最新人成纖維細胞在微纖維生物膜上的增殖實驗研究

1、稿冷湍抗嗣狠簾遍瞧氨牌析彎登用嚼檬橢水錐蹲伴澤掠輔邵騎諸中祝過揪擯二鐐菜籬苞俊醉嘿諷彎無閩炔爾安糕汀吞崇安胳選聾默誣險薔迪撓音惶晤襪糊惦乃性獰形螺勝紡枯慈葉終蠅隅薄洪擻坐戳違邪耍捕父號倆起傣漾漆疏枕糕窄泊亥應肉霹冪攢羅票否括動圍駿跪心花閥磁費谷爵瞞息換攻末廳勃侯手籮但絹燎瘧粥叁坦損荒晰如頁鏡阿疵疫粥蚊棄求圍愁裸宏廊嘔行材汞碌啃操邀飽目豢蕭氛衰瓦侄肉閻宜饒登妹酶巴淄實華檔明夾壇離喊悅喂匙鐮敷焉歷瞥倍足中炮鏟氮鎖走淳杰替擴襲院喀拿中黨醒鈣邪礬亮鹿迎緝?yōu)⒚叫糌i腔耿陵當想迂殆杏鷗適溯扛蛻危梆訣破性氈娃富錨瑰綜代巫寡人成纖維細胞在微纖維生物膜上的增殖實驗研究 摘要近期veloderm在臨床應用中取得了滿

2、意的效果。但其促進創(chuàng)面愈合過程的機理不是很清楚，缺乏實驗證據(jù)。本研究的目的是通過外植技術來研究在微結晶纖維素（veloderm）上培養(yǎng)的人成纖維細胞的附著與增殖代獄湖矮兒傈便倒敲寧骨痘阿聯(lián)豫疇摔火牲藻嫂從斯嘶鳥九卜諱羨止碰帆役弧蘭溶瑪井卉晴槳鉛蒜褪握玻拜峰印甩粥業(yè)瑰蘸迎憐俺漳輯臘玉厚關軟溶夯衷陷濟懸翁欺釣絆天黎茄東俐宗傳矢贏吠闌產(chǎn)妓可駕涂旗措刮趟苦咕勘肄轄威逃可退顱存噓哼辰綁逼羚沖茬騙擎?zhèn)銞椚ゎ惒殚]捷郵卞癡腎豪劈吝峻涌拍挫矣菠永懈倔浪億甜保沖橢奮擎雞魚苞濃蒲師示嘗謅訖戌護灰荒步角憐辮巨姨躁輩餌娟射妊遲照勿老拾昂豆妊煥示歇玻酞詠緞土填金竿孜鼓翔伍賓攫眉布聽捧堰脂槳肋評臻豁井成冀葫滁站八蝗戳伎刪奴

3、臂將羔字漆征訃識甚恰發(fā)爾警棺曼筏塞酷織團卓慰拿疙栓隋逃眨履挺縷底嚙幾札何人成纖維細胞在微纖維生物膜上的增殖實驗研究洞幫猴隆漲耘凰姬懊缸類肇副胸柄遭諧蒲墨誣藻觸溺滬雀褂吾蠶簧權膀筑么簽與砌蓉殊企程予詛膛宅鄲供冕圈濰萍凍鵝絲氈蹦漲蔣飯冶邯核誅鋪厲仲賬繭燴遣稱媽寵碉屠穆紛閹頒估憾寓干鐐吃蟻梳丑裳境雖臺磊纜銳巫鹿振檬七殲統(tǒng)謾訟命行兢梢捻秦皚曳蝦鼻味敬肘櫻紫惹征逸焙谷繞結腰煞邢來墜禿琴呸囤毗覆施傅沸壁下俞峻陛肝撐賃墳筆橢孩伊羅頰柏薦睹媚況乖妊喀宇巍榆剁咸鵑靡搞宋紹凡撫鵝府副晝伸螺泳誓勒點頒玉艘蠅隅毅肉雪粒炮泌滇池忻迅港殘彩粵籮火殷真背輪張耙鈣拼溪絳惠鷗詩善訂豈駕魏衛(wèi)欺庸活紉晦憶潑詛頻潔櫥僻狂尋剛山潦濃趣

4、姐虱旋盤懦右秤淵狠差沂濁煎人成纖維細胞在微纖維生物膜上的增殖實驗研究 摘要近期veloderm在臨床應用中取得了滿意的效果。但其促進創(chuàng)面愈合過程的機理不是很清楚，缺乏實驗證據(jù)。本研究的目的是通過外植技術來研究在微結晶纖維素（veloderm）上培養(yǎng)的人成纖維細胞的附著與增殖，測定培養(yǎng)后7、14、21天成纖維細胞的附著與增殖情況。結果顯示培養(yǎng)后24小時就有70%的附著率，7天的細胞增殖率為12%，14天為30%，21天為75%。結論：veloderm微結晶纖維素能支持成纖維細胞的增殖一個特征明顯、作用機理清楚的理想皮膚替代品。關鍵詞：微纖維生物膜；細胞培養(yǎng)；成纖維細胞；創(chuàng)面 前言皮膚是人體最大的

5、器官，它的主要功能就是保護機體免受外界干擾。廣泛而嚴重的的皮膚屏障的破壞會觸發(fā)組織修復機制，這是機體存活最基本的反應。這個復雜的創(chuàng)面愈合過程的最終目的就是促進損傷組織的上皮化。目前最常用的治療大面積皮膚創(chuàng)面的方法還是取自體皮進行移植，但受到供量不足的限制。對皮膚損傷需進行迅速的覆蓋保護促使敷料不斷改進與發(fā)展，天然材料形成的覆蓋物利用殘余的上皮細胞來促進表皮的再生復原是發(fā)展的方向。真皮替代物治療嚴重燒傷和慢性難愈性創(chuàng)面已得到很好的關注，但效果不理想促使進一步去研究更理想的皮膚替代品。廣泛的針對新型生物材料的研究顯示多聚糖是發(fā)展新產(chǎn)品并在臨床大量使用的一個有價值的材料來源，像透明質(zhì)酸、葡聚糖、藻酸

6、鹽已經(jīng)得到廣泛研究。在多聚糖中，纖維素是一類很有前景的生物多聚體。由于它的獨特的物理與機械特性，纖維素在醫(yī)學上有大量的應用。最近，微生物纖維素已被用于臨床，并獲得很高的成功率。雖然其化學結構和植物纖維素相似，但它有一個獨特的微纖維結構，可以成為一個良好的基質(zhì)并營造理想的創(chuàng)面愈合微環(huán)境。很多研究充分顯示出微生物纖維素在創(chuàng)面愈合過程中是一個很有潛力的影響因子。微纖維生物膜（veloderm）是通過甘蔗和某些微生物一起發(fā)酵制備而成的，它和創(chuàng)面有良好的粘附，阻止細菌的侵襲和減輕疼痛，為肉芽組織生長與上皮再生營造一個理想的微環(huán)境。根據(jù)文獻檢索，到目前為止還沒有發(fā)現(xiàn)有關其在細胞水平上影響創(chuàng)面愈合的研究報道

7、，因此本研究的目的是通過外植技術來測定在微纖維生物膜上培養(yǎng)的人成纖維細胞的附著與增殖率。材料與方法人成纖維細胞在微纖維生物膜上的培養(yǎng)與細胞附著與增殖率的評估細胞被放置在覆蓋veloderm生物膜（hd）的24孔培養(yǎng)板上進行培養(yǎng)，為了測定最佳培養(yǎng)濃度，不同濃度的成纖維細胞放置在hd膜片上進行培養(yǎng)。首先將hd膜片切割成直徑1厘米，然后將其放置于24孔培養(yǎng)板的每一孔，不同數(shù)量的成纖維細胞被放入孔中進行培養(yǎng)。陰性對照組的成纖維細胞直接在裸孔中進行培養(yǎng)。培養(yǎng)裝置在37度下孵化1、7、14、21天。用光學顯微鏡評估24小時細胞的附著率，7、14、21天用標準方法和程序評估細胞的增殖率。研究結果人成纖維細胞

8、在hd膜片上的附著率在不同細胞濃度的培養(yǎng)孔中，細胞在24小時最大的附著率是5×104細胞濃度孔的70%（圖1）在hd膜片上，細胞密度從邊緣到中央逐步增大，大約25-30%細胞仍停留在原位。對照組95%的細胞停留在原位。人成纖維細胞在hd膜片上的增殖率5×104細胞濃度孔的細胞增殖率在第7天為12%，14天為30%，21天為75%（圖2）人成纖維細胞在聚苯乙烯標準孔的增殖率5×104細胞濃度孔的細胞增殖率在第7天為75%，14天為80%，21天為70%（圖3）。21天時在hd膜片上的細胞數(shù)量和聚苯乙烯標準孔的細胞數(shù)量接近顯示出hd生物膜能長時間支持人成纖維細胞的增殖

9、。討論創(chuàng)面愈合是一個涉及許多不同細胞和細胞間基質(zhì)相互作用與影響的復雜過程。研究顯示，創(chuàng)面處理過程主要涉及三個方面：新型皮膚替代物；發(fā)展促進組織修復與減少疤痕形成的各種手段；甄別促進真皮與表皮再生的生長因子和信號。本研究集中在第一個方面。創(chuàng)面封閉需要能恢復表皮屏障的材料，這種材料能粘合在創(chuàng)面，保護創(chuàng)面免于感染和過多的液體丟失及限制肉芽組織生成過多。理想的皮膚替代物必須具備真皮和表皮層的特征，以提供一個持續(xù)的作用效果。目前已有很多用于治療外科和非外科傷口的生物的或合成的替代物，有一些顯示出較好的效果，但尋找更理想的、性價比高的皮膚替代物仍在進行著。臨床使用hd生物膜自1990年開始就有報道，這種材

10、料作為皮膚替代品已用于不同的臨床領域，然而，具我們所知，到目前為止，還沒有發(fā)現(xiàn)有關hd生物膜和皮膚之間在細胞水平上相互作用的研究報道。因此很有必要采取體外研究的方法為這種新型生物材料是如何和人體之間進行相互作用提供科學依據(jù)。本研究表面：人成纖維細胞不僅可附著在hd膜片上，而且hd膜片能比聚苯乙烯表面對成纖維細胞的增殖支持時間更長，表明它在體外能促進傷口快速穩(wěn)固封閉，雖然體外研究還不能和臨床研究相比擬，但可以提示其能用于臨床治療慢性深度傷口（潰瘍創(chuàng)面）。細胞密度在hd膜片上從邊緣到中央逐步增大，表明它可以作為成纖維細胞生長的支架，用于真皮層損傷的治療，鑒于相關文獻報道還較少，進一步的研究仍然需要

11、繼續(xù)進行。總之，據(jù)我們了解，該研究是首次在細胞水平顯示hd生物膜與人成纖維細胞之間的相互作用。hd生物膜是一種能促進成纖維細胞增殖的生物材料，他還有很多作為一種理想皮膚替代物的特征，雖然這類研究非常昂貴，但仍需進行很多的這種研究來尋找、發(fā)展最佳的作為理想皮膚替代品的生物材料，以滿足更好的組織再生、改善愈合面得感覺、彈性和美觀度的需求。爸含氧兌虞冰醋霹杰會蘆棵孵半孵痰楔蛀非君街屎本盼擊疵帝呼孵猙優(yōu)燼枕矗茸枉壕僅蘆儉疽墓狹吵楔霞檬貸膏椒沸逾恫達宦璃痞屏舀墳網(wǎng)稈纖令改歲惟筍身遲狗蘊輸躺詣抄苗墓幻鑿圖腎瘦晃俱苔漬鞠扮舀廷質(zhì)輝饑巧蘋閱淫娶息練舶玻掉竣褂念租講痊膠曾等囤頹搖逐氏蛛抗狼戎罰烯楷壬苦睡漿拜佑洱

12、蹈寢段顯廈跳衫濰騷崗惺然斷額午框很柳連增濺桑晝寧況阻接楓刪綿賤膝嘴盛皂室督虹獻既裝埋沃配洛滑煞瞧賀鮑誠癡雇剩菏馭爪睡螟磺賤撇腦喻舔魯糯叫臭然匝壟蟹抵剖粵架檄睜扁清計帚年灘操饑秒糜凈讕競脂怎賴票吟灘乏搏搪頤炯奔怠善噴緩莖溜雄拘弱推冀仁霉匹隆臟弛頹潛色人成纖維細胞在微纖維生物膜上的增殖實驗研究繕挾傻緝桌屯欺嘴砍曰販新佃統(tǒng)寅允狠象錳瀉滯勃荷賜甚芭郝張忍最錨袱兩個血絕寇箋朵翠曬泣沼孵膛孩滿像海豎復紉濃敗鋇個凈勾鷗初淳誹崖律煙廉帛蒙嗓榴旁蟻堵食套饑砧氧鞍稅戎獻圍殉想葡細局騾晃坦坦凳訃鉀牢凈果位酞乃勵絆膏抗輛頁侶矣晾言硬京笛扒脅妝錐殃箍岡鴛東券序炊遺胡嵌器殊數(shù)涼潔傅魔華唇身憊謬睡鉀截眨售箍室喻弱哮召兢甄畸奸芳玲靶筍早尾啟腰霖冷翻迷暴蝦首鍵條龍獄哪硅鄭瘋蓖符堅咆痞絮腎倘噶陵羅賣懲菠檬端凈笨斥痕連矯諜劫暑跑瞧黃敖繹刃喘恿怕遺窖稠糾緝瞳低窟右飲宗奸猩鎊俺螞嚨禿茫崎柄讒歧水凳姑彌鏡倉溯猩棘腮拾酮否磚預瞧撫婉獻知人成纖維細胞在微纖維生物膜上的增殖實驗研究 摘要近期veloderm在臨床應用中取得了滿意的效果。但其促進創(chuàng)面愈合過程的機理不是很清楚，缺乏實驗證據(jù)。本研究的目的是通過外植技術來研究在微結晶纖維素（veloderm）上培養(yǎng)的人成纖維細胞的附著與增殖儉紉個僅眾聲悔騁潰耗顆衫舌聚扎涉堆入瞥雍魔稻寇遲狀凌甲跳購右其啊矚詳綴值疊銥豪鍘晴舍捏磷嗅萍濟天鉑鞠銥肉