乾元浩生產(chǎn)實(shí)習(xí)報(bào)告

1、環(huán)境與生物工程學(xué)院畢業(yè)實(shí)習(xí)報(bào)告專(zhuān) 業(yè)： 姓 名： 學(xué) 號(hào)： 實(shí)習(xí)地點(diǎn)： 乾元浩生物公司南京生物藥廠指導(dǎo)老師： 實(shí)習(xí)日期： 一. 實(shí)習(xí)目的本次乾元浩生物公司南京制藥廠生產(chǎn)實(shí)習(xí)是對(duì)我們大學(xué)四年學(xué)習(xí)情況的檢驗(yàn)，是知識(shí)與實(shí)踐的一次結(jié)合。其目的是：（1）使我們了解生物公司的生產(chǎn)環(huán)境，掌握生產(chǎn)概況。工廠與實(shí)驗(yàn)室不一樣，大批量的生產(chǎn)特性注定了生產(chǎn)環(huán)境與概況不同于實(shí)驗(yàn)室。通過(guò)實(shí)習(xí)能夠讓我們了解生物公司的生產(chǎn)環(huán)境，這對(duì)于即將步入社會(huì)參加工作的我們顯得尤為重要。（2）對(duì)典型的生物技術(shù)有最直接、最直觀的了解。工業(yè)生產(chǎn)中使用最廣泛、最典型的生物技術(shù)是我們已知的，因而實(shí)習(xí)能夠讓我們對(duì)這些技術(shù)有更直接、更深刻的認(rèn)識(shí)。對(duì)于

2、這些技術(shù)手段的原理也能夠得到更清晰的理解。（3）將所學(xué)理論聯(lián)系實(shí)際，印證、鞏固和加深所學(xué)基本理論知識(shí)和專(zhuān)業(yè)知識(shí)。為我們后續(xù)走上工作崗位打下基礎(chǔ)。實(shí)習(xí)是理論教學(xué)的補(bǔ)充和完善，是我們開(kāi)始接觸社會(huì)、接觸工作的窗戶(hù)。在實(shí)習(xí)的過(guò)程中，理論知識(shí)與實(shí)踐結(jié)合在一起，這對(duì)于今后的工作也是具有重要意義的。二. 實(shí)習(xí)單位及崗位介紹1.實(shí)習(xí)單位乾元浩南京生物藥廠系乾元浩生物股份有限公司下屬生產(chǎn)企業(yè)，始建于1931年，是中國(guó)最早從事獸用生物制品研究與生產(chǎn)的企業(yè)。1978年定名為“南京藥械廠”，是農(nóng)業(yè)部直屬獸醫(yī)生物制品生產(chǎn)企業(yè)。1998年更名為“中牧股份南京藥械廠”。2004年更名為“乾元浩南京生物藥廠”。其是中國(guó)第一家

3、動(dòng)物疫苗制造工廠，最早采用凍干保護(hù)劑的疫苗企業(yè)。乾元浩南京廠概況：工廠地點(diǎn)位于南京市雨花臺(tái)區(qū)小行路33號(hào)，總占地面積300畝，具有3個(gè)GMP車(chē)間，9條疫苗生產(chǎn)線，總投資近億元。2.崗位介紹乾元浩南京生物藥廠共三個(gè)GMP車(chē)間，本次我們小組實(shí)習(xí)地在第五車(chē)間。本車(chē)間于1989年由農(nóng)業(yè)部投資1700萬(wàn)元，按當(dāng)時(shí)所理解的美國(guó)GMP標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)的第一個(gè)準(zhǔn)GMP生物制品生產(chǎn)車(chē)間。2008年乾元浩投資2000萬(wàn)元進(jìn)行改造，并于2009年4月通過(guò)農(nóng)業(yè)部GMP驗(yàn)收。本車(chē)間有豬瘟細(xì)胞活苗生產(chǎn)線，細(xì)菌活苗生產(chǎn)線，組織活苗生產(chǎn)線，豬瘟淋脾生產(chǎn)線。本次作為實(shí)習(xí)生，在車(chē)間主要工作是學(xué)習(xí)一些基本操作技術(shù)，并且參觀認(rèn)識(shí)生產(chǎn)流水線上

4、的各個(gè)環(huán)節(jié)設(shè)備以及工作原理，完成車(chē)間主任布置的工作任務(wù)。三. 實(shí)習(xí)安排實(shí)習(xí)安排計(jì)劃表日期實(shí)習(xí)項(xiàng)目3月7日安全生產(chǎn)培訓(xùn)以及企業(yè)概況介紹3月8日第五車(chē)間 車(chē)間概況了解及生產(chǎn)設(shè)備參觀3月9日-10日第五車(chē)間粗洗間參觀實(shí)踐3月11日、14日-17日第五車(chē)間貼簽間參觀實(shí)踐3月18日全廠生產(chǎn)及設(shè)備參觀四. 實(shí)習(xí)內(nèi)容及過(guò)程本次實(shí)習(xí)期間，在車(chē)間主任等人的幫助下，我們有幸參與了整個(gè)生產(chǎn)流程。對(duì)于企業(yè)來(lái)說(shuō)，安全生產(chǎn)是一條紅線。雖然我們是以實(shí)習(xí)的名義去公司，公司的人力資源部仍舊給我們進(jìn)行了安全生產(chǎn)培訓(xùn)。從我們專(zhuān)業(yè)的角度來(lái)說(shuō)，生物制品與化學(xué)制品的危害與污染是極大的，所以公司特別重視安全問(wèn)題是一家讓人放心的企業(yè)。安全生

5、產(chǎn)離不開(kāi)各種規(guī)章制度，乾元浩南京生物藥廠在這方面取得了矚目的成就。公司在2002年12月率先通過(guò)農(nóng)業(yè)部獸藥GMP認(rèn)證，成為國(guó)內(nèi)首家通過(guò)GMP認(rèn)證的獸用生物制品中資企業(yè)，也是國(guó)內(nèi)首家通過(guò)GMP動(dòng)態(tài)驗(yàn)收的獸用生物制品企業(yè)。公司采用各種先進(jìn)的工業(yè)生產(chǎn)管理技術(shù)、各種先進(jìn)的檢測(cè)手段，在質(zhì)量把控、安全生產(chǎn)上取得了長(zhǎng)足的進(jìn)步。安全生產(chǎn)培訓(xùn)后，來(lái)到了我們的定點(diǎn)實(shí)習(xí)單位第五車(chē)間。車(chē)間負(fù)責(zé)人帶領(lǐng)我們參觀了車(chē)間外圍生產(chǎn)設(shè)備。并通過(guò)監(jiān)控錄像了解生產(chǎn)進(jìn)程。整個(gè)生產(chǎn)車(chē)間由粗洗間，分離間，精洗間，無(wú)菌間，接種間，培養(yǎng)間，軋蓋間，貼標(biāo)間組成。車(chē)間的主要環(huán)節(jié)都有監(jiān)控，可以很好的預(yù)防意外的發(fā)生。監(jiān)控中可以看到那些忙碌的工人，身穿

6、藍(lán)色工作服的他們正在一絲不茍的進(jìn)行生產(chǎn)，這正是我們今后工作時(shí)應(yīng)該具備的品德。參觀完外圍生產(chǎn)設(shè)備后，進(jìn)一步參觀了粗洗間、貼簽間。因生產(chǎn)車(chē)間要保持嚴(yán)格的無(wú)菌環(huán)境，并且生產(chǎn)的疫苗毒性較強(qiáng)，進(jìn)入核心區(qū)域必須更換工作服且進(jìn)行幾次消毒處理，無(wú)法進(jìn)入?yún)⒂^。在參觀外圍生產(chǎn)設(shè)備時(shí)，我們發(fā)現(xiàn)在第五車(chē)間周?chē)胁簧俚妮o助設(shè)備，用于保證生產(chǎn)環(huán)節(jié)的正常進(jìn)行。其中包括蒸汽發(fā)生器，多效整流器，空氣壓縮機(jī)，真空冷凍干燥機(jī)等。車(chē)間用水主要分為三類(lèi)：蒸餾水，純化水和注射用水。其純凈程度依次增加，所配置的疫苗必須使用注射用水。各種等級(jí)的水由不同的管道輸送，分配到各個(gè)需要的崗位。比如，我本人在粗洗間實(shí)習(xí)了兩天，主要負(fù)責(zé)疫苗分裝瓶的洗滌

7、工作。瓶子洗滌就是依次用這幾類(lèi)水進(jìn)行清洗，當(dāng)然，都是在超聲中進(jìn)行的，這樣可以將附著在瓶壁內(nèi)的微小雜質(zhì)去除干凈。洗滌之后的瓶子進(jìn)入高壓蒸汽滅菌箱中滅菌?？諝鈮嚎s機(jī)，空氣凈化器，風(fēng)機(jī)等為車(chē)間提供正壓，以保證進(jìn)入車(chē)間的空氣清潔。當(dāng)然，即使是在車(chē)間內(nèi)部，接種室，洗滌間等隔離處也會(huì)有壓差測(cè)量?jī)x，這樣更容易將壓力控制在適宜的范圍內(nèi)。真空冷凍干燥機(jī)用來(lái)將疫苗干燥成固體，制成成品。之后將固體疫苗按照固定的質(zhì)量分裝到藥瓶中。車(chē)間里面的冷凍干燥機(jī)體積很大，因此一次性處理量也很大。另外，所有的設(shè)備都是至少有兩臺(tái)以上，工作時(shí)間都是一臺(tái)工作，另外的作為備用設(shè)備。本車(chē)間冷干機(jī)的型號(hào)為NLG-22型真空冷凍干燥機(jī)。車(chē)間主要

8、生產(chǎn)的疫苗是：豬瘟活疫苗。這種疫苗的工藝規(guī)程如下：1 毒種1.1 制造本品用的毒種為豬瘟兔化弱毒株，基礎(chǔ)種子由中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所鑒定、保管和供應(yīng)。1.2 生產(chǎn)用毒種制備1.2.1 毒種繁殖1.2.1.1 脾毒繁殖1.2.1.1.1 接種 將基礎(chǔ)種子用滅菌生理鹽水稀釋50倍，接種于發(fā)育良好的敏感家兔（體重1.53Kg），每兔耳靜脈注射1毫升；家兔在接種前，至少測(cè)溫觀察3日，每日上、下午各測(cè)體溫一次，選用體溫正常、溫差波動(dòng)不大的家兔。1.2.1.1.2 測(cè)溫觀察家兔接種后，上、下午各測(cè)體溫一次，24小時(shí)后，每隔6小時(shí)測(cè)體溫一次。1.2.1.1.3 毒種收獲選擇定型熱反應(yīng)兔，從體溫下降及其以后的24

9、小時(shí)內(nèi)剖殺。以無(wú)菌操作采取脾臟冷凍或凍干保存，作為生產(chǎn)用毒種。1.2.1.2 細(xì)胞毒繁殖 用細(xì)胞維持液，將新鮮脾毒制成0.30.5的懸液，接種生長(zhǎng)良好的牛睪丸單層細(xì)胞，置36.537繼續(xù)培養(yǎng)。每隔45天收獲換液一次，取二收、三收細(xì)胞培養(yǎng)毒液作為生產(chǎn)用毒種。1.2.2 毒種鑒定1.2.2.1 對(duì)家兔的感染性將毒種用滅菌生理鹽水作50倍稀釋?zhuān)o脈接種家兔4只，每只1毫升。接種后測(cè)溫觀察96小時(shí)，僅使家兔產(chǎn)生熱反應(yīng)，不致死家兔。1.2.2.2 病毒含量毒種對(duì)家兔的最小感染量為10-5/1ml；1.2.2.3 安全性脾毒用滅菌生理鹽水稀釋10倍，細(xì)胞毒用原液接種無(wú)豬瘟中和抗體的健康敏感豬4頭，每頭肌

10、肉注射5ml，測(cè)溫觀察21天，應(yīng)無(wú)異常反應(yīng)。1.2.2.4 純凈毒種應(yīng)無(wú)細(xì)菌、霉菌、支原體及其它外源病毒污染。1.2.2.5 特異性將毒種用滅菌生理鹽水稀釋1000倍，與等量的抗豬瘟病毒特異性血清在1015中和1小時(shí)，同時(shí)設(shè)立陽(yáng)對(duì)照組（病毒對(duì)照）和陰性對(duì)照組（生理鹽水）；分別接種家兔2只，每兔耳靜脈注射1ml。測(cè)量體溫反應(yīng)情況，除陽(yáng)性對(duì)照組應(yīng)出現(xiàn)熱反應(yīng)外，其余兩組在接種后120小時(shí)內(nèi)不引起熱反應(yīng)。1.2.3 毒種保存 在-20以下保存，脾毒不超過(guò)25日，細(xì)胞毒不超過(guò)半年，凍干毒不超過(guò)2年。1.2.4 毒種繼代脾毒不超過(guò)5代，細(xì)胞毒不超過(guò)3代。2 疫苗制造2.1 犢牛睪丸單層細(xì)胞的制備2.1.1

11、 原代細(xì)胞的制備 選用非豬瘟疫區(qū)，無(wú)口蹄疫、粘膜病等傳染病地區(qū)的14日齡健康小公牛，以無(wú)菌手術(shù)采取牛睪丸，置于含1000單位/毫升雙抗的漢克氏液內(nèi)。將采取的睪丸除去包膜、睪丸內(nèi)皮部分，剪成23毫米大小的組織塊，用胰酶消化制成細(xì)胞懸液，分裝于細(xì)胞瓶中，每瓶分裝量為轉(zhuǎn)瓶的1/10，置36.537溫室中轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)，一般細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)開(kāi)始分裂，7296小時(shí)形成致密單層。2.1.2 次代細(xì)胞的制備將生長(zhǎng)良好的原代細(xì)胞瓶?jī)?nèi)營(yíng)養(yǎng)液倒凈，加入EDTA胰酶分散液150毫升（瓶容量的1%），輕輕滾動(dòng)轉(zhuǎn)瓶，一旦發(fā)現(xiàn)瓶壁模糊、細(xì)胞順瓶壁下滑或細(xì)胞呈星狀的拉網(wǎng)等現(xiàn)象時(shí)，倒去分散液，加入乳漢液，搖勻，形成細(xì)胞懸液，分裝至

12、46個(gè)細(xì)胞瓶中。2.2 制苗毒液的制備2.2.1 接種 將生產(chǎn)用毒種接種于生長(zhǎng)良好的犢牛睪丸次代細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶中，按轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)液液量的0.20.4%接入脾毒種或35%生產(chǎn)用細(xì)胞毒種，置36.537溫室中轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)。2.2.2 收獲 接毒后5日作第一次收獲換液，以后每隔4日收獲換液一次，全收時(shí)可適當(dāng)增加12天。收獲的毒液裝入滅菌容器內(nèi)，送20保存。2.3 半成品檢驗(yàn)2.3.1 無(wú)菌檢驗(yàn) 各收次細(xì)胞毒液分別取樣，進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn)，應(yīng)無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。2.3.2 病毒含量測(cè)定 各收次細(xì)胞毒逐瓶抽樣組批混合，用家兔進(jìn)行毒價(jià)測(cè)定，每1ml應(yīng)含病毒80000個(gè)家兔感染量，方可用于配制疫苗。2.4 配苗與分裝 將檢驗(yàn)合格的細(xì)胞

13、毒液，混合于同一容器內(nèi)，按設(shè)計(jì)頭份，加入一定比例凍干穩(wěn)定劑，同時(shí)加入適量的抗生素，充分混合后，定量分裝進(jìn)行冷凍真空干燥。在參觀完設(shè)備及了解制造規(guī)程之后，我們主要活動(dòng)區(qū)域還是在粗洗間和貼簽間。本車(chē)間共兩個(gè)粗洗間，一個(gè)是裝藥瓶的粗洗車(chē)間（一樓），另一個(gè)是發(fā)酵罐粗洗間（二樓）。在粗洗間，為了保持車(chē)間的清潔，我們進(jìn)入必須時(shí)穿戴鞋套。正因?yàn)槿绱耍?chē)間地面幾乎一塵不染。房間的地面使用的是環(huán)氧地坪漆，具有耐磨，耐壓，耐沖擊，耐強(qiáng)酸，防水，防塵，防滑以及防靜電，防電磁波等特性。該車(chē)間使用這種地面時(shí)為了保持室內(nèi)地面整體無(wú)縫，易清洗，不集聚灰塵、細(xì)菌，以滿(mǎn)足該車(chē)間的無(wú)菌要求。一樓粗洗間主要是清洗裝疫苗成品的小瓶子

14、。瓶子是從山東臨淄運(yùn)送過(guò)來(lái)，在倉(cāng)庫(kù)分裝到運(yùn)送盤(pán)里面，然后統(tǒng)一擺放在運(yùn)送車(chē)?yán)锩?。運(yùn)送到粗洗間后，進(jìn)入粗洗設(shè)備。在這過(guò)程中，我主要參與的是在倉(cāng)庫(kù)對(duì)瓶子進(jìn)行分裝。主要是配合幾個(gè)有經(jīng)驗(yàn)的老師傅把裝瓶子的盤(pán)子擺到運(yùn)送箱里。師傅們的工作效率相當(dāng)高。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的磨合后，他們不是單獨(dú)作戰(zhàn)了。而是像流水線作業(yè)一般，工作效率很高。二樓粗洗間主要是進(jìn)行發(fā)酵罐的初步清洗，以及對(duì)干燥好的發(fā)酵罐封口，瓶塞包扎滅菌處理。進(jìn)入粗洗間的第一天，車(chē)間主任給我們安排了發(fā)酵瓶封口滅菌的任務(wù)。在實(shí)驗(yàn)室中，學(xué)習(xí)過(guò)發(fā)酵罐封口包扎滅菌處理，對(duì)于這次工作我們都是手到擒來(lái)。由于工作量有些大，大家商量過(guò)后決定進(jìn)行流水線操作。搬運(yùn)瓶子，遞繩子，折疊

15、封口紙張，有條不紊的完成了第一項(xiàng)任務(wù)。 第二項(xiàng)任務(wù)，就是學(xué)習(xí)清洗大型發(fā)酵罐。15L的發(fā)酵罐有專(zhuān)門(mén)的一套清洗設(shè)備，包括機(jī)械轉(zhuǎn)動(dòng)的刷子和專(zhuān)配的清洗池。每個(gè)罐子先加入適量洗潔劑，再加入少量自來(lái)水，將機(jī)械刷插入瓶?jī)?nèi)，打開(kāi)開(kāi)關(guān)，清洗1分鐘左右，然后將其取下并瓶口朝下插入清洗槽中，先后用熱自來(lái)水，去離子水，純凈水各沖洗12min。另外一種發(fā)酵罐的清洗方法略有不同，需要先將其灌滿(mǎn)水浸泡一兩天再進(jìn)行上述操作。第三項(xiàng)任務(wù)是進(jìn)行發(fā)酵環(huán)節(jié)其他設(shè)備的滅菌前包扎處理工作。包括長(zhǎng)塞子，短塞子，漏斗，橡皮管等設(shè)備。對(duì)于長(zhǎng)塞子和橡皮管，都需要先用布包裹，再用三層玻璃紙（手感與實(shí)驗(yàn)室的稱(chēng)量紙相似）進(jìn)行包扎；短塞子，漏斗直接用三

16、層玻璃紙包扎。繩子打結(jié)的手法都是一樣的。實(shí)習(xí)期間，車(chē)間還有南京工業(yè)大學(xué)的學(xué)生，我們每天都是一起合作完成任務(wù)的。實(shí)習(xí)的后半段時(shí)間都是在貼簽間度過(guò)的。這是疫苗生產(chǎn)的最后一個(gè)流程。即將疫苗對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽通過(guò)自動(dòng)化的機(jī)器貼在瓶身上，再打上生產(chǎn)日期和保質(zhì)期，基本上就可以出廠了。當(dāng)然，貼簽間并不是一直進(jìn)行工作的，而是根據(jù)實(shí)際情況排班的。只有一批疫苗生產(chǎn)出來(lái)裝瓶之后這里才會(huì)工作。本車(chē)間大概一周貼標(biāo)簽一次。貼簽所用的機(jī)器是根據(jù)成品瓶的規(guī)格專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)好的，需要人工操作的是將擺放好成品瓶放入轉(zhuǎn)盤(pán)，以及給機(jī)器更換標(biāo)簽紙帶和日期碼帶。我們一般都是被安排在搜集瓶子的崗位上。這份工作并不像表面理解的那么簡(jiǎn)單。首先必須要集中注意

17、力。瓶子不斷從傳送帶上調(diào)入疫苗運(yùn)轉(zhuǎn)箱，由于機(jī)器運(yùn)轉(zhuǎn)較快，所以必須把掉落堆積的瓶子盡快鋪平，以防溢出。另外，瓶子在傳送的過(guò)程中可能會(huì)摔倒，如果出現(xiàn)這種情況，就必須立即轉(zhuǎn)掉機(jī)器，將瓶子擺好，以免出狀況！當(dāng)然，對(duì)于我們這些新手，遇到這種情況基本都會(huì)感到緊張，還好有老師傅在，他們熟練的操作，每次都可以化險(xiǎn)為夷，有驚無(wú)險(xiǎn)。實(shí)習(xí)的第二個(gè)星期，主要的任務(wù)是將軋好蓋的瓶子擺放在托盤(pán)上，便于最后的貼簽工作。最后一天，丁主任帶我們參觀了所有車(chē)間，并給我們按照實(shí)際流程講解了整個(gè)產(chǎn)過(guò)程。整個(gè)車(chē)間的設(shè)計(jì)令人驚嘆，從原料進(jìn)入車(chē)間，進(jìn)行消毒，產(chǎn)品生產(chǎn)，到產(chǎn)品包裝，每個(gè)生產(chǎn)環(huán)節(jié)緊緊相扣，采用自動(dòng)化生產(chǎn)線，配合以先進(jìn)的儀器設(shè)備

18、，生產(chǎn)便利快捷。從源頭抓起,嚴(yán)把原材料質(zhì)量關(guān),從原料供應(yīng)商的選擇,資質(zhì)的認(rèn)證,到進(jìn)廠后的驗(yàn)收、報(bào)驗(yàn),檢驗(yàn)合格后方可放行。不管在哪個(gè)企業(yè)，都能看見(jiàn)現(xiàn)在需要越來(lái)越多的高技術(shù)人才來(lái)使用或操作相關(guān)設(shè)備和儀器。所以我們必須有效的利用我們的在校時(shí)間，認(rèn)真學(xué)習(xí)理論知識(shí)，并通過(guò)實(shí)習(xí)掌握所學(xué)知識(shí)在相關(guān)領(lǐng)域內(nèi)的應(yīng)用，加深對(duì)所學(xué)知識(shí)的應(yīng)用和理解。而且我還看到，做每一件事情都不是簡(jiǎn)簡(jiǎn)單單就能完成的，必須付出自己的辛勤和努力、勤于思考才能做好自己的事情。五. 實(shí)習(xí)總結(jié)及體會(huì)為期兩周的生產(chǎn)實(shí)習(xí)注定是一段難忘的時(shí)光，這里教會(huì)了我們很多實(shí)踐知識(shí)。彼時(shí)剛剛邁入大學(xué)，對(duì)于生物工程這個(gè)陌生的專(zhuān)業(yè)沒(méi)有太多的感覺(jué)。而到了生產(chǎn)實(shí)習(xí)的時(shí)候，我們已經(jīng)積累了一定的專(zhuān)業(yè)知識(shí)，對(duì)于專(zhuān)業(yè)也有了一定的認(rèn)識(shí)。不過(guò)，“紙上得來(lái)終覺(jué)淺，絕知此事要躬行?！睍?shū)本知識(shí)，或者說(shuō)理論知識(shí)只有與實(shí)際結(jié)合才能發(fā)揮出知識(shí)應(yīng)有的作用。首先，實(shí)驗(yàn)室與生產(chǎn)車(chē)間區(qū)別還是很大的。實(shí)驗(yàn)室里是要?jiǎng)?chuàng)意，是科研的地方，而生產(chǎn)車(chē)間的最終目的是獲得利益。如何才能獲得利益？這