血凝儀SOP文件CA1500

1、全自動血凝分析系統(tǒng)標準操作規(guī)程sopS碼：頁數：頁制定人簽名：日期：審核人簽名：日期：批準人簽名：日期：生效日期：頒發(fā)日期：周期性審查：年一次修訂登記:編碼頁碼修訂內容修訂依據簽名/日期審查登記:審查日期簽名修訂依據簽名/日期精品文檔文件編虢：Lab.SOP-COA-0001版 次：01標準作業(yè)程序編修日期：05.09.15M 次：第K共K使用單位：王日今UULL毗I乂 CAI500編寫：1 .設備基本技術參數1. 1原理CA1500凝血儀儀器具有三種檢測原理方法：凝固法、發(fā)色底物法、免疫法1.1.1. 凝固法：基本測試原理是光學法的散射光檢測（用660nm光電二極管檢測散射光強度的變化），還

2、并用了百分比方式 的測定原理:當試劑加入標本后， 凝血開始啟動，隨之光學出現變化， 儀器把這種光學的變化描繪成凝固曲線：把開始出現凝集的起始點作為0%把完全凝固的終點作為100%把50喊化點處作為凝固時間（報告點），當測定含有干擾物（黃疸、溶血、高脂血癥等）或 低纖維蛋白原血癥的特殊標本時，其作為起始點的0%勺基線會隨之上移或下移，相當于扣除本底干擾.以上凝固法檢測原理所測定的項目包括了最常用的如PT、APTT FIB、TT、內源凝血因子（F VIII、XI、XI、XII ）,外源凝血因子（F II、V、VII、為 等1.1.2. 發(fā)色底物法的檢測原理：是通過測定產色物質的吸光度變化，以推算待

3、測物的含量，這 種方法屬生物化學法， 其基本原理是：試劑中為人工合成的含某種酶裂解位點的短肽，與產色物質如對硝基苯胺（pNA）連接，待檢物品中含有活性酶或無活性的酶原被加入的激活劑活化，在檢測過程中產色 物質被解離下來，使被檢物品出現顏色變化，其與被檢物含量呈一定的數量關系。此方法以酶學方法為基礎，可檢測項目包括如：AT-III 、Plg、PG PS FM PAI, Tpa, a 2-AP等。1.1.3. 免疫法：以被檢物作為抗原，制備相應的多克隆抗體，利用抗原抗體的特異結合反應來對被檢物進行定性和定量檢測，在凝血儀上多采用免疫比濁法測定，其基本原理是當一定波長的光線通過反應混合液時，被其中抗

4、原抗體反應形成的免疫復合物吸收而減弱，在一定范圍內，其吸光度與復合物量呈正相關，因此當抗體量固定時，根據復合物的吸光度值，即可推算出待測抗原含量，可測定項目 如D-二聚體、vWF因子、FDP等1 . 2 檢測環(huán)境要求：1.1.1 溫度：10。- 30 C;濕度：20 - 80% （ 無冷凝）1.1.2 電源：交流電 100-240V, 50/60HZ；功率：720VA1.1.3 請勿將儀器直接置于水、直射陽光、冷凝或大風的環(huán)境中，這樣會導致不正確的檢測結 果并導致儀器工作不正常而損壞1.1.4 儀器的背面和墻之間要始終保持20厘米以上的距離。否則，儀器會過熱，連接導管和連接負載過大而可能引發(fā)火

5、災。1. 3主要項目檢測指標：1.1.1 檢測范圍：PT, TT-一5180sec （最寬可設置到600秒）APTT5300sec（最寬可設置到600秒）Fbg 0.2510 g/L （V0.5g/L或 10g/L建議使用重稀釋重檢模式 ）D-Dimer Plus 5016000 ug/L （ 2000ug/L 需使用重稀釋重檢模式）1.1.2 重復性：PT, APTT &CV 2 %Fbg 9V 4 %因子4 5 %TT CV 司0 %AT-III CV5 %D-Dimer Plus CV 10 %1.1.3 檢測速度：單項測試時最快180T/h,組合時約120140T/h;2.標本使用3.

6、8%或3.2%（W/V）拘橡酸鈉溶液作為抗凝劑；血樣與抗凝劑的比例為 9:1 ,如果血球壓積55%則需調整這個比例， 方法是：0.00185 X血液毫升數 N100-壓積尸抗凝劑毫升數，按比例重抽血檢驗；血漿分離（如果不能立即測試，應盡快分離血漿）；采樣后60分鐘內進行；分離血漿應在 3000r/min 離心10分鐘，務使血小板去除；盛血漿容器應加塞，防止PH改變；血漿存放時間不能太久：溫度后效時間室溫Khr28C9hr-20 CKWeeks-70 C由months低溫保存的樣品，要在 37c迅速解凍，減低凝血因子的消耗，并立即測試。3試劑及配套消耗品3.1 試齊1J3.1.1 反應試劑：采用

7、CA1500血凝儀配套Siemens試劑，具體見相應項目要求3.1.2 系統(tǒng)清潔液：廠家配套SysmexClean I清潔液，用于檢測過程中樣品針、試劑針的沖洗;3.1.3 系統(tǒng)沖洗液：蒸儲水，實驗室自制，用于檢測過程中系統(tǒng)管路的沖洗3.1.4 : 稀釋液：配套 Siemens 的 Owerns Veronal Buffer 和 CA System Buffer ,用于檢測 過程中樣本的稀釋或定標曲線制定中標準血漿的稀釋；3.2 其它消耗品3.2.1 反應杯：廠家配套 Sysmex Reaction Tube 反應杯，貨號：SU-4004校準4.1 定期進行光學通道靈敏度校準檢測（半年一次，由

8、廠家工程師進行）4.2 定期進行溫度檢測校準（半年一次，或有相應溫度錯誤報警時進行，由廠家工程師執(zhí)行）4.3 定期進行機械位置檢查調校（半年一次，或有相應定位錯誤報警時進行，由廠家工程師執(zhí)行）5質捽5.1 質控液種類：Siemens Citrol I , II , III5.2 質控液的準備5.2.1 準備方式依照質控血漿配制要求：每瓶用1ml蒸儲水溶解，置室溫15分鐘后方可使用,室溫下4小時內使用完；5.2.2 溶解后未使用完的質控血漿注明開瓶日期，分裝保存于一20C, 3周內使用完。5.3 質控血漿使用時機5.3.1 每天做檢體之前5.3.2 做完儀器校正之后5.3.3 重要的維修之后5.

9、3.5 懷疑病患的報告有異常時5.4 質控血漿注意事項5.4.1 當作一般檢體操作。5.4.2 接受范圍（閥值）：按質控血漿說明書標注。5.5 超閥值之補救措施5.5.1 檢查質控血漿是否過期、失效5.5.2 檢查所使用的試劑、清潔、沖洗液、緩沖液等是否過期、失效5.5.3 若解決上述因素仍無法改善質控結果，必須考慮進行儀器校準及調校，聯系廠家工程師 進行。6操作步驟6.1 測試前準備：檢查試劑、清潔液、沖洗液、反應杯等足夠當日使用，儀器開機自檢OK無報三，6.2 開機：電源開關位于儀器左側，打開到ON狀態(tài)，開機后儀器自檢 約5分鐘，屏幕上方Not Ready 變?yōu)镽eady , 提示可進行檢

10、測；6.3 每日針沖洗：在主屏幕上選 Rinse Probe”，然后按下Execute ”進行針沖洗6.4 標本上機操作步驟：6.4.1 常規(guī)標本檢測：從主菜單 選Work List -出現第一架樣本工作清單輸入畫面，選ID. No. Entry ,輸入第一個樣本編號- 按相應實驗項目名稱鍵 （如PT 、APTT），輸入此標本每項要 測試項目則選中項目相應位置標記為 O,- 用T鍵，同樣輸入其他病人的編號、項目， 全部輸入完，儀器接受所輸入的工作任務，按鍵NEXT為下一樣本架，繼續(xù)輸入. 將檢體按編號順序擺入普通樣本架，放置好在進樣器上，在儀器Ready狀態(tài)下，按即可6.4.2 急診標本檢測：

11、在檢測過程中如有緊急檢體插入，按 STAT,選擇STAT Holder ,當提示是否要設置急診標本，選擇OK ,中間5個急診專用位置設置畫面出現，確認急診位置處指示燈為綠色，向內推打開急診小門，按順序放置好急診標本，按一下急診小門左側門按紐，門關閉。用ID No. Entry輸入相應急診樣本標號，如 6.3.1 一樣按項目名稱鍵為每標本選擇要測 試的項目，確認，按開始急診檢測。6.4.3 查看結果：返回主屏幕，檢測的項目如果由”變?yōu)椤芭睹鞔嗽囼炓呀浲瓿桑缓蟀聪耂tored Data（儲存結果）鍵，屏幕會換到結果顯示界面，按下邊第一個菜單Graph”，查看凝集曲線、吸光度、結果等，檢查是否有E

12、rror錯誤信息，有錯誤報警的標本需考慮重測6.4.4 關機前沖洗針：關機前需要洗針，按下 Rinse Probe”，然后按下Execute”6.4.5 關機：回到主屏幕下，切斷儀器電源，關閉打印機。7維護保養(yǎng)7.1 每日維護：7.1.1 清空已用過的反應杯：，從儀器左側取出廢杯箱- 倒空廢杯- 清潔廢杯箱并放回 清潔試劑位：打開遮光蓋- 把試劑架取出.將試劑架連同試劑放入冰箱，- 用棉紗布擦干凈試劑位冷凝水- 蓋好遮光蓋7.2 每周維護7.2.1 液路沖洗：儀器在Ready”狀態(tài)下，從主菜單按Special Menu- 按Maintain 鍵- 按 Rinse&Prepare鍵- 按Exec

13、ute鍵，運行此程序- 完成后按Return鍵返回7.2.2 清潔儀器：定期用紗布、棉纖等擦干凈儀器內外；包括放試劑位置、放反應杯位置、檢測通道和各處表面位置.7.3 需要時維護：7.3.1 當有壓力報警時，調整壓力：儀器在Ready狀態(tài)下,從主菜單按Special Menu- 按Maintain 鍵- 按Pressure Adjust.鍵，顯示壓力是否在其調整范圍內？ （1.0Kg和2.2Kg壓力可調，負壓不可調）若否，則打開儀器右側相應的壓力調整旋鈕（開鎖），旋動調整至允許范圍- 鎖緊旋鈕7.3.2 當提示Replace Lamp Unit ”,提示亮度不夠（2000小時壽命），需更換燈泡

14、：關機- 從 儀器右側取下燈泡外蓋及內蓋- 更換好的燈泡- 裝上內外蓋- 從主菜單按Special Menu- 再按Maintain - 再按Calib. Lamp-確認關上遮光蓋，按Execute鍵運行調整程序8健康和安全操作指南所有操作維護需注意以下：即始 請佩戴防護手套以避免接觸病原微生物.按當地的春害生物廢物處理規(guī)定丟棄廢液.更操下來的部件及用過的紗布、 你產棉笠和手套.9參考附件9.1 CA1500 OPERATOR MANUAL9.2 CA150噴規(guī)操作流程9.3 CA1500B常維護及常見故障處理6歡迎下載文件編虢：Lab.SOP-COA-0002標準操作規(guī)程編修日期：05.09

15、.15版 次：01通心/立K A懈rfn 9壬耐口什M 次：第 K共 K單位名稱：if百|七口卜刀減山!伯鶻口編寫：間測定（API 1）1 .項目名稱：活化部分凝血活酶時間（Activated Partial Thromboplastin Time, APTT2 .檢驗原理：2.1. 檢測原理：全自動血凝儀測定，散射光凝固法檢測一一血漿樣本經過一定時間的溫育后，加入反應試齊心儀器采用波長為660nm的光照射反應物，通過測量散射光光強度的改變來測定凝血過程（纖維蛋白原轉化為纖維蛋白）中的濁度變化，從散射光光強度的測定可得凝集曲線，再通過百分比原理方法求得凝血時間。2.2. 反應方法學溯源：37c

16、條件下，以糅花酸激活因子刈和XI,以腦磷脂（部分凝血活酶）代替血小板， 在C睜參與下，觀察貧血小板血漿凝固所需時間，即為活化部分凝血活酶時間，是內源凝血 系統(tǒng)較敏感和 常用的篩選試驗。3 .設備參數：3.1. 設備：儀器型號Sysmex CA1500全自動血凝分析儀3.2. 分析和計算參數：報告單位秒（S）3.3. 樣本量：50 d ,試齊J量：50ul激活劑，50ul CaCl 23.4. 檢驗時間：在最長檢驗時間之內測出結果，標準設置最長檢驗時間：190秒3.5. 重復性：CV2%4 .試劑及配套品：4.1. 激活劑：Cephaloplastin試齊 1J （ Dade? Actin ?

17、Activated Cephaloplastin Reagent）4.1.1. 商標：西門子（SIEMENS4.1.2. 包裝規(guī)格：10 X2ml4.1.3. 貨號：B4218-14.1.4. 成分：腦磷脂（從干燥兔腦粉中提?。┘尤牒芯彌_液、穩(wěn)定劑和防腐劑的1.0 M0-4M的糅花酸溶液4.1.5. 使用方法：液體試劑，直接使用.4.1.6. 儲存：沒開蓋試劑放28c存放至包裝有效期，開蓋后28 C有效期7天4.2. 氯化鈣溶液（Calcium Chloride Solution ）4.2.1. 商標：西門子（SIEMENS4.2.2. 包裝規(guī)格：10M5ml4.2.3. 貨號：ORHC37

18、4.2.4. 成分：0.025mol/L 的氯化鈣溶液精品文檔4.2.5. 使用方法 : 液體試劑 , 直接使用 .4.2.6. 儲存 : 沒開蓋試劑放28 存放至包裝有效期 , 開蓋后28 有效期 7 天4.3. 清洗液（ Clean I ） : 用于測定過程中的吸樣針沖洗4.3.1. 商標：希森美康（Sysmex）4.3.2. 包裝規(guī)格： 50ml4.3.3. 貨號：GSA500A4.3.4. 成分：1%次氯酸鈉及活性成分4.3.5. 使用方法 : 液體試劑 , 直接使用 .4.3.6. 儲存 : 沒開蓋試劑放28 存放至包裝有效期 , 開蓋后放于儀器上有效期僅 24 小時4.4. 校準質

19、控血漿( Ci-Trol ? )4.4.1. . 商標：西門子(SIEMENS)4.4.2. 貨號：Level 1 (Normal), 291070 10X1mlLevel 2 (Abnormal),29107110MmiLevel 3 (Abnormal), 291072 10x1ml4.4.3. . 使用方法 :1ml 蒸餾水溶解置室溫15分鐘后使用4.4.4. 儲存 : 室溫 : 2h, 28 : 4h, 冷凍分裝保存： -20 C 2 周,-70 C 6 個月5 . 操作步驟：5.1. 開機：開打印機電源 -開CA1500儀器右側電源-開機后機器進行自檢、預熱， 當屏幕 上顯示Read

20、y”時可以進行試驗5.2. 每日針沖洗：在主屏幕上選Rinse Probe”,然后按下Execute ”進行針沖洗5.3. 準備試劑：按照儀器試劑位置設定，把上述每項的試劑準備好，放在相應的位置5.4. 準備反應杯：打開儀器頂部反應杯儲存槽，查看反應杯是否夠量，需及時添加5.5. 準備標本：將室內質控和離心好的樣本放在相應的樣本架上（一個架子可放10 個樣本），準備好放在進樣器上5.6. 輸入試驗項目：按下主菜單上的Work List ”鍵，在試驗項目鍵點擊APTT,使APTT項目下顯示“一變?yōu)椤！保础盎騄將需要測試標本如上操作選擇；5.7. 輸入樣本號：按下“ID No.Entry ”，按

21、順序輸入樣本的序號或病人的病歷號5.8. 開始檢測：待一切準備工作就緒，按下屏幕右上角START鍵，儀器開始檢測5.9. 查看結果：返回主屏幕，檢測的項目如果由 “ ”變?yōu)?“ ”表明此試驗已經完成，然后按下 “Stored Date ”（儲存結果）鍵，屏幕會換到結果顯示界面，按下邊第一個菜單“Graph”，查看凝集曲線、吸光度、結果等，檢查是否有Error 錯誤信息，有錯誤報警的標本需考慮重測5.10. 關機前沖洗針：關機前需要洗針，按下 Rinse Probe”，然后按下 Execute”5.11. 關機：回到主屏幕下，切斷儀器電源，關閉打印機。6 . 參考范圍： APTT（sec） ：

22、2535s7 .臨床意義：常用來篩選內源性凝血系統(tǒng)（VIII、IX、XI、XII）及肝素抗凝治療的監(jiān)測6歡迎下載 。精品文檔7.1. APTT延長：見于先天性凝血因子缺乏（如血友病甲、乙，接觸因子XII、XI缺乏，VW等）；多種凝血子缺 乏（如嚴重肝病、維生素K缺乏、DIC纖溶亢進等）；血液中有坑凝物存在7.2. 對內源凝血途徑因子（皿、IX、XI）缺乏較CT敏感（血小板異常不影響 APTT）能檢出 W : C小于25%勺輕型血友病。對凝血酶原、纖維蛋白原缺乏則不夠敏感，故APTT延長的最常見疾病為血友病。此時可進一步做糾正試驗，即于患者血漿中加入1/4量的正常新鮮血漿、硫酸鋼吸附血漿或正常血

23、清（試劑參見凝血酶原消耗試驗的糾正試驗），再彳Ap APTT如正常血漿和吸附血漿能糾正延長的結果而血清不能糾正，則為因子皿缺乏；如吸附血漿不能糾正，其余兩者都能糾正，則為因子 IX缺乏；如三者都不能糾正，則為病理性循環(huán)抗 凝物質。7.3. APTTt短：見于DIC高刎和妊娠高血壓綜合癥等高凝狀態(tài)7.4. 是監(jiān)測肝素治療的首選指標：在使用肝素治療時，多用 APTT監(jiān)測藥物用量，一般以維持結果 為基礎值的2倍左右8 .標本要求：8.1. 使用3.8%拘橡酸鈉溶液作為抗凝劑；8.2. 血樣與抗凝劑的比例為9:1 ,如果血球壓積55%則需調整這個比例， 方法是：0.00185 X血液毫升數 PJ MA

24、NUAL ENTRY光標在 IS I處輸入ISI值精品文檔4.1.6 . 成分： Thromborel ? S Reagent 中包含 :a. 凍干人胎盤促凝血酶原激酶( lyophilized humanplacental thromboplastin )b. 氯化鈣(calcium chloride)c. 穩(wěn)定劑(stabilizers)d. 防腐劑( Preservatives )4.2. 清洗液( Clean I ) : 用于測定過程中的吸樣針沖洗4.2.1 商標：希森美康(Sysmex)4.2.2 包裝規(guī)格： 50ml4.2.3 貨號：GSA500A4.2.4 成分：1%次氯酸鈉及活

25、性成分4.2.5 使用方法 : 液體試劑 , 直接使用 .4.2.6 儲存 : 沒開蓋試劑放28存放至包裝有效期, 開蓋后放于儀器上有效期僅 24 小時4.3標準血漿：(Standard HumarPlasma)-用于PT%勺定標校準1.1 .1 商標：西門子(SIEMENS)1.2 .2 貨號： ORKL 134.1.3 包裝 :6X1ml4.1.4 . 使用方法 :1ml 蒸餾水溶解, 放置 15 分鐘后使用 4.1.5 儲存 :沒開配試劑放 28存放至包裝有效期 , 開配后保存條件:室溫：2h, 28 C: 4h, -20分裝冷凍保存：2周，-70 分裝冷凍保存：6個月1.4. 質控血漿

26、( Ci-Trol ? )1.4.1 . 商標：西門子(SIEMENS)1.4.2 貨號：Level 1 (Normal), 291070 10X1mlLevel 2 (Abnormal),29107110MmlLevel 3 (Abnormal), 291072 10 X1ml1.4.3 . 使用方法 :1ml 蒸餾水溶解置室溫15分鐘后使用1.4.4 儲存 : 沒開配試劑放 28 存放至包裝有效期 , 開配后保存條件: 室溫 : 2h, 28 :4h, 冷凍分裝保存： -20C 2 周,-70 C 6 個月5 . 操作步驟：5.1. 開機：開打印機電源 -開CA1500儀器右側電源-開機后

27、機器進行自檢、預熱， 當屏幕 上顯示Ready”時可以進行試驗5.2. 每日針沖洗：在主屏幕上選Rinse Probe”,然后按下Execute ”進行針沖洗5.3. 準備試劑：按照儀器試劑位置設定，把上述每項的試劑準備好，放在相應的位置5.4. 準備反應杯：打開儀器頂部反應杯儲存槽，查看反應杯是否夠量，需及時添加5.5. 準備標本： 將室內質控和離心好的樣本放在相應的樣本架上 (一個架子可放10 個樣本) ，準備好放在進樣器上5.6. 輸入試驗項目：按下主菜單上的 Work List ”鍵，在試驗項目鍵點擊PT,使PT項目下顯示“一”變?yōu)?。，按“或J將需要測試標本如上操作選擇；5.7. 輸入

28、樣本號：按下“ID No.Entry ”，按順序輸入樣本的序號或病人的病歷號5.8. 開始檢測：待一切準備工作就緒，按下屏幕右上角START鍵，儀器開始檢測5.9. 查看結果：返回主屏幕，檢測的項目如果由變?yōu)椤北砻鞔嗽囼炓呀浲瓿?，然后按下Stored Date（儲存結果）鍵，屏幕會換到結果顯示界面，按下邊第一個菜單Graph，查看凝集曲線、吸光度、結果等，檢查是否有Error錯誤信息，有錯誤報警的標本需考慮重測5.10. 關機前沖洗針：關機前需要洗針，按下 Rinse Probe”,然后按下Execute ”5.11. 關機：回到主屏幕下，切斷儀器電源，關閉打印機。6 .參考范圍：PT (se

29、c) : 10.813.5 sPT% : 803120%PTR : 0.85 - 1.15INR : 0.81.207 .臨床意義：7.1. PT 延長：7.1.1 外源凝血系統(tǒng)的因子 n、V、口、x和纖維蛋白原減低，如先天性某因子缺乏癥和低（無）纖維蛋白原血癥，但均很少見，獲得性的見于DIC、原發(fā)性纖溶、維生素K缺乏癥、肝臟 疾病等。7.1.2 .血循環(huán)中抗凝物質增加，如肝素或FDP增多等。7.2. PT 縮短：口服避孕藥、高凝狀態(tài)和血栓性疾病等。7.3. 用于香豆素類等口服抗凝劑的監(jiān)控7.3.1 一般認為以維持 PT值在參考值的2倍左右（1.32.5倍），或PTR為1.31.5 （最大不超

30、過2）為宜。7.3.2 . PT吸控制在40%上，減低到40%出血傾向。7.3.3 .不同情況下口服抗凝藥治療的最佳抗凝強度時INR的范圍：a. 術前兩周或術中口服抗凝藥，INR為1.53.0;b. 原發(fā)或繼發(fā)靜脈血栓的預防，INR為2 3;c. 活動性靜脈血栓、肺梗塞、復發(fā)性靜脈血栓的預防，INR為24;d. 動脈血栓栓塞的預防，心臟換瓣術后，INR為3-4.5 。8 .標本要求：8.1. 使用3.8%拘橡酸鈉溶液作為抗凝劑；8.2. 血樣與抗凝劑的比例為9:1 ,如果血球壓積20%55%則需調整這個比例，方法是：0.00185 X血液毫升數100-壓積尸抗凝劑毫升數；8.3. 血漿分離（如

31、果不能立即測試，應盡快分離血漿）；一采樣后60分鐘內進行；一分離血漿應在 3000r/min 離心10分鐘，務使血小板去除；8.4. 血漿保存條件：溫度后效時間室溫Khr28C9hr-20 CKWeeks-70 C由months8.5. 低溫保存的樣品，要在 37c迅速解凍，減低凝血因子的消耗，并立即測試。8.6. 所有與標本接觸的試管、吸管等均采用用塑料或硅化處理的。8.7. 拒收標本：嚴重溶血、黃疸、脂血或出現凝塊，距采集時間超過2小時并且沒有按要求儲存的9 .參考依據：CA150眸自動血凝儀使用手冊，試劑使用說明書1次迎下載精品文檔10.附件:10.1 CA1500常規(guī)操作流程10.2

32、. PT試劑使用說明書文件編虢：Lab.SOP-COA-0004版 次：01標準操作規(guī)程 血漿纖維蛋白原定量測定（Fib ）編修日期：05.09.15M 次：第 K共 K單位名稱：編寫：1 .項目名稱：纖維蛋白原（Fibinogen）2 .檢驗原理：2.1. 檢測原理：全自動血凝儀測定，散射光凝固法檢測原理一一血漿樣本經過一定時間的溫育后，加入反應試劑，儀器采用波長為660nm的光照射反應物，通過測量散射光光強度的改變來測定凝血過程 （纖維蛋白原轉化為纖維蛋白）中的濁度變化，從散射光光強度的測定可得凝集曲線，再通過百分比原理方法求得凝血時間.先用此方法分別測定不同 FIB濃度的標準血漿制定橫坐

33、標為凝血時間，縱坐標為Fib濃度的Fib標準曲線，在測定病人血漿時測定的凝血時間與標準曲線上對應的時間-濃度值一一對應，儀器則自動報告出 Fib含量（g/L）.2.2. 反應方法學溯源：纖維蛋白原測定（Clauss法）原理-37 C條件下，凝血酶將可溶性的血漿蛋白纖維蛋白原轉化為不溶性的多聚體纖維蛋白。當凝血酶濃度較高（約為100NIH/ml ）且纖維蛋白原濃度較低（0.050.8g/L ）時該反應決定于纖維蛋白原濃度，凝血酶凝血時間與纖維蛋白原濃度相比較呈線形關系。3 .設備參數：3.1. 設備：儀器型號Sysmex CA1500全自動血凝分析儀3.2. 分析和計算參數：報告單位秒（S）,F

34、ib定量g/L3.3. 樣本量：1/10稀釋標本100ul（10ul血漿+90ul緩沖液），試齊J量：50ul3.4. 檢驗時間：在最長檢驗時間之內測出結果，標準設置最長檢驗時間：190秒3.5. 重復性：CV4%4 .試劑及配套品：4.1. 反應試劑：凝血酶試劑（Thrombin Reagent）4.1.1 商標：西門子（SIEMENS4.1.2 包裝規(guī)格：10X5ml4.1.3 貨號：B4233-274.1.4 成分：牛凝血酶凍干粉（lyophilized preparation of bovine thrombin ）（近似 100 NIH units/ml ）1敢迎下載精品文檔4.1.

35、5 使用方法 :5ml 蒸餾水充分溶解后使用4.1.6 儲存 : 沒開配試劑放 28存放至包裝有效期 , 開配后保存條件: 28 : 5 天4.2. 緩沖液( Dade? OwrenS Veronal Buffer 或 CA System Buffer ) - 用于標本稀釋4.2.1 商標：西門子(SIEMENS)4.2.2 包裝規(guī)格：10 M5ml 或 1X500ml4.2.3 貨號：B4234-25 或 B4265-354.2.4 成分：a.2.84X102M的巴比妥鈉(sodium barbital)b.1.25X101M的氯化鈉(sodium chloride)c.PH7.35 0.1

36、4.2.5 使用方法 : 每次倒出剛夠當天使用的量放置于儀器上使用.4.2.6 儲存：沒開配試劑放 28c密封存放至包裝有效期，開蓋后放置儀器上保存：V24h,使用放置 時間太長的緩沖液會導致凝血時間延長即 Fib 含量測定偏低!4.3. 清洗液( Clean I ) : 用于測定過程中的吸樣針沖洗4.3.1 商標：希森美康(Sysmex)4.3.2 包裝規(guī)格： 50ml4.3.3 貨號：GSA500A4.3.4 成分：1%次氯酸鈉及活性成分4.3.5 使用方法 : 液體試劑 , 直接使用 .4.4 標準血漿 :( Standard HumanPlasma) - 用于 Fib 的定標校準4.4

37、.1 商標：西門子(SIEMENS)4.4.2 貨號： ORKL 134.4.4.3 包裝 :6X1ml4.4.4. 使用方法 :1ml 蒸餾水溶解, 放置 15分鐘后使用4.4.5 儲存 : 沒開配試劑放28 存放至包裝有效期, 開配后保存條件:室溫：2h, 28 C: 4h, -20C分裝冷凍保存:2周，-70 C分裝冷凍保存:6 個月4.5. 質控血漿( Ci-Trol ? )4.5.1 . 商標：西門子(SIEMENS)4.5.2 貨號：Level 1 (Normal), 291070 10X1mlLevel 2,291071 10X1mlLevel 3, 291072 10 X1ml

38、4.5.3 . 使用方法 :1ml 蒸餾水溶解置室溫15分鐘后使用4.5.4 儲存 : 沒開配試劑放28 存放至包裝有效期, 開配后保存條件: 室溫 : 2h, 28 :4h, 冷凍分裝保存： -20C 2 周,-70 C 6 個月5 . 操作步驟：5.1. 開機：開打印機電源 -開CA1500儀器右側電源-開機后機器進行自檢、預熱， 當屏幕 上顯示Ready”時可以進行試驗5.2. 每日針沖洗：在主屏幕上選Rinse Probe”,然后按下Execute ”進行針沖洗5.3. 準備試劑：按照儀器試劑位置設定，把上述每項的試劑準備好，放在相應的位置5.4. 準備反應杯：打開儀器頂部反應杯儲存槽

39、，查看反應杯是否夠量，需及時添加12歡迎下載。精品文檔10個樣本）準5.5. 準備標本：將室內質控和離心好的樣本放在相應的樣本架上（一個架子可放 備好放在進樣器上5.6. 輸入試驗項目：按下主菜單上的 WorkList ”鍵，在試驗項目鍵點擊 FIB ,使FIB項目下顯示“一” 變?yōu)榘础盎騄將需要測試標本如上操作選擇；5.7. 輸入樣本號：按下ID No.Entry ”，按順序輸入樣本的序號或病人的病歷號5.8. 開始檢測：待一切準備工作就緒，按下屏幕右上角START鍵，儀器開始檢測5.9. 查看結果：返回主屏幕，檢測的項目如果由”變?yōu)椤吧呙鞔嗽囼炓呀浲瓿桑缓蟀聪耂tored Date（儲存

40、結果）鍵，屏幕會換到結果顯示界面，按下邊第一個菜單Graph，查看凝集曲線、吸光度、結果等，檢查是否有Error錯誤信息，有錯誤報警的標本需考慮重測5.10. 關機前沖洗針：關機前需要洗針，按下 Rinse Probe”,然后按下Execute ”5.11. 關機：回到主屏幕下，切斷儀器電源，關閉打印機。6 .參考范圍：Fbg : 24g/L7 .臨床意義：7.1. Fib 減少見于：先天性低（無）纖維蛋白原血癥、嚴重肝臟疾病、原發(fā)性纖維蛋白溶解、DIC、異常纖維蛋白原血癥、新生兒及早產兒、某些產科意外、惡性腫瘤等。7.2. Fib 增高見于：各種血栓前狀態(tài)及血栓栓塞病、月經期及妊娠期、糖尿病

41、、動脈硬化、結締組織病、手術后、休克、癌腫、骨髓瘤、放射治療后等。8 .標本要求：8.1. 使用3.8%拘橡酸鈉溶液作為抗凝劑；8.2. 血樣與抗凝劑的比例為9:1 ,如果血球壓積55%則需調整這個比例，方法是：0.00185 X血液毫升數100-壓積尸抗凝劑毫升數；8.3. 血漿分離（如果不能立即測試，應盡快分離血漿）；一采樣后60分鐘內進行；一分離血漿應在 3000r/min 離心10分鐘，務使血小板去除；8.4. 血漿保存條件：溫度后效時間室溫Khr28C9hr-20 CKWeeks-70 C由months8.5. 低溫保存的樣品，要在 37c迅速解凍，減低凝血因子的消耗，并立即測試。8

42、.6. 所有與標本接觸的試管、吸管等均采用用塑料或硅化處理的。8.7. 拒收標本：嚴重溶血、黃疸、脂血或出現凝塊，距采集時間超過2小時并且沒有按要求儲存的9 .參考依據：CA150眸自動血凝儀使用手冊，試劑使用說明書10 .附件:10.1. CA1500常規(guī)操作流程10.2. . FIB試劑使用說明書編寫者：日期：科主任簽字:文件編虢：Lab.SOP-COA-0005標準操作規(guī)程編修日期：05.09.15版 次：01rfrr 而后 口d Psi。川1 之 / rTM 次：第 K共 K單位名稱：域皿叫H巾日例JE （ II）編寫：1 .項目名稱：血漿凝血酶時間測定（Thrombin time ,

43、 TT）2 .檢驗原理：2.1. 檢測原理：全自動血凝儀測定，散射光凝固法檢測原理 一一血漿樣本經過一定時間的溫育后，加入反應試劑，儀器采用波長為660nm的光照射反應物，通過測量散射光光強度的改變來測定凝血過程（纖維蛋白原轉化為纖維蛋白）中的濁度變化，從散射光光強度的測定可得凝集曲線，再通過百分 比原理方法求得凝血時間。2.2. 反應方法學溯源：受檢血漿中加入凝血酶試劑，使纖維蛋白原轉變?yōu)槔w維蛋白，觀察血漿凝固所需的時間即凝血酶時間。3 .設備參數：3.1. 設備：儀器型號Sysmex CA1500全自動血凝分析儀3.2. 分析和計算參數：凝血酶原時間-秒（S）3.3. 樣本量：50 d,試

44、齊J量：100ul03.4. 檢驗時間：在最長檢驗時間之內測出結果，標準設置最長檢驗時間：120秒3.5. 重復性：CV4%4 .試劑及配套品：4.1. .反應試劑：凝血活酶含鈣試劑（Test Thrombin Reagent ）4.1.1 商標：西門子（SIEMENS4.1.2 包裝規(guī)格：10X5ml,貨號： OWHM134.1.3 使用方法：每瓶用5ml專用緩沖液溶解，須放置室溫10分鐘后才使用 保存：未溶解試劑28 c至包裝有效期，試劑溶解后28 c : 7天 機上有效期（15C） : 10小時4.1.4 .成分：試劑成分為凝血酶凍干品4.2. .清洗液（Clean I）:用于測定過程中的吸樣針沖洗4.2.1 商標：希森美康（SysmeX）1紙迎下載精品文檔4.2.2 包裝規(guī)格： 50ml4.2.3 貨號：GS