3-軍團(tuán)菌實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險(xiǎn)評估報(bào)告

1、 軍團(tuán)菌實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險(xiǎn)評估報(bào)告一、生物學(xué)特性 一種類和細(xì)菌分型軍團(tuán)菌屬( Legionella) 的細(xì)菌是一 類革蘭氏陰性桿菌，廣泛分布于自然界中，尤其適宜溫暖潮濕地帶的天然水源及人工冷、熱水管道系統(tǒng)中。軍團(tuán)菌科僅有一個屬，即軍團(tuán)菌屬 9 本屬包括嗜肺軍團(tuán)菌、博杰曼軍團(tuán)菌、米克戴德軍團(tuán)菌、杜莫夫軍團(tuán)菌、長灘軍團(tuán)菌、高爾曼軍團(tuán)菌、詹姆斯敦軍團(tuán)菌、約旦軍團(tuán)菌、菲利軍團(tuán)菌、阿尼沙軍團(tuán)菌、紅光軍團(tuán)菌、橡樹嶺軍團(tuán)菌等 30 種以上的軍團(tuán)菌，至少 19 種是人類肺炎的病原菌，其中以嗜肺性軍國菌最易致病。以下以介紹嗜肺軍團(tuán)菌有關(guān)內(nèi)容為主。嗜肺軍團(tuán)菌具有O和H抗原，O抗原具特異性，根據(jù)O抗原特異性可將嗜肺軍團(tuán)菌

2、 分為 15 個血清型 (LP1-LP15) ，其中1 型就是 1976 年軍團(tuán)病的病原菌。在我國分離較多的嗜肺軍團(tuán)菌為 l(LPl)和 6 (LP6) 兩個血清型。 15 個血清型中前 10 個血清型都具有 39kDa 外膜蛋白成分，是機(jī)體應(yīng)答反應(yīng)的主要免疫原。 H 抗原無特異性。（二)來源1976 年，美國費(fèi)城退伍軍人協(xié)會會員中曾爆發(fā)急性發(fā)熱性呼吸道疾病，造成 221 人感染疾病，其中死亡34 人。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)一種細(xì)菌，被命名為嗜肺軍國菌。隨后，許多有關(guān)細(xì)菌暫被列入這一屬，且追溯研究發(fā)現(xiàn) 9 早在 1943 年即有軍團(tuán)菌病的病例。此后，軍團(tuán)菌病在全球共發(fā)生過 50 多次。近幾年在歐洲、美國

3、、澳大利亞等國家和地區(qū)均有流行 9 其中最常見的病原體為嗜肺軍團(tuán)菌(占病例的 85% 90%) ，其次是米克戴德軍團(tuán)菌(占5%10%) ，最后是博杰曼軍團(tuán)菌和杜莫夫軍團(tuán)菌。此類細(xì)菌形態(tài)相似，具有共同的生化特征 9會引起類似疾病。（三）傳染性軍團(tuán)病的主要污染源是供水系統(tǒng)、冷卻塔及空調(diào)系統(tǒng)。軍團(tuán)菌為水源中常見的微生物 9 空調(diào)系統(tǒng)、冷卻塔和暖水管道是該菌極易繁殖的場所 9 因此，暴發(fā)流行多見于醫(yī)院、 旅館、建筑工地等公共場所。(四傳播途徑 病原菌隨氣霧和氣溶膠經(jīng)呼吸道傳播。直接與軍團(tuán)菌接觸本身并不存在危險(xiǎn)，但將含有此種菌的水滴、懸浮物吸入肺中，就會引起危及生命的疾病。 (五)易感性人群普遍易感 9

4、 男性發(fā)病多于女性 9 孕婦、老年人、免疫功能低下者為多發(fā)人群。醫(yī)院內(nèi)感染占 5% ，而且集中在免疫缺陷、器官移植、血液透析、糖尿病、吸煙、慢性支氣管炎或 肺氣腫、腫瘤等患者。（六)潛伏期肺炎型潛伏期-般為 2 10d; 非肺炎型(龐蒂亞克熱)為該病菌感染的輕型 9 潛伏期566h ，半數(shù)為36h 左右。 53 推薦精選 （七）劑量效應(yīng)關(guān)系軍團(tuán)菌感染劑量與不同型別軍團(tuán)菌致病性的強(qiáng)弱密切相關(guān) 9 因而產(chǎn)生了有流感樣型 (輕癥型)、肺炎型(重癥型)和肺外感染三種類型的不同臨床特征的軍團(tuán)菌病。目前，尚未見軍團(tuán)菌對人準(zhǔn)確感染劑量的報(bào)道。(八)致病性(1)致病物質(zhì)嗜肺軍團(tuán)菌產(chǎn)生的多種酶類、毒素和溶血素，

5、直接損傷宿主。細(xì)胞毒素阻礙中性拉細(xì)胞氧化代謝;菌細(xì)胞中所含的磷酸醋酶阻礙剌激中性拉細(xì)胞超氧化物 離子產(chǎn)物，使中性粒細(xì)胞內(nèi)第二信使陷于混亂。這些物質(zhì)可抑制吞噬細(xì)胞與溶酶體的融 合 9 使吞噬體內(nèi)的細(xì)菌在吞噬細(xì)胞內(nèi)生長繁殖而導(dǎo)致宿主細(xì)胞死亡。(2) 所致疾病嗜肺軍團(tuán)可引起軍團(tuán)病，也可引起醫(yī)院感染。多流行于夏秋季。主要通過呼吸道吸入帶菌飛沫、氣溶膠而感染，引起以肺為主的全身性感染。軍團(tuán)病臨床上 有流感樣型(輕癥型)，肺炎型 (重癥型)和肺外感染三種類型。流 惑樣型亦稱龐蒂亞克熱， 出現(xiàn)發(fā)熱、不適、頭痛和肌肉疼痛等癥狀， X 線無肺炎征象 9 預(yù)后良好;肺炎型亦稱軍團(tuán)病，起病驟然 9 出現(xiàn)以肺部感染為

6、主的多器官損害，患者出現(xiàn)寒戰(zhàn)、高熱、頭痛、肌痛劇烈、干咳，后出現(xiàn)濃痰或咯血 9 全身癥狀明顯，常伴有中樞神經(jīng)系統(tǒng)和消化道癥狀，不及時(shí)治療可導(dǎo)致死亡，死亡率可達(dá) 15% 20% 。肺外感染型為繼發(fā)性感染9 出現(xiàn)腦、腸、腎、肝、脾 等多臟器感染的癥狀。嗜肺軍團(tuán)菌為胞內(nèi)寄生菌，細(xì)腿免疫在抗感染中起主要作用。(九)變異性軍團(tuán)菌的變異性目前尚未有確鑿證據(jù)資料可以證實(shí)。(十)環(huán)境中的穩(wěn)定性 軍團(tuán)菌產(chǎn)生在自然環(huán)境中，在溫水里及潮熱的地方蔓延。人工供水系統(tǒng) 9 包括淋浴器、礦泉池、噴泉以及空調(diào)設(shè)備的冷卻水塔均能為軍團(tuán)桿菌的大量繁殖提供生存環(huán)境。軍團(tuán)菌是長期隱藏在空調(diào)制冷裝置中的致病菌，該茵在適宜的環(huán)境中可長期

7、存活，隨冷風(fēng)吹出浮游在空氣中，人們通常是由于呼吸了被軍團(tuán)桿菌污染的水源散發(fā)的水霧而感染上軍團(tuán)病的。十一藥物敏感性軍團(tuán)菌對紅霉素敏感 9 重癥患者用紅霉素靜滴外，可聯(lián)合應(yīng)用利福平、多西環(huán)素。氨基糖甙類抗生素、青霉素和頭孢菌素對軍團(tuán)菌病無效。（十二）消毒劑敏感性對常用化學(xué)消毒劑敏感，如 0.03% 戊二醛、 2% 甲酸及 70% 乙醇均可殺死該菌，但對氯或酸的抵抗力比腸道菌大 9 置于 21時(shí)含 O. 1ng/LJ 游離氯的水中 9 殺死 90% 嗜肺軍團(tuán)菌需 40min，而殺死大腸埃希菌則不到 1min ，在pH=2.0的鹽酸中可存活 30min:利用這些特點(diǎn)處理標(biāo)本可去除雜菌。（十三)物理滅活

8、對干燥、紫外線較敏感，加熱70 以上，也可滅活。通過照射紫外線短波，波長 254nm 可以使病菌無法活躍，再附加使用超聲波可以更有力地除菌。薄膜技術(shù)使用 薄膜來去除微生物， 一般可以利用薄膜的微孔讓直徑小于0.2nm 的顆粒包括細(xì)菌，甚至部分病毒 9 過濾掉。54 推薦精選該菌在適宜的環(huán)境中可長期存活。如在 36 37 的熱水中能夠存活，而在蒸餾水中可存活l00d 以上。(十五)與其他生物和環(huán)境的交互作用軍團(tuán)菌能與一些常見原蟲形成共生關(guān)系，可寄生于阿米巴變形蟲內(nèi)井保持致病活性。（十六）預(yù)防和浩療方案目前，尚無嗜肺軍團(tuán)菌特異性疫苗。醫(yī)院空調(diào)冷卻水、輔助呼吸機(jī)等產(chǎn)生的氣溶膠中能檢出此菌。因此，加強(qiáng)

9、水源管理及人工輸水管道和設(shè)施的消毒處理 9 防止軍團(tuán)菌造成空氣和水源的污染，是預(yù)防軍團(tuán)菌病擴(kuò)散的重要措施。 軍團(tuán)菌肺炎為細(xì)胞內(nèi)感染，因此，治療以紅霉素為首選。輕癥病例以口服紅霉素和其他輔助藥為主。較重者用紅霉素分次靜脈滴注，連用 23周。并聯(lián)合其他輔助藥物治療。重癥患者用紅霉素靜滴外， 可聯(lián)合應(yīng)用利福平、多西環(huán)素，支持對癥等綜合治療。大環(huán)內(nèi)酯類或氟喹諾酮類、四環(huán)素類、利福平等也有一定的治療效果。一、 實(shí)驗(yàn)室相關(guān)活動風(fēng)險(xiǎn)評估與控制 (一)實(shí)驗(yàn)室感染性因子的種類、來源和危害1感染性因子的種類 軍團(tuán)菌可產(chǎn)生多種酶和毒素 9 包括蛋白酶、磷酸酯酶、脫氧核糖核酸酶、 ß內(nèi)酰胺酶，以及細(xì)胞毒素，

10、可能與毒性有關(guān)。根據(jù)軍團(tuán)菌生物特性和中心 驗(yàn)室檢測能力范圍，本實(shí)驗(yàn)室可能的感染因子為軍團(tuán)菌病原體。2. 感染因子的來源 (1)用于軍團(tuán)菌檢測的公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)中的冷卻水、冷凝水樣品等。 (2) 樣本采集和檢測過程涉及的所有實(shí)驗(yàn)場所。(3) 實(shí)驗(yàn)室操作過程中可能產(chǎn)生的含病原菌的氣溶膠。 3. 感染性因子可能造成的危害 (1)被污染的實(shí)驗(yàn)器材、器皿等對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成污染。 (2) 實(shí)驗(yàn)室廢棄物對環(huán)境造成污染。(3) 實(shí)驗(yàn)人員暴露后感染。(4) 實(shí)驗(yàn)室含病原體的氣溶膠對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成污染。 由于軍團(tuán)菌是通過氣溶膠感染致病的，所以，實(shí)驗(yàn)室人員在檢測過程的各個環(huán)節(jié)有可能因意外吸入實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的氣溶膠

11、，從而導(dǎo)致感染。(二)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)活動過程中的風(fēng)險(xiǎn)評估與控制1.實(shí)驗(yàn)方法(1)風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別未采用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢則;使用新的或變更的國家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)前，未經(jīng)技術(shù)確認(rèn)，可能存在安全風(fēng)險(xiǎn)。(2)風(fēng)險(xiǎn)控制措施盡量采用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測，或使用經(jīng)過充分驗(yàn)證的 實(shí)驗(yàn)方法;在使用新的或變更的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)前，必須經(jīng)過嚴(yán)格的技術(shù)確認(rèn)。2. 樣品采集 (1)公共場所的集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)冷凝水、冷卻水樣本采集主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材螺旋蓋玻璃瓶等容器。白 55 推薦精選主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 公共場所的集中系統(tǒng)冷凝水、冷卻水等樣品中可能存在感染性病原體 9 采樣人員采樣不規(guī)范、盛裝容器密合不嚴(yán)、玻璃容器意外破損等

12、原因均可導(dǎo)致樣品濺灑、溢出、滲漏而污染環(huán)境;同時(shí)， 現(xiàn)璃容器意外破損存在意外剌傷或劃傷采樣人員的風(fēng)險(xiǎn)。風(fēng)險(xiǎn)控制措施 采集容器必須防水、防漏，容器外面要包裹足量的吸收性材料，以便容器打破或泄漏時(shí)，能吸收溢出的所有液體。(2)集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)空氣樣本采集主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材 微生物氣溶膠濃縮器、液體沖擊式微生物氣溶膠采樣器、螺旋蓋吸收管。主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)空氣標(biāo)本中可能存在軍團(tuán)菌等感染性病 原體。使用液體沖擊式微生物氣溶膠采樣器采集標(biāo)本的過程中，工作人員采樣不規(guī)范、個 人防護(hù)不到位 9 均存在采樣人員被氣溶膠感染的隱患。風(fēng)險(xiǎn)控制措施 采集集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)中的空氣標(biāo)本時(shí) 9

13、采樣人員需要穿戴 防護(hù)服、口罩、帽子、手套等防護(hù)品，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)要求規(guī)范采樣。(3) 下呼吸道分泌物、肺活檢組織或胸腔積掖等標(biāo)本的采集主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材塑料蝶旋蓋采樣管、消毒棉簽等。主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 下呼吸道分泌物、肺活檢組織或胸腔積液等病理標(biāo)本中可能存 在感染性病原體，采集過程中 9 患者咳嗽，釋放小顆粒氣溶膠;采樣人員采樣不規(guī)范、個人 防護(hù)不到位，存在采樣人員隨氣霧 和氣溶膠吸入感染的隱患。(4) 血樣的采集主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材一次性采血針、真空采血管、消毒榻簽及一次性利器盒。主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 血液樣品可能存在不明感染性病原體，采血管密封蓋意外脫落 或采血針內(nèi)殘留血滴落，存在血樣濺灑從而污染人員

14、或環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn);采血針頭存在意外刺 傷或如傷采樣人員的風(fēng)險(xiǎn)。風(fēng)險(xiǎn)控制措施使用一次性采血針和真空采血管時(shí) 9 采樣人員應(yīng)經(jīng)過正規(guī)采血培訓(xùn)，并熟練掌握采血技巧。采血前做好個人防護(hù)(防護(hù)服、乳膠手套、口罩) ;認(rèn)真、仔細(xì)謹(jǐn)慎操作，抽血后的針頭直接放入利器盒內(nèi) 9 禁止用于直接接觸使用后的針頭或?qū)⑹褂煤蟮?針頭重新套上針頭套;采好血后直立于試管架中，防止倒翻;消毒棉簽等污染物放入醫(yī)療 廢棄物專用袋中，統(tǒng)一進(jìn)行消毒處理。3，樣本包裝和運(yùn)送(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材真空密封采血管、外螺旋蓋玻璃瓶、聚乙烯材料密填充器、 聚乙烯材料密封采樣管、 95 千帕樣品運(yùn)輸罐、 B 類標(biāo)本運(yùn)輸箱 (UN3373 冷藏箱)、

15、運(yùn)送 車輛。(2) 主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 盛樣容器不堅(jiān)固，存在玻璃容器或包裝容器意外破損，刺傷或劃傷采送樣人員的隱患;盛樣容器密合不嚴(yán)，可能導(dǎo)致樣品濺灑、溢出、滲漏;樣本運(yùn)輸包 裝不符合生物安全要求，可能導(dǎo)致樣品的側(cè)翻、滲漏，造成污染擴(kuò)散。(3) 風(fēng)險(xiǎn)控制措施盛裝樣品的容器必須堅(jiān)固、不易破碎，盡可能選用塑料制品，采樣后必須檢查容器的密合性。樣品的運(yùn)輸需使用三層合格的包裝材料。推薦精選、 56 推薦精選4. 樣品接收和前處理(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材旋渦振蕩器、離心機(jī)、生物安全柜、潔凈工作臺、微生物膜 過掠裝置。（2）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別樣品管理員未按實(shí)驗(yàn)室樣品管理程序的要求接收樣品;檢測人 員進(jìn)行樣品前處理

16、時(shí)未做好個人防護(hù);打開水樣、空氣吸收液標(biāo)本、下呼吸道分泌物樣本 時(shí)，意外發(fā)生的樣品側(cè)翻；水樣前處理執(zhí)行過濾和洗脫操作時(shí)樣液濺灑，離心機(jī)操作時(shí)離 心管破裂等意外情況。(3) 風(fēng)險(xiǎn)控制措施樣品接收必須在專用的區(qū)域進(jìn)行， 合同評審人員和實(shí)驗(yàn)室收樣人員嚴(yán)格按照樣品管理程序(XJK/CX32)要求交接樣品，不得擅自打開樣品包裝， 收樣后及時(shí)洗手。開始檢測前 9 必須做好個人防護(hù):對盛裝下呼吸道分泌物等感染性材料樣品的容器，必須在生物安全柜中緩慢打開;水樣和空氣吸收液標(biāo)本必須在潔凈工作室內(nèi)打開;開啟容器管口應(yīng)該動作輕緩，不能對著操作者。進(jìn)行水樣前處理時(shí)，抽濾和洗脫整個操作過程時(shí)動作必須輕緩， 防止產(chǎn)生大量

17、氣溶膠和樣液濺灑污染環(huán)境；遇到水樣中含有較多沉積物和軟泥時(shí)，必須先粗濾 9 以降低多次抽濾造成氣霧和樣液濺灑污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備應(yīng)急藥箱，發(fā)生手剪傷等意外事件時(shí)應(yīng)立即進(jìn)行消毒、包扎處理。在進(jìn)行感染性樣品和濾膜洗脫等離心振蕩操作時(shí)必須戴口罩，并將離心蓋封嚴(yán)實(shí)， 再關(guān)上離心機(jī)蓋，以防氣溶膠的產(chǎn)生。當(dāng)發(fā)生離心管意外破裂、濺出時(shí)，應(yīng)及時(shí)對所有涉及污染的部位進(jìn)行消毒處理。同時(shí)，按二級生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)與管理 "實(shí)驗(yàn)室意外事 故的處置"章節(jié)處置。5. 樣本檢測過程(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材 旋渦振蕩器、離心機(jī)、微生物膜濾系統(tǒng)、生物安全柜、培養(yǎng)箱、定量熒光 PCR 儀、核酸提取儀、

18、金屬浴、移液器及吸液頭、接種環(huán)、培養(yǎng)皿、無水乙醇、 溴化乙啶等。(2) 主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別對水樣、空氣、下呼吸道分泌物等樣品進(jìn)行軍團(tuán)菌菌株分離、生化鑒定、血清分型、 藥敏試驗(yàn)、分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)活動時(shí)，均涉及活菌操作。檢測過程中樣品移取、劃線分離、 涂片染色、離心、過濾等操作均可產(chǎn)生氣溶膠，存在氣溶膠直接吸入感染的隱患。實(shí)驗(yàn)過程中玻璃器材意外破碎或滲漏、離心操作時(shí)離心管意外破裂等事故，可造成液體濺出從而污染設(shè)備表面或工作臺面等環(huán)境，間接污染操作者的皮膚、黏膜。提取核酸時(shí) 9 使用的無水乙醇屬易燃易爆物質(zhì)，溴化乙啶具有強(qiáng)烈致癌性。(3) 風(fēng)險(xiǎn)控制措施檢測人員在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)按照二級生物安全防護(hù)要求做好自身防

19、護(hù)措施(穿防護(hù)服，戴手套、口罩，穿不露腳趾和覆蓋腳背、防滑、防滲漏的工作鞋)。進(jìn)行水樣等樣品抽濾、濃縮等操作時(shí)，必須在潔凈實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行且動作要輕緩，抽濾前一定要檢查濾器的密合性。下呼吸道分泌物等病理標(biāo)本、涉及感染性活菌實(shí)驗(yàn)操作時(shí)必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對桌面、臺面及時(shí)進(jìn)行消毒處理。 57 推薦精選必須使用移液器或吸球移取樣液，旋蓋和移液的操作動作要輕緩，所有吸管應(yīng)用棉塞，移液頭盡可能使用帶濾芯的，以減少對移液器或吸球的污染。使用直徑23mm且完全封閉、手柄的長度小于 6cm 的接種環(huán)分離細(xì)菌，盡可能使用封閉式微型電加熱器對接種環(huán)進(jìn)行消毒，避免在酒精燈的明火上加熱從而引起感染性物質(zhì)的爆

20、濺。盡可能以塑料器皿代替玻璃器皿，若必須使用玻璃器皿，只能用實(shí)驗(yàn)室級玻璃(硼硅酸鹽) ，且任何破碎或有裂紋的器皿都應(yīng)丟棄。禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片、 玻璃碎片等銳器。嚴(yán)禁用帶有注射針頭的注射器吸液，更不可把它當(dāng)吸管用，用過的銳器 應(yīng)直接放入利器盒，消毒后廢棄。分子生物學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)中使用的無水乙醇屬易燃易爆物質(zhì)，應(yīng)放置在通風(fēng)柜遠(yuǎn)離熱源;溴化乙啶屬有毒物質(zhì)，需要專人專管。在任何可能導(dǎo)致潛在的傳染性物質(zhì)濺出的操作過程中，應(yīng)保護(hù)好面部、眼睛和嘴; 發(fā)生液體濺出、溢出等事故，明顯暴露于傳染源時(shí)，應(yīng)立即向科室負(fù)責(zé)人報(bào)告，及時(shí)處理并對事故的發(fā)生與處理作記錄，必要時(shí)進(jìn)行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評估、觀察和治療并保留

21、書面記錄。6. 菌株使用、保存和運(yùn)輸(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材接種針(環(huán))、菌株保存管、生物安全柜、 95 千帕樣品運(yùn)輸 罐、B 類標(biāo)本運(yùn)輸箱 (UN3373冷藏箱)、運(yùn)送車輛。(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別保菌操作不規(guī)范、個人防護(hù)不到位、保菌磁珠管等保菌容器意外破損、磁珠掉落等會導(dǎo)致病原菌污染實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和實(shí)驗(yàn)人員。軍團(tuán)菌使用和保存未按照菌(毒)種管理程序>>(XJK/CX37)要求實(shí)施管理，存在菌株被惡意使用及污染環(huán)境等生物安全隱患。運(yùn)送包裝不符合生物安全要求，或運(yùn)輸工具無安全保障，則易造成污染擴(kuò)散，甚至樣本丟失。(3) 風(fēng)險(xiǎn)控制措施軍團(tuán)菌分離純化及保菌操作必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，若發(fā)生保菌

22、磁珠管破損、磁珠掉落的情況時(shí)，應(yīng)及時(shí)對所有涉及污染的部位進(jìn)行消毒處理，并按二級生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)與管理中"實(shí)驗(yàn)室意外事故的處置"章節(jié)進(jìn)行規(guī)范處置。軍團(tuán)菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的使用、保存嚴(yán)格按照菌(毒)種管理程序>>（ XJK/CX37)要求進(jìn)行操作，實(shí)行雙人雙鎖保管，嚴(yán)防菌株被惡意使用而造成生物危害。軍團(tuán)菌陽性菌株上送應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行規(guī)范，采取 3 層包裝，并由專車運(yùn)送，同時(shí)攜帶"可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸許可證"，由專業(yè)人員全程護(hù)送。7. 實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材70%75%的酒精、施康清洗消毒液0(2) 主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)

23、識別工作完畢后，若不及時(shí)對工作臺面、生物安全柜進(jìn)行消毒，有可 能會對下次的操作人員造成污染或感染。(3) 風(fēng)險(xiǎn)控制措胞工作完畢后，及時(shí)對檢測所涉及的工作臺面、地面和生物安全柜進(jìn)行消毒，使用稀釋 100 倍的施康清洗消毒液擦拭，用消毒液清潔后要干燥 20min以 58 推薦精選上，再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。生物安全柜用 70%75% 的酒精擦拭消毒。待實(shí)驗(yàn)和消毒完畢， 先脫去手套，再脫去防護(hù)服，并正確用肥皂和流水洗手。8. 廢棄物處置(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材 醫(yī)療廢棄物專用袋、硬質(zhì)耐高壓防滲漏垃圾桶、高壓滅菌器。(2) 主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別樣品采集和實(shí)驗(yàn)檢測過程產(chǎn)生的感染性廢棄物主要有水樣、空氣樣品、下呼吸道分

24、泌物等病理標(biāo)本、血液血清標(biāo)本、病原菌的培養(yǎng)基標(biāo)本和陽性菌種及所有實(shí)驗(yàn)過程涉及的用品，釋放前未按照規(guī)范要求處理，導(dǎo)致感染或致病因子外泄而污染環(huán)境。樣品采集和實(shí)驗(yàn)檢測過程中產(chǎn)生的被污染的損傷性廢棄物，如一次性使用采血和下呼吸道分泌采樣用具、載玻片、玻璃試管、玻璃安瓿、培養(yǎng)皿等，未按照要求進(jìn)行規(guī)范處理，存在意外刺傷或劃傷工作人員的隱患。(3) 風(fēng)險(xiǎn)控制措施 實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理應(yīng)遵循醫(yī)療廢棄物管理?xiàng)l例>>醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢棄物管理辦法>>醫(yī)療廢物專用包裝袋、容器和警示標(biāo)志標(biāo)準(zhǔn)等相關(guān)法規(guī)要求，分類收集，規(guī)范處置。所有損傷性廢棄物必須放置于有警示標(biāo)識的硬質(zhì)、防漏、防銳器刺破的專用利器

25、盒中;所有感染性廢棄物必須放置于有警示標(biāo)識的醫(yī)療廢物專用包裝袋中;使用高效消毒液浸泡或高溫高壓滅菌后集中處理，集中存放至中心指定的醫(yī)療廢棄室，由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理單位上門收集，集中處置。同時(shí)，做好廢棄物處置交接記錄，所有相關(guān)記錄應(yīng)定期整理歸擋。(三)實(shí)驗(yàn)室?，F(xiàn)活動中其他風(fēng)險(xiǎn)評估與預(yù)防控制措施1.電力(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 斷電或電壓不穩(wěn)，存在引發(fā)電氣設(shè)備故障的隱患。斷電可使運(yùn)行中的生物安全柜、檢測設(shè)備突然停止工作，致使實(shí)驗(yàn)活動被迫中斷，存在感染性物質(zhì)外溢，污染操作人員和環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。(2) 預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室由雙路市電供電，并為關(guān)鍵儀器設(shè)備配備應(yīng)急電源 (UPS)，避免實(shí)驗(yàn)室因斷電可能引發(fā)的生

26、物安全風(fēng)險(xiǎn)，確保檢測工作順利進(jìn)行。2. 電氣操作(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別實(shí)驗(yàn)室活動涉及的電氣操作，包括實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)電氣設(shè)備的啟動、關(guān)閉、安裝和維修;設(shè)備層內(nèi)UPS 、空調(diào)機(jī)組等電氣設(shè)備的啟動、關(guān)閉和維修等。這些電氣操作的過程可能產(chǎn)生觸電、電擊、造成電氣故障等風(fēng)險(xiǎn)。(2)預(yù)防控制措施電氣設(shè)備的設(shè)計(jì)及制造應(yīng)符合相關(guān)安全標(biāo)準(zhǔn)的要求。實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)若有380V的電源插座，則需明確標(biāo)識，并由有資質(zhì)的專業(yè)人員進(jìn)行操作。新的、改裝過的或修理過的電氣設(shè)備在未經(jīng)專業(yè)人員(如有資質(zhì)的電工)完成電氣安全測試、使設(shè)備符合安全使用要求之前，不允許使用。電氣設(shè)備使用人員應(yīng)接受正確操作的培訓(xùn)，操作方式不降低電氣的安全性。電氣

27、設(shè)備使用人員要定期檢查設(shè)備的破損情況，以避免引起電氣故障。只有專業(yè)人員才可從事電氣設(shè)備和電路工作。禁止未經(jīng)授權(quán)的工作。 59 推薦精選采取措施對設(shè)備進(jìn)行去污染處理，以降低維護(hù)人員被病原菌感染的風(fēng)險(xiǎn)。3. 實(shí)驗(yàn)室給排水設(shè)施設(shè)備(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 實(shí)驗(yàn)室含有給排水的設(shè)施設(shè)備，包括位于工作區(qū)和洗消區(qū)的高壓滅菌器和洗滌池。管道意外破裂、排水管道阻塞可能導(dǎo)致感染性材料溢出，有污染實(shí)驗(yàn)人員和環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。(2) 預(yù)防控制措施 實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的所有染菌物及器具，必須先經(jīng)高壓滅菌或含氧消毒劑浸泡消毒后洗滌，洗消產(chǎn)生的污水集中排入中心污水池進(jìn)行消毒處理，嚴(yán)禁直接排放。按照"GB 18466中6.1污水取樣

28、與監(jiān)測"要求執(zhí)行。4. 實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位可能存在密封不嚴(yán)的情況，當(dāng)感染性材料溢出時(shí)，有污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。(2) 預(yù)防控制措施 所有管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位應(yīng)嚴(yán)格密封，定期進(jìn)行檢查檢測，避免感染性材料外溢從而污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。5. 主要檢測儀器設(shè)備(1)細(xì)菌鑒定和藥敏測試儀 (ATB 儀)、PCR 儀、核酸提取儀、凝膠成像儀等設(shè)備。主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 對疑似嗜肺軍團(tuán)菌鑒定時(shí)要用到 ATB 儀進(jìn)行生化鑒定及藥敏試驗(yàn)，或用核酸提取儀、定量熒光 PCR 儀進(jìn)行毒力基因檢測。使用這些設(shè)備時(shí)，如果不按操作規(guī)程進(jìn)行規(guī)范操作，則會導(dǎo)致病原體濺出，滲漏

29、從而污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境。預(yù)防控制措施 嚴(yán)格按 ATB 儀、核酸提取儀、 PCR 儀、凝膠成像儀等設(shè)備操作規(guī)程操作和維護(hù)，每次使用完畢后對設(shè)備箱體及可能污染的實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行消毒。(2) 離心機(jī)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 未正確配備密閉蓋離心機(jī)、密封頭的真空采血管、耐壓螺旋蓋離心管，高速離心時(shí)可產(chǎn)生氣溶膠擴(kuò)散;離心血樣時(shí)沒有做好平衡，可能會發(fā)生離心管破裂、 離心管蓋脫落的情況，存在血樣污染離心轉(zhuǎn)子和離心腔的風(fēng)險(xiǎn)。預(yù)防控制措施 實(shí)驗(yàn)室配備密閉蓋離心機(jī)、密封頭的真空采血管、耐壓螺旋蓋離心管;離心前做好平衡，選擇正確的離心速度和離心力;規(guī)范正確操作;每次使用后做好清潔消毒和使用維護(hù)記錄，定期進(jìn)行功能檢查，確保離心機(jī)性能正常

30、。(3) 微生物膜過濾裝置主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 未按照儀器使用要求規(guī)范操作，可能會發(fā)生濾杯松動，導(dǎo)致待檢樣品濾液外流，從而污染實(shí)驗(yàn)臺面和設(shè)備。預(yù)防控制措施 實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格按照儀器使用說明規(guī)范操作，儀器啟動前，必須檢查濾杯與濾器接口的密封性，保證密閉狀態(tài)，并做好個人生物安全防護(hù);每次使用后做好清潔消毒和使用維護(hù)記錄，定期進(jìn)行功能檢查，確保儀器性能正常。6. 生物安全設(shè)施設(shè)備 (1)生物安全柜主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 沒有按照設(shè)備操作規(guī)程或使用說明書進(jìn)行操作、維護(hù)，使生物安全柜的氣溶膠防護(hù)效果明顯降低，甚至失效。設(shè)備長時(shí)間使用后未及時(shí)更換 HEPA 過濾膜，可出現(xiàn)工作窗口氣流速度降低或流向紊亂等功能失常狀況。生物安全

31、柜使用后未進(jìn)60 推薦精選第四章呼吸道病原微生物實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險(xiǎn)評估報(bào)告實(shí)例行徹底消毒處理，對清潔、維護(hù)人員將會產(chǎn)生污染。設(shè)備長期關(guān)停，將會使部分電器元件 老化從而失去正常功能。對于設(shè)備移位、碰撞受損時(shí)，沒有及時(shí)進(jìn)行性能檢測等。預(yù)防控制措施正確選配生物安全柜，使用人員接受相關(guān)操作、維護(hù)培訓(xùn) 9 做到規(guī) 范使用和維護(hù)。每月進(jìn)行空氣沉降菌檢測，每年請有資質(zhì)的服務(wù)機(jī)構(gòu)對生物安全柜的風(fēng)速、氣流、塵埃粒子數(shù)、紫外線強(qiáng)度等主要性能指標(biāo)進(jìn)行檢測 9 確保其功能正常。一旦生物安全柜的使用造成污染，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行消毒。(2)高壓滅菌器主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別沒有正確配備高壓滅菌器，存在氣溶膠污染環(huán)境的隱患;沒有按照設(shè)備操作規(guī)程或

32、使用說明書進(jìn)行操作、維護(hù)，可能使高壓滅菌器的效果明顯降低，甚至失效，失去去污染與無害化的作用;壓力鍋長時(shí)間使用又不定期監(jiān)測滅菌效果，對壓力容器的滅菌效果無從考證，存在滅菌不徹底從而引發(fā)污染的隱患。壓力鍋長期關(guān)停期間，如果不及時(shí)排干鍋體水分，將會使內(nèi)部器件老化從而失去正常功能。預(yù)防控制措施選擇下排式高壓滅菌器，防止氣溶膠污染 9 正確規(guī)范操作，定期維護(hù)，確保高壓滅菌器性能正常，做好使用記錄。每次監(jiān)測化學(xué)指示物，監(jiān)控并記錄溫度、壓 力、時(shí)間等滅菌參數(shù) 9 每周進(jìn)行生物監(jiān)測，以保證滅菌質(zhì)量。(3) 個人防護(hù)用品主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 實(shí)驗(yàn)室不提供足夠數(shù)量的、符合質(zhì)量要求的防護(hù)服、防護(hù)眼罩、一次性乳膠手套、口

33、罩和覆蓋足背的防滑鞋等 9 使用大小不合適的個人防護(hù)用品，個人防護(hù)用品穿戴、脫卸的程序、方法不符合要求 9 均可能存在人員感染或污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。預(yù)防控制措施選擇正規(guī)、符合質(zhì)量要求的防護(hù)用品 9 使用前進(jìn)行必要的培訓(xùn)，按照規(guī)定的程序正確使用、脫卸。(4)應(yīng)急救治設(shè)施和用品主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別實(shí)驗(yàn)室若沒有配備洗眼器、應(yīng)急藥箱等必要的應(yīng)急設(shè)施和物品，或配備的急救用品種類不全、不合適或過期，則會導(dǎo)致急用時(shí)無法發(fā)揮作用。預(yù)防控制措施在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)正確配備洗眼器，確保其功能正常。配備的 75% 乙醇、碘伏或其他消毒劑、創(chuàng)可貼等急救物品與實(shí)驗(yàn)活動相適應(yīng)并在有效期內(nèi)使用，專人負(fù)責(zé)管理 9 定期維護(hù)、清理和更新。( 5)

34、消毒滅菌劑 要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 消毒劑產(chǎn)品無生產(chǎn)許可證、過期、配制方法或濃度不正確、種類選擇不合理，將會導(dǎo)致消毒效果降低、生物滅活能力降低或?qū)ξ锲犯g性增加、對皮膚造成剌激等問題。 防控制措施 選擇符合國家標(biāo)準(zhǔn)的正規(guī)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品 9 選擇合適的消毒劑，按照規(guī)定的消毒方法、消毒時(shí)間和消毒濃度(劑量)進(jìn)行消毒，避免使用過期產(chǎn)品;消毒過程中，消毒人員應(yīng)做好必要的個體防護(hù)，防止發(fā)生意外。根據(jù)軍團(tuán)菌特點(diǎn)，可選用70%75% 酒精和稀釋1025 倍、50 100 倍、 200 倍的施康消毒劑 作為實(shí)驗(yàn)室常用消毒劑。7. 管理體系的風(fēng)險(xiǎn)推薦精選 (1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別管理體系(包括應(yīng)急預(yù)案)是否健全和完善，是否符

35、合實(shí)際管理要求，程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書和操作規(guī)程是否科學(xué)和具有可操作性，是否能確保生物安全 ，61推薦精選病原棋生物實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險(xiǎn)評估報(bào)告實(shí)例的主要因素。如果組織結(jié)構(gòu)不健全、設(shè)置不合理、體系文件與實(shí)際工作不匹配，以及部門職責(zé)不清或銜接不當(dāng)?shù)?，就都可能帶來安全風(fēng)險(xiǎn)。(2)預(yù)防控制措施定期開展對管理體系的評審，包捂應(yīng)急預(yù)案、檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范(SOP)等，發(fā)現(xiàn)問題應(yīng)及時(shí)修訂、完善，以確保生物安全管理體系持續(xù)有效運(yùn)行。四)工作人員的風(fēng)險(xiǎn)評估與預(yù)防控制措施 (1)人員數(shù)量和素質(zhì) 主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別人員過少會因缺少相互提示監(jiān)督或因工作量增大而導(dǎo)致操作過 中工作失誤增加，風(fēng)險(xiǎn)增加。預(yù)防控制措施采樣和檢測人員數(shù)量應(yīng)與

36、工作量相匹配，盡量有 2 名工作人員同時(shí)進(jìn)行采樣和檢測工作，質(zhì)量監(jiān)督員加強(qiáng)對實(shí)驗(yàn)活動關(guān)鍵步驟的監(jiān)督。(2) 人員結(jié)構(gòu)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別實(shí)驗(yàn)室檢測人員職稱分布不合理，新進(jìn)人員沒有高資歷人員帶 教操作，不能很好地應(yīng)對意外事件，風(fēng)險(xiǎn)增加。預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室檢測人員的年齡和資歷結(jié)構(gòu)應(yīng)配備合理 9 新進(jìn)人員應(yīng)由高 資歷人員帶教或監(jiān)督操作。(3) 職業(yè)操守主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別軍團(tuán)菌檢測存在較大的生物安全風(fēng)險(xiǎn) 9 若政治思想素質(zhì)不高、責(zé) 任心不強(qiáng)的人員參與該項(xiàng)工作，則產(chǎn)生生物危害而危及人員安全、環(huán)境安全與社會安定的 可能性較大。預(yù)防控制措施加強(qiáng)工作人員職業(yè)道德教育，培養(yǎng)工作責(zé)任心。2. 健康管理(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別

37、健康狀況主要包括生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。若實(shí)驗(yàn)室檢測相關(guān)人員出現(xiàn)呼吸道感染癥狀、機(jī)體免疫力低下，或其他不適合工作的狀況，則職業(yè)暴露 風(fēng)險(xiǎn)增加。(2) 預(yù)防控制措施建立健康申報(bào)制度，遇有人員出現(xiàn)呼吸道感染癥狀、機(jī)體免疫力低下及其他不適合工作的情況時(shí)，應(yīng)及時(shí)向科室負(fù)責(zé)人報(bào)告并暫停工作。3. 人員資質(zhì)(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別檢測人員不具備衛(wèi)生檢測相關(guān)學(xué)歷教育背景，不熟悉軍團(tuán)菌檢測方法及操作規(guī)范，未執(zhí)行相關(guān)的專業(yè)知識培訓(xùn)和考核，未獲得上崗證 9 無法保證工作質(zhì)量和安全。(2) 頂防控制措施檢測人員必須是檢驗(yàn)或相關(guān)專業(yè)畢業(yè) 9 經(jīng)過上崗培訓(xùn)和考核合格。上崗培訓(xùn)內(nèi)容至少應(yīng)包括軍團(tuán)菌檢測相關(guān)基礎(chǔ)理論、相關(guān)檢測

38、技術(shù)及管理要求、實(shí)驗(yàn) 操作步驟、檢測質(zhì)量保證與質(zhì)量控制。要求掌握相關(guān)專業(yè)知識和技能，能獨(dú)立熟練地操作，了解相關(guān)技術(shù)、質(zhì)量控制及生物安全要求的新進(jìn)展，實(shí)驗(yàn)室在使用新檢測方法前，須對 技術(shù)人員進(jìn)行再培訓(xùn)。4生物安全培訓(xùn)要求推薦精選（1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 檢測人員、輔助人員、后勤保障人員、進(jìn)修實(shí)習(xí)人員上崗前沒有" 62 推薦精選四章呼吸道病原做生物實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險(xiǎn)評估報(bào)告實(shí)例接受嚴(yán)格的生物安全以及相關(guān)生物安全設(shè)備操作的技術(shù)培訓(xùn)，易導(dǎo)致生物安全事故的 發(fā)生。(2)預(yù)防控制措施檢測人員、輔助人員、后勤保障人員每年參加本中心組織的生物安全知識或生物安全操作技術(shù)培訓(xùn)、考核。上崗前熟練掌握生物安全儀器設(shè)備

39、、設(shè)施操作技術(shù) 9 具備相關(guān)的安全防護(hù)能力。進(jìn)修實(shí)習(xí)人員參與實(shí)驗(yàn)活動前必續(xù)進(jìn)行生物安全知識的培訓(xùn)，在帶教老師的監(jiān)督下工作。5應(yīng)急事件處理能力（1）主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別實(shí)驗(yàn)人員上崗前沒有接受實(shí)驗(yàn)室意外事故處理、職業(yè)暴露后預(yù)防等突發(fā)事件處置的培訓(xùn) ，一旦發(fā)生意外事件 9 就不能有效地進(jìn)行早期處理和控制生物安全事件。(2)預(yù)防控制措施 實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室意外事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度和病原微生物生物安全應(yīng)急處置技術(shù)方案中規(guī)定的要求進(jìn)行應(yīng)急事件的處置，強(qiáng)化職業(yè)暴露的應(yīng)急處理能力。(五實(shí)驗(yàn)室非常規(guī)活動中的風(fēng)險(xiǎn)評估與預(yù)防控制措施(1)主要的實(shí)驗(yàn)室非常規(guī)活動實(shí)驗(yàn)室外專業(yè)人員對實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備的維護(hù)、維修

40、、檢定/校準(zhǔn)、檢測驗(yàn)證(如主要設(shè)施設(shè)備的檢測驗(yàn)證)和更換(如高效過濾器等的更換)等。實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員對實(shí)驗(yàn)室及公共環(huán)境的保潔、實(shí)驗(yàn)器材的清洗消毒。實(shí)驗(yàn)室外人員參觀實(shí)驗(yàn)室和上級部門對實(shí)驗(yàn)室的檢查。任何其他人員需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事實(shí)驗(yàn)活動外的行為。(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別上述人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事相關(guān)活動 9 特別是發(fā)生不慎打翻、打破標(biāo)本管或損壞儀器零部件等情況時(shí) 9 可能會引起實(shí)驗(yàn)室感染的風(fēng)險(xiǎn)。實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行過程中 9 某些人員需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室參觀 9 存在影響實(shí)驗(yàn)活動正常運(yùn)行或 者導(dǎo)致相關(guān)或不相關(guān)的設(shè)施設(shè)備損壞的風(fēng)險(xiǎn)。c(3)預(yù)防控制措施實(shí)行人員準(zhǔn)入、登記制度。進(jìn)修實(shí)習(xí)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事檢測活動前， 必須先

41、進(jìn)行生物安全和實(shí)驗(yàn)規(guī)章制度的培訓(xùn)。參觀和檢查活動的范圍應(yīng)盡可能不涉及實(shí)驗(yàn)區(qū)域。若中心實(shí)驗(yàn)室外專業(yè)人員和實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員確需進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相關(guān)活動， 或上級部門需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢查， 則應(yīng)由中心實(shí)驗(yàn)室人員陪同。實(shí)驗(yàn)室外專業(yè)人員和實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員必須要有相應(yīng)的專業(yè)知識，應(yīng)對其進(jìn)行 生物安全培訓(xùn)，提供安全指南，實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)協(xié)助指導(dǎo)和規(guī)范進(jìn)入人員在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的活動并對其安全行為進(jìn)行監(jiān)督 9 進(jìn)入人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)管理規(guī)定 9 以確保人員和環(huán)境安全。進(jìn)入人員未經(jīng)許可絕對不能私自動用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有標(biāo)志的危險(xiǎn)品(除非經(jīng)過授權(quán)) ， 絕不能將未經(jīng)消毒處理的物品拿出實(shí)驗(yàn)區(qū)。4 在生物安全BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行

42、設(shè)施、設(shè)備維護(hù)維修過程中，若發(fā)生意外事件，則應(yīng)立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人根據(jù)造成的事故進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估，采取應(yīng)對措施。推薦精選 63 。推薦精選病原微生物實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險(xiǎn)評估報(bào)告實(shí)例按專業(yè)技術(shù)要求進(jìn)行設(shè)施、設(shè)備的維護(hù)維修時(shí) 9 不能私自動用其他設(shè)施設(shè)備。若導(dǎo)致相關(guān)或不相關(guān)的設(shè)施、設(shè)備損壞時(shí)，則應(yīng)及時(shí)報(bào)告。當(dāng)需要更換HEPA 過濾膜或高效過驚器時(shí) 9 應(yīng)先對高效過濾器、 HEPA 過濾膜等作原位消毒后，專業(yè)人員才能進(jìn)行更換。為確保自己和他人的安全，禁止未穿防護(hù)服的人員隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的防護(hù)區(qū)域。 同時(shí)也禁止穿防護(hù)服的人員走出實(shí)驗(yàn)室的防護(hù)區(qū)域。對實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施、設(shè)備進(jìn)行維護(hù)工作時(shí)動作輕柔，避免產(chǎn)生氣溶

43、膠。離開實(shí)驗(yàn)室前 9 所有人員必須洗手。六被誤用和惡意使用的風(fēng)險(xiǎn)與預(yù)防控制措施1主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別陽性標(biāo)本未明確標(biāo)識，未嚴(yán)格實(shí)行雙人雙鎖管理 9 實(shí)驗(yàn)活動結(jié)束后不及時(shí)對操作場所進(jìn)行消毒，工作人員在不知情的情況下可能誤用標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)材料和 設(shè)施設(shè)備等 9 導(dǎo)致人員感染和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染、人員受傷或設(shè)施設(shè)備損壞等事故。2預(yù)防控制措施實(shí)行嚴(yán)格的人員準(zhǔn)入和持證上崗制度。所有獲得批準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作的人員，必須嚴(yán)格按規(guī)程操作實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)施、設(shè) 備， 以及其他一切實(shí)驗(yàn)活動 9 不得私自動用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)任何不熟悉的物品。發(fā)生事故時(shí)必須及時(shí)報(bào)告并作必要的處理和記錄。實(shí)驗(yàn)所用材料和試劑等必須有明確的標(biāo)識。陽性際本實(shí)施嚴(yán)格的雙

44、人雙鎖管理， 上送的陽性樣本必須經(jīng)中心蓋章批準(zhǔn)，采用專 用包裝，并由專業(yè)人員全程護(hù)送。(七)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室已發(fā)生的事故分析和從中得到的啟示目前，已有軍團(tuán)菌檢測導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室人員感染的相關(guān)報(bào)道，主要原因是采樣人員現(xiàn)場采樣和實(shí)驗(yàn)室人員在進(jìn)行樣本前處理、檢驗(yàn)、廢棄物處置等工作過程中，個人防護(hù)不到位而吸入氣溶膠導(dǎo)致感染。因此，應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室相關(guān)規(guī)定，按照風(fēng)險(xiǎn)評估報(bào)告制訂的要求規(guī)范執(zhí)行，可降低和規(guī)避職業(yè)暴露風(fēng)險(xiǎn)。三、實(shí)驗(yàn)室理化因素風(fēng)險(xiǎn)評估及安全防護(hù)措施一)紫外線1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別潔凈實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的傳遞窗、生物安全柜、 BSL-2 實(shí)驗(yàn)室均使用紫外線燈進(jìn)行物體表面消毒。紫外線波長為 250 280nm ，主要影響眼

45、睛和皮膚9 引起急性角膜炎和結(jié)膜炎、慢性白內(nèi)障等眼疾病 9 還可誘發(fā)皮膚癌。紫外線燈開啟時(shí) 9 人員在不知情的情況下進(jìn)入可受到傷害。2. 安全防護(hù)措施在實(shí)驗(yàn)室工作應(yīng)避免紫外線直接照射人體，特別是眼部。生物安全柜表面應(yīng)張貼紫外線危害的標(biāo)識 9 提醒實(shí)驗(yàn)人員小心紫外線危害。在進(jìn)行紫外線消毒時(shí) 9 實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)盡量遠(yuǎn)離消毒區(qū)域。如此 9 基本可以規(guī)避紫外線對人體的危害。（二）輻射1主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 輻射源或輻射事故可以間接導(dǎo)致病原微生物屏障系統(tǒng)的破壞，增加實(shí)驗(yàn)人員被病原微生物感染的風(fēng)險(xiǎn)。2預(yù)防控制措施 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)遠(yuǎn)離輻射源，如果無法避開，則應(yīng)采取物理措施，防。64。推薦精選第四章呼吸道病原微生物實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)

46、險(xiǎn)評估報(bào)告實(shí)例止輻射源對檢測工作和人員的健康產(chǎn)生影響。本中心實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部和周邊建筑群均沒有輻射源，所以 9 輻射風(fēng)險(xiǎn)基本不用考慮。王)施康清洗消毒劑1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別施康清洗消毒劑I屬于含爭氯消毒劑，有效氯的含量為 4. 55%5.55% ，次氯酸鈉為主要?dú)⒕蜃?。含氯的消毒液會殘留在空氣中不揮發(fā)9 長期使用會使人感到頭疼、惡心并剌激黏膜 9 對于有體質(zhì)過敏的人，還容易引發(fā)過敏、哮喘疾病等。高濃度的含氯消毒劑對人的呼吸道黏膜和皮膚有明顯的剌擻作用，可使人流淚、咳嗽，并剌激 皮膚和黏膜，嚴(yán)重者可出現(xiàn)氯氣中毒。急性中毒者出現(xiàn)躁動、惡心、嘔吐、呼吸困難等癥狀，甚至因窒息而死。2. 安全防護(hù)措施按照使用

47、說明，根據(jù)消毒對象不同而配制不同的稀釋倍數(shù)，避免使用不必要的高濃度的消毒液 9 稀釋和使用時(shí)戴好手套 9 消毒后可及時(shí)開窗通風(fēng)，基本可規(guī)避消毒液對人體的危害。(四真他1 主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的照明和聲音(生物安全柜等)有可能因強(qiáng)光和噪聲對人員的健康造成損害。2. 安全防護(hù)措施對實(shí)驗(yàn)室的照明和聲音等參數(shù)進(jìn)行檢測，確保合格，避免強(qiáng)光和噪聲對人員健康的損害。四、實(shí)驗(yàn)室火災(zāi)險(xiǎn)評估與頓防控制措施1 主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識別 (1)超負(fù)荷用電，電線過長。(2) 電器和電源老化、電器保養(yǎng)不良，例如電纜的絕緣層破舊或損壞。(3) 用火不當(dāng)?shù)纫l(fā)火災(zāi)。(4) 儀器設(shè)備在不使用時(shí)未關(guān)閉電源。(5) 使用的儀器設(shè)備不是專為

48、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)計(jì)。(6) 易燃、易爆品處理、保存不當(dāng)。(7) 不相容化學(xué)品沒有正確隔離。(8) 在易燃物品和蒸汽附近有能產(chǎn)生火花的設(shè)備。 (9) 通風(fēng)系統(tǒng)不當(dāng)或不充分。2. 預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室采取以下預(yù)防控制措施避免火災(zāi)發(fā)生 9 保證發(fā)生火災(zāi)后能夠安全撤離實(shí)驗(yàn)室。(1)定期檢查電器插座、電線絕緣層是否完好，保證用電負(fù)荷，對易燃、易爆等危險(xiǎn)品進(jìn)行有效區(qū)域隔離。(2) 實(shí)驗(yàn)室配備滅火器。放置在易取的地點(diǎn) 9 擺放部位張貼滅火器標(biāo)識。該滅火器用于撲滅可控制的火災(zāi) 9 幫助人員撤離火場;對滅火器進(jìn)行定期檢查和維護(hù)， 確保其有效使用。(3) 實(shí)驗(yàn)室需裝設(shè)應(yīng)急燈，所有出口都有黑暗中可見的"緊急出口

49、"標(biāo)識;當(dāng)出現(xiàn)緊急狀況時(shí)，實(shí)驗(yàn)室所有出口的鎖必須處于開啟狀態(tài)，出口設(shè)計(jì)應(yīng)保證不經(jīng)過高危險(xiǎn)區(qū)域就能逃脫，所有出口都能通向一個開放空間。& 65 *推薦精選病原微生物實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險(xiǎn)評估報(bào)告實(shí)例(4)走廊、流通區(qū)域不得放置障礙物，不受人員流動和滅火設(shè)備移動的影響。(5) 在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)顯著位置張貼火警電話標(biāo)識。實(shí)驗(yàn)室每年對工作人員進(jìn)行消防知識培訓(xùn)，包括消防器材的使用、火災(zāi)發(fā)生時(shí)的應(yīng)急行動等。五、自然災(zāi)害風(fēng)險(xiǎn)評估與安全防護(hù)措施自然災(zāi)害可能導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)室緊急狀況主要包括水災(zāi)和地震等。推薦精選（一）水災(zāi)1風(fēng)險(xiǎn)識別 水災(zāi)可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞 9 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染性材料隨水外溢。2. 安

50、全防護(hù)措施(1)在安全手冊中制訂實(shí)驗(yàn)室緊急事件應(yīng)急預(yù)案) ，并對所有實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行培訓(xùn)。(2)實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生水災(zāi)報(bào)警，應(yīng)立刻停止工作。首先，考慮實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染性物質(zhì)和 人員的轉(zhuǎn)移。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人、中心主任應(yīng)根據(jù)條件及時(shí)采取對策 9 第一時(shí)間聯(lián)系相關(guān)消防人員。消防人員應(yīng)有防護(hù)措施，并在受過訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)室工作人員陪同下，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室完成菌毒種和人員的安全轉(zhuǎn)移工作。（二）地震1風(fēng)險(xiǎn)識別 發(fā)生地震等自然災(zāi)害會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞，存在人員傷害和實(shí)驗(yàn)室感染性材料外溢的風(fēng)險(xiǎn)。推薦精選2. 安全防護(hù)措施實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采取措施降低自然災(zāi)害帶來的風(fēng)險(xiǎn)，保證災(zāi)害發(fā)生后實(shí)驗(yàn)人員能夠安全撤離實(shí)驗(yàn)室9 減少對人員和環(huán)境的影響

51、。發(fā)生地震后，首先，設(shè)立距實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)20m范圍內(nèi)的封鎖區(qū)。其次 9 對封鎖區(qū)進(jìn)行消毒 9 然后由專業(yè)人員在做好個人防護(hù)的前提下對實(shí)驗(yàn)內(nèi)部環(huán)境邊消毒邊清理， 清理到樣品保存地點(diǎn)。如果保藏樣品的容器沒有破壞，則可安全轉(zhuǎn)移到其他安全的實(shí)驗(yàn)室存放。如果保藏樣品的容器已被破壞和發(fā)生外溢，則應(yīng)立即用可靠方法進(jìn)行徹底消毒滅菌。處理現(xiàn)場的人員需要由生物安全委員會評估暴露級別和暴露源級別，決定是否用藥及確定預(yù)防性用藥方案。六、生物安全及其他緊急事件（事故）處理預(yù)案(一)實(shí)驗(yàn)室主生物安全事件（事故）處理措施(1)當(dāng)生物安全柜或潔凈實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)持續(xù)正壓時(shí) 9 室內(nèi)人員應(yīng)立即停止操作，并通知運(yùn)行保障人員采取措施恢復(fù)

52、負(fù)壓。如果不能及時(shí)恢復(fù)和保持負(fù)壓，應(yīng)停止實(shí)驗(yàn)，并按規(guī)程退出。發(fā)生此類事故或發(fā)生意外停電， 造成具有傳染性物質(zhì)暴露潛在危險(xiǎn)的事故和污染時(shí)，工作人員除了采取緊急措施外，還應(yīng)立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室安全負(fù)責(zé)人，組織對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行終末消毒。(2) 在離心過程中離心管破裂時(shí) ，應(yīng)馬上關(guān)閉電源，讓離心機(jī)停止工作，并靜止 30min。然后緩慢打開離心機(jī)蓋，將離心杯平穩(wěn)地拿到生物安全柜中。如果發(fā)生泄漏，則用1%的次氯酸鈉消毒液灌人離心杯腔體中消毒 30min，然后棄去消毒掖和離心管碎片，將離心杯清洗后擦干。(3) 發(fā)生污染物潑濺或溢出時(shí)，立即用清潔布或吸水紙覆蓋污染處，并倒上 1025倍稀釋的施康消毒液，作用至少 30m

53、in ，方可清理全部污染物,用消毒劑擦拭污染區(qū)域。所，66 '推薦精選第四章呼吸道病原徽生物實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險(xiǎn)評估報(bào)告實(shí)例有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。如發(fā)生大范圍污染物擴(kuò)散事故時(shí)，應(yīng)立即通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場。待其查清情況，確定消毒方案，并組織對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行終末消毒。(4)發(fā)生空氣污染時(shí)，可采用低溫蒸汽甲醛氣體進(jìn)行消毒。甲醛有致癌作用，不宜用于生物安全柜和實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)空氣消毒。(二其他緊急事件(事故)處理措施 在制訂的應(yīng)急預(yù)案中應(yīng)包括消防人員和其他緊急救助人員。應(yīng)事先告知他們哪些實(shí)驗(yàn)室有潛在的感染性物質(zhì)，讓他們熟悉實(shí)驗(yàn)室的布局和設(shè)備。實(shí)驗(yàn)室人員要熟悉緊急撤離的情況及緊急撤離

54、的路線標(biāo)識，在實(shí)驗(yàn)室發(fā)生不可控制的火災(zāi)、水災(zāi)、爆炸或其他危險(xiǎn)情況時(shí)，為確保工作人員的安全，要進(jìn)行緊急撤離。所有實(shí)驗(yàn)室人員須了解緊急撤離的行動計(jì)劃、撤離的路線和緊急撤離的集合地點(diǎn)，每年至少參加一次緊急撤離演習(xí)，包括急救設(shè)備使用和采取相應(yīng)急救措施。(三)生物安全及其他緊急事件(事故)報(bào)告和記錄 (1)發(fā)生生物安全及其他緊急事件時(shí)，在緊急處理的同時(shí)必須向中心主管領(lǐng)導(dǎo)和生物安全委員會報(bào)告。(2) 對于生物安全事件必須進(jìn)行登記，記錄發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)、詳細(xì)經(jīng)過及處理方 法等。七、生物安全和生物安全保障風(fēng)險(xiǎn)管理 (一)生物安全風(fēng)險(xiǎn)評估依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)險(xiǎn)評估所依據(jù)的數(shù)據(jù)及擬采取的風(fēng)險(xiǎn)控制措施、安全操作規(guī)程等均應(yīng)以國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會、世界衛(wèi)生組織、國際標(biāo)準(zhǔn)化組織等機(jī)構(gòu)或行業(yè)權(quán)威機(jī)構(gòu)發(fā)布的指南、 標(biāo)準(zhǔn)等為依據(jù)。(二)危險(xiǎn)發(fā)生的慨率評倍(見表 4-3)表 4-3 軍團(tuán)菌危險(xiǎn)發(fā)生的概率評估推薦精選序號潛在危險(xiǎn)因素危害發(fā)生固有措施殘留風(fēng)險(xiǎn)可控 程度概率風(fēng)險(xiǎn)合理性風(fēng)險(xiǎn)程度推薦精選采血過程中患者咳嗽或打噴嚏l導(dǎo)致其飛沫入侵采血人員口、鼻高度