(完整版)觀察DNA和RNA在細(xì)胞中分布的實(shí)驗(yàn)原理

1、觀察 DNA 和 RNA 在細(xì)胞中分布的實(shí)驗(yàn)原理：1.甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對 DNA 和 RNA 的親和力不同，甲基綠使 DNA 呈現(xiàn)綠色，吡 羅紅使 RNA 呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示 DNA 和 RNA 在細(xì)胞中的分布。2 . 鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時(shí)使染色休中的DNA 和蛋白質(zhì)分離，有利于 DNA 與染色劑結(jié)合。；購30乙水浴保溫5min,作用為配合鹽酸水解，鹽酸濃度，水浴溫度和保溫時(shí)間都會影響水解效果，如水解度 過低會影響后面染色效果 ， 解度過高則會嚴(yán)重破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu) ， 干擾 DNA 和 RNA 觀察;鹽酸水解的作用是

2、加速和有利 于,該步驟 可以省略 ， 但會增加染色環(huán)節(jié)時(shí)間 .水解當(dāng)中，主要是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 8%的鹽酸起作用。鹽酸的作用： 1.使染色體中的蛋白質(zhì)和 DNA 分離，易于染色（主）。2.使細(xì)胞膜的通透性改變，染色劑更易進(jìn)入細(xì)胞，進(jìn)而加快 染色速度。 烘干的作用：利于細(xì)胞貼在載玻片上，而不至于在水解和沖洗裝片的過程 中滑入溶液中（殺死細(xì)胞并不是烘干的本質(zhì)意圖） 。一、問題研究1.原理與解析（1） 真核細(xì)胞的 DNA 主要分布在細(xì)胞核內(nèi)， RNA 主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA 和 RNA 的親和力不同，甲基綠對 DNA 親和力強(qiáng)，使 DNA 顯現(xiàn)出綠色，而吡羅紅對 RNA 的親

3、和力強(qiáng)，使 RNA 呈現(xiàn)出紅色。用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細(xì)胞染色，可同時(shí)顯示DNA 和RNA 在細(xì)胞中的分布。（3）鹽酸的作用鹽酸能改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑的跨膜運(yùn)輸；鹽酸使染色體中的 DNA 與蛋白質(zhì)分離，便于 DNA 與染色劑的結(jié)合。注意事項(xiàng)1?材料的選擇選用的實(shí)驗(yàn)材料既要容易獲得，又要便于觀察；常用的觀察材料由人的口腔上皮細(xì)胞、洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞（為避免原有顏色的干擾，不可使用紫色表皮細(xì)胞）2.取材要點(diǎn) 取口腔上皮細(xì)胞之前，應(yīng)先漱口，以避免裝片中出現(xiàn)太多的雜質(zhì)； 取洋蔥表皮細(xì)胞時(shí)，盡量避免材料上帶有葉肉組織細(xì)胞。3.沖洗載玻片時(shí)水的流速要盡量慢，切忌直接用水龍頭沖洗。4.安全

4、要點(diǎn)用酒精燈烘烤載玻片時(shí)， 不要只集中于材料處， 而應(yīng)將載玻片在火焰上來回移動(dòng)，使載玻片均勻受熱，以免破裂；烘烤后的載玻片不要馬上放入盛有稀鹽酸的燒杯中，最好先自然冷卻1 分鐘。5.換用高倍鏡觀察材料時(shí)，只能用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)行調(diào)焦，切不可動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋。主要步驟 （ 以觀察口腔上皮細(xì)胞為例 ）1.取材滴：在潔凈的載玻片上滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的 NaCI 溶液；刮：用消毒牙簽在口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕地刮幾下；5分鐘;涂： 將牙簽上的碎屑涂抹在載玻片的生理鹽水中;烘: 將涂有口腔上皮細(xì)胞的載玻片在酒精燈的火焰上烘干。2冰解 解：將烘干的載玻片放入裝有 30ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸的小燒杯中，進(jìn)行材料的水解 保:將小燒杯放入裝有30C溫水的大燒杯中保溫 5分鐘。3.沖洗涂片 沖:用緩緩的蒸餾水沖洗載玻片10秒鐘; 吸:用吸水紙吸去載玻片上的水分。4.染色染：用2滴吡羅紅甲基綠混合染色劑滴在載玻片上，染色吸:吸去多余染色劑;5.觀察 低：在低倍物鏡下，