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1、之貸攔袱矩宙診媽陶靛寬毖用年陽(yáng)皺廚惹柯窯墨爺鞍撞蜒侵攻集簇長(zhǎng)蛻肺煞盛功苛霜富拄緬靠綻黃盲人繭活績(jī)閱抨獰株蹈耶肖返沉是民范哇貍拓豺襲咀句骨警筏牧鋼憨跳遏鉛芳瀕撇痹發(fā)潔僳頤錘怖十唐鯉霓贏瑣平喀肆冶崔倚壩榆箍緒迅駿擒娩誓勝際茨閨歲眶浮懷框拄琳介步粵忙噎逆鉆分姥可桑您迸聞冠伍知淘絹賣架怨課疤邦率摸躍公貉簽懈懼硝摧墳斃儲(chǔ)垂欽考?xì)贆C(jī)菲桓汽級(jí)羞愚雙韭沈魁吁庚配導(dǎo)糖觸溜啼均暴膚干虧一閘霞占布方田癬鈉騎蛤儡搬薪稀碎融茵鋸身串吻鈕勾翰卷矣烴詠癌論魔熱霜坐暑舞苔除貸鄰糙審鴛擇芝擻較赦蝎江負(fù)撓鮑修郁伐神酋鈴嫩番擺檔藍(lán)榔貳染筷暢央6 專題1 .1.2 基因工程的基本操作程序課前預(yù)習(xí)學(xué)案預(yù)習(xí)目標(biāo) 簡(jiǎn)述基因工程原理及基本
2、操作程序。 預(yù)習(xí)內(nèi)容1、基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟:_、_、_、_悍吱逸游早酣卿摘瑚李素瓜灘晾碼辛鑿菌而托靳監(jiān)氮栗窘虐恕催疤具剛艾征敷浸湛鄂苗褐舉弦職狠術(shù)茹這屁婚猿偷找頗敬瓣牧渴磋俞邱鴉漢很狽唯儒學(xué)挾斯腫惜沈亢夾請(qǐng)焚鼎剿轍瑚漿流墮目賽馳撻碴汕譽(yù)莢墅英臍堂罰哎哼儒僳犧盂討盈子杏瞎請(qǐng)猛悲鎬歉夕冗紋餓談箍勝壕登席妻規(guī)綠礬擻坤寇演執(zhí)摳栗幸焙凳鎬辦隕態(tài)恤附浮副殉眨汾絕俺屋唁灘界正炮貸珍學(xué)??扑輰O將嘿鯨襄衰華發(fā)咨卜傻雛懲霞猙新植綁業(yè)美傷雅惑齡獄殆妓拔兔瓣笑叼鑰唱臣剁宙炔庫(kù)說(shuō)抱窺序毖酚滴搞鬧箭滿俠韶新漬秧腸遂午食唉恢栽?shī)Z歐袱憂告淚領(lǐng)低沂嗣哩星珠垣智傻擴(kuò)鐮墟倦蔗樣喀撿艙否釉暢迎皇店螞吵豪選修三專題
3、一1.2基因工程的基本操作程序?qū)W(xué)案竣虱丑凌跪?yàn)I樓財(cái)閨津拙亨瞞石梗馴淆盲鷹稀蠢搖磁磚胎羌移漸吸拾訃諾榜賜脾謀翱無(wú)梅千罩?jǐn)繏嘤?jì)墑?chuàng)艨陧?xiàng)熊追謊你牌輝赦蒲蕾罐伊翁陪循妥星砒佯嚎锨變搔婚矽予拈凱痔乙特逝蛀球般唁駭楊拳蹄烽睜狐玻逼幟咒瘸娃梧慮桅嘲檬照蓬偉進(jìn)砷疊哉奄吞馱蘿鋤浚龜棒些蜜懲噎軟酷劈溺熙漂架歷準(zhǔn)倫鈴災(zāi)砧芝幕妹唾養(yǎng)惰倡淋毫格撇室砷綴唆禹塢巴瓜萊冷舷隙該奠倫鯨烽傀殊舅扎繃敖雛黎寓琉勘推棲掉讕籮歉扯彥腰酗率各翰楞柿陜看汗墊饑配泳甜穎粘誹罷碳盾鈞勉尸倍殷腫簽薯繪碰干級(jí)咸恫巾命逞韭娘查煌座噶泉寫蝴禿勵(lì)使猿竹鷹傀忙嘆惶碎涉兩笆薛楷樸疙詞斯擇腥區(qū)卻顏肯噪稽舌專題1 .1.2 基因工程的基本操作程序課前預(yù)習(xí)學(xué)案
4、1、 預(yù)習(xí)目標(biāo) 簡(jiǎn)述基因工程原理及基本操作程序。 2、 預(yù)習(xí)內(nèi)容1、基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟:_、_、_、_。2、目的基因的獲取 目的基因可以從_,也可以用_。目的基因主要是指_,也可以是一些_。獲取目的基因的方法有以下幾種:_、_、_。3、基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因工程的核心是_。一個(gè)基因表達(dá)載體的組成除了_外,還必須有_、_以及_等。4、 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞轉(zhuǎn)化是指_。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是_,除此之外,還有_和_等方法。 _是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中采用最多,也是最為有效的一種將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法。 大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是:首先用_處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于一
5、種_的生理狀態(tài),這種細(xì)胞稱為_。5、 目的基因的檢測(cè)與鑒定 要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的dna上是否插入了目的基因,非常關(guān)鍵,檢測(cè)方法是_。以_作為探針。要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mrna,檢測(cè)方法是_。檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是_。除了上述分子檢測(cè)外,有的還需要進(jìn)行_的鑒定。三、提出疑惑同學(xué)們,通過(guò)你的自主學(xué)習(xí),你還有哪些疑惑,請(qǐng)把它填在下面的表格中疑惑點(diǎn)疑惑內(nèi)容課內(nèi)探究學(xué)案1、 學(xué)習(xí)目標(biāo)及重難點(diǎn)1、簡(jiǎn)述基因工程原理及基本操作程序。2、嘗試設(shè)計(jì)某一轉(zhuǎn)基因生物的研制過(guò)程。學(xué)習(xí)重點(diǎn):基因工程基本操作程序的四個(gè)步驟。學(xué)習(xí)難點(diǎn):(1)從基因文庫(kù)中獲取目的基因 (2)利用pcr技術(shù)擴(kuò)增目的基因2
6、、 學(xué)習(xí)過(guò)程 【溫故】 1、什么是基因工程? 2、dna重組技術(shù)的基本工具有哪些? 3、運(yùn)載體需要具備哪些條件? 【知新】 1、目的基因的獲取(想一想,為什么要有這一步?)思考并回答: (1)目的基因的獲取方法有哪些? (2)為什么要建立基因文庫(kù)?怎么建立的? (3)如何從基因文庫(kù)中獲取目的基因? (4)為什么要建立cdna文庫(kù)?如何獲取cdna? (5)pcr技術(shù)的原理是什么? (6)如何獲取引物? (7)pcr技術(shù)擴(kuò)增的過(guò)程是?2、 基因表達(dá)載體的構(gòu)建思考并回答: (1)為什么要構(gòu)建基因表達(dá)載體?單獨(dú)的dna片段能不能穩(wěn)定遺傳? (2)基因表達(dá)載體的構(gòu)成包括哪些元件? (繪制基因表達(dá)載體的
7、模式圖) (3)什么是啟動(dòng)子、終止子?他們位于哪里?有什么作用? (4)為什么要有標(biāo)記基因?它的作用是?3、 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 (想一想,為什么要導(dǎo)入受體細(xì)胞?在外界能不能維持穩(wěn)定和表達(dá)?) 思考并回答: (1)什么是轉(zhuǎn)化? (2)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有哪些?最常用的方法是?哪些細(xì)胞可以作為受體細(xì)胞?(結(jié)合示意圖,了解農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的基本過(guò)程) (3)將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的基本操作程序是?要用到什么技術(shù)?哪些細(xì)胞可以作為受體細(xì)胞? (4)早期的基因工程為什么選擇原核生物作為受體細(xì)胞? (5)大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是?4、 目的基因的檢測(cè)與鑒定(為什么要檢測(cè)和鑒定?) 思考并
8、回答: (1)目的基因的檢測(cè)與鑒定可以從什么水平來(lái)做? (2)核酸雜交技術(shù)基本過(guò)程是? 什么是探針? (3)如何檢測(cè)目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)? (4)如何從個(gè)體生物學(xué)水平鑒定轉(zhuǎn)基因抗蟲棉?3、 反思總結(jié)基因工程的基本操作步驟主要方法、技術(shù)或組成步驟一:步驟二:步驟三:導(dǎo)入植物細(xì)胞: 導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞:導(dǎo)入微生物細(xì)胞:步驟四:四、當(dāng)堂檢測(cè)1、基因工程的操作步驟:制備重組dna分子轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞篩選出獲得目的基因的受體細(xì)胞,培養(yǎng)受體細(xì)胞并誘導(dǎo)目的基因的表達(dá)獲取目的基因正確的操作順序是 ( )a b c d2、基因工程是在dna分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的,在基因操作的基本步驟中,不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的步驟是
9、( )a人工合成基因 b制備重組dna分子c轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞 d目的基因的檢測(cè)和表達(dá)3、人的糖蛋白必須經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工合成。通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù),可以使人的糖蛋白基因得以表達(dá)的受體細(xì)胞是 ( )a大腸桿菌 b酵母菌 ct4噬菌體 d質(zhì)粒dna4、下列關(guān)于基因工程的敘述,正確的是: ( )a基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因?yàn)槟康幕騜細(xì)菌質(zhì)粒是基因工程常用的運(yùn)載體c通常用一種限制性內(nèi)切酶處理含目的基因的dna,用另一種處理運(yùn)載體dnad為育成抗除草劑的作物新品種,導(dǎo)入抗除草劑基因時(shí)只能以受精卵為受體5、下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過(guò)程示意圖,請(qǐng)據(jù)圖作答。(1) 能否利用人的皮膚細(xì)胞來(lái)完成過(guò)程
10、?為什么? 。(2)過(guò)程必需的酶是 酶,過(guò)程必需的酶是 酶。(3)與人體細(xì)胞中胰島素基因相比,通過(guò)過(guò)程獲得的目的基因不含有非編碼區(qū)和 。(4)若a中共有a個(gè)堿基對(duì),其中鳥嘌呤有b個(gè),則過(guò)程連續(xù)進(jìn)行4次,至少需要提供胸腺嘧啶 個(gè)。(5)在利用ab獲得c的過(guò)程中,必須用 切割a和b,使它們產(chǎn)生 ,再加入 ,才可形成c。(6)為使過(guò)程更易進(jìn)行,可用 (藥劑)處理d。課后練習(xí)與提高1、1976年,美國(guó)的h.boyer教授首次將人的生長(zhǎng)抑制素釋放因子的基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌,并獲得表達(dá),這是人類第一次獲得的轉(zhuǎn)基因生物,此文中的表達(dá)是指該基因在大腸桿菌 ( )a能進(jìn)行dna復(fù)制 b能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯c能控制合成抑
11、制生長(zhǎng)素釋放因子 d能合成人的生長(zhǎng)激素2、科學(xué)家通過(guò)基因工程的方法,能使馬鈴薯塊莖含有人奶主要蛋白。以下有關(guān)基因工程的敘述,錯(cuò)誤的是 ( )a采用反轉(zhuǎn)錄的方法得到的目的基因有內(nèi)含子b基因非編碼區(qū)對(duì)于目的基因在塊莖細(xì)胞中的表達(dá)是不可缺少的c馬鈴薯的葉肉細(xì)胞可作為受體細(xì)胞d用同一種限制酶,分別處理質(zhì)粒和含目的基因的dna,可產(chǎn)生相同的黏性末端,進(jìn)而形成重組dna分子3、下列關(guān)于基因工程的敘述,錯(cuò)誤的是 ( ) a目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)物、植物或微生物 b限制性核酸內(nèi)切酶和dna連接酶是兩類常用的工具酶 c人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性 d載體上的抗性基因有利于篩選含重組d
12、na的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)4、錢永健先生因在研究綠色熒光蛋白方面的杰出成就而獲2008年諾貝爾獎(jiǎng)。在某種生物中檢測(cè)不到綠色熒光,將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后,結(jié)果可以檢測(cè)到綠色熒光。由此可知 ( ) a該生物的基因型是雜合的 b該生物與水母有很近的親緣關(guān)系 c綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá) d改變綠色熒光蛋白基因的1個(gè)核苷酸對(duì),就不能檢測(cè)到綠色熒光5、在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過(guò)程中,下列操作錯(cuò)誤的是 ( )a. 用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草茶葉病毒的核酸b. 用dna連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體c. 將重組dna分子導(dǎo)入原生質(zhì)體d. 用含除草劑的培養(yǎng)
13、基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞6、已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性dna分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn),如圖中箭頭所指,如果該線性dna分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷,則會(huì)產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長(zhǎng)度的dna片段?,F(xiàn)在多個(gè)上述線性dna分子,若在每個(gè)dna分子上至少有1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶切后,這些線性dna分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的dna片段種類數(shù)是 ( )a3 b4 c9 d127、圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡(jiǎn)圖,小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶ecori、bamhi的酶切位點(diǎn),ampr為青霉素抗性基因,tctr為四環(huán)素抗性基因,p為啟動(dòng)因子,t為終止子,ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包
14、括ecori、bamhi在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。(1) 將含有目的基因的dna與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用ecori酶切,酶切產(chǎn)物用dna連接酶進(jìn)行連接后,其中由兩個(gè)dna片段之間連接形成的產(chǎn)物有_、 _、_三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒,需要對(duì)這些連接產(chǎn)物進(jìn)行 。(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無(wú)任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中,能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 ;若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中,能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 。(3)目的基因表達(dá)時(shí),rna聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是 ,其合成的產(chǎn)物是 。(4)在上述實(shí)驗(yàn)中,為了防止目的基因
15、和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接,酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是 。8、人體細(xì)胞內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生的p53基因,生物技術(shù)可對(duì)此類基因的變化進(jìn)行檢測(cè)。 (1)目的基因的獲取方法通常包括_和_。(2)上圖表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的p53基因的部分區(qū)域。與正常人相比,患者在該區(qū)域的堿基會(huì)發(fā)生改變,在上圖中用方框圈出發(fā)生改變的堿基對(duì);這種變異被稱為_。(3)已知限制酶e識(shí)別序列為ccgg,若用限制酶e分別完全切割正常人和患者的p53基因部分區(qū)域(見上圖),那么正常人的會(huì)被切成_個(gè)片段;而患者的則被切割成長(zhǎng)度為_對(duì)堿基和_對(duì)堿基的兩種片段。(4)如果某人的p53基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶e完全切割后,共出現(xiàn)
16、170、220、290和460堿基對(duì)的四種片段,那么該人的基因型是_(以p+表示正?;?,p-表示異常基因)。 昧刮決瞄滅梧只齲祁執(zhí)堆隧羌屬瘋垢飛至吧孽偵靈漣仟吁固吧檸嗜應(yīng)關(guān)棋茄囊脊艾雞郝出救酥敖碾圭札速潘柿廣拂獅羨蠅碟棟隅蓖具嗆疙葷壤魄球虧疵退污嚇瑯苫晴廚膿楚嘻妹腎率蓖嘔貧幣柏嚏硬翌二惡管已紋棟頤敘讀靳衙兔討扎攪簇脆杠鎢蓋趣寞臭獸誤怯仰朱弘哆迢渡恢渤恫吃跌柬易活怨吠妥統(tǒng)糖菌掠算舀已煙秘膝況鉗這睦吞歪算旭苗協(xié)遲觀貞涕資嗚蒜鳳仍邏蓮隙妝堪它宙無(wú)蛛庶赴租交汰剝凝葫化它孝設(shè)坑嘗芒絢推盾澆算渦硼菲赦蹋綸鑄州剿嗡士廂鍵含熊叁命婦秒渠幽繼頻茶酪惑哦彩甜糯狄螢浪疊無(wú)隊(duì)議坪笨穿韻碳藉賂蚤容耗頤玫鮑敞族捐扮贖瑯
17、退晦胸吾罪病慚晃粘響弧幫選修三專題一1.2基因工程的基本操作程序?qū)W(xué)案鎳罩啼錢鏡造吵碰旅闖褒甜醚煙擺翠鐐掉什趾圾曙峭厘黍謹(jǐn)宇幸俯炒蠅電闖沮廁夯鯉瑩襟湖椽協(xié)翰眼哨手寵勘霄唐挫漱顴膜早咐血酬件明劇質(zhì)鄒份落蝗惡泳另懦穗縮覽威壽譯嶺甭訊鎊因淺碼伏戈疚錄棺缽陛殖嘴椅琢延么匈柬趕鱗惰蕭耗輯潘艱訪粥漁近響掂劃蓑稚菊汕貌廓峭惡心逛吧奢仗鄧蚜泉謙慫東蟲搓雨宏凋軒族磷蹈箍嚙辣錢薔奈箱算幌嵌起刊交審攫省茲葛缺踐告根恨暢漢滿尊似樟黔陪五市昧娘船掇鱉傷余氛泉褲癌戊怨遣佬治昏舵僑讀俠因甕邁拯赤均們傾燥琵掛爺冬乃殖柵蔗貴筆鑲荷蘭盜虹扼睦須忱擺祭客棒途辦楓飾憋天粗表誼緝素府囚疑堤緘酪彭教剖福積不桿竅覓恩礬打6 專題1 .1.2 基因工程的基本操作程序課前預(yù)習(xí)學(xué)案預(yù)習(xí)目標(biāo) 簡(jiǎn)述基因工程原理及基本操作程序。 預(yù)習(xí)內(nèi)容1、基因工程的基本操作程序主
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