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1、胰島素和腎上腺素對血糖的調(diào)節(jié)(葡萄糖氧化酶法)實驗目的:1.了解血糖濃度測定的原理和方法。2.了解并驗證胰島素和腎上腺素對血糖的調(diào)節(jié)。3.在實驗中培養(yǎng)嚴謹?shù)淖黠L和準確進行實際操作的能力,提高分析問題的能力。實驗原理:胰島素和腎上腺素是體內(nèi)對血糖調(diào)節(jié)的激素, 胰島素是唯一降低血糖的激素。 通過對實驗動物分別注射不同的激素,了解激素對血糖的調(diào)節(jié)影響。測定血糖的原理:在條件下 ,葡萄糖氧化酶可催化葡萄糖生成葡萄糖酸和H2O2,后者在H O 酶的作用下與苯酚、4-氨基安替吡啉生成紅色醌類物質(zhì),在505nm 處有最大吸收峰 ,吸22光度與葡萄糖含量成正比。實驗器材:器材 : 10mm 100mm 試管、
2、試管架、恒溫水浴、沸水浴、冰浴、蠟筆、721-分光光度計、兔臺、注射器、手術刀片。試劑 1.酶酚混合試劑主要成分:葡萄糖氧化酶H2O2 酶苯酚4-氨基安替吡啉2.葡萄糖標準儲存液(100mmol/L )3.葡萄糖標準應用液(5mmol/L )取葡萄糖標準儲備液5ml ,置于 100ml 容量瓶中,加苯甲酸溶液至刻度。4.胰島素注射液5.腎上腺素注射液實驗內(nèi)容與方法:一、注射藥物并取血:1.分別取2 只兔子,稱量體重,從耳緣靜脈采血2ML。只兔子按體重分別注射腎上腺素和胰島素,從注射藥物時開始計時,每隔一次,一共取血 4 次,每次 2ML。30 分鐘取血二、血糖的測定1取 16 150mm 試管 3 支按下表進行操作:試劑( ml )測定管標準管空白管血清或血漿葡萄糖標準應用液蒸餾水酶酚混合試劑2將上述各管混勻放入37水浴中加熱15 分鐘,用波長 505nm 分光光度計進行比色,空白管調(diào)零點讀取測定管與標準管吸光度。3計算測定管吸光血糖( mmol/L ) =標準管吸光標準管濃度4計算注射藥物前后血糖變化情況。實驗注意事項:血清加量要準,否則會影響到結果的準確性。實驗報告:
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