培養(yǎng)基模擬灌裝(小容量注射劑)無(wú)菌生產(chǎn)工藝驗(yàn)證方案11

1、審 批部門(mén)姓名簽名日期起草人品質(zhì)管理部起草人生產(chǎn)技術(shù)部起草人針劑車(chē)間審核人針劑車(chē)間審核人生產(chǎn)技術(shù)部審核人質(zhì)檢中心審核人品質(zhì)管理部批準(zhǔn)人質(zhì)量負(fù)責(zé)人分發(fā)部門(mén)： 培養(yǎng)基模擬灌裝（小容量注射劑）無(wú)菌生產(chǎn)工藝驗(yàn)證小組一、概述廠區(qū)無(wú)菌操作生產(chǎn)線，按2010版GMP及其附錄要求進(jìn)行設(shè)計(jì)，是專(zhuān)用于小容量注射劑非最終滅菌產(chǎn)品生產(chǎn)使用。某某產(chǎn)品因無(wú)法進(jìn)行F08分鐘濕熱滅菌，以達(dá)到SAL10-6，但處方可以通過(guò)微生物滯留過(guò)濾器過(guò)濾，故采用除菌過(guò)濾和無(wú)菌工藝相結(jié)合的滅菌方法。推薦精選無(wú)菌生產(chǎn)工藝是制藥領(lǐng)域中最難的工藝之一，確保產(chǎn)品無(wú)菌是該工藝最大的難點(diǎn)，減少無(wú)菌工藝藥品污染風(fēng)險(xiǎn)的兩項(xiàng)重要措施為：人員的培訓(xùn) 無(wú)菌工藝驗(yàn)

2、證。按SFDA化學(xué)藥品注射劑基本技術(shù)要求：培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證是對(duì)設(shè)備、環(huán)境以及人員操作的一種系統(tǒng)驗(yàn)證，是判斷無(wú)菌保證水平的關(guān)鍵手段。故在正式生產(chǎn)前必須按某某產(chǎn)品生產(chǎn)工藝進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證。1 本次驗(yàn)證關(guān)鍵生產(chǎn)工藝流程圖安瓿的清洗干熱滅菌工器具清洗和滅菌配 料稱(chēng) 量燈 檢灌 封除菌過(guò)濾一般區(qū)A級(jí)背景C級(jí)背景D級(jí)背景 2 驗(yàn)證原理將培養(yǎng)基暴露于設(shè)備、容器密封系統(tǒng)的表面和關(guān)鍵環(huán)境條件中，并模擬實(shí)際生產(chǎn)完成工藝操作。對(duì)裝有培養(yǎng)基的密閉容器進(jìn)行培養(yǎng)以檢查微生物的生長(zhǎng)并評(píng)價(jià)結(jié)果，確定實(shí)際生產(chǎn)中產(chǎn)品污染的可能性。對(duì)于失敗的驗(yàn)證進(jìn)行菌種分析并調(diào)查，確認(rèn)并解決可能造成失敗的原因后，重新進(jìn)行驗(yàn)證。3驗(yàn)證次數(shù)按20

3、10版GMP附錄1要求因該生產(chǎn)線為新建廠區(qū)設(shè)施，為培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)的首次驗(yàn)證，故需進(jìn)行連續(xù)三個(gè)批次的驗(yàn)證活動(dòng)。二、驗(yàn)證目的1通過(guò)該工藝驗(yàn)證活動(dòng)證明新設(shè)計(jì)廠房采用既定的無(wú)菌生產(chǎn)工藝能保證產(chǎn)品的無(wú)菌要求；2通過(guò)該工藝驗(yàn)證活動(dòng)證明無(wú)菌操作相關(guān)人員資格，降低人員帶入無(wú)菌的風(fēng)險(xiǎn)；3通過(guò)該工藝驗(yàn)證活動(dòng)確保生產(chǎn)符合現(xiàn)行GMP法規(guī)要求。三、驗(yàn)證范圍和實(shí)施時(shí)間1本驗(yàn)證方案適用于廠區(qū)小容量注射劑車(chē)間無(wú)菌生產(chǎn)線正式投入使用前某某品種小容量注射劑無(wú)菌生產(chǎn)工藝培養(yǎng)基模擬灌裝驗(yàn)證活動(dòng)；推薦精選2計(jì)劃驗(yàn)證實(shí)施時(shí)間為2013年3月4月連續(xù)三個(gè)批次。四、驗(yàn)證小組和職責(zé)1 驗(yàn)證小組根據(jù)驗(yàn)證的內(nèi)容和驗(yàn)證管理文件要求，成立驗(yàn)證小組

4、，驗(yàn)證小組成員見(jiàn)下表，小組人員應(yīng)在最終驗(yàn)證報(bào)告中簽名確認(rèn)。在驗(yàn)證實(shí)施前，方案起草人應(yīng)對(duì)所有相關(guān)參與人員進(jìn)行驗(yàn)證方案的培訓(xùn)，做好培訓(xùn)記錄，并將記錄附于驗(yàn)證報(bào)告后。姓名職務(wù)職責(zé)生產(chǎn)技術(shù)部經(jīng)理驗(yàn)證小組組長(zhǎng)，負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的審核和工作總體安排和實(shí)施，組織調(diào)查和處理驗(yàn)證過(guò)程中出現(xiàn)的異常情況技術(shù)管理員負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的起草，提供驗(yàn)證過(guò)程中相關(guān)技術(shù)支持，參與驗(yàn)證異常情況調(diào)查工作車(chē)間主任安排車(chē)間崗位人員配合驗(yàn)證工作的實(shí)施，對(duì)驗(yàn)證過(guò)程的異常情況進(jìn)行協(xié)助調(diào)查，負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的審核車(chē)間技術(shù)副主任負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的起草，提供驗(yàn)證過(guò)程中相關(guān)技術(shù)支持，參與驗(yàn)證異常情況調(diào)查工作配料崗位人員負(fù)責(zé)配料操作和除菌過(guò)濾以及滅菌操作并記錄洗瓶崗

5、位人員負(fù)責(zé)洗瓶和安瓿滅菌操作并記錄灌封崗位人員負(fù)責(zé)灌封操作并記錄燈檢崗位人員負(fù)責(zé)燈檢操作和產(chǎn)品7天和14天的觀察與統(tǒng)計(jì)維修員負(fù)責(zé)驗(yàn)證過(guò)程中設(shè)備的維修工作，參與驗(yàn)證模擬維修活動(dòng)QC負(fù)責(zé)驗(yàn)證相關(guān)檢驗(yàn)工作和檢驗(yàn)數(shù)據(jù)收集統(tǒng)計(jì)工作，參與驗(yàn)證過(guò)程異常情況調(diào)查工作，負(fù)責(zé)驗(yàn)證結(jié)束后培養(yǎng)基的滅活處理工作QC經(jīng)理負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的審核，協(xié)調(diào)驗(yàn)證相關(guān)檢驗(yàn)工作，參與驗(yàn)證異常情況調(diào)查處理QA負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的審核和文件的歸檔，協(xié)調(diào)各部門(mén)相關(guān)工作具體安排QA確保驗(yàn)證活動(dòng)按方案執(zhí)行，確保驗(yàn)證活動(dòng)符合GMP要求，負(fù)責(zé)相關(guān)取樣工作QA負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的起草，組織驗(yàn)證方案相關(guān)培訓(xùn)，參與驗(yàn)證異常情況調(diào)查工作推薦精選質(zhì)量負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的批準(zhǔn)

6、，驗(yàn)證證書(shū)的簽發(fā)2各部門(mén)職責(zé)2.1 品質(zhì)管理部協(xié)助驗(yàn)證活動(dòng)的執(zhí)行參與驗(yàn)證異常情況的調(diào)查和處理參與驗(yàn)證文件的起草工作負(fù)責(zé)驗(yàn)證過(guò)程的取樣負(fù)責(zé)生產(chǎn)監(jiān)督，保證所有數(shù)據(jù)的真實(shí)性和完整性負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的審批和歸檔2.2 質(zhì)檢中心協(xié)助驗(yàn)證活動(dòng)的執(zhí)行，提供必要的取樣工具參與驗(yàn)證異常情況的調(diào)查和處理負(fù)責(zé)相關(guān)檢驗(yàn)工作，提供相關(guān)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)負(fù)責(zé)最終培養(yǎng)基的處理2.3 生產(chǎn)技術(shù)部負(fù)責(zé)驗(yàn)證活動(dòng)的執(zhí)行負(fù)責(zé)驗(yàn)證數(shù)據(jù)的收集和相關(guān)文件的起草負(fù)責(zé)組織驗(yàn)證過(guò)程中異常情況的調(diào)查和處理2.4 生產(chǎn)車(chē)間負(fù)責(zé)驗(yàn)證相關(guān)操作活動(dòng)參與異常情況的調(diào)查和處理參與驗(yàn)證文件的起草和審核2.5 工程部協(xié)助驗(yàn)證活動(dòng)確保其順利完成維修人員參與驗(yàn)證活動(dòng)的實(shí)施2.6

7、物料管理部協(xié)助提供驗(yàn)證活動(dòng)過(guò)程中所需物料五、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估分析表通過(guò)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，確認(rèn)本次驗(yàn)證活動(dòng)需要驗(yàn)證的項(xiàng)目風(fēng)險(xiǎn)描述可能性嚴(yán)重性可測(cè)性風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)風(fēng)險(xiǎn)控制措施驗(yàn)證項(xiàng)目推薦精選環(huán)境達(dá)不到相關(guān)生產(chǎn)要求中高高高建立廠房清潔消毒規(guī)程，定期環(huán)境監(jiān)測(cè)并趨勢(shì)分析 培養(yǎng)基灌裝全程對(duì)環(huán)境進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)人員造成污染中高高高人員培訓(xùn)并更衣考核上崗，每批對(duì)進(jìn)入無(wú)菌區(qū)人員取樣監(jiān)控所有相關(guān)人員，模擬生產(chǎn)實(shí)際活動(dòng)后取樣，對(duì)最多允許人數(shù)進(jìn)行挑戰(zhàn)滅菌后的衣服，器具等發(fā)生二次污染低高高高驗(yàn)證滅菌后儲(chǔ)存方式和有效期，操作人員培訓(xùn)考核上崗，生產(chǎn)過(guò)程中進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控，生產(chǎn)結(jié)束后與產(chǎn)品接觸表面取樣相關(guān)驗(yàn)證操作與正常生產(chǎn)一致，生產(chǎn)結(jié)束后對(duì)關(guān)鍵表面取樣，

8、儲(chǔ)存方式和有效期在相關(guān)清潔滅菌驗(yàn)證中完成滅菌效果未達(dá)到低高中中所有滅菌裝載和參數(shù)須經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，按經(jīng)驗(yàn)證的操作方式滅菌在設(shè)備驗(yàn)證中完成配液/灌封超過(guò)規(guī)定時(shí)限要求低中低中工藝規(guī)程中明確規(guī)定時(shí)限按照工藝規(guī)定工序最大時(shí)間挑戰(zhàn)進(jìn)行驗(yàn)證灌封設(shè)備故障并維修中中低中人員培訓(xùn)，使用前通過(guò)試機(jī)，并定期設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)模擬維修操作進(jìn)行挑戰(zhàn)驗(yàn)證過(guò)濾系統(tǒng)有效性和污染低高高高過(guò)濾后對(duì)除菌過(guò)濾器進(jìn)行起泡點(diǎn)測(cè)試，使用前進(jìn)行清潔和滅菌處理在無(wú)菌過(guò)濾系統(tǒng)工藝驗(yàn)證中完成，并取過(guò)濾后的藥液進(jìn)行無(wú)菌檢查取樣工具，記錄等傳入污染中低高高所有相關(guān)工具，記錄等進(jìn)入無(wú)菌區(qū)隨廠房消毒，臨時(shí)需要的經(jīng)酒精消毒和紫外加消毒從傳遞窗進(jìn)入在消毒效果驗(yàn)證中完成清

9、潔工具和清潔消毒劑使用帶來(lái)的污染低高高高清潔工具需滅菌，清潔消毒劑需除菌過(guò)濾后進(jìn)入無(wú)菌區(qū)在無(wú)菌過(guò)濾效果和設(shè)備驗(yàn)證中完成灌封所用安瓿造成污染低高高高工藝規(guī)程規(guī)定安瓿的滅菌參數(shù)和暫存時(shí)間在洗烘線驗(yàn)證中完成滅菌效果和單向流保護(hù)，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)灌封前區(qū)域，對(duì)滅菌后的安瓿進(jìn)行取樣推薦精選壓縮空氣帶來(lái)的污染低中高高壓縮空氣加終端過(guò)濾器，并定期確認(rèn)過(guò)濾器的完整性，周期性進(jìn)行壓縮空氣系統(tǒng)驗(yàn)證和監(jiān)測(cè)壓縮空氣系統(tǒng)驗(yàn)證中完成生產(chǎn)過(guò)程中，異常操作造成的風(fēng)險(xiǎn)中低中中嚴(yán)格異常操作的要求，對(duì)于可能污染的藥品報(bào)廢處理模擬中控，倒瓶，倒液，破瓶等情況進(jìn)行挑戰(zhàn)驗(yàn)證產(chǎn)品暴露過(guò)長(zhǎng)帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)中低高低嚴(yán)格控制允許的灌封速度挑戰(zhàn)工藝規(guī)程中允許的

10、最慢速度進(jìn)行灌封六、驗(yàn)證項(xiàng)目的合格標(biāo)準(zhǔn)與具體活動(dòng)1確保已完成下列驗(yàn)證和確認(rèn)工作：WFI和PW系統(tǒng)驗(yàn)證HVAC系統(tǒng)的驗(yàn)證壓縮空氣系統(tǒng)的驗(yàn)證過(guò)濾系統(tǒng)的驗(yàn)證無(wú)菌區(qū)人員更衣確認(rèn)滅菌系統(tǒng)滅菌效果和儲(chǔ)存期確認(rèn)洗烘灌聯(lián)動(dòng)線確認(rèn)無(wú)菌區(qū)清潔消毒方法驗(yàn)證恒溫恒濕箱確認(rèn)配制罐的確認(rèn)無(wú)菌分析方法學(xué)驗(yàn)證2確保以下文件已有草案或生效某某品種的生產(chǎn)工藝規(guī)程某某品種的批生產(chǎn)記錄配料崗位SOP工器具處理崗位SOP洗烘瓶崗位SOP灌封崗位SOP各相關(guān)設(shè)備的清潔、操作和維護(hù)保養(yǎng)SOP3 驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn)3.1按照藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南2003版相關(guān)規(guī)定：無(wú)菌性的可置信限度為95%，產(chǎn)品允許污染概率不得大于推薦精選0.1%（即無(wú)菌分裝藥品的

11、無(wú)菌保證水平SAL不得低于10-3）。其合格標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)下表模擬灌裝數(shù)量/瓶污染控制數(shù)量/瓶299647420474362941629577512775233.2按照藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2010版附錄無(wú)菌藥品第47條相關(guān)規(guī)定：養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)當(dāng)足以保證評(píng)價(jià)的有效性。批量較小的產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌裝的數(shù)量應(yīng)當(dāng)至少等于產(chǎn)品的批量。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)的目標(biāo)是零污染，應(yīng)當(dāng)遵循以下要求：（一）灌裝數(shù)量少于5000支時(shí)，不得檢出污染品。（二）灌裝數(shù)量在5000至10000支時(shí)：有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗(yàn)；有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗(yàn)證。（三）灌裝數(shù)量超過(guò)10000支時(shí)：有1支污染，需調(diào)查；有2支污染，需

12、調(diào)查后，進(jìn)行再驗(yàn)證。（四）發(fā)生任何微生物污染時(shí)，均應(yīng)當(dāng)進(jìn)行調(diào)查。3.3 綜合上述標(biāo)準(zhǔn)，本次驗(yàn)證數(shù)量定在50006294瓶之間，灌裝量為2ml，且其污染數(shù)不得超過(guò)1瓶。4 驗(yàn)證活動(dòng)前其他準(zhǔn)備工作經(jīng)確認(rèn)合格的胰酶酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)250g×2瓶，經(jīng)濕熱滅菌并用橡膠塞封口的無(wú)菌取樣試管20支，接觸碟60個(gè)，沉降菌培養(yǎng)皿15個(gè)，金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、黑曲霉、生孢梭菌，枯草芽孢桿菌和白色念珠菌等各類(lèi)菌種，API鑒別菌種試紙，經(jīng)滅菌的具塞三角瓶10個(gè)，8000支5ml規(guī)格的無(wú)色安瓿瓶，能控制2328和3035的培養(yǎng)區(qū)域以及便于觀察和運(yùn)輸?shù)闹修D(zhuǎn)箱若干。5工器具滅菌和準(zhǔn)備將模擬灌裝

13、活動(dòng)中需要用到的生產(chǎn)工器具、潔凈服和設(shè)備提前一天進(jìn)行滅菌，按相關(guān)SOP要求儲(chǔ)存，將需要使用的消毒劑提前一天進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾準(zhǔn)備，將無(wú)菌操作區(qū)提前一天按清潔SOP要求進(jìn)行清潔消毒，按生產(chǎn)工藝流程提前一天領(lǐng)取TSB和相關(guān)包材存放在車(chē)間內(nèi)。6配料配料前取該崗位所需注射用水進(jìn)行內(nèi)毒素檢查，確保內(nèi)毒素檢驗(yàn)合格后，取胰酶酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)360g按配料崗位操作SOP加入已清潔滅菌的配料罐中，緩緩加入60以上注射用水12L，攪拌10分鐘使溶成均勻溶液（注：此處按實(shí)際生產(chǎn)工藝操作，將其中的原輔料換成TSB）。QA用滅菌的具塞三角瓶在配料間取樣50ml，在瓶身標(biāo)明取樣位置、取樣數(shù)量、取樣時(shí)間和樣品名稱(chēng)后送

14、質(zhì)檢中心測(cè)定溶液中微生物負(fù)載。其合格標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)1cfu/ml。7除菌過(guò)濾用經(jīng)提前一天滅菌（是否使用前進(jìn)行完整性測(cè)試按新工藝規(guī)程定）的0.2m聚醚砜除菌過(guò)濾器，過(guò)濾上述培養(yǎng)基溶液。QA取50ml×2瓶過(guò)濾完的培養(yǎng)基，在瓶身標(biāo)明取樣位置、取樣數(shù)量、取樣時(shí)間和樣品推薦精選名稱(chēng)后送質(zhì)檢中心進(jìn)行14天培養(yǎng)的無(wú)菌性檢查（若有菌生長(zhǎng)需對(duì)樣品進(jìn)行菌種鑒定），其余量分裝于已清潔滅菌的中轉(zhuǎn)儲(chǔ)存罐中。濾芯在過(guò)濾完后進(jìn)行氣泡點(diǎn)測(cè)試，以確認(rèn)濾芯的完整性。另取經(jīng)除菌過(guò)濾的培養(yǎng)基180ml分裝于18支10ml的試管中，送質(zhì)檢中心進(jìn)行培養(yǎng)基的微生物生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)。7.1 培養(yǎng)基無(wú)菌性檢查7.1.1方法：其中一只三角瓶樣品在2

15、328培養(yǎng)14天；另一支三角瓶在3035培養(yǎng)14天。7.1.2可接受標(biāo)準(zhǔn)：兩只三角瓶中的培養(yǎng)基在14天內(nèi)應(yīng)無(wú)任何微生物生長(zhǎng)。7.2培養(yǎng)基的微生物生長(zhǎng)試驗(yàn)：7.2.1方法：質(zhì)檢中心QC人員將QA所取的18支樣品，在2支10ml試管中接種枯草芽孢桿菌，接種量100cfu/管，另取一支作為空白對(duì)照；在2支10ml試管中接種白色念珠菌，接種量100cfu/管，另取一支作為空白對(duì)照。其他每2支接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、黑曲霉、生孢梭菌，接種量100cfu/管，分別另取4支作為空白對(duì)照。接種后蓋塞、封口并分別在3035（金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌）和2328（白色念珠菌、

16、黑曲霉）培養(yǎng) 7 天。7.2.2可接受標(biāo)準(zhǔn)：7天內(nèi)接種的各試管的TSB培養(yǎng)基中應(yīng)出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長(zhǎng)，且空白對(duì)照管應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)則判定該培養(yǎng)基微生物性能生長(zhǎng)試驗(yàn)符合要求規(guī)定。8 洗烘瓶生產(chǎn)操作人員將提前一天領(lǐng)取的安瓿8000只，按洗烘瓶崗位操作SOP和相關(guān)工藝要求及時(shí)進(jìn)行清洗滅菌。若洗烘瓶或灌封過(guò)程中損耗過(guò)大，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充清洗安瓿確保滅菌合格安瓿超過(guò)6294瓶。9灌裝加塞：將經(jīng)隧道烘箱滅菌合格的安瓿送入灌裝線，開(kāi)啟灌裝機(jī)，在與實(shí)際生產(chǎn)環(huán)境相同的條件下，將過(guò)濾后的培養(yǎng)基溶液灌入安瓿內(nèi)，并封口，調(diào)節(jié)裝量為2ml瓶，用潔凈區(qū)無(wú)菌空氣代替惰性氣體。無(wú)菌灌裝時(shí)限56小時(shí)（由生產(chǎn)工藝規(guī)程定）。全過(guò)程，

17、設(shè)備慢速運(yùn)行（灌裝速度120支/分鐘）?？刂乒嘌b模式，設(shè)置灌裝前中后三個(gè)階段，每個(gè)階段約灌裝2000支，其余時(shí)間設(shè)備正常運(yùn)行(不走瓶)，每灌封一盤(pán)及時(shí)記錄好灌封時(shí)間和盤(pán)號(hào)放在裝中間產(chǎn)品的盤(pán)內(nèi)。灌封完的樣品及時(shí)傳出無(wú)菌區(qū)。9.1最差灌裝條件的模擬：9.1.1設(shè)備模擬維修：在灌封正常運(yùn)行過(guò)程中，停灌30分鐘，進(jìn)行設(shè)備模擬維修，保持現(xiàn)有人員在操作間內(nèi)，維修結(jié)束按相應(yīng)的清潔SOP消毒后后標(biāo)記設(shè)備再次運(yùn)行后一盤(pán)樣品（約230支），并在記錄上做好備注。9.1.2模擬現(xiàn)場(chǎng)人員最大控制數(shù)在灌裝正常運(yùn)行過(guò)程中，模擬現(xiàn)場(chǎng)最多人員允許數(shù)，如7人，標(biāo)記該過(guò)程中生產(chǎn)出的一盤(pán)樣品（約230支），并在記錄上做好備注。9.1

18、.3模擬灌裝針/管調(diào)整、更換在灌裝正常運(yùn)行過(guò)程中，進(jìn)行緊急停機(jī)，模擬調(diào)整、更換灌裝針/管2支或以上，標(biāo)記更換針/管后灌裝的一盤(pán)樣品（約230支），并在記錄上做好備注。9.1.4模擬空瓶倒瓶、破瓶在灌裝正常運(yùn)行過(guò)程中，模擬倒瓶，破瓶情況，停灌處理，處理結(jié)束后繼續(xù)灌裝，標(biāo)記此后灌裝的一盤(pán)樣品（約230支），并在記錄上做好備注。推薦精選9.1.5模擬藥液瓶破瓶在灌裝正常運(yùn)行過(guò)程中，模擬有藥液瓶破碎，停灌處理，處理結(jié)束后繼續(xù)灌裝，標(biāo)記此后灌裝的一盤(pán)樣品（約230支），并在記錄上做好備注。9.1.6模擬中控抽樣處理的過(guò)程在灌裝正常運(yùn)行過(guò)程中，模擬三次抽樣測(cè)定可見(jiàn)異物、含氧量和裝量的過(guò)程，抽樣過(guò)程中進(jìn)行灌

19、封，標(biāo)記對(duì)應(yīng)的三盤(pán)，并在記錄中做好備注。9.2灌裝過(guò)程的中間控制接觸碟和沉降菌的取樣應(yīng)做好空白對(duì)照。9.2.1人員表面微生物取樣：對(duì)進(jìn)入灌裝區(qū)域的所有人員離開(kāi)無(wú)菌區(qū)前進(jìn)行不少于5個(gè)位置的用接觸碟進(jìn)行表面微生物取樣，可選取樣部位包括：手套、眼鏡、手臂、額頭、口罩和前胸以及取樣人員認(rèn)為可能污染的區(qū)域。合格標(biāo)準(zhǔn)為每個(gè)進(jìn)入A級(jí)區(qū)操作人員每人平均數(shù)1cfu/碟（55mm），且每個(gè)碟子不得超過(guò)1cfu；B級(jí)區(qū)人員為5cfu/碟（55mm）。9.2.2沉降菌的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)：對(duì)灌裝全過(guò)程中應(yīng)對(duì)灌裝A級(jí)區(qū)域進(jìn)行全程動(dòng)態(tài)沉降菌監(jiān)測(cè)，每過(guò)2h更換取樣碟，取樣位置設(shè)為灌裝針頭處，出瓶口，和封口處以及取樣人員認(rèn)為可能污染的

20、區(qū)域。A級(jí)區(qū)經(jīng)時(shí)間折算后平均值1cfu/4小時(shí)/皿（90mm），且每皿不得超過(guò)1cfu/4小時(shí)。9.2.3對(duì)灌裝區(qū)域懸浮粒子的全程動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)：設(shè)備上自帶監(jiān)控系統(tǒng)必須滿(mǎn)足所監(jiān)控懸浮粒子數(shù)（0.5m）3520/立方米的要求；若為外用懸浮粒子計(jì)數(shù)器取樣，取樣部位選定為盡可能靠近灌裝處，合格標(biāo)準(zhǔn)為所監(jiān)控懸浮粒子數(shù)（0.5m）3520/立方米。9.2.4 對(duì)灌裝區(qū)域的動(dòng)態(tài)浮游菌取樣：灌封過(guò)程中選定灌裝針頭處，出瓶口，和封口處以及取樣人員認(rèn)為可能污染的區(qū)域進(jìn)行浮游菌取樣，每個(gè)部位取樣1立方米，要求其折算后平均值1cfu/立方米。9.2.5操作完成后對(duì)關(guān)鍵設(shè)備表面取樣：相關(guān)操作程序結(jié)束后，對(duì)關(guān)鍵設(shè)備表面進(jìn)行取

21、樣，以排除設(shè)備污染，取樣部位包括：灌裝針頭，出瓶后轉(zhuǎn)盤(pán)，暫存藥液的儲(chǔ)罐，A級(jí)區(qū)的過(guò)濾器、呼吸器等，要求平均數(shù)1cfu/碟（55mm），且每個(gè)碟子不得超過(guò)1cfu。9.2.5對(duì)安瓿的取樣：在驗(yàn)證過(guò)程的前、中、后期分別取3支已滅菌的安瓿瓶放置在裝有足量已滅菌的無(wú)菌培養(yǎng)基的三角瓶?jī)?nèi)，并做好標(biāo)記，先后在2328和3035環(huán)境內(nèi)各培養(yǎng)七天，要求無(wú)菌生長(zhǎng)。9.3 所有進(jìn)入無(wú)菌區(qū)人員均應(yīng)登記進(jìn)出時(shí)間。10燈檢檢查將已灌封完畢的產(chǎn)品傳入燈檢區(qū)域，翻轉(zhuǎn)三次確保培養(yǎng)基與包材內(nèi)壁充分接觸，剔除破瓶，將其余產(chǎn)品按原灌裝盤(pán)號(hào)分別裝盤(pán)送培養(yǎng)區(qū)域，每盤(pán)內(nèi)放入原灌封物料標(biāo)簽和燈檢合格數(shù)量。11培養(yǎng)將燈檢完的產(chǎn)品先放置在232

22、8環(huán)境內(nèi)培養(yǎng)7天，期間在第三天將所有產(chǎn)品翻轉(zhuǎn)一次，在第七天觀察污染數(shù)；其后轉(zhuǎn)入3035環(huán)境中內(nèi)培養(yǎng)7天，在第七天培養(yǎng)結(jié)束后統(tǒng)計(jì)污染數(shù)。接受標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)實(shí)際考察數(shù)，按照本文件3.1和3.2項(xiàng)目要求，50006294之間，污染總數(shù)應(yīng)1支，若超過(guò)1支，除非有明確證明是破瓶所致，否則該驗(yàn)證失敗。發(fā)現(xiàn)被污染的樣品應(yīng)進(jìn)行菌種分析。推薦精選12培養(yǎng)基陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)因培養(yǎng)基灌裝過(guò)程中，所有樣品無(wú)菌過(guò)濾后進(jìn)行了時(shí)限儲(chǔ)存和高溫灌封操作，為確保這些操作不影響培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)性，故從燈檢完產(chǎn)品抽取60支進(jìn)行樣品陽(yáng)性對(duì)照，分為3組，每組20支，其中一組西林瓶中接種枯草芽孢桿菌（3035培養(yǎng)），一組西林瓶中接種白色念珠菌（23

23、28培養(yǎng)），一組接種生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)已發(fā)現(xiàn)的菌種（若無(wú)則取消該組試驗(yàn)），接種濃度均小于100cfu/瓶，分別在相應(yīng)溫度下培養(yǎng)5天。5天內(nèi)至少50%以上接種的各安瓿瓶中的TSB培養(yǎng)基中應(yīng)出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長(zhǎng)；對(duì)已經(jīng)出現(xiàn)明顯微生物生長(zhǎng)的西林瓶，各組各取1瓶進(jìn)行鏡檢、API等已確定是添加的菌。七、可能的偏差或漏項(xiàng)的處理評(píng)價(jià)無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)結(jié)果的主要指標(biāo)之一是微生物污染水平，如果試驗(yàn)結(jié)果證明其污染水平超過(guò)規(guī)定的合格限度，則應(yīng)立即停止生產(chǎn)，調(diào)查并記錄污染產(chǎn)生的原因。在調(diào)查結(jié)束并采用相應(yīng)的措施后應(yīng)重復(fù)進(jìn)行培養(yǎng)基無(wú)菌模擬灌裝試驗(yàn)。原因調(diào)查至少應(yīng)包括如下項(xiàng)：a、生產(chǎn)環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)；b、生產(chǎn)環(huán)境懸浮粒子監(jiān)

24、測(cè)數(shù)據(jù)；c、人員和設(shè)備污染的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)；d、生產(chǎn)環(huán)境浮游菌監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)；e、操作間的空氣流向、壓差；f、操作人員的操作方法、培訓(xùn)情況；g、模擬灌裝試驗(yàn)過(guò)程中的異常情況；h、無(wú)菌室生產(chǎn)工具及其他用品的儲(chǔ)存狀況；i、鑒別污染微生物的種、屬，以尋找污染源的線索；j、無(wú)菌室的清潔、清潔堆規(guī)程的培訓(xùn)及執(zhí)行情況；k、無(wú)菌生產(chǎn)用設(shè)備的控制系統(tǒng)和監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的校正；l、生產(chǎn)后過(guò)濾器的完整性檢測(cè)結(jié)果；m、相關(guān)產(chǎn)品、相關(guān)生產(chǎn)過(guò)程存在的問(wèn)題等。原因調(diào)查結(jié)束后，應(yīng)根據(jù)調(diào)查所確定的或可能發(fā)生的原因制定糾正或改進(jìn)方案并予以實(shí)施。當(dāng)改進(jìn)方案實(shí)施之后應(yīng)重復(fù)模擬灌裝試驗(yàn)。八、再驗(yàn)證周期1 當(dāng)空氣凈化系統(tǒng)、灌封和過(guò)濾設(shè)備、除菌過(guò)濾和灌封工

25、藝以及灌封操作人員重大變更后，應(yīng)當(dāng)重復(fù)進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝無(wú)菌生產(chǎn)工藝驗(yàn)證。2 當(dāng)空氣凈化系統(tǒng)連續(xù)停機(jī)超過(guò)1個(gè)月，重新開(kāi)啟生產(chǎn)前3未出現(xiàn)異常情況時(shí)也需每半年至少進(jìn)行一個(gè)批次培養(yǎng)基模擬灌裝無(wú)菌生產(chǎn)工藝驗(yàn)證。推薦精選九、附件 培訓(xùn)記錄,表面微生物監(jiān)測(cè)記錄，懸浮粒子監(jiān)測(cè)記錄，沉降菌監(jiān)測(cè)記錄，浮游菌監(jiān)測(cè)記錄，菌種鑒別記錄，細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)記錄，確認(rèn)相關(guān)驗(yàn)證和確認(rèn)工作，確認(rèn)相關(guān)文件，培養(yǎng)基信息確認(rèn)表，TSB培養(yǎng)基過(guò)濾前微生物限度檢查，TSB培養(yǎng)基無(wú)菌性檢查記錄，培養(yǎng)基微生物生長(zhǎng)試驗(yàn)，安瓿瓶無(wú)菌檢查記錄，人員進(jìn)出無(wú)菌區(qū)登記臺(tái)賬，培養(yǎng)基灌封試驗(yàn)產(chǎn)品培養(yǎng)過(guò)程溫濕度記錄，模擬灌封樣品培養(yǎng)最終結(jié)果記錄，培養(yǎng)基微生物陽(yáng)

26、性對(duì)照培養(yǎng)結(jié)果和TSB（小容量注射劑多少規(guī)格）批生產(chǎn)記錄。推薦精選附件1確認(rèn)相關(guān)驗(yàn)證和確認(rèn)工作項(xiàng)目驗(yàn)證報(bào)告文件號(hào)驗(yàn)證有效期至檢查結(jié)論WFI系統(tǒng)驗(yàn)證符合不符合PW系統(tǒng)驗(yàn)證符合不符合HVAC系統(tǒng)驗(yàn)證符合不符合壓縮空氣系統(tǒng)驗(yàn)證符合不符合過(guò)濾系統(tǒng)驗(yàn)證符合不符合滅菌設(shè)備確認(rèn)符合不符合滅菌儲(chǔ)存和效期驗(yàn)證符合不符合洗瓶機(jī)確認(rèn)符合不符合隧道烘箱確認(rèn)符合不符合灌裝機(jī)確認(rèn)符合不符合無(wú)菌區(qū)清潔消毒驗(yàn)證符合不符合恒溫恒濕箱確認(rèn)符合不符合配制罐確認(rèn)符合不符合無(wú)菌分析方法學(xué)驗(yàn)證符合不符合備注確認(rèn)人/日期復(fù)核人/日期附件2確認(rèn)相關(guān)文件文件名稱(chēng)檢查結(jié)論文件名稱(chēng)檢查結(jié)論工藝規(guī)程符合不符合配料崗位SOP符合不符合批生產(chǎn)記錄符合不

27、符合灌封崗位SOP符合不符合工器具處理崗位SOP符合不符合洗烘瓶崗位SOP符合不符合配制罐清潔、操作和維護(hù)保養(yǎng)SOP符合不符合滅菌柜清潔、操作和維護(hù)保養(yǎng)SOP符合不符合洗瓶機(jī)清潔、操作和維護(hù)保養(yǎng)SOP符合不符合隧道烘箱清潔、操作和維護(hù)保養(yǎng)SOP符合不符合備注確認(rèn)人/日期復(fù)核人/日期推薦精選附件3 培養(yǎng)基信息確認(rèn)表培養(yǎng)基灌封驗(yàn)證的批號(hào)： TSB培養(yǎng)基進(jìn)廠批號(hào)供應(yīng)商上海中科昆蟲(chóng)生物科技開(kāi)發(fā)有限公司TSB培養(yǎng)基有效期至培養(yǎng)基全稱(chēng)胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基說(shuō)明書(shū)中的培養(yǎng)基的配制方法取本品30g,加1L蒸餾水，加熱溶解；分裝，121高壓滅菌15min。若本品出現(xiàn)結(jié)塊，請(qǐng)勿使用。備注：確認(rèn)人/日期：復(fù)核人/日期

28、：附件4TSB培養(yǎng)基過(guò)濾前微生物限度檢查培養(yǎng)基灌封驗(yàn)證批號(hào)培養(yǎng)條件試驗(yàn)方法將 ml的TSB先在2328培養(yǎng)48h，再在3035培養(yǎng)48h，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)。培養(yǎng)時(shí)間24h48h72h96h菌落數(shù)(cfu/ml)結(jié)論合格（1cfu/ml） 不合格確認(rèn)人/日期：復(fù)核人/日期：附件5TSB培養(yǎng)基無(wú)菌性檢查記錄培養(yǎng)基灌封驗(yàn)證批號(hào)培養(yǎng)日期培養(yǎng)天數(shù)12345678910111213142328培養(yǎng)3035培養(yǎng)備注(打“-”表示不長(zhǎng)菌，打“+”表示長(zhǎng)菌)結(jié)論合格（培養(yǎng)14天后均無(wú)任何微生物生長(zhǎng)） 不合格確認(rèn)人/日期：復(fù)核人/日期：推薦精選附件6培養(yǎng)基微生物生長(zhǎng)試驗(yàn)培養(yǎng)基灌封驗(yàn)證批號(hào)試驗(yàn)日期菌種名稱(chēng)菌種信息培養(yǎng)條件試管1試管2空白結(jié)論枯草芽孢桿菌白色念珠菌金黃色葡萄球菌銅綠假單胞菌黑曲霉生孢梭菌備注“+”表示陽(yáng)性，“-”表示陰性結(jié)論：合