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文檔簡介

1、第一章1、兩次綠色革命的內(nèi)容、標(biāo)志及存在的問題。第一次綠色革命使用矮稈品種。主要的內(nèi)容:大規(guī)模地推廣矮稈、半矮稈、抗倒伏、產(chǎn)量高、適應(yīng)性廣的優(yōu)良小麥及水稻品種,并同時改進(jìn)灌溉、施肥等相關(guān)技術(shù)。存在的問題:一、作物單一化。二、大規(guī)模灌溉和施肥對水質(zhì)的影響。三、大量施用化學(xué)肥料、農(nóng)藥。第二次綠色革命雜種優(yōu)勢的利用第三次綠色革命轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利用第二章2、基因工程中理論上的三大發(fā)現(xiàn)及技術(shù)上的三大發(fā)明。 理論上的三大發(fā)現(xiàn):一、DNA是遺傳物質(zhì)被證實(shí)。 二、DNA雙螺旋模型的提出。 三、“中心法則”的提出。 技術(shù)上的三大發(fā)明:一、工具酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用。 二、反轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用。 三、載體的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用。第三

2、章3、型限制性內(nèi)切酶。 特點(diǎn):識別位點(diǎn)的特異性。 識別序列的對稱性。 切割位點(diǎn)的規(guī)范性。4、載體的必備條件。分子較小,可攜帶比較大的DNA片段。 能獨(dú)立于染色體而進(jìn)行自主復(fù)制并且是高效的復(fù)制。 要有盡可能多種限制酶的切割位點(diǎn),但每一種限制酶又要最少的切割位點(diǎn)(多克隆位點(diǎn) multiple cloning sites,MCS)。 有適合的標(biāo)記,易于選擇。 有時還要求載體要能啟動外源基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄及表達(dá),并且盡可能是高效的表達(dá)。 從安全角度考慮,要求載體不能隨便轉(zhuǎn)移,僅限于在某些實(shí)驗(yàn)室內(nèi)特殊菌種內(nèi)才可復(fù)制等。5、質(zhì)粒提取的原理、步驟。 提取方法:堿變性法;煮沸法;SDS法。原理:基于細(xì)菌染色體DNA

3、與質(zhì)粒DNA變性與復(fù)性特征而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的質(zhì)粒DNA兩條互補(bǔ)鏈不會完全分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc等高鹽緩沖液調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒復(fù)性迅速而準(zhǔn)確,而細(xì)菌染色體DNA的兩條互補(bǔ)鏈彼此已完全分開,復(fù)性不會那么迅速而準(zhǔn)確,它們相互纏繞形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,細(xì)菌染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物以及細(xì)菌碎片等一起沉淀下來而被除去。步驟:接種含pUC-mT質(zhì)粒的大腸桿菌到1.5ml含有60g/ml Amp抗生素的LB 液體培養(yǎng)基。 (37搖

4、培過夜(1012h);12000rpm, 3min)棄去上清液,倒立于濾紙之上,盡量去凈上清。 加100l 液,渦旋震蕩,充分混勻 配制適量的液 加200l 液,迅速輕輕混勻(以顛倒EP管5-10次為宜),冰浴,5-10min,此時應(yīng)有絲狀物出現(xiàn)。 加150l 液,輕輕混勻, 冰浴,5min以上此時應(yīng)有絮狀物出現(xiàn)。 12000rpm, 5min取上清液,加等體積的酚-氯仿-異戊醇,渦旋振蕩,使溶液呈現(xiàn)乳白色,5min 12000rpm, 10min取上清液,加2倍體積的冷乙醇,混勻,-20,30min 12000rpm, 10min棄去上清液,用70%乙醇清洗沉淀 干燥加20l TE溶解,4保

5、存6、關(guān)于圖位克隆的原理及其步驟。概念:該法分離基因是根據(jù)目的基因在染色體上的位置進(jìn)行的,無需預(yù)先知道基因的DNA順序,也無需預(yù)先知道其表達(dá)產(chǎn)物的有關(guān)信息。它是通過分析目的基因與已知分子標(biāo)記的連鎖關(guān)系來確定目的基因在染色體上的位置。原理: 功能基因在基因組中都有相對穩(wěn)定的基因座,在利用分子標(biāo)記技術(shù)對目的基因進(jìn)行精確定位的基礎(chǔ)上,用與目的基因緊密連鎖的分子標(biāo)記篩選DNA文庫(包括BAC、YAC、TAC、PAC等),構(gòu)建目的基因區(qū)域的物理圖譜,再利用此圖譜通過染色體步移逐步逼近目的基因,最終克隆目的基因,并通過遺傳轉(zhuǎn)化試驗(yàn)證實(shí)目的基因的功能。步驟: 初步定位構(gòu)建連鎖圖譜精細(xì)定位 構(gòu)建物理圖譜染色體

6、步移確定候選基因功能互補(bǔ)驗(yàn)證7、抑制性消減雜交的原理及其技術(shù)流程。原理:通過合成兩個不同的接頭,接于經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化后的測試(tester)cDNA片段的5末端,將測試和驅(qū)動(driver)進(jìn)行兩輪雜交。標(biāo)準(zhǔn)化步驟均等了測試中的cDNA單鏈豐度,消減雜交步驟去除測試和驅(qū)動之間的共同序列。利用抑制性PCR選擇性擴(kuò)增目的cDNA片段,同時抑制非目的cDNA的擴(kuò)增。因此,抑制性消減雜交技術(shù)顯著增加了獲得低豐度差異表達(dá)的cDNA的概率。技術(shù)流程:1) 測試材料:tester; 對照材料:driver;2) cDNA合成:通過反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA;3)cDNA酶切;4) 加接頭(adapter),將te

7、ster cDNA分成兩組:tester 1和tester 2,一份與Adaptor1連接,另一份與Adaptor2連接(5端);5)第一次差減雜交,使連接一種接頭的差異表達(dá)基因初步富集;6)第二次差減雜交,形成了新的連接有兩種接頭的雙鏈雜交片段,作為PCR指數(shù)擴(kuò)增的模板;7)兩輪PCR,特異擴(kuò)增代表了差異表達(dá)的cDNA片段; 8)將PCR所得的差別表達(dá)基因片段插入適當(dāng)載體,轉(zhuǎn)化細(xì)菌。經(jīng)篩選,獲得具有差異表達(dá)cDNA片段的陽性克隆。然后通過序列分析,可獲得一些新的ESTs序列。技術(shù)流程圖示:第四章8、Ti質(zhì)粒是來自細(xì)菌系統(tǒng)的,為何能在真核生物中表達(dá)?證據(jù)一. T-DNA的基因不含有內(nèi)含子,幾乎

8、每個基因的翻譯起始位點(diǎn)都是AUG。證據(jù)二. 無論是胭脂堿合成酶基因nos還是章魚堿合成酶基因ocs的5末端都具有真核特有的TATA-box,CAAT-box。證據(jù)三. T-DNA產(chǎn)生的mRNA均是典型的植物mRNA分子。9、野生Ti質(zhì)粒的缺陷和改進(jìn)方法。缺陷: Ti質(zhì)粒分子量過大,一般在160240kb,在基因工程中難以操作; 很難找到單一的酶切位點(diǎn); 生長在培養(yǎng)基上的植物轉(zhuǎn)化細(xì)胞產(chǎn)生大量的生長素和分裂素阻止了細(xì)胞再生長為整株植物; Ti質(zhì)粒只能在農(nóng)桿菌中復(fù)制、繁殖而擴(kuò)增,不能在大腸桿菌中復(fù)制。 Ti質(zhì)粒上還存在一些對于T-DNA轉(zhuǎn)移不起任何作用的基因。 改進(jìn)方法:1、去除致瘤基因Onc。 2

9、、構(gòu)建卸甲載體。10、一元載體系統(tǒng)和雙元載體系統(tǒng)的特點(diǎn)及其異同點(diǎn)。一元載體轉(zhuǎn)化系統(tǒng):一元載體轉(zhuǎn)化系統(tǒng)是中間表達(dá)載體與改造后的受體Ti質(zhì)粒之間,通過同源重組所產(chǎn)生的一種復(fù)合型載體。又分為共整合載體和拼接末端載體。共整合載體:中間表達(dá)載體與受體Ti卸甲載體,通過同源重組共整合而構(gòu)建;中間表達(dá)載體與受體Ti質(zhì)粒之間同源序列是pBR322。拼接末端載體:兩個LIH序列在同源重組前分別處于不同質(zhì)粒上。一元載體轉(zhuǎn)化系統(tǒng)-pGV3850與SEV比較:共同點(diǎn): 兩者都是通過受體Ti質(zhì)粒與中間載體同源重組而形成,故同屬于一元載體系統(tǒng)。不同點(diǎn):受體Ti質(zhì)粒與中間載體的結(jié)構(gòu)不同。同源序列不同。 SEV是更有效的共整

10、合載體。雙元載體轉(zhuǎn)化系統(tǒng):由兩個分別含T-DNA和Vir區(qū)的相容性Ti質(zhì)粒構(gòu)成的雙質(zhì)粒系統(tǒng),又因?yàn)槠銽-DNA與Vir基因在兩個獨(dú)立的質(zhì)粒上,通過反式激活T-DNA轉(zhuǎn)移,故稱之為反式載體(trans vecter)。主要包括兩個載體(Ti質(zhì)粒):穿梭載體(微型Ti質(zhì)粒)和卸甲載體(輔助Ti質(zhì)粒)。 基于T-DNA轉(zhuǎn)移機(jī)制的兩種特點(diǎn):對T-DNA轉(zhuǎn)移和整合到植物染色體中起順式作用的僅僅是其末端24個重復(fù)序列。引起T-DNA轉(zhuǎn)移和整合的毒性區(qū)(vir)基因產(chǎn)物起反式作用,即Vir基因不必與T-DNA末端重復(fù)序列位于同一質(zhì)粒上,可由另一種質(zhì)粒提供。一元載體系統(tǒng)和雙元載體系統(tǒng)的比較 一、雙元載體不需要

11、共整合過程:系統(tǒng)中的兩個質(zhì)粒不必含有同源序列, 構(gòu)建的操作步驟比較簡單。插入載體的外源基因變異小。 二、穿梭質(zhì)粒:具有E.coli質(zhì)粒的復(fù)制位點(diǎn),能在農(nóng)桿菌的寄主中復(fù)制,使其質(zhì)粒拷貝數(shù)增加10100倍,分子量?。?0kb),可直接進(jìn)行體外遺傳操作。轉(zhuǎn)移到農(nóng)桿菌比較容易(轉(zhuǎn)化效率高),而且構(gòu)建的頻率較高。 三、載體的穩(wěn)定性不同:共整合載體構(gòu)建成功后,工程菌的穩(wěn)定性較好,雙元載體穩(wěn)定性較差,容易丟失。第五章11、遺傳學(xué)標(biāo)記的分類。分為顯性和共顯性標(biāo)記: 種類:形態(tài)標(biāo)記、細(xì)胞學(xué)標(biāo)記、生化標(biāo)記、分子標(biāo)記。12、各種分子標(biāo)記的縮寫和全稱。RFLP標(biāo)記:限制性片段長度多態(tài)性(restriction fra

12、gment length polymorphism, RFLP)通過限制酶酶切片段的長度多態(tài)性來揭示DNA堿基組成不同的技術(shù)稱為限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)(RFLP技術(shù))。RAPD標(biāo)記:隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA(random amplified polymorphic DNA)。是以單個隨機(jī)排列的寡聚脫氧核苷酸單鏈 (一般為8-10bp)為引物(primer),非定點(diǎn)擴(kuò)增基因組DNA,獲得長度不同的多態(tài)性DNA片段。SSR標(biāo)記:簡單序列重復(fù)標(biāo)記(又稱微衛(wèi)星標(biāo)記)通過對微衛(wèi)星序列作特異PCR擴(kuò)增產(chǎn)生的。AFLP標(biāo)記:擴(kuò)增性片段長度多態(tài)性(amplified fragment length polymor

13、phism),它是RFLP和PCR結(jié)合的產(chǎn)物。SNP標(biāo)記:單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism, SNP),是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列的多態(tài)性。13、RFLP、AFLP的原理、技術(shù)流程。RFLP的原理:是利用特定的限制性內(nèi)切酶識別并切割(消化)不同生物個體的基因組DNA,由于不同個體等位基因間堿基的互換、重排、缺失等變化導(dǎo)致限制性內(nèi)切酶識別位點(diǎn)發(fā)生改變,從而造成基因型間限制性片段長度的差異。RFLP的技術(shù)流程:酶切,電泳分離DNASouthern轉(zhuǎn)移標(biāo)記雜交X光片 自顯影AFLP的原理:AFLP的技術(shù)流程:第六章14、水分的生

14、理生態(tài)作用。1.水分的生理作用:1)水是植物細(xì)胞原生質(zhì)的重要組分2)水是植物體內(nèi)代謝過程的反應(yīng)物質(zhì)3)水是植物各種生化反應(yīng)和物質(zhì)運(yùn)輸?shù)慕橘|(zhì)4)水使植物保持挺立的姿態(tài)5)細(xì)胞的分裂和延伸生長都需要足夠的水2.水對植物的生態(tài)作用:1) 水是植物體溫調(diào)節(jié)劑2) 水對可見光的通透性3) 水對植物生存環(huán)境的調(diào)節(jié)15、細(xì)胞水勢的組成。水勢=滲透勢+襯質(zhì)勢+壓力勢16、根系吸水的途徑。質(zhì)外體途徑和共質(zhì)體途徑17、蒸騰作用的生理意義。 蒸騰作用的意義:1、蒸騰作用是水分吸收與運(yùn)轉(zhuǎn)的動力2、蒸騰作用促進(jìn)木質(zhì)部汁液中物質(zhì)的運(yùn)輸3、蒸騰作用降低葉片的溫度4、蒸騰作用有利于氣體的交換18、氣孔運(yùn)動的機(jī)理。淀粉-糖轉(zhuǎn)化

15、學(xué)說:* K+積累學(xué)說無機(jī)離子泵學(xué)說:*蘋果酸代謝學(xué)說19、植物細(xì)胞對礦質(zhì)營養(yǎng)的吸收。根系是植物吸收礦質(zhì)的主要器官,吸收礦質(zhì)的部位和吸水的部位都是根尖未栓化的部分。根毛區(qū)是吸收礦質(zhì)離子最快的區(qū)域。植物吸收礦質(zhì)元素的特點(diǎn) 1)根系吸收礦質(zhì)與吸收水分的相互關(guān)系相互關(guān)聯(lián):(2)相互獨(dú)立:兩者的吸收不成比例;吸收機(jī)理不同分配方向不同2)根系對離子吸收具有選擇性選擇性主要表現(xiàn)在兩個方面:對同一溶液中不同離子的選擇吸收(NH+、NO3-、K+、Ca2+等) 對同一鹽分中陰陽離子的選擇吸收(Ca(NO3)2、NH4HCO3等)產(chǎn)生原因:根細(xì)胞質(zhì)膜上不同離子的載體和離子通道數(shù)量有關(guān)。3)根系吸收單鹽會受毒害:

16、任何植物,假若培養(yǎng)在某一單鹽溶液中,不久即呈現(xiàn)不正常狀態(tài),最后死亡 影響根系吸收礦質(zhì)元素的因素溫度、通氣狀況、溶液濃度、土壤PH值。20、植物礦質(zhì)營養(yǎng)的同化(N同化)。N源:氮?dú)狻⒂袡C(jī)氮、無機(jī)氮N同化方式:1、硝酸鹽的代謝還原 2、氨的同化3、生物固氮影響固氮因素 光合作用 為固氮提供物質(zhì)和能量生長期 最大固氮速率在種子和果實(shí)發(fā)育期,豆類種子中90的氮是在生殖生長期固定的。遺傳因子 如結(jié)瘤的效率/根瘤菌與植物的識別能力等,用基因工程技術(shù)提高豆類產(chǎn)量,或把固氮基因引入非豆科植物。21、植物光合作用的機(jī)理。整個光合作用可大致分為三個步驟: 原初反應(yīng);指光合色素對光能的吸收、傳遞與轉(zhuǎn)換過程。 電子傳

17、遞和光合磷酸化;電子傳遞以“Z”方案進(jìn)行,葉綠體在光下將無機(jī)磷(Pi)與ADP合成ATP的過程稱為光合磷酸化。光合磷酸化與電子傳遞相偶聯(lián) 碳同化過程暗反應(yīng):指植物利用光反應(yīng)中形成的同化力(ATP和NADPH),將CO2轉(zhuǎn)化為糖類的過程22、C同化途徑及其例子。途徑:C3途徑:卡爾文循環(huán)(維管束鞘細(xì)胞)。例子:光合作用的植物都能進(jìn)行卡爾文循環(huán)C4途徑:C4-二羧酸途徑(葉肉細(xì)胞)。例子:甘蔗、玉米、高粱CAM(景天酸代謝)途徑:這類植物體內(nèi)白天糖分含量高,夜間有機(jī)酸含量高例子:景天科、仙人掌科、菠蘿23、影響光合作用的因素。光照、二氧化碳、溫度、水分、礦質(zhì)營養(yǎng)24、植物呼吸作用的生理意義。 (1

18、)為植物生命活動提供能量和還原力(2)中間產(chǎn)物是合成重要有機(jī)物質(zhì)的原料(3)在植物抗病免疫方面有重要作用25、呼吸代謝的多樣性表現(xiàn)在哪些方面?(1)呼吸代謝生化途徑的多樣性(2)電子傳遞途徑的多樣性(3)末端氧化酶的多樣性26、氧化磷酸化的機(jī)理。有關(guān)氧化磷酸化總共有三種假說:化學(xué)滲透假說、化學(xué)偶聯(lián)假說、構(gòu)象偶聯(lián)假說。化學(xué)滲透假說:認(rèn)為電子傳遞釋放的自由能和ATP的合成是與一種跨線粒體內(nèi)膜的質(zhì)子梯度相偶聯(lián)的。(該假說現(xiàn)在普遍被人們所接受并且有大量的實(shí)驗(yàn)證據(jù)支持該假說)化學(xué)偶聯(lián)假說:認(rèn)為電子傳遞反應(yīng)釋放的能量通過一系列連續(xù)的化學(xué)反應(yīng)形成高能共價(jià)中間物。最后將其能量轉(zhuǎn)移到ADP中形成ATP。構(gòu)象偶聯(lián)

19、假說:認(rèn)為電子沿著電子傳遞鏈傳遞使線粒體內(nèi)膜的蛋白質(zhì)組分發(fā)生了構(gòu)象變化,形成一種高能構(gòu)象,這種高能形式通過ATP的合成而恢復(fù)其原來的構(gòu)象。27、抗氰呼吸的作用機(jī)理。抗氰呼吸在高等植物中廣泛存在。最典型的例子是天南星科植物的佛焰花序。其作用機(jī)理是E含F(xiàn)e2+,其功能是將UQH2的電子傳給O2生成H2O。對O2的親和力高,易被水楊基氧肟酸(SHAM)所抑制,對氰化物不敏感。交替氧化酶位于線粒體內(nèi)膜。 28、影響呼吸速率的因素。(1)內(nèi)部因素的影響。(2)外界條件的影響:溫度、氧氣、二氧化碳濃度、水分。第七章29、植物細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。概念:植物細(xì)胞接受激素、溫度、光照等刺激信號并整合、放大,最終引起

20、細(xì)胞反應(yīng)。連接環(huán)境刺激到植物反應(yīng)的分子途徑。植物信號分子 :按作用范圍分:胞內(nèi)信號分子:化學(xué)信號(植物激素是主要的信號分子)、物理信號。胞間信號分子:電信號、水力學(xué)信號。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子途徑: 胞間信號傳遞1、 化學(xué)信號的傳遞。方式:氣相、韌皮部、木質(zhì)部。2、 電信號的傳遞。3、 水力學(xué)信號的傳遞。 膜上信號轉(zhuǎn)換。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程: 刺激受體信號整合與放大基因表達(dá)反應(yīng) 胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。1、 鈣信號系統(tǒng)。2、 肌醇磷脂信號系統(tǒng) 3、 環(huán)核苷酸信號系統(tǒng) 細(xì)胞反應(yīng)。30、生長素、赤霉素、細(xì)胞分裂素的生長效應(yīng)。生長素:(1)促進(jìn)生長(2)促進(jìn)不定根形成(3)調(diào)運(yùn)養(yǎng)分(4) 其它效應(yīng):影響性別分化和促進(jìn)開花、防器

21、官脫落、疏花疏果、除草。赤霉素:(1)促莖伸長生長(2)誘導(dǎo)開花(3)打破休眠(4)促進(jìn)雄花分化(5)促進(jìn)座果,減少花朵脫落(6)誘導(dǎo)單性結(jié)實(shí)細(xì)胞分裂素:(1)促進(jìn)細(xì)胞分裂(2)促進(jìn)芽分化(3)促進(jìn)細(xì)胞擴(kuò)大(4)促進(jìn)側(cè)芽發(fā)育,消除頂端優(yōu)勢(5)延緩葉片衰老(6)打破種子休眠31、種子萌發(fā)的生長生理變化。種子吸水:吸脹吸水(快)緩慢吸水滲透吸水(快)呼吸作用的變化和酶的形成:無氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)橛醒鹾粑粑鰪?qiáng)。貯藏酶(-淀粉酶)活性增加,新酶開始合成(-淀粉酶)。有機(jī)物的轉(zhuǎn)變:種子有機(jī)物被分解,供給幼胚生長。激素的變化:束縛型激素轉(zhuǎn)變成自由型激素。32、春化作用的機(jī)理及其在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用。春化作

22、用機(jī)理:(1)春化刺激的感受和傳遞 (2)春化的生理生化基礎(chǔ) (3)春化與春化素、赤霉素關(guān)系。應(yīng)用:(一)人工春化處理(二)調(diào)種引種(三)控制花期33、光周期:植物對晝夜長度發(fā)生反應(yīng)的現(xiàn)象稱光周期現(xiàn)象。34、光周期誘導(dǎo)的機(jī)理及其理論的應(yīng)用。機(jī)理:(1)光周期誘導(dǎo) 達(dá)一定生理年齡時,經(jīng)足夠天數(shù)的適宜光周期處理,以后即使處于不適宜光周期下,仍能保持刺激效果而開花,稱光周期誘導(dǎo)(photoperiodic induction)。(2)光周期誘導(dǎo)中光期與暗期作用。暗期長度是成花決定因素光期長度決定花原基的數(shù)量,但不成正比關(guān)系。應(yīng)用:1.植物地理分布和引種載培2. 育種3.控制花期4. 調(diào)節(jié)營養(yǎng)生長和生

23、殖生長35、光周期誘導(dǎo)開花的假說。成花素假說:感受光周期器官是葉,經(jīng)誘導(dǎo)后產(chǎn)生促進(jìn)開花的物質(zhì);葉產(chǎn)生的特殊物質(zhì)可向各方向運(yùn)轉(zhuǎn),到達(dá)莖生長點(diǎn)引起各種變化;不同植物成花刺激物具相似性質(zhì);特定條件下產(chǎn)生的成花素不是基礎(chǔ)代謝中產(chǎn)生的一般物質(zhì)。36、種子成熟時的生理生化變化(果實(shí))。1、可溶性糖轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄蕴欠e累。2、非蛋白N逐漸減少,蛋白N增加。3、糖類轉(zhuǎn)化為脂肪。4、內(nèi)源激素變化:CTK、GA、IAA依次出現(xiàn)高峰。37種子休眠的原因和破除方法。原因及破除方法種皮限制:種皮太硬、不透水、不透氣。氨水處理松樹種子。種子未完成后熟作用:后熟作用:指成熟種子離開母體后,需要經(jīng)過一系列生理生化變化才能完成生理

24、成熟而具備發(fā)芽能力的生理過程??捎脤臃e處理法破除休眠。抑制物質(zhì)的存在:有些植物果實(shí)或種子中存在萌發(fā)抑制物質(zhì),如氨、乙烯、芥子油等??赏ㄟ^水洗等方法去除抑制物質(zhì)。38、植物變老的機(jī)理。營養(yǎng)虧缺學(xué)說 DNA損傷學(xué)說遺傳程序?qū)W說生物自由基損傷學(xué)說激素平衡學(xué)說第八章39、逆境對植物的傷害。1、破壞膜系統(tǒng)、透性加大、酶活性紊亂;2、光合速率下降,同化物形成減少;3、呼吸速率發(fā)生變化:凍、高溫、鹽、淹水下降;零上低溫和干旱先升后降;病害升。4、誘導(dǎo)糖類和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇苄曰衔?0、植物抗逆的一般表現(xiàn)。1、逆境下,質(zhì)膜透性增大,內(nèi)膜系統(tǒng)膨脹、收縮或破損。2、產(chǎn)生逆境蛋白。3、滲透調(diào)節(jié)與抗逆。4、植物激素與

25、抗逆:低溫、高溫、干旱和鹽害等脅迫下,ABA和乙烯含量大幅度升高,當(dāng)脅迫解除時則恢復(fù)正常水平。 5、植物的交叉適應(yīng):植物經(jīng)歷了某種逆境后,能提高對另一些逆境的抵抗能力。41、冷害。冷害(chilling injury):冰點(diǎn)以上低溫對植物造成的傷害。42、抗旱害的機(jī)理。(1)機(jī)械損傷學(xué)說(2)蛋白質(zhì)變性學(xué)說(3)膜透性的改變(4)活性氧傷害加強(qiáng)43、鹽分對植物的傷害、適應(yīng)機(jī)理。傷害:(1)滲透脅迫引起生理干旱(2)離子失調(diào)導(dǎo)致毒害作用(3)膜透性改變適應(yīng)機(jī)理:(1)避鹽性:有泌鹽、稀鹽和拒鹽三種方式。(2)耐鹽性:耐滲透脅迫營養(yǎng)元素平衡代謝穩(wěn)定性與鹽結(jié)合碳代謝途徑的改變44、病害的機(jī)理。植物在

26、生長發(fā)育和貯藏過程中,由于遭受其他生物的侵染或不利非生物因素的影響,使其生長發(fā)育受到阻礙,導(dǎo)致產(chǎn)量下降、品質(zhì)變劣、甚至死亡的現(xiàn)象,稱為植物病害。名詞解釋:1、粘性末端 :因酶切位點(diǎn)在兩條DNA單鏈上不同(對稱)酶切后形成的具有互補(bǔ)堿基的單鏈末端結(jié)構(gòu),酶切產(chǎn)生的兩個粘性末端很容易通過互補(bǔ)堿基的配對而重新連接起來。2、平末端 :因酶切位點(diǎn)在兩條DNA單鏈上相同,酶切后形成的平齊的末端結(jié)構(gòu),這種末端不易重新連接起來。3、同裂酶 :能識別和切割同樣的核苷酸靶序列的不同內(nèi)切酶。4、同尾酶:識別的靶序列不同,但能產(chǎn)生相同粘性末端的一類限制性核酸內(nèi)切酶。5、-互補(bǔ)現(xiàn)象 :將含有功能性完整的LacZ 基因的載

27、體導(dǎo)入到人工構(gòu)建的大腸桿菌株系中,載體編碼的-片段就能和寄主編碼的w-片段發(fā)生互補(bǔ)并具有了對底物X-gal的作用功能(發(fā)生顯色反應(yīng))。6、基因組文庫:用克隆載體將某種生物的基因組全部遺傳信息儲存于一個受體菌的群體內(nèi)。7、 cDNA文庫:生物基因組轉(zhuǎn)錄的全部或部分mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的各種cDNA片段,分別與克隆載體重組而存在于一種受體菌的群體內(nèi)。8、染色體步移:從第一個重組克隆插入片段的一端分離出一個片段作為探針從文庫中篩選第二個重組克隆,該克隆插入片段含有與探針重疊順序和染色體的其他順序。從第二個重組克隆的插入片段再分離出末端小片段篩選第三個重組克隆,如此重復(fù),得到一個相鄰的片段,等于在染色體上移了一步,故稱之為染色體步移。9、植物遺傳轉(zhuǎn)化:指以植物器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體作為受體,通過某種技術(shù)或途徑轉(zhuǎn)入外源基因,獲得使外源基因穩(wěn)定表達(dá)的可育植株的過程。 10、三親雜交法 :將供體菌、協(xié)助菌與受體菌混合起來,使菌體細(xì)胞緊密接觸,供體中的質(zhì)??梢栽趨f(xié)助菌的幫助下通過接合轉(zhuǎn)移方式導(dǎo)入受體菌中的方法。11、雙親雜交法 :12、遺傳標(biāo)記:指可以明確反映遺傳多態(tài)性的生物特

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