生化檢驗(yàn)報(bào)告的審核

1、臨床生化檢驗(yàn)反應(yīng)原理臨床生化檢驗(yàn)反應(yīng)原理及報(bào)告的審核及報(bào)告的審核瀘州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科瀘州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 潘庭榮潘庭榮1實(shí)用精品課件PPT主要內(nèi)容主要內(nèi)容常見(jiàn)的生化反應(yīng)原理常見(jiàn)的生化反應(yīng)原理檢驗(yàn)報(bào)告審核普遍存在的問(wèn)題檢驗(yàn)報(bào)告審核普遍存在的問(wèn)題檢驗(yàn)報(bào)告審核的建議檢驗(yàn)報(bào)告審核的建議總結(jié)總結(jié)2實(shí)用精品課件PPT終點(diǎn)分析法（平衡法）終點(diǎn)分析法（平衡法） 連續(xù)監(jiān)測(cè)法連續(xù)監(jiān)測(cè)法比濁測(cè)定法比濁測(cè)定法一、常見(jiàn)的生化反應(yīng)原理一、常見(jiàn)的生化反應(yīng)原理3實(shí)用精品課件PPT 終點(diǎn)分析法是基于反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物的終點(diǎn)分析法是基于反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特征及其對(duì)光吸收強(qiáng)度的大小，對(duì)物質(zhì)進(jìn)吸收光譜特征及其對(duì)光吸

2、收強(qiáng)度的大小，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量的一類(lèi)分析方法。反應(yīng)混合物進(jìn)行一定時(shí)間行定量的一類(lèi)分析方法。反應(yīng)混合物進(jìn)行一定時(shí)間反應(yīng)后，達(dá)到平衡終點(diǎn)，即在顯色反應(yīng)處于穩(wěn)定階反應(yīng)后，達(dá)到平衡終點(diǎn)，即在顯色反應(yīng)處于穩(wěn)定階段時(shí)，監(jiān)測(cè)其顏色對(duì)光的吸收強(qiáng)度，以此計(jì)算待測(cè)段時(shí)，監(jiān)測(cè)其顏色對(duì)光的吸收強(qiáng)度，以此計(jì)算待測(cè)物濃度。分為一點(diǎn)、兩點(diǎn)終點(diǎn)法物濃度。分為一點(diǎn)、兩點(diǎn)終點(diǎn)法終點(diǎn)分析法終點(diǎn)分析法4實(shí)用精品課件PPT一點(diǎn)終點(diǎn)法一點(diǎn)終點(diǎn)法 一點(diǎn)終點(diǎn)法：一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)是使用一點(diǎn)終點(diǎn)法：一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)是使用一種或兩種試劑。當(dāng)樣品和試劑混合后，待一種或兩種試劑。當(dāng)樣品和試劑混合后，待測(cè)物與試劑的物理化學(xué)反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)時(shí)，測(cè)測(cè)物與試劑的物

3、理化學(xué)反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)時(shí)，測(cè)定吸光度，計(jì)算待測(cè)物質(zhì)的濃度。該法要求定吸光度，計(jì)算待測(cè)物質(zhì)的濃度。該法要求試劑本底顏色要深，該法具有代表性的試驗(yàn)試劑本底顏色要深，該法具有代表性的試驗(yàn)有：總蛋白、白蛋白、鎂測(cè)定有：總蛋白、白蛋白、鎂測(cè)定5實(shí)用精品課件PPTTP反應(yīng)曲線反應(yīng)曲線6實(shí)用精品課件PPTMg反應(yīng)曲線反應(yīng)曲線7實(shí)用精品課件PPT 二點(diǎn)終點(diǎn)法：一般是用雙試劑，是自動(dòng)二點(diǎn)終點(diǎn)法：一般是用雙試劑，是自動(dòng)化生化分析儀常用的一種方法。該方法的化生化分析儀常用的一種方法。該方法的優(yōu)點(diǎn)是可以消除樣品、試劑的顏色、濁度優(yōu)點(diǎn)是可以消除樣品、試劑的顏色、濁度以及一些干擾物質(zhì)的影響。代表性的試驗(yàn)以及一些干擾物質(zhì)的影響

4、。代表性的試驗(yàn)有葡萄糖等有葡萄糖等兩點(diǎn)終點(diǎn)法兩點(diǎn)終點(diǎn)法8實(shí)用精品課件PPTCre反應(yīng)曲線反應(yīng)曲線9實(shí)用精品課件PPT 測(cè)定底物的消耗或產(chǎn)物生成的速度的化學(xué)測(cè)定底物的消耗或產(chǎn)物生成的速度的化學(xué)方法稱(chēng)為連續(xù)監(jiān)測(cè)法（又稱(chēng)動(dòng)態(tài)分析法、速率方法稱(chēng)為連續(xù)監(jiān)測(cè)法（又稱(chēng)動(dòng)態(tài)分析法、速率法或動(dòng)力學(xué)法）。在反應(yīng)速度恒定期（零級(jí)反法或動(dòng)力學(xué)法）。在反應(yīng)速度恒定期（零級(jí)反應(yīng)期）來(lái)連續(xù)觀察和記錄一定反應(yīng)時(shí)間內(nèi)底物應(yīng)期）來(lái)連續(xù)觀察和記錄一定反應(yīng)時(shí)間內(nèi)底物或產(chǎn)物量的變化。以單位時(shí)間酶促反應(yīng)初速度或產(chǎn)物量的變化。以單位時(shí)間酶促反應(yīng)初速度計(jì)算酶活力的大小和代謝物的濃度。計(jì)算酶活力的大小和代謝物的濃度。連續(xù)監(jiān)測(cè)法連續(xù)監(jiān)測(cè)法10實(shí)

5、用精品課件PPT酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線11實(shí)用精品課件PPT酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線12實(shí)用精品課件PPT典型酶聯(lián)法反應(yīng)曲線典型酶聯(lián)法反應(yīng)曲線13實(shí)用精品課件PPTAMY反應(yīng)曲線反應(yīng)曲線14實(shí)用精品課件PPTALT反應(yīng)曲線反應(yīng)曲線15實(shí)用精品課件PPT 通過(guò)檢測(cè)物質(zhì)對(duì)光的散射或透射強(qiáng)度通過(guò)檢測(cè)物質(zhì)對(duì)光的散射或透射強(qiáng)度來(lái)測(cè)定物質(zhì)的方法稱(chēng)比濁法。比濁法可來(lái)測(cè)定物質(zhì)的方法稱(chēng)比濁法。比濁法可分為化學(xué)比濁法和免疫比濁法，免疫比分為化學(xué)比濁法和免疫比濁法，免疫比濁法又分為透射比濁和散射比濁。全自濁法又分為透射比濁和散射比濁。全自動(dòng)生化儀常用透射比濁法，常用于特種動(dòng)生化儀常用透射比濁法，常

6、用于特種蛋白測(cè)定。其工作曲線為拋物線。蛋白測(cè)定。其工作曲線為拋物線。 比濁測(cè)定法比濁測(cè)定法16實(shí)用精品課件PPT比濁測(cè)定法比濁測(cè)定法注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：抗原或抗體量（測(cè)定物）大大過(guò)剩，可出現(xiàn)可抗原或抗體量（測(cè)定物）大大過(guò)剩，可出現(xiàn)可溶性復(fù)合物，造成誤差。溶性復(fù)合物，造成誤差。應(yīng)維持反應(yīng)管中抗體蛋白（底物）始終過(guò)剩。應(yīng)維持反應(yīng)管中抗體蛋白（底物）始終過(guò)剩。 易受到脂血的影響。易受到脂血的影響。 17實(shí)用精品課件PPT二、報(bào)告審核中的普遍問(wèn)題二、報(bào)告審核中的普遍問(wèn)題責(zé)任心不強(qiáng)，未對(duì)結(jié)果進(jìn)行認(rèn)真審核責(zé)任心不強(qiáng)，未對(duì)結(jié)果進(jìn)行認(rèn)真審核對(duì)檢測(cè)儀器或試劑方法學(xué)不夠了解對(duì)檢測(cè)儀器或試劑方法學(xué)不夠了解專(zhuān)業(yè)知識(shí)欠

7、缺，工作經(jīng)驗(yàn)不足專(zhuān)業(yè)知識(shí)欠缺，工作經(jīng)驗(yàn)不足對(duì)儀器檢測(cè)的結(jié)果及室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果過(guò)對(duì)儀器檢測(cè)的結(jié)果及室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果過(guò)于相信于相信18實(shí)用精品課件PPT三、報(bào)告審核的建議三、報(bào)告審核的建議結(jié)合臨床資料審核結(jié)合臨床資料審核結(jié)合分析項(xiàng)目間的內(nèi)在聯(lián)系審核（專(zhuān)業(yè)知識(shí)）結(jié)合分析項(xiàng)目間的內(nèi)在聯(lián)系審核（專(zhuān)業(yè)知識(shí)）結(jié)合影響檢驗(yàn)結(jié)果因素審核結(jié)合影響檢驗(yàn)結(jié)果因素審核u檢驗(yàn)項(xiàng)目的方法學(xué)和線性檢驗(yàn)項(xiàng)目的方法學(xué)和線性u(píng)檢驗(yàn)標(biāo)本的影響檢驗(yàn)標(biāo)本的影響u檢驗(yàn)儀器性能影響檢驗(yàn)儀器性能影響結(jié)合當(dāng)日檢驗(yàn)結(jié)果總體趨勢(shì)審核結(jié)果結(jié)合當(dāng)日檢驗(yàn)結(jié)果總體趨勢(shì)審核結(jié)果19實(shí)用精品課件PPT結(jié)合臨床資料結(jié)合臨床資料 結(jié)合病人的性別、年齡、臨床診斷、其他結(jié)合病

8、人的性別、年齡、臨床診斷、其他檢查結(jié)果審核檢查結(jié)果審核 例：某病人檢測(cè)的例：某病人檢測(cè)的TP為為110g/L，該標(biāo)本沒(méi)，該標(biāo)本沒(méi)有脂血等影響檢測(cè)結(jié)果的因素有脂血等影響檢測(cè)結(jié)果的因素 臨床診斷：多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷：多發(fā)性骨髓瘤 另：胰島素與低血糖、病人輸注藥物對(duì)結(jié)果另：胰島素與低血糖、病人輸注藥物對(duì)結(jié)果的影響的影響20實(shí)用精品課件PPT檢驗(yàn)項(xiàng)目間的內(nèi)在聯(lián)系檢驗(yàn)項(xiàng)目間的內(nèi)在聯(lián)系各檢測(cè)參數(shù)間存在大小、比例、邏輯關(guān)系各檢測(cè)參數(shù)間存在大小、比例、邏輯關(guān)系例：例：HDL-C+LDL-CTC、Dbil Tbil CK-MB CK(M+B) -HBDH LDH(H+M) 原發(fā)性甲亢：原發(fā)性甲亢：T3、T4

9、、TSH等等21實(shí)用精品課件PPT影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素 試劑線性范圍：試劑線性范圍： 了解檢驗(yàn)項(xiàng)目試劑的線性范圍，對(duì)超過(guò)了解檢驗(yàn)項(xiàng)目試劑的線性范圍，對(duì)超過(guò)或低于范圍的項(xiàng)目，必須進(jìn)行相應(yīng)的減量稀釋或低于范圍的項(xiàng)目，必須進(jìn)行相應(yīng)的減量稀釋或增量后重新測(cè)定?；蛟隽亢笾匦聹y(cè)定。22實(shí)用精品課件PPT線性范圍線性范圍 在實(shí)際工作中，用連續(xù)監(jiān)測(cè)法會(huì)遇到檢驗(yàn)在實(shí)際工作中，用連續(xù)監(jiān)測(cè)法會(huì)遇到檢驗(yàn)結(jié)果為結(jié)果為0或者負(fù)值的情況，此時(shí)不能盲目相信或者負(fù)值的情況，此時(shí)不能盲目相信該結(jié)果低就出具低值報(bào)告，應(yīng)查看其反應(yīng)曲線該結(jié)果低就出具低值報(bào)告，應(yīng)查看其反應(yīng)曲線例：某病人的尿液例：某病人的尿液AMY檢測(cè)結(jié)

10、果為檢測(cè)結(jié)果為0U/L 其反應(yīng)曲線如下圖：其反應(yīng)曲線如下圖：23實(shí)用精品課件PPTAMY反應(yīng)曲線反應(yīng)曲線24實(shí)用精品課件PPTAMY反應(yīng)曲線分析反應(yīng)曲線分析分析：由于測(cè)定物質(zhì)濃度過(guò)高分析：由于測(cè)定物質(zhì)濃度過(guò)高處理：對(duì)測(cè)定物質(zhì)進(jìn)行十倍左右的稀釋再測(cè)定，處理：對(duì)測(cè)定物質(zhì)進(jìn)行十倍左右的稀釋再測(cè)定，直到反應(yīng)曲線恢復(fù)正常結(jié)果才可靠直到反應(yīng)曲線恢復(fù)正常結(jié)果才可靠25實(shí)用精品課件PPT影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)：檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)： 要了解該項(xiàng)目試劑采用的方法學(xué)：要了解該項(xiàng)目試劑采用的方法學(xué)： 例：某病人在測(cè)定心肌酶譜時(shí)，其例：某病人在測(cè)定心肌酶譜時(shí)，其CK:246U/L、 CK-M

11、B:286U/L，標(biāo)本無(wú)溶血等因素影響，標(biāo)本無(wú)溶血等因素影響 其結(jié)果中其結(jié)果中CK-MBCK26實(shí)用精品課件PPT檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué) 分析：分析：CK是由是由M和和B兩類(lèi)亞基組成的二聚體，兩類(lèi)亞基組成的二聚體，其構(gòu)成為其構(gòu)成為CK-MB(心型心型)約占約占0-3%、 CK-MM(肌肌型型)約占約占97-100%、 CK-BB（腦型）約占（腦型）約占0-1% 27實(shí)用精品課件PPT檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué) CK-MB采用的檢測(cè)方法為免疫抑制法采用的檢測(cè)方法為免疫抑制法 原理原理:正常人體中，正常人體中，CK同工酶中同工酶中CK-MM CK-MB CK-BB,其中其中CK-B

12、B含量極少，可忽含量極少，可忽略。免疫抑制法正是建立于忽略略。免疫抑制法正是建立于忽略CK-BB的基礎(chǔ)的基礎(chǔ)上。采用抗體抑制其上。采用抗體抑制其M亞基活性，使亞基活性，使CK-MM失失去活性，而去活性，而CK-MB失去一半的活性。單測(cè)定失去一半的活性。單測(cè)定B亞基的活性，其結(jié)果亞基的活性，其結(jié)果2即為即為CK-MB活性活性28實(shí)用精品課件PPT檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué) 原因分析：由于在患輕度或中度腦損傷、腦原因分析：由于在患輕度或中度腦損傷、腦 血管意外及腦手術(shù)后血管意外及腦手術(shù)后 、新生兒產(chǎn)程窒息造成、新生兒產(chǎn)程窒息造成 腦組織發(fā)生實(shí)質(zhì)性損害腦組織發(fā)生實(shí)質(zhì)性損害 的病人中，的病人中，

13、CK-BB會(huì)會(huì)升高，這時(shí)該方法測(cè)定的升高，這時(shí)該方法測(cè)定的CK-MB的活性相當(dāng)?shù)幕钚韵喈?dāng)于是于是CK-MB+2CK-BB的活性之和，造成的活性之和，造成 CK-MB活性假性升高活性假性升高29實(shí)用精品課件PPT檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)為什么為什么CK-MB 2CK不可能不可能 該測(cè)定該測(cè)定CK-MB活性活性=CK-MB+2CK-BB,如果如果CK-BB CK-MM,結(jié)果要乘結(jié)果要乘2，即，即CK-MB+2CK-BB CK-BB+CK-MB+CK-MM,測(cè)定的測(cè)定的CK-MB 活性活性 CK活性，但活性，但CK-MB 2CK不可能不可能解決方法：其他方法測(cè)定解決方法：其他方法測(cè)定CK-M

14、B的質(zhì)量的質(zhì)量 30實(shí)用精品課件PPT檢驗(yàn)標(biāo)本的影響檢驗(yàn)標(biāo)本的影響 標(biāo)本脂血會(huì)使反應(yīng)濁度增加，透光度下降，標(biāo)本脂血會(huì)使反應(yīng)濁度增加，透光度下降，吸光度增加，從而造成檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。如吸光度增加，從而造成檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。如TP、TG、UA顯著增高，顯著增高，GGT顯著下降或?yàn)轱@著下降或?yàn)? 標(biāo)本溶血會(huì)使標(biāo)本溶血會(huì)使K+、ALT、AST、LDH等檢驗(yàn)等檢驗(yàn)結(jié)果顯著升高結(jié)果顯著升高抗凝劑的錯(cuò)誤使用抗凝劑的錯(cuò)誤使用31實(shí)用精品課件PPT儀器性能影響儀器性能影響 儀器老化、故障、清洗管道堵塞、水質(zhì)儀器老化、故障、清洗管道堵塞、水質(zhì)不純等均會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響不純等均會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響光路老化：表現(xiàn)為光

15、路老化：表現(xiàn)為ALT、AST等項(xiàng)目結(jié)果重復(fù)等項(xiàng)目結(jié)果重復(fù)性較差性較差水質(zhì)不純、反應(yīng)杯清洗不干凈：表現(xiàn)為無(wú)機(jī)物水質(zhì)不純、反應(yīng)杯清洗不干凈：表現(xiàn)為無(wú)機(jī)物質(zhì)結(jié)果不準(zhǔn)質(zhì)結(jié)果不準(zhǔn)32實(shí)用精品課件PPT檢驗(yàn)結(jié)果的總體趨勢(shì)檢驗(yàn)結(jié)果的總體趨勢(shì) 即使質(zhì)控在控，也要注意當(dāng)日檢驗(yàn)結(jié)果的即使質(zhì)控在控，也要注意當(dāng)日檢驗(yàn)結(jié)果的總體的分布趨勢(shì)總體的分布趨勢(shì)如如K+的參考區(qū)間為的參考區(qū)間為3.55.5，中值為，中值為4.5，如，如果當(dāng)日結(jié)果大部分甚至全部低于果當(dāng)日結(jié)果大部分甚至全部低于4.5，即使當(dāng)，即使當(dāng)日質(zhì)控在控，任要考慮結(jié)果是否偏低，應(yīng)重新日質(zhì)控在控，任要考慮結(jié)果是否偏低，應(yīng)重新校準(zhǔn)、質(zhì)控后再測(cè)定校準(zhǔn)、質(zhì)控后再測(cè)定 如在質(zhì)控中如在質(zhì)控中 TC(-1S),HDL (+1S) ,LDL(+1S),雖然在控，如出現(xiàn)大部分雖然在控，如出現(xiàn)大部分HDL+LDL TC，也應(yīng)考慮重新對(duì)三項(xiàng)目校標(biāo)、質(zhì)控后再測(cè)定也應(yīng)考慮重新對(duì)三項(xiàng)目校標(biāo)、質(zhì)控后再測(cè)定33實(shí)用精品課件PPT四、總結(jié)四、總結(jié)不要盲目相信儀器檢測(cè)的結(jié)果一定準(zhǔn)確不要盲目相信儀器檢測(cè)的