無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證課件

1、無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證無(wú)菌、微生物限度檢查及方法驗(yàn)證無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理一、實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與設(shè)備和管理（法規(guī)要求）無(wú)菌檢查、微生物限度檢查與抗生素微生物檢定的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)嚴(yán)格分開(kāi)。無(wú)菌檢查、微生物限度檢查實(shí)驗(yàn)室分無(wú)菌操作間和緩沖間。無(wú)菌操作間應(yīng)具備相應(yīng)的空調(diào)凈化設(shè)施和環(huán)境，采用局部百級(jí)措施時(shí)，其環(huán)境應(yīng)符合萬(wàn)級(jí)潔凈度要求。進(jìn)入無(wú)菌操作間應(yīng)有人流凈化和物流凈化的設(shè)施。無(wú)菌操作間應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)品種的需要，保持對(duì)鄰室的相對(duì)正壓或相對(duì)負(fù)壓，并定期檢測(cè)潔凈度。無(wú)菌操作間內(nèi)禁放雜物，并應(yīng)制定地面、門窗、墻壁、設(shè)施等的定期清潔、滅菌規(guī)程。無(wú)菌檢查在潔凈度100級(jí)單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，

2、其全過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染。單向流空氣區(qū)與工作臺(tái)面，必須進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。微生物限度檢查的全過(guò)程，均應(yīng)遵守?zé)o菌操作，嚴(yán)防再污染。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理為滿足微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)要求，微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有：嚴(yán)格分開(kāi)的無(wú)菌檢查、微生物限度檢查、無(wú)菌采樣室。菌種處理與微生物鑒別室有局部百級(jí)措施。各自分開(kāi)的抗生素微生物檢定、細(xì)菌內(nèi)毒素檢查、抗菌作用測(cè)定半無(wú)菌室。培養(yǎng)室（一般為100，000級(jí)）。試液及培養(yǎng)基的配制室。滅菌室。實(shí)驗(yàn)器皿洗滌、烘干室。人員辦公休閑室。實(shí)驗(yàn)用品、易耗品儲(chǔ)藏室。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理設(shè)施和設(shè)備的管理特殊標(biāo)準(zhǔn)品菌種培養(yǎng)基

3、、緩沖液、試劑消毒劑文件管理培訓(xùn)內(nèi)審無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理微生物室實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理制定潔凈室（無(wú)菌室）的使用管理規(guī)程（SOP）菌種處理相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）生物安全柜的使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）帶菌廢棄物的處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）環(huán)境消毒標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）環(huán)境清潔、消毒標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）試液及培養(yǎng)基配制的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）實(shí)驗(yàn)器皿洗滌標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）建立無(wú)菌室使用登記冊(cè)使用日期，時(shí)間，使用人，設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)狀況，溫、濕度，潔凈度狀況（沉降菌數(shù)、浮游菌數(shù)、塵埃粒子數(shù)），報(bào)修原因，報(bào)修結(jié)果，清潔工作（臺(tái)面、地面、墻面、天花板、傳遞窗、門把手），消毒液

4、名稱等無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理實(shí)驗(yàn)室使用管理每天工作前用消毒液消毒工作臺(tái)，開(kāi)紫外燈（最少半小時(shí)）進(jìn)行空氣消毒，每月定期做徹底清潔工作，適當(dāng)時(shí)用消毒劑進(jìn)行熏蒸。非必要品禁止帶入實(shí)驗(yàn)室，必要資料和記錄應(yīng)消毒后進(jìn)入并應(yīng)遠(yuǎn)離操作臺(tái)。實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入潔凈室（無(wú)菌室）不得化妝、戴手表、戒指等首飾；不得吃東西。應(yīng)嚴(yán)格按更衣程序更衣。記錄溫濕度是否在規(guī)定的范圍內(nèi)，每次實(shí)驗(yàn)時(shí)，對(duì)操作室和層流臺(tái)做微生物沉降菌落計(jì)數(shù)并記錄；如發(fā)現(xiàn)問(wèn)題應(yīng)找原因，及時(shí)報(bào)修和報(bào)告并將報(bào)修原因和結(jié)果記錄歸檔。如遇停電，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)，重新進(jìn)入無(wú)菌室前，至少開(kāi)啟機(jī)房運(yùn)轉(zhuǎn)1小時(shí)以上。在每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，應(yīng)用消毒劑及時(shí)按消毒

5、規(guī)程中的要求消毒操作臺(tái)和潔凈室（區(qū)），并開(kāi)啟室內(nèi)紫外燈以殺滅存留微生物。使用后的器具如平皿、試管，所有微生物培養(yǎng)物，染菌/帶菌物品等應(yīng)用消毒液浸泡（至少24小時(shí)以上），經(jīng)煮沸或滅菌后清洗或丟棄。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理l潔凈室（無(wú)菌室）的使用管理每季度定期進(jìn)行清潔度再驗(yàn)證，以確保潔凈度符合規(guī)定，保存原始記錄及趨勢(shì)分析資料，定期歸檔保存。至少每年一次定期更換新的紫外燈管并記錄，以確保紫外燈管滅菌持續(xù)有效，定期歸檔保存。至少2年1次，或按潔凈度驗(yàn)證實(shí)際情況，定期更換初效、中效、高效頭。以確保凈化系統(tǒng)的功能持續(xù)有效，并同時(shí)在使用登記本上做好更換記錄。定期歸檔保存。平時(shí)實(shí)驗(yàn)室

6、內(nèi)應(yīng)盡可能減少人員的走動(dòng)或活動(dòng)，通向潔凈室的門要關(guān)閉或安裝自動(dòng)閉門器使其保持關(guān)閉狀態(tài)。發(fā)現(xiàn)潔凈度不符合規(guī)定時(shí)，應(yīng)立即停止使用，尋找原因，徹底清潔、消毒，須經(jīng)清潔度再驗(yàn)證符合規(guī)定后，才再使用，并將情況記錄在無(wú)菌室使用登記冊(cè)上，定期歸檔保存。非微生物室檢驗(yàn)人員不得進(jìn)入潔凈室（無(wú)菌室），對(duì)必須進(jìn)入的外來(lái)人員或維修人員應(yīng)進(jìn)行指導(dǎo)和監(jiān)督。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理一、實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與設(shè)備和管理設(shè)施潔凈室、凈化工作臺(tái)、生物安全柜。設(shè)備高壓蒸汽滅菌器、電熱恒溫干烤箱、培養(yǎng)箱、冰箱。實(shí)驗(yàn)儀器全封閉薄膜過(guò)濾裝置、電動(dòng)勻漿儀、電熱恒溫水浴箱、離心機(jī)、顯微鏡，及刻度吸管、試管、三角燒瓶、培養(yǎng)皿等

7、。建立主要設(shè)施、設(shè)備、儀器的明細(xì)記錄，內(nèi)容包括名稱、型號(hào)、生產(chǎn)廠家、購(gòu)買日期。質(zhì)量保證檔案：購(gòu)買發(fā)票、安裝驗(yàn)收或開(kāi)箱驗(yàn)收記錄、調(diào)試記錄、計(jì)量檢定或運(yùn)行校驗(yàn)合格證、指定專人負(fù)責(zé)、制訂標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）、建立使用登記冊(cè)，維修、保養(yǎng)記錄、改造或更新記錄、直至報(bào)廢記錄。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理一、實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與設(shè)備和管理定期監(jiān)測(cè)生物安全柜和（或）超凈工作臺(tái)的內(nèi)表面的微生物學(xué)質(zhì)量及其內(nèi)部的空氣質(zhì)量（粒子和微生物）。使用時(shí)檢查壓差指示表。培養(yǎng)箱、冰箱需在設(shè)備的每個(gè)腔室內(nèi)放置經(jīng)校準(zhǔn)過(guò)的玻璃溫度計(jì)，每天檢查設(shè)備腔室內(nèi)的溫度狀況并且在日志上做好相應(yīng)的記錄。定期回顧每個(gè)設(shè)備的溫度記錄數(shù)

8、據(jù)，以考察設(shè)備的運(yùn)行狀態(tài)。定期用中性的清潔劑或消毒劑清洗培養(yǎng)箱（或室）、冷藏箱（或室）、冷凍冰箱及水浴的腔室內(nèi)表面。高壓滅菌柜、電熱恒溫干燥箱等需要驗(yàn)證和持續(xù)監(jiān)控。儀器的校準(zhǔn)和確認(rèn)。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理需要確認(rèn)和驗(yàn)證試驗(yàn)和持續(xù)的質(zhì)量監(jiān)控的設(shè)備高壓滅菌柜和電熱恒溫干燥去熱原烘箱安裝確認(rèn)（IQ）：要確認(rèn)控制系統(tǒng)及其他儀器儀表的設(shè)計(jì)是否得當(dāng)并經(jīng)過(guò)校驗(yàn)。檢查有關(guān)共用介質(zhì)（如蒸氣、水和空氣等）符合滅菌工藝的要求。運(yùn)行確認(rèn)（OQ）：要求證明空載狀態(tài)下驗(yàn)證方案中所述腔室內(nèi)所有關(guān)鍵位置的溫度是否均處在規(guī)定范圍內(nèi)。建立熱分布圖譜?？蛰d狀態(tài)下，濕熱滅菌當(dāng)腔室工作溫度不低于121時(shí)，各

9、點(diǎn)溫度與腔室內(nèi)平均溫度之差不超過(guò)1 ，于熱除熱源，當(dāng)運(yùn)行溫度不低于250 時(shí)，腔室內(nèi)的溫差應(yīng)不得超過(guò)15 。性能確認(rèn)（PQ）：要求在滿載條件，溫度探頭插入待滅菌物品的內(nèi)部，同時(shí)加入一定濃度的微生物或獨(dú)立的生物指示劑。對(duì)不同的工藝條件（物品、包裝和裝載方式、滅菌參數(shù)等），分別進(jìn)行性能確認(rèn)試驗(yàn)，包括熱穿透試驗(yàn)和生物指示劑挑戰(zhàn)試驗(yàn)。包括：高壓滅菌柜、除熱源電熱恒溫干燥箱、自動(dòng)微生物鑒別系統(tǒng)和計(jì)數(shù)系統(tǒng)。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理品種：520倍稀釋的碘伏水溶液0.10%新潔爾滅容易1:50的84消毒液75%乙醇溶液3%碘酒溶液5%石碳酸（來(lái)蘇兒）消毒溶液2%戊二醛水溶液尼泊金酒精

10、消毒液等應(yīng)定期更換消毒劑品種，按標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)確配制。l清潔、消毒劑的管理無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理一、菌種的保存與管理菌種特殊的標(biāo)準(zhǔn)品 應(yīng)保持基生長(zhǎng)特性和減少污染，是微生物實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致性的重要保證。制定菌種保藏管理制度 微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定菌種的保藏管理規(guī)程來(lái)規(guī)范菌種的來(lái)源、申購(gòu)、保管、轉(zhuǎn)種傳代、存儲(chǔ)和領(lǐng)用等方面的要求，確保菌種的溯源性和穩(wěn)定性；防止試驗(yàn)用菌種因多次傳代而失去典型生物學(xué)特征發(fā)生變異或死亡，保證菌種長(zhǎng)期正確、穩(wěn)定，從而確保實(shí)驗(yàn)的靈敏度和重現(xiàn)性。菌種名稱：金黃色葡萄球菌菌種系列號(hào)：CMCC(B)26003傳代次數(shù)：第 4 代有 效 期： 年 月 日 制備日期： 年

11、月 日 傳 代 人：王熙鳳無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理菌種保存應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，加鎖保存于冰箱中。實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)來(lái)自CMCC（中國(guó)藥品生物制品檢定所醫(yī)學(xué)菌種保藏中心或ATCC（美國(guó)菌種保藏中心）等國(guó)際法定菌種保藏機(jī)構(gòu)。有接收、確認(rèn)記錄。菌種的轉(zhuǎn)種等均應(yīng)在超凈工作臺(tái)進(jìn)行，以防污染。各種菌種應(yīng)按規(guī)定時(shí)間接種，所有保藏的菌種均應(yīng)貼有相應(yīng)的標(biāo)簽，有菌種清單。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)常用菌種枯草芽孢桿菌 CMCC（B）63501金黃色葡萄球菌 CMCC（B）26003生孢梭菌 CMCC（B）64941銅綠假單胞菌 CMCC（B）10104大腸埃希菌 CMCC（B）441

12、02乙型副傷寒沙門菌 CMCC（B）50094白色念珠菌 CMCC（B）98001黑曲霉 CMCC（B）9 003無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證菌種保藏步驟干燥菌種復(fù)蘇，劃平板挑選特征典型的純菌菌落；（制菌懸液使用）確定保藏的合格菌體形態(tài)；選擇最適宜的保存方法，定期對(duì)保藏菌種進(jìn)行檢查，觀察是否發(fā)生變化，若有變化，須改變保藏方法。保藏期滿應(yīng)及時(shí)進(jìn)行移種。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證菌種的接收標(biāo)準(zhǔn)菌種一般是玻璃安平裝的凍干粉劑接收時(shí)應(yīng)檢查名稱/數(shù)量和完整性。貼好標(biāo)簽后儲(chǔ)存于-20一般安平凍干品可在5年之內(nèi)使用使用時(shí)應(yīng)按（菌種保藏中心提供的）相關(guān)資料的要求進(jìn)行復(fù)溶、培養(yǎng)和保存。無(wú)菌微生物限度檢查及方法

13、驗(yàn)證菌種的復(fù)活l 菌種的復(fù)活用70%的酒精擦拭清潔安瓿，自然風(fēng)干用一小砂輪在安瓿的上部劃一條線，用手輕輕將安瓿開(kāi)無(wú)菌操作，用一無(wú)菌吸管無(wú)菌移取12ml適宜的液體培養(yǎng)基到瓿中；輕輕地旋轉(zhuǎn)安瓿以使凍干菌種和液體培養(yǎng)基充分混合并完全溶解；用無(wú)菌吸管將安瓶?jī)?nèi)菌液轉(zhuǎn)移到相應(yīng)的液體培養(yǎng)基中，根據(jù)不同菌種類型而將其培養(yǎng)于相宜的溫度下24-72小時(shí)。l 菌種的確認(rèn) 菌種復(fù)活后，應(yīng)確認(rèn)菌種的純度與特性從培養(yǎng)肉湯中取細(xì)菌培養(yǎng)物接種到平板上，上劃線分離出單個(gè)菌落。培養(yǎng)后觀察其是否具有典型的菌落形態(tài)然后挑取單一的純菌落，進(jìn)行革蘭染色、鏡檢，觀察其染色特性及菌形。最后再做生化實(shí)驗(yàn)以進(jìn)一步鑒定該菌種，或用API鑒定系統(tǒng)做

14、鑒定工作。對(duì)已經(jīng)過(guò)鑒定確認(rèn)的菌種就可以進(jìn)行菌種的傳代和保藏了。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證菌種的傳代和保藏l 菌種的保藏方法使菌種的代謝處于最不活躍或相對(duì)靜止的狀態(tài)，從而在一定時(shí)間內(nèi)不發(fā)生變異并保持生命活力。一般來(lái)說(shuō)，低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的三個(gè)重要因素?zé)o論使用那種菌種保藏方法，都應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，以確保在相應(yīng)保存條件下的菌種不會(huì)變異并且性能穩(wěn)定。菌種的傳代次數(shù)（自原始菌種凍干粉起）不得超過(guò)5代（GMP，藥典）將微生物接種至一新鮮培養(yǎng)基上/內(nèi)，每萌發(fā)一次即稱為“一代”。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證冷凍真空干燥保藏法 主要是將待保藏菌種混于有保護(hù)作用介質(zhì)內(nèi)制成菌液，分裝在安瓿中于冷

15、凍條件下使其快速凍結(jié)，因凍結(jié)可使晶型細(xì)致，不致?lián)p傷活菌細(xì)胞。然后用真空抽氣減壓，是安瓿內(nèi)的冰晶液體升華，水氣迅速被真空抽走，冰晶型的菌液很快變成疏松的干燥固體物，最后在真空狀態(tài)下熔封管口，使干燥物在局部真空條件下封存，并置冷暗處，在很長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)菌種仍可維持活力不變。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證甘油冷凍管保藏法將待保藏菌接種至平板或瓊脂斜面，培養(yǎng)用無(wú)菌接種環(huán)輕輕刮取菌臺(tái)，用接種環(huán)使細(xì)菌充分?jǐn)U散到預(yù)先裝于試管中的無(wú)菌蒸餾水中調(diào)整菌液濃度，使其等同于麥?zhǔn)媳葷峁艿?0號(hào)管向已制備好的菌懸液中加入等體積、濃度為20%的無(wú)菌甘油，得到10%甘油菌懸液。輕輕振搖小管，使內(nèi)容物充分混合，分裝于無(wú)菌小試管。制好的

16、甘油冷凍管最好在-30條件下貯存。有效期至少為2年。氧細(xì)菌和酵母菌可用此法保藏，霉菌和厭氧菌則不適于用此法保藏。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證液體石蠟覆蓋保藏法將菌種穿刺接種于半固體高層培養(yǎng)基中培養(yǎng)，無(wú)菌操作在層流臺(tái)下用無(wú)菌吸管吸取無(wú)菌液體石蠟至培養(yǎng)好的菌種管內(nèi)，并使石蠟高出菌種表面約1cm，將試管直立，置于28冰箱中或室溫下保存，如銅綠假單胞菌。此法保藏霉菌、放線菌、芽胞桿菌可保藏兩年以上，酵母菌可保藏12年，一般無(wú)芽胞細(xì)菌也可保藏1年左右。此法制備簡(jiǎn)單，不需要其他特殊設(shè)備，并且效果好，是傳代培養(yǎng)的變相方法，可適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證瓊脂斜面低溫保藏法保藏法（廠家常用）將

17、菌種接種在適宜的固體斜面培養(yǎng)基上，生長(zhǎng)充分后，移至28冰箱中保藏。保藏時(shí)間：霉菌、放線菌及芽胞的菌保存24個(gè)月，移種一次；酵母菌2個(gè)月移種一次；細(xì)菌最好每1月移種一次。優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，使用方便，不需特殊設(shè)備，對(duì)大多數(shù)微生物都適用。缺點(diǎn)：保藏期太短；傳代次數(shù)多，易發(fā)生變異及污染。此法為實(shí)驗(yàn)室工作用菌種的最常用的保藏方法，僅能用于工作用菌種的短期保藏。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證保藏芽胞液對(duì)產(chǎn)芽胞的微生物宜制成芽胞菌懸液后再保藏，無(wú)菌操作，取1ml孢子液接入茄形瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)使菌液均勻分布于培養(yǎng)基表面。將培養(yǎng)皿在適當(dāng)?shù)臏囟认屡囵B(yǎng)。一般需要7天或更長(zhǎng)時(shí)間在層流臺(tái)下，取35ml氯化鈉磷酸鹽緩沖

18、液（pH7.0）加入培養(yǎng)皿內(nèi)用無(wú)菌玻璃L棒輕輕刮下菌苔，注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基。用無(wú)菌注射器或無(wú)菌吸管吸取菌懸液，收集于試管中。將收集的芽胞液放在8090水浴中加熱15分鐘，冷卻。做好標(biāo)記，放至28冰箱中保藏。原始芽胞液可保存1年。每次使用前用平皿法重新標(biāo)定其濃度。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物菌種的傳代保藏過(guò)程按菌種說(shuō)明書要求復(fù)溶菌粉菌（標(biāo)準(zhǔn)菌株），轉(zhuǎn)種于適當(dāng)?shù)脑鼍囵B(yǎng)基內(nèi)（此為第一代G1），復(fù)壯后轉(zhuǎn)接至平板上，并于適當(dāng)溫度下培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間，分離出單個(gè)純種菌落（此為第二代G2）菌種鑒定完成后，挑取純菌落制成濃菌懸液用于制備甘油冷凍管，冷凍或低溫保存（標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株G2）；同時(shí)挑取純菌落轉(zhuǎn)接斜面菌

19、種作為工作用菌種（工作菌株W3），于適當(dāng)溫度下培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間后可用于試驗(yàn)，直至轉(zhuǎn)為W5為止，需重新開(kāi)啟安瓶，再重復(fù)上述操作程序。菌種被分為兩類，傳代用菌種和工作用菌種，傳代用菌種（標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株）用甘油冷凍管法保藏工作用菌種（工作菌株）用斜面低溫保藏法保藏?zé)o菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證試驗(yàn)用菌液的制備傳代：取菌液0.1ml接種至10ml液體培養(yǎng)基，按規(guī)定培養(yǎng)、稀釋對(duì)照用菌種在使用過(guò)程中，亦應(yīng)檢查其生物學(xué)特性。如菌落形態(tài)（在可能情況下，用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行生長(zhǎng)檢查）、革蘭染色、鏡檢菌體形態(tài)、主要生化特性（必要時(shí)應(yīng)作菌種鑒定實(shí)驗(yàn)）。如發(fā)現(xiàn)染菌或或變異，衰退等現(xiàn)象時(shí)，應(yīng)及時(shí)處理。為保證試驗(yàn)的可靠性和準(zhǔn)確性，

20、實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)規(guī)程制備和使用菌種，并對(duì)每種微生物的存貯條件（需/厭氧狀態(tài)、溫度和時(shí)間）進(jìn)行確認(rèn)。室溫下菌懸液應(yīng)在制備后的2小時(shí)內(nèi)使用低溫保存（2-8）時(shí)細(xì)菌和酵母菌的菌懸液應(yīng)在制備后的24小時(shí)內(nèi)使用霉菌孢子液則應(yīng)在制備后的7天內(nèi)使用（黑曲霉孢子懸液可保存在28 ，在驗(yàn)證過(guò)的貯存期內(nèi)使用）在使用時(shí)（在24小時(shí)之內(nèi)）均應(yīng)同時(shí)進(jìn)行菌數(shù)復(fù)核檢查。試驗(yàn)時(shí)可采用分光光度法或麥?zhǔn)媳葷岱ü烙?jì)菌液濃度。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證菌種的制備、保藏和使用記錄菌種的制備、保藏和使用記錄1、菌種名稱_菌種系列號(hào)_菌種來(lái)源_ 實(shí)驗(yàn)室編號(hào)_傳代代數(shù)_2、菌種制備：培 養(yǎng) 基_批號(hào)_接種日期_ 接種容器_數(shù)量_培養(yǎng)

21、條件_溫度_時(shí)間_ 純化分離鑒定結(jié)果_操作人_日期_3、菌種保藏方法_保藏?cái)?shù)量_保藏用培養(yǎng)基_批號(hào)_ 培養(yǎng)條件 溫度_時(shí)間_有效期_操作人_日期_4、菌種使用記錄序號(hào)支取日期數(shù)量操作人用途處理當(dāng)菌種超過(guò)有效期或被污染以后應(yīng)滅菌后丟棄。 是 否說(shuō)明：實(shí)驗(yàn)室菌種編號(hào)原則：名稱+傳代代數(shù)+制備日期無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證培養(yǎng)基管理一般采用購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所合格的商品脫水培養(yǎng)基。同時(shí)按照使用說(shuō)明書進(jìn)行配制，需注意培養(yǎng)基的pH值應(yīng)符合規(guī)定，否則必須校正后，按說(shuō)明書規(guī)定滅菌。商品脫水培養(yǎng)基應(yīng)在有效期內(nèi)使用，使用前應(yīng)注意核對(duì)名稱，檢查外觀，遇有結(jié)塊、吸潮現(xiàn)象，應(yīng)廢棄。新鮮培養(yǎng)基的配制，應(yīng)按質(zhì)量標(biāo)

22、準(zhǔn)規(guī)定的配方進(jìn)行，對(duì)培養(yǎng)基的原材料要進(jìn)行挑選，試劑應(yīng)為化學(xué)純?cè)噭┮?guī)格。制成的培養(yǎng)基要求無(wú)沉淀。必要時(shí)以適當(dāng)方法過(guò)濾，調(diào)整pH值，分裝滅菌備用。滅菌：應(yīng)經(jīng)驗(yàn)證合格的滅菌程序（一定裝載方式下滅菌方法和條件）。驗(yàn)證：無(wú)菌性試驗(yàn)，促生長(zhǎng)試驗(yàn)，滅菌器蒸汽循環(huán)系統(tǒng)。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證培養(yǎng)基的質(zhì)量控制建立質(zhì)量控制程序所有配好的培養(yǎng)基均需進(jìn)行質(zhì)量控制（pH、適用性檢查試驗(yàn)）培養(yǎng)基有效期的確定：定期的穩(wěn)定性檢查以確定有效期（225，避光，非密閉容器3周內(nèi)使用，密閉容器1年內(nèi)使用。質(zhì)量控制的頻率：用同1批脫水培養(yǎng)基，采用經(jīng)驗(yàn)證的配制和滅菌方法制備的培養(yǎng)基，可只做1次靈敏度檢驗(yàn)。質(zhì)量控制菌株的選擇（營(yíng)養(yǎng)、

23、靈敏、代表性）對(duì)無(wú)菌培養(yǎng)基的無(wú)菌性、靈敏度檢查與對(duì)照培養(yǎng)基進(jìn)行比較無(wú)菌檢查用需氣厭氣培養(yǎng)基的指示劑氧化層不得超過(guò)培養(yǎng)基深度的1/5，否則須經(jīng)水浴煮沸10分鐘，但只限加熱一次。無(wú)菌檢查結(jié)束時(shí)，指示劑氧化層應(yīng)不超過(guò)培養(yǎng)基深度的1/2。大腸埃希菌檢查用MUG培養(yǎng)基配制前應(yīng)挑選無(wú)熒光的試管進(jìn)行配制，觀察結(jié)果時(shí)應(yīng)用同批培養(yǎng)基配制的空白管和陽(yáng)性菌管同時(shí)觀察。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證培養(yǎng)基的靈敏度檢查：已知菌生長(zhǎng)試驗(yàn)細(xì)菌組：取每管裝量為12ml硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基9支，分別接種小于100cfu試驗(yàn)菌各2支； 菌種： 金黃色葡萄球菌 銅綠假單胞菌 枯草芽孢桿菌 生孢梭菌空白對(duì)照：另一支不接種，培養(yǎng)2472

24、小時(shí)逐日觀察結(jié)果霉菌組：取每管裝量為9ml的改良馬丁液體培養(yǎng)基5支，分別接種小于100cfu試驗(yàn)菌各2支； 菌種： 白色念珠菌 黑曲霉空白對(duì)照：另一支不接種，培養(yǎng)5天逐日觀察結(jié)果l結(jié)果判定空白管培養(yǎng)基無(wú)菌生長(zhǎng)加菌的培養(yǎng)基管均生長(zhǎng)良好判靈敏度檢查合格。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證培養(yǎng)基管理配制好的培養(yǎng)基，按無(wú)菌要求進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)基的配制須有記錄，記錄內(nèi)容含有：配制日期和配制人員的標(biāo)識(shí)；培養(yǎng)基/溶液的類型、體積；成分、每個(gè)成分物質(zhì)的含量、制造商、批號(hào)；pH（最初和最終）值無(wú)菌措施，包括實(shí)施的方式、時(shí)間和溫度。按日期編制滅菌后的培養(yǎng)基編號(hào)將制備完畢的培養(yǎng)基按品種放置在陰涼的指定位置，備用。注意保存期

25、無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證滅菌法濕熱高壓蒸汽滅菌法：依115、121 或132 ，應(yīng)用于培養(yǎng)基滅菌、試驗(yàn)器械、工作服、橡膠物品和實(shí)驗(yàn)室廢棄物，也可用于玻璃器皿的滅菌。一般121 30min干熱法：利用物理學(xué)，171 -1小時(shí)，160 -2小時(shí)、121 -3小時(shí)：玻璃器皿濕熱：蛋白質(zhì)容易凝固干熱：氧化無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證：l 在化學(xué)測(cè)試中，藥品的測(cè)定方法需要驗(yàn)證，與此相應(yīng)，當(dāng)建立藥品的無(wú)菌、微生物限度檢查法時(shí)，也應(yīng)進(jìn)行分析方法的驗(yàn)證，以證明所采用的方法適合于該產(chǎn)品的無(wú)菌、微生物限度檢查。l 證明采用藥典的某種方法和檢驗(yàn)條件，在該供試品的檢驗(yàn)量、檢驗(yàn)條件下，無(wú)抑菌活性或活性

26、已消失，保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證：l 驗(yàn)證時(shí)機(jī)；l 建立檢驗(yàn)方法時(shí)；l 修訂檢驗(yàn)方法時(shí)；l 組分和檢驗(yàn)條件發(fā)生變更時(shí)；l 定期再驗(yàn)證。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證人員l 人是無(wú)菌藥品生產(chǎn)中的主要污染源，在管理比較到位。生產(chǎn)設(shè)備自動(dòng)化程度較好，操作人員素質(zhì)較高的企業(yè)，人員操作所致的污染率超過(guò)70%。l 具微生物專業(yè)知識(shí)l 經(jīng)無(wú)菌技術(shù)培訓(xùn)l 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果能進(jìn)行充分全面的評(píng)價(jià)。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證其它重要影響因素 藥品本身的抑菌性； 培養(yǎng)基的促菌生長(zhǎng)能力； 培養(yǎng)條件（溫度、濕度及需氧或厭氧）； 過(guò)濾系統(tǒng)的材質(zhì)無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證檢驗(yàn)的進(jìn)展強(qiáng)調(diào)檢驗(yàn)

27、的過(guò)程控制，提高檢出率，保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。人員的要求環(huán)境、設(shè)施要求培養(yǎng)基適用性檢驗(yàn)數(shù)量方法驗(yàn)證培養(yǎng)時(shí)間試驗(yàn)用菌全封閉過(guò)濾培養(yǎng)器、隔離系統(tǒng)無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證檢驗(yàn)結(jié)果的保證l 要求有一個(gè)取樣計(jì)劃來(lái)涵蓋整個(gè)批號(hào)l 有足夠的取樣量和檢驗(yàn)量l 選擇適用的培養(yǎng)基l 采用經(jīng)驗(yàn)證的無(wú)菌檢驗(yàn)方法l 良好的環(huán)境監(jiān)控l 人員保證無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證無(wú)菌檢查無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證無(wú)菌檢查l 定義：p無(wú)菌原料藥是指法定藥品標(biāo)準(zhǔn)中列有無(wú)菌檢查項(xiàng)目的制劑和原料藥，包括無(wú)菌制劑和無(wú)菌原料藥。p無(wú)菌檢查是檢查要求無(wú)菌的藥品、醫(yī)療器具、原料、輔料以及要求無(wú)菌的其他物品是否染有活菌的一種方法。l 符合無(wú)

28、菌檢查法的規(guī)定僅表明了供試品在該檢驗(yàn)條件下未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌和真菌污染。l 無(wú)菌檢查法建立在批產(chǎn)品受微生物污染是均勻的假設(shè)上（其實(shí)非均勻）。無(wú)菌檢出低污染的概率極低的。因此，無(wú)菌檢查存在風(fēng)險(xiǎn)和局限性。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證無(wú)菌檢查的局限性l 無(wú)法對(duì)整批產(chǎn)品進(jìn)行100%檢驗(yàn)l 只進(jìn)行細(xì)菌和真菌的檢驗(yàn)l 培養(yǎng)基l 培養(yǎng)條件（如溫度和時(shí)間）是有限的l 我們的工作環(huán)境及操作是在相對(duì)無(wú)菌的狀態(tài)。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證無(wú)菌檢查：注射劑、植入劑、部分外用藥l 鼻用制劑：用于手術(shù)或創(chuàng)傷的鼻用制劑。l 凝膠劑：用于嚴(yán)重創(chuàng)傷的凝膠劑。l 乳膏劑：用于燒傷或嚴(yán)重創(chuàng)傷的乳膏劑。新增的無(wú)菌檢查中藥制劑l 散劑：用于

29、燒傷或嚴(yán)重創(chuàng)傷的外用散劑。l 鼻用制劑：用于嚴(yán)重創(chuàng)傷的鼻用制劑。l 眼用制劑：用于傷口的眼用制劑。l 軟膏劑：用于燒傷或嚴(yán)重創(chuàng)傷的乳膏劑。l 氣霧劑、噴霧劑：用于燒傷或嚴(yán)重創(chuàng)傷的氣霧劑、噴霧劑。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證GMP取樣取樣注意事項(xiàng)，包括為降低取樣過(guò)程產(chǎn)生的各種風(fēng)險(xiǎn)所采取的預(yù)防措施，尤其是無(wú)菌或有害物料的取樣以及防止取樣過(guò)程中污染和交叉污染的注意事項(xiàng)；在生產(chǎn)的每一階段，應(yīng)當(dāng)保護(hù)產(chǎn)品和物料免受微生物和其他污染。附錄1無(wú)菌藥品 質(zhì)量控制第八十條 無(wú)菌檢查的取樣計(jì)劃應(yīng)當(dāng)根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果制定，樣品應(yīng)當(dāng)包括微生物污染風(fēng)險(xiǎn)最大的產(chǎn)品。無(wú)菌檢查樣品的取樣至少應(yīng)當(dāng)符合以下要求：（一）無(wú)菌灌裝產(chǎn)品的

30、樣品必須包括最初、最終灌裝的產(chǎn)品以及灌裝過(guò)程中發(fā)生較大偏差后的產(chǎn)品；（二）最終滅菌產(chǎn)品應(yīng)當(dāng)從可能的滅菌冷點(diǎn)處取樣；（三）同一批產(chǎn)品經(jīng)多個(gè)滅菌設(shè)備或同一滅菌設(shè)備分次滅菌的，樣品應(yīng)當(dāng)從各個(gè)/次滅菌設(shè)備中抽取。一般隨機(jī)抽樣，保證樣品的代表性和原始性，復(fù)試樣品應(yīng)盡量重現(xiàn)原取樣。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證注意事項(xiàng)只要供試品的性狀允許，應(yīng)采用薄膜過(guò)濾法（首選）只要供試品的性狀允許（溶解性、抑菌性），應(yīng)將所有容器內(nèi)的全部?jī)?nèi)容物過(guò)濾驗(yàn)證用供試品用最大量陽(yáng)性對(duì)照分開(kāi)培養(yǎng)大腸埃希菌代替銅綠假單胞菌（G+敏感，保證結(jié)果有效）無(wú)菌檢測(cè)14天（補(bǔ)償生長(zhǎng)條件、潛在的低生長(zhǎng)者、修復(fù)受損細(xì)胞）優(yōu)先選用密閉式過(guò)濾器，或一次性

31、過(guò)濾器濾膜材質(zhì)（抗用低吸附），濾膜的完整性，沖洗量。直接法接種供試品體積不得大于培養(yǎng)基體積的10%，每管裝量硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基不少于15ml，改良馬丁培養(yǎng)基不少于10ml，可用濃縮培養(yǎng)基，或增加培養(yǎng)容器數(shù)。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證結(jié)果判斷l(xiāng) 陽(yáng)性管生長(zhǎng)良好，陰性管不得長(zhǎng)菌，否則試驗(yàn)無(wú)效。l 以一次檢出為準(zhǔn)，不得復(fù)試。（低檢出率，實(shí)驗(yàn)環(huán)境、條件改善l 當(dāng)符合下列至少一個(gè)條件時(shí)，方可判試驗(yàn)結(jié)果無(wú)效；無(wú)菌檢查試驗(yàn)所用的設(shè)備及環(huán)境的微生物監(jiān)控結(jié)果不符合無(wú)菌檢查法的要求?；仡櫉o(wú)菌試驗(yàn)過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)有可能引起微生物污染的因素。陰性對(duì)照管有菌生長(zhǎng)。供試品管中生長(zhǎng)的微生物經(jīng)鑒定后，確認(rèn)是因無(wú)菌試驗(yàn)中所使用

32、的物品和（或）無(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)引起的。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證結(jié)果保證有效的結(jié)果可靠的結(jié)論培養(yǎng)基保證結(jié)果判斷SOP操作人無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證方法驗(yàn)證的一般程序與環(huán)節(jié)需前處理不需前處理有抑菌作用樣品無(wú)抑菌作用去除抑菌作用檢查驗(yàn)證前處理方法對(duì)污染菌生長(zhǎng)、檢出的影響。可以通過(guò)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)判斷驗(yàn)證抑菌活性去除的有效性，以及去除方法對(duì)污染菌生長(zhǎng)、檢出的影響。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證無(wú)菌檢查驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)：供試品直接接種法薄膜過(guò)濾法100ml/筒試驗(yàn)組（供試品+菌）金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸、枯草桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉培養(yǎng)基對(duì)照組 陽(yáng)性菌對(duì)照組（加菌同試驗(yàn)組）規(guī)定T培養(yǎng)35天觀察

33、結(jié)果書寫驗(yàn)證報(bào)告稀釋劑對(duì)照組無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物限度檢查無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物限度檢查：口服、外用l 控制項(xiàng)目雜菌數(shù)：細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)?？刂凭ㄖ虏【捍竽c埃希菌、大腸菌群、沙門菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、梭菌、白色念珠菌。l 制定原則：非無(wú)菌藥品的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)是基于藥品的給藥途徑及對(duì)患者潛在的危害而制定的。l 依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)檢查控制菌無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證l 不含藥材原粉的制劑l 含藥材原粉的制劑：丸劑l 含動(dòng)物藥的制劑l 外用制劑滴眼劑一般局部用藥直腸給藥制劑尿道、陰道給藥制劑滴鼻劑l 不同制劑的限度無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證注意事項(xiàng)l采用稀釋法

34、、離心沉淀集菌法、薄膜過(guò)濾法、中和法等方法或聯(lián)合使用這些方法消除供試品的抑菌活性l供試液從制備到加入檢驗(yàn)用培養(yǎng)基不得超過(guò)1小時(shí)l供試液制備若需用水浴加溫時(shí)，溫度不應(yīng)超過(guò)45l供試品須符合微生物限度標(biāo)準(zhǔn)和菌數(shù)報(bào)告規(guī)則，應(yīng)采用使微生物生長(zhǎng)的更高稀釋級(jí)進(jìn)行驗(yàn)證。（10-3，1000）l無(wú)合適方法消除抑菌性的檢驗(yàn)方法，選擇回收率更接近要求的方法和條件應(yīng)對(duì)生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品特性進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和產(chǎn)品質(zhì)量。l報(bào)告規(guī)則（平均數(shù)，300cfu）l培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間變化l檢驗(yàn)量（中藥膜劑，沙門菌）l樣品稀釋級(jí)的選擇（驗(yàn)證）l離心法500轉(zhuǎn)/分，3分鐘（中藥混懸劑重新驗(yàn)證，只適用細(xì)菌）l控制菌-培養(yǎng)

35、基的適用性（促生長(zhǎng)能力、指標(biāo)能力和抑制能力）參照培養(yǎng)基（比較菌落形態(tài)、大小、指標(biāo)劑反應(yīng)、生長(zhǎng)速度）最長(zhǎng)（抑）、最短（生）培養(yǎng)時(shí)間。l疑似菌確認(rèn)，選擇認(rèn)可的菌種鑒定方法，陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)至少進(jìn)行到分離的步驟。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證微生物限度檢查法驗(yàn)證l 細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)計(jì)數(shù)方法驗(yàn)證定量回收率測(cè)定實(shí)驗(yàn)l 控制菌檢查方法驗(yàn)證定性能否生長(zhǎng)、專屬性實(shí)驗(yàn)無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證回收率計(jì)算試驗(yàn)組的菌回收率=（試驗(yàn)組平均菌落數(shù)-供試品組平均菌落數(shù)）/菌液組平均菌落數(shù)100%稀釋級(jí)對(duì)照組的菌回收率=（稀釋劑對(duì)照組的平均菌落數(shù)/菌液組的平均菌落數(shù)）100%在3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)中，稀釋劑對(duì)照組、試驗(yàn)組的回

36、收率均不低于70%，若任一次試驗(yàn)中回收率低于70，應(yīng)重新選擇方法再驗(yàn)證。無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證方法驗(yàn)證：控制菌l 控制菌：大腸埃希菌，銅綠假單胞菌、沙門菌、大腸菌群、生孢梭菌l 計(jì)數(shù)方法：平皿法、薄膜過(guò)濾法。特殊：生孢梭菌（加菌量：10100cfu，只要求生長(zhǎng)不要求回收率l 制定原則：非無(wú)菌藥品的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)是基于藥品的給藥途徑及對(duì)患者潛在的危害而制定的。l 依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)檢查控制菌無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證原料藥/賦形劑量微生物檢查微生物能否在原料或賦形劑中生長(zhǎng)或存活？提供支持?jǐn)?shù)據(jù)，不必做微生物限度檢查和制定認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)原料或賦形劑是否無(wú)菌？不需進(jìn)一步做微生物限度檢查法或制定認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)原料/賦

37、形劑合成/工藝相關(guān)步驟本身是否會(huì)減少微生物按照協(xié)議后藥典各論制訂微生物限度認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)按照協(xié)議后藥典各論制訂微生物限度認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)逐批檢查微生物限度和指示菌抽批檢驗(yàn)微生物限度和指示菌是否有科學(xué)證明減少步驟會(huì)造成原料/輔料中微生物量認(rèn)可限度（未檢出覺(jué)指示菌）？提供支持?jǐn)?shù)據(jù)，不必做微生物限度檢查和制訂認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)所監(jiān)控的微生物量/指示菌量是否都低于規(guī)定限度？是否是是是否是是無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證非無(wú)菌制劑的微生物檢查制劑中是否含防腐劑或本身是否有抗微生物能力？制訂防腐劑認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)和認(rèn)證在低于或等于指定的最小防腐劑濃度時(shí)是否有效，并證明制劑本身的抗微生物能力逐批進(jìn)行微生物限度實(shí)驗(yàn)按照協(xié)議后藥典各論制訂微生物

38、限度認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)不必做微生物限度檢查和制訂認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)是否每批都符合微生物限度標(biāo)準(zhǔn)？提供支持?jǐn)?shù)據(jù)，不必做微生物限度檢查和制訂認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)是否是否是制劑是否為固體劑型？是否有科學(xué)證據(jù)證明制劑有抑制微生物生長(zhǎng)的特性？否否是無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證保證藥品微生物檢驗(yàn)結(jié)果可靠的有效途徑藥品微生物實(shí)驗(yàn)環(huán)境微生物的監(jiān)測(cè)環(huán)境微生物的監(jiān)測(cè)環(huán)境細(xì)菌與藥品細(xì)菌的比較結(jié)論無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證2010版藥典無(wú)菌檢查法的主要增修訂情況無(wú)菌微生物限度檢查及方法驗(yàn)證l 前言部分 1、新增規(guī)定：“防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出?！?2、新增規(guī)定：“日常檢驗(yàn)還需要對(duì)環(huán)境進(jìn)行監(jiān)控。” 3、新增規(guī)定：“無(wú)菌檢查人員必須具備微生物專業(yè)知識(shí)，并經(jīng)過(guò)無(wú)菌