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文檔簡介

1、蘆薈組織培養(yǎng)快速繁殖蘆薈組織培養(yǎng)快速繁殖09生物制藥生物制藥 范敏范敏婷婷 蘆薈為百合科多年生肉質(zhì)常綠草本植物,葉片含有大量天然蛋白質(zhì)、維生素、蘆薈素、活性酶等以及人體所需的各種微量元素,具有健胃、通便、消炎、抗菌、抗腫瘤等藥理作用。為了實現(xiàn)大規(guī)模工廠化生產(chǎn)和快速繁殖的目的,除采取生產(chǎn)上常用的的扦插和依靠接芽與側(cè)株進行分株繁殖外,采取組織培養(yǎng)技術(shù)可以快速繁殖大量優(yōu)良品種的蘆薈苗。愈傷組織培養(yǎng)愈傷組織培養(yǎng) 繼代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)分化培養(yǎng)分化培養(yǎng)生根培養(yǎng)生根培養(yǎng)煉苗煉苗移栽移栽 一、取材與消毒。 取盆栽蘆薈植株或大田植株的上端或吸芽,將材料中心部分(生長點及附近組織)切成小拇指大小,置于自來水 下沖洗干

2、凈,然后用2%洗潔精或飽和洗衣粉搖動5min,倒去洗滌劑后,用自來水沖洗干凈,然后用90%酒精消毒1min;再用無菌水沖洗45次,瀝干水。 二、初代培養(yǎng) 在蘆薈的初代培養(yǎng)及誘導(dǎo)側(cè)芽分化的過程中,以采用成分為MS+BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖3.0%+瓊脂0.7%的培養(yǎng)基效果最為理想。接種后40d,統(tǒng)計在該培養(yǎng)基上平均每個外植體誘導(dǎo)側(cè)芽數(shù)為4個,且側(cè)芽粗壯濃綠。蘆薈快繁的整個過程中溫度均可控制在26左右,白天日光燈照明11h左右,光照強度為10001500lx,晚間黑暗。 三、繼代培養(yǎng) 當(dāng)在初代培養(yǎng)基上培養(yǎng)了40d左右時,側(cè)芽轉(zhuǎn)接 到成分為MS+BA3.0mg/L+NAA0.2

3、mg/L+蔗糖3.0%+瓊脂0.7%的培養(yǎng)基上培養(yǎng),25d后,每個芽周圍又可長出46個側(cè)芽。形成芽叢,此時即可切下來再進行幾代培養(yǎng)。以后每25d可繼代增殖1次。在第一次至第5次繼代增殖過程中,隨著繼代數(shù)的增加,每個芽叢平均新增芽數(shù)亦明顯增多。 四、生根培養(yǎng) 蘆薈增殖芽長到一定高度即可轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基,生根培養(yǎng)基采用:KC+IBA2.5mg/L+蔗糖3%+瓊脂0.7%+活性炭0.3%較適宜。 五、壯苗培養(yǎng) 為了使植株健壯,使之能 在移栽后保證較高的成活率,當(dāng)在生根培養(yǎng)基上形成了完整植株后,即可轉(zhuǎn)接到1/2MS+IBA2.0mg/L+Ac0.3%+蔗糖3%+瓊脂0.7%的壯苗培養(yǎng)基上進行壯苗培養(yǎng)。此階段可將光照強度增至2000lx,經(jīng)20d左右培養(yǎng),平均每個試管植株長出45條粗壯的側(cè)根,葉色濃綠。即可煉苗轉(zhuǎn)移。 六、移栽與管理 蘆薈試管苗移栽前應(yīng)將培養(yǎng)瓶搬出培養(yǎng)室,并敞開瓶口于普通房間內(nèi)煉苗34d。移栽時,可先往瓶中加入少量水并搖動培養(yǎng)基,然后用鑷子將試管苗輕輕取出,洗凈基部粘附的培養(yǎng)基,然后移栽到沙河中。同時要注意及時噴水保濕。移栽初期幼苗有轉(zhuǎn)黃現(xiàn)象,這是因為初期適應(yīng)反

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