酶的特異性課件

1、1實(shí)驗(yàn)四實(shí)驗(yàn)四 影響酶活性影響酶活性的因素的因素 2一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊弧?shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察淀粉在水解過程中遇碘后溶液顏色的變化。觀察不同底物、溫度、ph、激活劑與抑制劑對(duì)唾液淀粉酶活性的影響。3二、原理二、原理影響酶活性的因素包括：底物類型、酶濃度、底物濃度、產(chǎn)物濃度、抑制劑、激活劑、ph值、溫度等淀粉在淀粉酶的作用下被降解成單糖，這種降解過程是逐步進(jìn)行的，降解的中間產(chǎn)物遇碘曾現(xiàn)不同的顏色： 淀粉 紅色糊精 無色糊精 麥芽糖 葡萄糖 （紫藍(lán)色）（紅色） （無色） 所以根據(jù)水解液和碘反應(yīng)的顏色，可以判斷水解是否已完全。4三、試劑和器材三、試劑和器材 1. 試劑 新鮮唾液稀釋液、1%蔗糖溶液、benedic

2、t試劑、0.5%淀粉、含0.3%nacl的0.5%淀粉溶液、 5氯化鈉溶液、0.1硫酸銅溶液、 0.2 mol/l磷酸氫二鈉溶液、檸檬酸鈉溶液、ki-i2溶液 2. 器材 恒溫水浴鍋、冰箱、電磁爐5四、操作方法四、操作方法1. 唾液淀粉酶液的準(zhǔn)備：實(shí)驗(yàn)者先用蒸餾水嗽口，然后含一口蒸餾水于口中，輕嗽一、二分鐘，吐入小燒杯中。將其稀釋5-20倍。2. 淀粉酶活性的檢測： 取一支試管，注入0.5%淀粉溶液3 ml與稀釋的唾液1 ml?；靹蚝蟛迦?支玻棒，將試管連同玻棒置于37水浴中。不時(shí)地用玻棒從試管中取出1滴溶液，滴加在白磁板上，隨即加1滴碘液，觀察溶液呈現(xiàn)的顏色。此實(shí)驗(yàn)延續(xù)至溶液僅表現(xiàn)碘被稀釋后

3、的微黃色為止。記錄淀粉在水解過程中，遇碘后溶液顏色的變化及反應(yīng)時(shí)間。根據(jù)反應(yīng)時(shí)間調(diào)整酶的稀釋倍數(shù)。6實(shí)驗(yàn)四實(shí)驗(yàn)四1 1 酶的特異性酶的特異性7一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解酶的特異性并掌握檢查酶的特異性的方法和原理。二、原理二、原理 酶的特異性是指一種酶只能對(duì)一種或一類化合物（此類化合物通常具有相同的化學(xué)鍵）起作用，而不能對(duì)別的化合物起作用。如淀粉酶只能催化淀粉水解，對(duì)蔗糖的水解無催化作用。 本實(shí)驗(yàn)以唾液淀粉酶（含淀粉酶和少量麥芽糖酶）對(duì)淀粉的作用為例，說明酶的特異性。淀粉和蔗糖都沒有還原性，但淀粉水解產(chǎn)物為葡萄糖，蔗糖水解產(chǎn)物為果糖和葡萄糖，均為還原性糖，能與benedict試劑反應(yīng)，生成磚紅色的氧化亞

4、銅沉淀。8三、試劑和器材 1. 試劑 新鮮唾液稀釋液、1%蔗糖溶液、benedict試劑、0.5%淀粉、含0.3%nacl的0.5%淀粉溶液 2. 器材 恒溫水浴鍋四、操作方法 1. 檢查試劑 取2只試管，按下表操作。 9 試管 編號(hào)試劑處理 1 20.3nacl 的0.5%淀粉溶液/ml3 2%蔗糖溶液/ml3benedict試劑/ml22 沸水浴煮沸23min記錄觀察結(jié)果10 淀粉酶的專一性實(shí)驗(yàn) 取2只試管，按下表操作。 試管編號(hào)試劑處理 1 2稀釋的唾液/ml110.3nacl的 0.5%淀粉溶液/ml3 2% 蔗糖溶液/ml3搖勻，置37水浴保溫10min10minbenedict試劑/ml22 沸水浴煮沸23min記錄觀察結(jié)果1112五、注意事項(xiàng) 唾液的稀釋倍數(shù)因人而異，有時(shí)差別很大