C-S- P,C-N-P鍵的有機(jī)化合物，屬磷酸酯類化合物； 有機(jī)磷農(nóng)藥有上百種，具有代表性的有： 敵敵畏、對(duì)硫磷、氧化樂果、辛硫磷、甲胺磷、甲 拌磷(3911)、樂果、敵百蟲、二溴磷、久效磷、磷 銨、殺螟硫磷、甲基對(duì)硫磷、倍硫磷、內(nèi)吸磷 (1059)、雙硫磷、乙酰甲胺磷、二嗪磷、丙溴磷等； 有機(jī)磷農(nóng)藥，高效廣譜，易降解，半衰期短， 人體、動(dòng)物體內(nèi)不易蓄積，不易殘留； 由于某些有機(jī)磷農(nóng)藥急性毒性強(qiáng)，常因使用、 保管、運(yùn)輸?shù)炔簧?，污染?/p>

19、品造成人畜急性中 毒，因此食品中需要測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)藥殘留。 表73其中有機(jī)磷農(nóng)藥比較表 名稱名稱毒毒 性性 殘效殘效 期期(d) 用途與特點(diǎn)用途與特點(diǎn)我國(guó)允許殘留量標(biāo)準(zhǔn)我國(guó)允許殘留量標(biāo)準(zhǔn)(mg/Kg) 糧食糧食蔬菜水果蔬菜水果植物油植物油 甲拌磷甲拌磷劇劇30-40拌種拌種0.02不得檢出不得檢出不得檢出不得檢出 殺螟硫磷殺螟硫磷低低短短糧食作物糧食作物0.040.4不得檢出不得檢出 倍硫磷倍硫磷低低短短果樹蔬菜糧食果樹蔬菜糧食0.050.050.1 樂果樂果低低5使用范圍廣使用范圍廣101 敵敵畏敵敵畏劇劇短短煎煮破壞煎煮破壞未定未定0.2 對(duì)硫磷對(duì)硫磷劇劇7糧食作物糧食作物0.1不得檢出不得

20、檢出0.1 馬拉硫磷馬拉硫磷低低短短糧食熏蒸糧食熏蒸3未定未定 2.2食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測(cè)定 食品中有機(jī)磷農(nóng)藥的測(cè)定采用氣相色譜 法； 食品中有機(jī)磷農(nóng)藥的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)： GB/T5009.20-2003 食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量 的測(cè)定； GB/T5009.161-2003 動(dòng)物性食品中有機(jī)磷農(nóng) 藥多組分殘留量的測(cè)定 GB/T5009.145-2003 植物性食品中有機(jī)磷和 氨基甲酸酯多組分的測(cè)定 2.2.1動(dòng)物性食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測(cè)定 原理： 樣品經(jīng)提取凈化后，用氣相色譜法分離測(cè)定，火焰 光度檢測(cè)器檢測(cè)，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。 試劑： 丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)乙烷，均重蒸 氯化鈉

21、、無水硫酸鈉 凝膠 Bio-Beads S-X3，200400目； 有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 儀器 氣相色譜儀火焰光度檢測(cè)器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 凝膠凈化柱 2.2.1動(dòng)物性食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測(cè)定 操作方法 樣品提取制備，同有機(jī)氯農(nóng)藥測(cè)定； 凈化，同有機(jī)氯農(nóng)藥測(cè)定； 測(cè)定 色譜條件 色譜柱：涂SE-54 0.25m,30m0.32mm(內(nèi)徑)石英彈性毛細(xì)管柱 柱溫：程序升溫 檢測(cè)器：火焰光度檢測(cè)器(FPD-P) 進(jìn)樣口溫度：270 氣體流程：氮?dú)?N2載氣)1 ml/min；尾吹：50 ml/min；氫氣， 50 ml/min；空氣500 ml/min。 60,1min110235265 4

22、0/min5/min40/min 2.2.1動(dòng)物性食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留 色譜分析 分別吸取1l樣液和混合標(biāo)準(zhǔn)溶液注入氣相色譜儀，以保留時(shí)間 定性，以樣品和標(biāo)準(zhǔn)峰高或峰面積比較定量。 結(jié)果計(jì)算 13中有機(jī)磷農(nóng)藥色譜圖 1.甲胺磷 2.敵敵畏 3.乙酰甲胺磷 4.久效磷5.樂果 6.乙拌磷 7.甲基對(duì)硫磷 8.殺螟硫磷9.甲基嘧啶磷 10.馬拉硫磷 11.倍硫磷 12.對(duì)硫磷 13.乙硫磷 1000 1000 1 21 Vm Vm X 式中 X樣品中各農(nóng)藥含量(mg/Kg) m1被測(cè)樣品中各農(nóng)藥的含量 (ng); m樣品質(zhì)量(g) V1樣液進(jìn)樣體積(L) ；V2 樣液最后定容體積(mL) 2.2.

23、2植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留 原理： 樣品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯農(nóng)藥有機(jī)溶劑提取，液液 分配、微型柱凈化除去干擾物質(zhì)，用氮磷檢測(cè)器(FID) 檢測(cè)，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。 試劑 丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、正己烷，重蒸 磷酸、氯化鈉、無水硫酸鈉、氯化銨 硅膠，6080目130烘2h，以5%水失活； 助濾劑，celite545; 凝結(jié)劑，5g氯化銨+10mL磷酸+100mL水，用前稀釋5 倍； 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 2.2.2植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留 儀器 組織搗碎機(jī)、離心機(jī)、超聲波清洗器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 氣相色譜儀火焰光度檢測(cè)器 操作方法 提取 凈化 將凝結(jié)

24、液和助濾劑加入提取樣品的分液漏斗中，輕搖靜置 5min用布氏漏斗抽濾，然后用二氯甲烷提取經(jīng)無水硫酸鈉漏 斗過濾后35旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至少量，氮吹儀吹干加入少量 正己烷過硅膠柱，依次用4mL正己烷+丙酮(7+3)、4mL乙酸 乙酯、8mL丙酮+乙酸乙酯(1+1)、4mL丙酮+甲醇(1+1)洗柱， 收集洗脫液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀45濃縮近干，用二氯甲烷定容至 1mL。 2.2.2植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留 測(cè)定 氣相色譜條件 色譜柱：BP5或OV-101 25m0.32mm(內(nèi)徑)石英彈性毛細(xì)管柱 氣體流速：氮?dú)?N2載氣)50ml/min；尾吹(氮?dú)?：50 ml/min；氫 氣:0.5Kg/

25、cm2；空氣:0.3Kg/cm2 。 溫度：柱溫采用程序升溫方式 檢測(cè)器：氮磷檢測(cè)器(FTD) 色譜分析：量取1 L樣液和混合標(biāo)準(zhǔn)溶液注入氣相色譜儀， 以保留時(shí)間定性，以樣品和標(biāo)準(zhǔn)峰高或峰面積比較定量。 140185195235 50/min恒溫2min2/min10/min 進(jìn)樣口 溫度235 恒溫1min 2.2.2植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留 結(jié)果計(jì)算 fmh Eh si sii X 1000 色譜圖色譜圖 1. 2.062甲胺磷甲胺磷 2. 3.775乙酰甲胺磷乙酰甲胺磷 3. 4.097敵百蟲敵百蟲 4. 5.058葉撣散葉撣散 5. 6.163仲丁威仲丁威 6. 6.5甲

26、基內(nèi)吸磷甲基內(nèi)吸磷 7. 7.688甲拌磷甲拌磷 8. 7.797久效磷久效磷 9. 8.41樂果樂果 10. 8.575甲基對(duì)硫磷甲基對(duì)硫磷 11.12.288馬拉氧磷馬拉氧磷 12. 12.745毒殺稗毒殺稗 13. 13.367西維因西維因 14. 14.18蟲螨磷蟲螨磷 15. 14.353倍硫磷倍硫磷 16. 14.827馬拉硫磷馬拉硫磷 17. 15.027對(duì)硫磷對(duì)硫磷 18. 18.28 殺撲磷殺撲磷 19. 19.412乙硫磷乙硫磷 20. 21.293克線磷克線磷 2.3 食品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 氨基甲酸酯類農(nóng)藥的理化性質(zhì) 氨基甲酸酯類農(nóng)藥是氨基甲酸的衍生物，殺蟲

27、力強(qiáng)， 作用迅速，對(duì)蟲體有較強(qiáng)的選擇性，對(duì)人畜毒性較 低并易分解失效，在體內(nèi)無蓄積中毒作用； 常見的有西維因(甲萘威)、呋喃丹、涕滅威、殘殺 威、速滅威、害撲威、滅殺威、異丙威(葉蟬散)、 抗蚜威、滅草、滅草猛等； 目前WHO和我國(guó)僅對(duì)西維因的殘留量有規(guī)定。各 類食品中的最高殘留量(mg/Kg): 稻米和小麥5.0； 全麥粉和根莖類2.0； 家禽和蛋類(去殼)0.5；馬鈴薯和白面粉0.2； 畜禽肉0.2； 奶制品0.1。 2.3.1 動(dòng)物性食品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定 原理 樣品提取處理凈化微孔濾膜過濾后進(jìn)樣，用反相高效液 相色譜分離，紫外檢測(cè)器檢測(cè)，色譜峰保留時(shí)間定性外 標(biāo)法定量 試劑

28、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、環(huán)己烷，均重蒸； 氯化鈉、無水硫酸鈉；重蒸蒸餾水； 凝膠，Bio-Beads S-X3，200400目； 氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品與標(biāo)準(zhǔn)溶液 儀器 高效液相色譜(HPLC)紫外檢測(cè)器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 凝膠凈化柱 2.3.1 動(dòng)物性食品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定 高效液相色譜紫外檢測(cè)器高效液相色譜紫外檢測(cè)器 2.3.1 動(dòng)物性食品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定 操作方法 樣品提取凈化制備，同動(dòng)物性食品中有機(jī)磷農(nóng)藥處理 方法； 高效液相色譜測(cè)定 色譜條件： 色譜柱：Altima C18 4.6mm25cm; 流動(dòng)相：甲醇+水(60+40)；流速：0.5mL/min; 柱溫：30;紫

29、外檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm。 測(cè)定：將儀器調(diào)至最佳狀態(tài)，分別將5L混合標(biāo)準(zhǔn) 溶液及樣品凈化液注入色譜儀中，以保留時(shí)間定性， 以樣品和標(biāo)準(zhǔn)峰高或峰面積比較定量。 氨基甲酸酯農(nóng)藥氨基甲酸酯農(nóng)藥HPLC標(biāo)準(zhǔn)色譜圖標(biāo)準(zhǔn)色譜圖 1.涕滅威涕滅威 2.速滅威速滅威3.呋喃丹呋喃丹 4.西維因西維因5.異丙威異丙威 2.4 食品中擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 擬除蟲菊酯農(nóng)藥的理化性質(zhì) 除蟲菊酯是菊科植物除蟲菊成分，對(duì)昆蟲具有高效速殺 作用 擬除蟲菊酯農(nóng)藥就是仿天然除蟲菊酯化學(xué)合成的殺蟲劑， 具有高效、廣譜、低毒、低殘留的特點(diǎn)，對(duì)水生動(dòng)物毒 性較大 常見的溴氰菊酯(敵殺死)、氯氰菊酯、氯菊酯、中西殺滅 菊酯、甲氰菊

30、酯、氰戊菊酯、二氯苯醚菊酯等； 第十三屆國(guó)際食品中獸藥殘留法典委員會(huì)規(guī)定：溴氰菊 酯在動(dòng)物源食品中的MRL(mg/Kg)為牛羊雞肌肉0.03，肝 腎0.05，脂肪0.5，牛奶和雞蛋0.03； 我國(guó)農(nóng)業(yè)部規(guī)定： 氰戊菊酯在牛羊豬肌肉、脂肪1.0，副產(chǎn)品0.02，牛奶0.01 氟氯苯氰菊酯在牛肌肉、腎0.01，肝0.02，奶0.03，脂肪 0.15。 測(cè)定方法參照GB/T 5009.162和GB/T 5009.1462003 第三節(jié) 食品中黃曲霉毒素的測(cè)定 概述 黃曲霉毒素(AFT)是黃曲霉和寄生曲霉的代謝產(chǎn)物， 溫特曲霉也能少量產(chǎn)生毒素； 黃曲霉毒素是一族結(jié)構(gòu)類似化合物的總稱，基本結(jié)構(gòu) 是二呋喃

31、環(huán)和香豆素，紫外線下能發(fā)熒光； 目前已分離鑒定出12種，包括B1、B2、G2、M1、M2、 P1、Q、H1、GM、B2a和毒醇； 黃曲霉毒素是劇毒物質(zhì)，毒性相當(dāng)于氰化鉀的10倍， 砒霜的68倍，具有極強(qiáng)的致癌性，長(zhǎng)期攝入會(huì)誘發(fā)肝 癌； 各種黃曲霉毒素中以黃曲霉毒素B1毒性和致癌性最強(qiáng)， 在食品中污染最為嚴(yán)重; 食品中黃曲霉毒素B1的測(cè)定常采用薄層色譜法。 表74 食品中黃曲霉毒素的最高限量 食品名稱食品名稱黃曲霉素黃曲霉素B1最高允許限量最高允許限量 (g/Kg) 玉米玉米,花生花生,花生油花生油,堅(jiān)果和干果堅(jiān)果和干果(核桃杏仁核桃杏仁)20 玉米及花生制品玉米及花生制品(按原料折算按原料折算

32、)20 大米大米,其它油脂其它油脂(香油香油,菜籽油菜籽油,大豆油大豆油,葵花油葵花油 胡麻油胡麻油,茶油茶油,麻油麻油,玉米胚芽油玉米胚芽油,米糠油米糠油,棉籽油棉籽油) 10 其它食品其它食品(麥類麥類,面粉面粉,薯干薯干),發(fā)酵食品發(fā)酵食品(醬油醬油,醋豆豉醋豆豉, 腐乳腐乳),淀粉制品淀粉制品(糕點(diǎn)糕點(diǎn),餅干餅干,面包面包,裱花蛋糕裱花蛋糕) 5 牛乳及其制品牛乳及其制品(消毒牛奶消毒牛奶,新鮮生牛乳新鮮生牛乳,全脂奶粉全脂奶粉,淡淡 煉煉,乳奶油乳奶油),黃油黃油,新鮮豬組織新鮮豬組織(肝肝,腎腎,血血,瘦肉瘦肉) 0.5 3.1 食品中黃曲霉毒素B1的測(cè)定 原理 樣品中黃曲霉毒素B

33、1經(jīng)提取濃縮、薄層分離后，在 波長(zhǎng)365nm紫外燈下產(chǎn)生紫色熒光，根據(jù)其在薄層 上顯示熒光的最低檢出量來測(cè)定含量。 試劑 三氯甲烷、甲醇、苯、乙腈、丙酮； 正己烷或石油醚，沸程3060或6090； 無水乙醚、硅膠G、三氟乙酸、無水硫酸鈉、氯化 鈉； 苯乙腈(98+2ml)混合液、甲醇水(55+45) 溶液； 黃曲霉毒素B1標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.04g/ml黃曲霉毒素B1標(biāo)準(zhǔn)使用液 25g/L消毒用次氯酸鈉溶液 3.1 食品中黃曲霉毒素B1的測(cè)定 儀器 小型粉碎機(jī)、篩、電動(dòng)振蕩器、全玻璃濃縮器、玻 璃板(520cm)、薄層板涂布器、展開槽 紫外燈100125W帶365nm濾光片； 微量注射器或血色素吸管

34、 操作方法 取樣、提取 測(cè)定 薄層板的制備 單向展開法 點(diǎn)樣 距薄層板下端3cm基線上滴加樣液，一板可滴加4個(gè)點(diǎn)，距 邊和點(diǎn)間為1cm,點(diǎn)直徑3cm,點(diǎn)依次為10 L的0.04 g/mL黃曲霉毒 素B1標(biāo)樣,20 L樣液,20 L樣液+ 10 L的0.04 g/mL黃曲霉毒素 B1標(biāo)樣,20 L樣液+ 10 L的0.2g/mL黃曲霉毒素B1標(biāo)樣； 黃曲霉毒素 B1 3.1 食品中黃曲霉毒素B1的測(cè)定 展開與觀察：在展開槽內(nèi)加10mL無水乙醇，預(yù)展12cm，取出揮 干。再于另一展開槽內(nèi)加10mL丙酮三氯甲烷(8+92)，展開10 12cm取出，在紫外燈下觀察結(jié)果。 確證試驗(yàn)：驗(yàn)證需要加三滴三氟乙

35、酸，產(chǎn)生黃曲霉毒素B1的衍生 物，展開后此衍生物比移值約在0.1左右，在薄層板左邊一次滴加 兩個(gè)點(diǎn)。1點(diǎn)10 L0.04 g/mL黃曲霉毒素B1標(biāo)樣， 2點(diǎn)20 L樣液， 在以上兩點(diǎn)上各加一滴三氟乙酸蓋于其上，反應(yīng)5min后，用吹風(fēng) 機(jī)吹熱風(fēng)2min，注意熱風(fēng)吹到薄層板上溫度不高于40。再在薄 層板上滴加兩個(gè)點(diǎn)。 3點(diǎn)10 L0.04 g/mL黃曲霉毒素B1標(biāo)樣， 4 點(diǎn)20 L樣液，展開，在紫外燈下觀察樣液是否產(chǎn)生與黃曲霉毒 素B1標(biāo)樣相同的衍生物。未加三氟乙酸的3、4點(diǎn)可作為樣液和標(biāo) 準(zhǔn)液的衍生物對(duì)照。 稀釋定量：如樣液的熒光點(diǎn)的強(qiáng)度與黃曲霉毒素B1標(biāo)樣最低檢出 量(0.0004 g)的熒

36、光強(qiáng)度一致，則樣液中黃曲霉毒素B1含量為 5g/Kg;如強(qiáng)度高于標(biāo)樣檢出限，則需要估計(jì)減少滴加樣液量或稀 釋樣液至強(qiáng)度一致為止。 結(jié)果計(jì)算 mV DV X 1000 2 1 0004. 0 第四節(jié) 食品中亞硝基化合物的測(cè)定 概述 N亞硝基化合物可分為N亞硝胺和N亞硝酰胺兩大 類，即通常所說亞硝胺化合物； N亞硝基化合物不是食品中天然存在物質(zhì)，是食品中 的亞硝酸鹽與仲胺在酸性條件下的反應(yīng)產(chǎn)物： 魚和肉的腌制和烘烤 蔬菜的腌制 乳制品發(fā)酵、啤酒釀造 魚和肉腐敗變質(zhì) 亞硝胺化合物除少量劇毒外大多毒性較低，對(duì)人類的 危害主要是其致癌性，可能誘發(fā)各種部位腫瘤，如： 食道癌、肝癌等； 食品中N亞硝胺的測(cè)定

37、方法有氣相色譜熱能分析儀 法和氣相色譜質(zhì)譜法。 食食 品品限量限量(MLs)(g/Kg) N亞硝胺亞硝胺N亞硝酰胺亞硝酰胺 海產(chǎn)品海產(chǎn)品47 肉制品肉制品35 表表75 食品中亞硝基化合物的限量指標(biāo)食品中亞硝基化合物的限量指標(biāo) GB 2762-2005 4.1氣相色譜熱能分析法測(cè)亞硝胺化合物 原理 樣品中N亞硝胺經(jīng)硅藻土吸附或真空低溫蒸餾，二 氯甲烷提取分離，氣相色譜熱能分析法(GC-TEA) 測(cè)定 氣相色譜分離的亞硝胺在熱解室裂解產(chǎn)生NO與臭氧 反應(yīng)成激發(fā)態(tài)NO，返回基態(tài)時(shí)發(fā)射近紅外光(600 2800nm)用熱能分析儀特異檢測(cè)。適用于啤酒中N 亞硝基二甲胺含量測(cè)定。 試劑 二氯甲烷、硅藻土

38、、氮?dú)?、無水硫酸鈉； 1mol/L氫氧化鈉溶液、0.1mol/L鹽酸溶液； 200mg/L, 200g/L N亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液和工作液。 儀器 氣相色譜熱能分析儀、玻璃層析管、加壓蒸餾裝 置 K-D濃縮器、恒溫水浴鍋 4.1氣相色譜熱能分析法測(cè)亞硝胺化合物 操作方法 提取、濃縮 測(cè)定 氣相色譜條件 汽化室溫度：220 色譜柱溫度：175或從75以5/min速度升至175后維持 色譜柱：23m2 3mm(內(nèi)徑)玻璃管或不銹鋼柱，內(nèi)裝涂 以固定液，10%(m/m)聚乙二醇20M和氫氧化鉀10g/L或 13%(m/m) Carbowax20M/TPA于載體Chromosorb WAW- DMCs(8

39、0100目)； 載氣：氬氣，流速2040mL/min。 熱能分析儀 接口溫度：250；熱解室溫度：500 真空度：133266Pa 冷阱：用液氮調(diào)至250(可用CTR過濾器代替)。 4.1氣相色譜熱能分析法測(cè)亞硝胺化合物 測(cè)定：分別注入樣品濃縮液和N亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)工作液 510L，利用保留時(shí)間定性，峰高或峰面積定量。 計(jì)算 mVh VcVh X 12 21 式中式中 X樣品中樣品中N亞硝基二甲胺含量亞硝基二甲胺含量(g/Kg) h1樣品濃縮液中亞硝基二甲胺的峰高樣品濃縮液中亞硝基二甲胺的峰高(mm)或峰面積或峰面積(mm2) h2 標(biāo)準(zhǔn)品工作液中亞硝基二甲胺的峰高標(biāo)準(zhǔn)品工作液中亞硝基二甲胺的峰高(

40、mm)或峰面積或峰面積(mm2) c標(biāo)準(zhǔn)品工作液中亞硝基二甲胺的濃度標(biāo)準(zhǔn)品工作液中亞硝基二甲胺的濃度(g/L) V1,V2分別為樣品濃縮液和標(biāo)準(zhǔn)工作液的進(jìn)樣體積分別為樣品濃縮液和標(biāo)準(zhǔn)工作液的進(jìn)樣體積(L) V樣品濃縮液的濃縮體積樣品濃縮液的濃縮體積(L) m樣品的質(zhì)量樣品的質(zhì)量(g) 氮氮 吹吹 儀儀 4.1氣相色譜質(zhì)譜法測(cè)亞硝胺化合物 原理 樣品中的N亞硝胺類化合物經(jīng)水蒸氣蒸餾和有機(jī)溶 萃取后，濃縮至一定量，采用氣相色譜質(zhì)譜法定 性定量 試劑 二氯甲烷，須用全玻璃蒸餾裝置重蒸； 無水硫酸鈉、優(yōu)級(jí)純氯化鈉、硫酸(1+3)、耐火磚顆 粒； 0.5mg/mL, 5 g/mL的 N 亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)溶液和

41、使用液； 120g/L氫氧化鈉溶液； 儀器 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法 水蒸汽蒸餾裝置 K-D濃縮器 4.1氣相色譜質(zhì)譜法測(cè)亞硝胺化合物 操作方法 水蒸汽蒸餾、萃取純化、濃縮 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法 色譜條件 汽化室溫度：190 色譜柱溫度：對(duì)N亞硝基二甲胺 130; N亞硝基二乙胺 145; N 亞硝基二丙胺 130; N亞硝基吡咯烷160； 色譜柱：2m1.8 3.0mm(內(nèi)徑)玻璃管，內(nèi)裝涂以15%(m/m) PEG20M固定液和氫氧化鉀10g/L的 80100目Chromosorb WAW- DMCs； 載氣：氦氣，流速40mL/min。 質(zhì)譜儀條件 分辨率7000;離子化電壓70 V;離子化電流

42、300A;離子源溫度180; 離子源真空度1.3310-4Pa;界面溫度180 。 4.1氣相色譜質(zhì)譜法測(cè)亞硝胺化合物 測(cè)定 采用電子轟擊源高分辨率匹配法，用全氟煤油碎片離子分 別監(jiān)視N亞硝基二甲胺 、N亞硝基二乙胺 、 N亞硝 基二丙胺 、 N亞硝基吡咯烷的分子、離子，結(jié)合保留時(shí) 間定性，以示波器上該分子、離子的峰高來定量 。 1000 2 1 m Vc h h X 式式中中 X樣品中某一種樣品中某一種N亞硝胺化合物的含量亞硝胺化合物的含量(g/Kg 或或g/L) h1濃縮液中該濃縮液中該N亞硝胺化合物的峰高亞硝胺化合物的峰高(mm) h2樣品標(biāo)準(zhǔn)液中該樣品標(biāo)準(zhǔn)液中該N亞硝胺化合物的峰高亞硝

43、胺化合物的峰高(mm) c樣品標(biāo)準(zhǔn)液中該樣品標(biāo)準(zhǔn)液中該N亞硝胺化合物的濃度亞硝胺化合物的濃度(g/mL) V樣品濃縮液體積樣品濃縮液體積(mL) m樣品質(zhì)量或體積樣品質(zhì)量或體積(g或或mL) 第五節(jié) 食品中苯并(a)芘的測(cè)定 苯并芘的危害 苯并芘為致癌物質(zhì)多環(huán)芳烴中的一種。3,4-苯并 芘是一種有5個(gè)苯環(huán)構(gòu)成的多環(huán)芳烴，性質(zhì)穩(wěn)定； 在有機(jī)溶劑中，用波長(zhǎng)365nm紫外線照射可產(chǎn)生 典型的紫色熒光； 3,4-苯并芘是已發(fā)現(xiàn)的200多種多環(huán)芳烴中最主 要的環(huán)境和食品污染物，是一種強(qiáng)烈的致癌物 質(zhì)，對(duì)機(jī)體各器官具有致癌作用； 食品食品限量限量(MLs)(g/Kg) 熏烤肉熏烤肉5 植物油植物油10 糧

44、食糧食5 表表76 食品中苯并食品中苯并(a)芘的限量指標(biāo)芘的限量指標(biāo) GB 2762-2005 5.1熒光分光光度法測(cè)定食品中苯并(a)芘 食品中苯并(a)芘測(cè)定有熒光分光光度法和目測(cè)比色法 熒光法原理 樣品用溶劑或經(jīng)皂化后提取，再用液液分配或色譜柱凈化， 用乙?；癁V紙分離苯并(a)芘。因苯并(a)芘在紫外光照射下呈 藍(lán)紫色熒光斑點(diǎn)，剪下有苯并(a)芘的濾紙部分溶劑浸出用熒 光分光光度計(jì)測(cè)熒光強(qiáng)度與標(biāo)準(zhǔn)品比較定量。 試劑 苯、無水乙醇、丙酮，重蒸； 環(huán)乙烷(或石油醚，沸程3060)重蒸或氧化柱處理除熒光 二甲基甲酰胺或二甲基亞砜、95乙醇、氫氧化鉀； 無水硫酸鈉，乙醇(95%)二氯甲烷(2+

45、1)展開劑 硅鎂型吸附劑、層析用(中性)氧化鋁、乙?；癁V紙； 100 g/mL，1.0 g/mL，0.1 g/mL苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)溶液 5.1熒光分光光度法測(cè)定食品中苯并(a)芘 儀器 脂肪提取儀 層析柱 35cm1015mm(內(nèi)徑) 上端有25mm(內(nèi)徑) 810cm的內(nèi)徑漏斗，下端具有活塞； 層析缸，K-D全玻璃濃縮器，回流皂化裝置，組織搗 碎機(jī) 組織搗碎機(jī)，振蕩器，25、50L微量注射器； 熒光分光光度計(jì)，帶365或254nm濾光片的紫外光燈。 操作方法 樣品提取、凈化 薄層層析分離 在乙酰化濾紙上一端5cm處，吸取樣品液點(diǎn)于 濾紙上，用電吹風(fēng)從背面吹散溶劑；同樣點(diǎn) 苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)液，

46、濾紙下端浸入層析缸內(nèi)展開 劑約1cm，待溶劑前沿至20cm時(shí)取出陰干； 5.1熒光分光光度法測(cè)定食品中苯并(a)芘 在365nm或254nm紫外燈下觀察濾紙條，用鉛筆劃出 標(biāo)準(zhǔn)苯并(a)芘及其同一位置的樣品的藍(lán)紫色斑點(diǎn)，剪 下此點(diǎn)分別放入小比色管中，各加4mL苯加蓋，放入 5060水浴搖蕩浸泡15min； 測(cè)定 將樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的苯浸出液移入熒光分光光度計(jì)的石 英杯中，以365nm為激發(fā)光波長(zhǎng)，以365460nm波長(zhǎng) 進(jìn)行熒光掃描，所得熒光光譜與標(biāo)準(zhǔn)苯并(a)芘的光譜 對(duì)比； 在分析同時(shí)做試劑空白、處理樣品所用全部試劑，分 別讀取樣品、標(biāo)準(zhǔn)及試劑空白于波長(zhǎng)4065nm處熒光 強(qiáng)度，按基線法由下式

47、計(jì)算數(shù)值，為定量計(jì)算的熒光 強(qiáng)度。 2/ 411401406 FFFF 熒光分光光度計(jì)熒光分光光度計(jì) 5.1熒光分光光度法測(cè)定食品中苯并(a)芘 結(jié)果計(jì)算 樣品中的苯并(a)芘按下式計(jì)算： 1 2 21 1000 V V m FF F S X 式中式中 X樣品中的苯并樣品中的苯并(a) 芘含量芘含量(g/Kg) S苯并苯并(a) 芘標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)的質(zhì)量芘標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)的質(zhì)量(g) F標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度(mm) F1樣品斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度樣品斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度(mm) F2試劑空白斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度試劑空白斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度(mm) V1,V2 分別為樣品濃縮液體積和點(diǎn)樣體積分別為

48、樣品濃縮液體積和點(diǎn)樣體積(mL) m樣品質(zhì)量樣品質(zhì)量(g) 5.2 目測(cè)比色法測(cè)定食品中苯并(a)芘 原理 樣品提取凈化后在乙?；癁V紙上層析分離苯并(a) 芘，分離到的斑點(diǎn)在波長(zhǎng)365nm的紫外燈下觀察， 與標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)進(jìn)行目測(cè)比色概略定量。 試劑和儀器同5.1 操作方法見P249 計(jì)算 1 2 1 2 1000 V V m m X 式中式中 X樣品中的苯并樣品中的苯并(a) 芘含量芘含量(g/Kg) m2樣品斑點(diǎn)相當(dāng)苯并樣品斑點(diǎn)相當(dāng)苯并(a) 芘質(zhì)量芘質(zhì)量(g) V1,V2 分別為樣品濃縮液體積和點(diǎn)樣體積分別為樣品濃縮液體積和點(diǎn)樣體積(mL) m1樣品質(zhì)量樣品質(zhì)量(g) 第六節(jié) 白酒中甲醇的測(cè)定

49、 白酒中甲醇的危害 白酒中通常含有甲醇，微量甲醇 可引起人體慢性損害，高劑量可 引起人體急性中毒； 果膠含量較高原料、蒸煮原料溫 度過高、時(shí)間過長(zhǎng)及使用含果膠 多的糖化劑能增加成品中甲醇含 量； 甲醇進(jìn)入人體后分解緩慢有蓄積 作用。少量甲醇可至中毒。飲后 數(shù)小時(shí)發(fā)生昏暈、沉睡、全身無 力、頭痛、視覺模糊、惡心嘔吐、 腹痛、呼吸困難，接著譫妄和直 覺喪失，數(shù)小時(shí)至數(shù)日后失明。 第六節(jié) 白酒中甲醇的測(cè)定 甲醇最突出的毒性是對(duì)視神經(jīng) 作用，中毒劑量因人而異，一 般78mL純甲醇可致失明， 30100mL可致死 酒中甲醇含量在2.4 41.1g/100mL，因而蒸餾酒必 須嚴(yán)可控制甲醇含量； 我國(guó)規(guī)定

50、： 薯干酒甲醇0.12g/L; 谷類酒甲醇0.04g/L。 蒸餾酒中甲醇含量測(cè)定有氣 相色譜法和品紅亞硫酸比 色法 第六節(jié) 白酒中甲醇的測(cè)定 白酒中甲醇的測(cè)定常采用品紅亞硫酸比色法； 原理 甲醇在磷酸溶液中被高錳酸鉀氧化為甲醛，過量的 高錳酸鉀及在反應(yīng)中產(chǎn)生的二氧化錳，在硫酸環(huán)境 下被草酸還原，甲醛再與無色品紅亞硫酸試劑作用 生成藍(lán)紫色化合物，在波長(zhǎng)590nm處有最大吸收。 試劑 高錳酸鉀磷酸溶液 草酸硫酸溶液 品紅亞硫酸溶液 10mg/mL、0.50mn/mL甲醇標(biāo)準(zhǔn)和標(biāo)準(zhǔn)使用溶液 60%無甲醇的乙醇溶液 100g/L亞硫酸鈉溶液 第六節(jié) 白酒中甲醇的測(cè)定 儀器 分光光度計(jì) 操作方法 參見教

51、材P251，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線然后測(cè)定樣品 計(jì)算 100 1000 V m X 式中 X樣品中甲醇的含量(g/100mL); m測(cè)定樣品中甲醇的質(zhì)量(mg); V樣品體積(mL) 第七節(jié) 動(dòng)物性食品中獸藥殘留的測(cè)定 概述 獸藥是指用于預(yù)防治療診斷動(dòng)物疾病或有目的地調(diào) 節(jié)動(dòng)物生理機(jī)能的物質(zhì)(含藥物飼料添加劑)； 獸藥殘留：對(duì)食品動(dòng)物用藥后動(dòng)物產(chǎn)品的任何食用 部分中的原型藥物或/和其代謝產(chǎn)物； 獸藥最高殘留限量(MRL)對(duì)食品動(dòng)物用藥后產(chǎn)生的允 許存在與食品表面或內(nèi)部的該獸藥殘留的最高量(濃 度)(以鮮重計(jì)mg/Kg或g/Kg)； 獸藥在動(dòng)物源食品中殘留超標(biāo)會(huì)給人體健康帶來不 利影響，主要表現(xiàn)為毒性作用

52、、過敏反應(yīng)、變態(tài)反 應(yīng)、細(xì)菌耐藥性、菌群失調(diào)、致畸作用、致癌作用、 致突變作用、激素作用等。 第七節(jié) 動(dòng)物性食品中獸藥殘留的測(cè)定 獸獸 藥藥 抗生素類藥物抗生素類藥物 磺胺類藥物磺胺類藥物 硝基呋喃類藥物硝基呋喃類藥物 抗寄生蟲類藥物抗寄生蟲類藥物 激素類藥物激素類藥物 7.1 畜禽肉中抗生素殘留量的測(cè)定 原理 樣品提取微孔濾膜過濾后直接進(jìn)樣，用反相色譜分 離紫外檢測(cè)器檢測(cè)，與標(biāo)準(zhǔn)樣品比較定量，出峰順 序依次為土霉素、四環(huán)素、金霉素，標(biāo)準(zhǔn)加入法定 量。 試劑 乙腈 0.01mol/L磷酸二氫鈉溶液、5%高氯酸溶液 各1mg/mL土霉素、四環(huán)素、金霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.1mg土霉素+0.1mg四環(huán)素

53、+0.2mg金霉素/mL混標(biāo)溶 液 儀器 高效液相色譜儀紫外檢測(cè)器 7.1 畜禽肉中抗生素殘留量的測(cè)定 操作方法 提取凈化 色譜條件 柱：ODS-C18 (5m), 6.2mm15cm 檢測(cè)波長(zhǎng)：355nm；靈敏度：0.002AUFS 柱溫：室溫；流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量：10L 流動(dòng)相：乙腈+0.01mol/L磷酸二氫鈉(35+65)，用30 (V/V)硝酸溶液調(diào)節(jié)pH至2.5，用前脫氣10min。 計(jì)算 1000 1000 m A X 式中式中 X樣品中抗生素含量樣品中抗生素含量(mg/Kg) A樣品溶液測(cè)得抗生素質(zhì)量樣品溶液測(cè)得抗生素質(zhì)量(g) m樣品質(zhì)量樣品質(zhì)量(g) 7.2

54、畜禽肉中己烯雌酚殘留量的測(cè)定 原理 樣品勻漿后甲醇提取過濾，注入高效液相色譜紫外檢 測(cè)，與標(biāo)準(zhǔn)樣品比較定量。 試劑 甲醇、磷酸、0.043mol/L磷酸二氫鈉溶液 1.0mg/mL、100g/mL的己烯雌酚標(biāo)準(zhǔn)溶液和標(biāo)準(zhǔn)使用 液 儀器 高效液相色譜儀紫外檢測(cè)器 小型絞肉機(jī)、粉碎機(jī)、電動(dòng)振蕩機(jī)和離心機(jī) 操作條件 提取凈化 7.2 畜禽肉中己烯雌酚殘留量的測(cè)定 色譜條件 柱：CLC-ODS-C18 (5m), 6.2mm15cm不銹鋼柱 檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm；靈敏度：0.04AUFS 柱溫：室溫；流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量：20L 流動(dòng)相：甲醇+ 0.043mol/L磷酸二氫鈉(70+30)

55、，用磷酸調(diào) 節(jié)pH至5，用前脫氣10min。磷酸二氫鈉溶液用前過0.45 m濾膜。 10001000 10001000 1 2 V V m A X 雌激素標(biāo)準(zhǔn)色譜圖雌激素標(biāo)準(zhǔn)色譜圖 1.溶劑峰溶劑峰 2.雜質(zhì)峰雜質(zhì)峰 3.己烯雌酚標(biāo)準(zhǔn)峰己烯雌酚標(biāo)準(zhǔn)峰 7.3 動(dòng)物性食品中鹽酸克倫特羅殘留量的測(cè)定 概述 鹽酸克倫特羅，俗稱“瘦肉精”，可用與治療哮喘； 鹽酸克倫特羅可以促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，改善動(dòng)物體內(nèi)脂 肪分配，增加瘦肉率； 我國(guó)曾出現(xiàn)“瘦肉精”中毒事件，1997年我國(guó)明令 禁止畜牧生產(chǎn)中使用“瘦肉精”，但是仍有非法使 用存在； 檢測(cè)方法 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T5009.192-2003)規(guī)定三種檢測(cè)方法

56、氣質(zhì)聯(lián)用法 高效液相色譜法 酶聯(lián)免疫法(ELISA篩選法) 人有了知識(shí)，就會(huì)具備各種分析能力， 明辨是非的能力。 所以我們要勤懇讀書，廣泛閱讀， 古人說“書中自有黃金屋。 ”通過閱讀科技書籍，我們能豐富知識(shí)， 培養(yǎng)邏輯思維能力； 通過閱讀文學(xué)作品，我們能提高文學(xué)鑒賞水平， 培養(yǎng)文學(xué)情趣； 通過閱讀報(bào)刊，我們能增長(zhǎng)見識(shí)，擴(kuò)大自己的知識(shí)面。 有許多書籍還能培養(yǎng)我們的道德情操， 給我們巨大的精神力量， 鼓舞我們前進(jìn)。 河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院精品課程-食品分析 2.1.1 動(dòng)物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量 的測(cè)定 原理 樣品處理后，用氣相色譜法測(cè)定。在一定溫度下，載氣攜帶氣化后的樣品， 通過色譜柱，被逐一分離，隨即通過電子捕獲器，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法 定量。 20種有機(jī)氯農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分色譜圖種有機(jī)氯農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分色譜圖 1.BHC 2. BHC 3. BHC 4.五氯硝基苯五氯硝基苯 5.BHC 6.七氯七氯 7.艾氏劑艾氏劑 8.除