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1、會(huì)計(jì)學(xué)1高中教育專題課題高中教育專題課題DNA粗提取與鑒定粗提取與鑒定第1頁/共49頁第2頁/共49頁第3頁/共49頁第4頁/共49頁第5頁/共49頁第6頁/共49頁第7頁/共49頁哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞無細(xì)胞核及細(xì)胞器。液體培養(yǎng)基中的大腸桿菌的DNA量減少。魚卵是減數(shù)分裂的產(chǎn)物。第8頁/共49頁第9頁/共49頁第10頁/共49頁第11頁/共49頁第12頁/共49頁第13頁/共49頁第14頁/共49頁第15頁/共49頁第16頁/共49頁第17頁/共49頁第18頁/共49頁第19頁/共49頁第20頁/共49頁第21頁/共49頁第22頁/共49頁第23頁/共49頁第24頁/共49頁第25頁/共49頁第2
2、6頁/共49頁第27頁/共49頁第28頁/共49頁第29頁/共49頁第30頁/共49頁第31頁/共49頁第32頁/共49頁第33頁/共49頁第34頁/共49頁第35頁/共49頁第36頁/共49頁第37頁/共49頁第38頁/共49頁方法步驟 加入物質(zhì) 目的 1.制備雞血細(xì)胞液 檸檬酸鈉溶液 2.提取雞血細(xì)胞細(xì)胞核物質(zhì) 20 m1蒸餾水 幻燈片 18 3.溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA 2 m1L 的NaCI溶液40mL 幻燈片 18 4.析出含DNA的黏稠物 蒸餾水 5.濾取含DNA的黏稠物 6.將DNA的黏稠物再溶解 2 molL 的NaCl溶液20 mL 7.過濾含DNA的NaCl 溶液 8.提取含有
3、雜質(zhì)較少的 DNA 冷卻的95的酒精50 mL 幻燈片 18 A:(1)向試管中加入 2molL 的NaCl溶液5mL (2)加入DNA (3)4 mL二苯胺試劑 9.DNA的鑒定 B:(1)向試管中加入 2molL 的NaCl溶液5mL (2)4 mL二苯胺試劑 加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固使血細(xì)胞吸水破裂,釋放DNA溶解DNA稀釋NaCl溶液至0.14mol/L,使DNA最大限度地析出使含DNA的黏稠物留在紗布上使含DNA的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中除去含DNA的濾液中的雜質(zhì)析出DNA A出現(xiàn)藍(lán)色 B 無藍(lán)色第39頁/共49頁第40頁/共49頁第41頁/共49頁第42頁/共49頁第
4、43頁/共49頁第44頁/共49頁練習(xí)1、請解釋提取DNA的實(shí)驗(yàn)操作中主要的步驟的目的。答:提取DNA的第一步是材料的選取,其目的是一定要選取DNA含量較高的生物材料,否則會(huì)由于實(shí)驗(yàn)過程中或多或少的損失而造成檢測的困難;第二步是DNA的釋放和溶解,這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵,要盡可能使細(xì)胞內(nèi)的DNA全部溶解;第三步是DNA的純化,即根據(jù)DNA的溶解特性、對酶及高溫的耐受性的不同等特性,最大限度地將DNA與雜質(zhì)分開;最后一步是對DNA進(jìn)行鑒定,這是對整個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的檢測。第45頁/共49頁2、你認(rèn)為從細(xì)胞中提取某種特定的蛋白質(zhì)與提取DNA一樣容易嗎? 答:提取蛋白質(zhì)比提取DNA的難度大。這是因?yàn)?/p>
5、,與DNA相比,蛋白質(zhì)對溫度、鹽濃度、pH等條件要敏感得多,很容易失活;并且蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)多種多樣,理化性質(zhì)各不相同,使得蛋白質(zhì)的提取沒有一種統(tǒng)一的方法,只能根據(jù)特定蛋白質(zhì)的特性摸索提取的條件,設(shè)計(jì)特定的方法。第46頁/共49頁2.實(shí)驗(yàn)中NaCl的物質(zhì)的量濃度為2 molL和0.14 molL對DNA有何影響?1.在DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)過程中,兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是( )。A.稀釋血液、沖洗樣品B.使血細(xì)胞破裂、降低NaCl濃度使DNA析出C.使血細(xì)胞破裂、增大DNA溶解量 D.使血細(xì)胞破裂、提取含雜質(zhì)較少的DNA答:B答:前者是溶解DNA,后者是使DNA析出第47頁/共49頁3.DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)染成( ) A.磚紅色 B.橘黃色 C.紫色 D.藍(lán)色4.提取雞血中的DNA時(shí),為
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