2015版藥典培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證

1、培養(yǎng)基驗(yàn)證文件驗(yàn)證文件名稱驗(yàn)證文件編碼計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證方案TS-YZ-2522-01有限公司制藥有限公司驗(yàn)證立項申請表驗(yàn)證立項題目計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查的驗(yàn)證立項編號TS-YZ-2522-01驗(yàn)證形式驗(yàn)證立項部門質(zhì)量部申請日期年 月曰驗(yàn)證對象計數(shù)培養(yǎng)基適用性需氧菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。驗(yàn)證目的及驗(yàn)證內(nèi)容本次驗(yàn)證的目的是確認(rèn)胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基是否適合需氧菌、霉菌及酵母菌數(shù)測定。冋意對計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查試驗(yàn)方案進(jìn)行驗(yàn)證。年 月曰主管部門審核意見對驗(yàn)證方案的編制及實(shí)施要求驗(yàn)證方案編制應(yīng)科學(xué)，合理，方法應(yīng)切實(shí)可行，實(shí)施必須按照方案進(jìn)行。驗(yàn)

2、證總負(fù)經(jīng)審核批準(zhǔn)對計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查進(jìn)行驗(yàn)證。簽字：年 月曰責(zé)人批準(zhǔn)起草部門簽名日期化驗(yàn)室質(zhì)量部驗(yàn)證方案的審批驗(yàn)證方案目錄1 、概述2 、驗(yàn)證目的批準(zhǔn)部門簽名日期質(zhì)量部驗(yàn)證總負(fù)責(zé)人3 、驗(yàn)證范圍4 、驗(yàn)證項目小組成員及職責(zé)5 、驗(yàn)證合格標(biāo)準(zhǔn)6 、試驗(yàn)材料7 、菌液制備8 、適用性檢查9、驗(yàn)證記錄10、驗(yàn)證結(jié)論及綜合評價計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查的驗(yàn)證方案1. 驗(yàn)證目的：需氧菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗(yàn)證的目的是確認(rèn)胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基是否適合需氧菌、霉菌及酵母菌總數(shù)測定。2. 參照標(biāo)準(zhǔn)：中國藥典2015年版四部1105非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查

3、法。3. 驗(yàn)證項目：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查。4. 驗(yàn)證小組人員及職責(zé):人員組成姓名咅職務(wù)/職稱職責(zé)組長質(zhì)量部副部長負(fù)責(zé)驗(yàn)證期間各部門的協(xié)調(diào)及整個驗(yàn)證過程的具體實(shí)施。成員化驗(yàn)室主任負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草及具體實(shí)施，確保驗(yàn)證過程能按方案規(guī)疋的程序進(jìn)行，負(fù)責(zé)各種驗(yàn)證資料（檢查結(jié)果）的整理，負(fù)責(zé)驗(yàn)證報告的編寫?；?yàn)室化驗(yàn)員化驗(yàn)室化驗(yàn)員負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核及批準(zhǔn)；負(fù)責(zé)出具檢驗(yàn)報告；審查驗(yàn)證報告及發(fā)放驗(yàn)證報告；負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的管理化驗(yàn)室化驗(yàn)員負(fù)責(zé)驗(yàn)證報告的編寫規(guī)范；審查驗(yàn)證報告及發(fā)放驗(yàn)證報告。5.合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比值應(yīng)在0.5? 2

4、范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致6.試驗(yàn)材料:6.1. 被驗(yàn)證產(chǎn)品：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基6.2. 儀器設(shè)備：621. YXQ-LS-100G 型立式壓力蒸汽滅菌器6.2.2. GHT-00雙人凈化工作臺6.2.3. BSC-110011A2-X 生物安全柜6.2.4. MJ-250I 型霉菌培養(yǎng)箱 （20? 25C）6.2.5. LRH-250 生化培養(yǎng)箱（30? 35C）6.2.6. 電熱恒溫干燥箱6.2.7微波爐6.3.驗(yàn)證用培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家批號6.4.驗(yàn)證用菌株： （第代）驗(yàn)證菌株鋰傘甘培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間（小時）7.菌液制備按6.4規(guī)定程序培養(yǎng)各

5、試驗(yàn)菌株。取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌、白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物，用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液制成約為50100cfu / ml的菌懸液；取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入3? 5ml含0.05% （ ml/ml ）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，將抱子洗脫。然后，采用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含 0.05%（ ml/ml ）聚山梨酯 80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液制成約為 50100cfu/ml 的黑曲霉抱子懸液。8.適用性檢查:50? 100cfu/ml ）各 1ml,8.1. 取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的菌液(每株試驗(yàn)

6、菌平行制備 2 個平皿，分別注入 2 個無菌平皿中，立即傾注胰酪大豆胨瓊脂 培養(yǎng)基，并作陰性對 照，混勻，凝固，置 30? 35C 培養(yǎng) 24 小時，計數(shù)；取白色念珠菌 的菌液( 50? 100cfu/ml )各 1ml ，分 別注入 2 個無菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊 脂培養(yǎng)基， 并作陰性對照，混勻，凝固，置20? 25C 培養(yǎng)72 小時，計數(shù)；取黑曲霉菌 的菌液( 50? 100cfu/ml ) 1ml ，注入無菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂 培養(yǎng)基， 每株試驗(yàn)菌平行制備 2 個平皿，并作陰性對照，混勻，凝固，置 20? 25C 培養(yǎng) 168 小 時，計數(shù)。8.2. 取金黃色葡萄球菌

7、、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的菌液(50? 100cfu/ml )各 1ml ， 分別注入無菌平皿中，立即傾注胰酪大豆胨瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備 2 個平皿，并作陰性對照，混勻，凝固，置30? 35E培養(yǎng)24小時，計數(shù)；取白色念珠菌的菌液(50? 100cfu/ml )各1ml，分別注入無菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂對 照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備 2 個平皿，并作陰性對照，混勻，凝固， 置20? 25E培養(yǎng)72小時，計數(shù)；取黑曲霉菌的菌液(50? 100cfu/ml )各1ml，分別注入無菌平皿 中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2 個平皿，并作陰性 對照

8、，混勻，凝固，置 20? 25E 培養(yǎng) 168 小時，計數(shù)。9. 驗(yàn)證記錄10. 驗(yàn)證結(jié)論及綜合評價日期：評價人：附表1:計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證記錄驗(yàn)證菌株平皿號驗(yàn)證培養(yǎng)基組陰性對照對照培養(yǎng)基組陰性對照菌落平均數(shù)的比值(cfu / ml)(cfu / ml)(cfu / ml)(cfu / ml)（應(yīng)在0.5? 2范圍內(nèi)）大腸埃布困12（培養(yǎng)3天計數(shù)）平均值金黃色葡萄球菌12（培養(yǎng)3天計數(shù)）平均值1枯草芽抱桿菌2（培養(yǎng)3天計數(shù)）平均值1白色念珠菌2（培養(yǎng)5天開始計數(shù)）平均值黑曲霉菌1試驗(yàn)時間一年一月一日完成時間年_月_日（培養(yǎng)5天開始計數(shù)）2平均值結(jié)論復(fù)核人 試驗(yàn)人復(fù)核人試驗(yàn)人驗(yàn)證報告的審批

9、驗(yàn)證報告1. 驗(yàn)證目的：需氧菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗(yàn)證的目的是確認(rèn)胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基是否適合需氧菌、霉菌及起草部門簽名日期化驗(yàn)室質(zhì)量部酵母菌總數(shù)測定。2. 參照標(biāo)準(zhǔn)：中國藥典2015年版四部1105非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查法批準(zhǔn)部門簽名日期質(zhì)量部驗(yàn)證總負(fù)責(zé)人3. 驗(yàn)證項目：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查。4. 驗(yàn)證小組人員及職責(zé)：人員組成姓名咅職務(wù)/職稱職責(zé)組長質(zhì)量部副部長負(fù)責(zé)驗(yàn)證期間各部門的協(xié)調(diào)及整個驗(yàn)證過程的具體實(shí)施。成員化驗(yàn)室主任負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草及具體實(shí)施，確保驗(yàn)證過程能按方案規(guī)定的程序進(jìn)化驗(yàn)室化驗(yàn)員

10、行，負(fù)責(zé)各種驗(yàn)證資料（檢查結(jié)果）的整理，負(fù)責(zé)驗(yàn)證報告的編寫。化驗(yàn)室化驗(yàn)員負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核及批準(zhǔn)；負(fù)責(zé)出具檢驗(yàn)報告；審查驗(yàn)證報告及發(fā)放驗(yàn)證報告；負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的管理化驗(yàn)室化驗(yàn)員負(fù)責(zé)驗(yàn)證報告的編寫規(guī)范；審查驗(yàn)證報告及發(fā)放驗(yàn)證報告。5.合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比值應(yīng)在0.5? 2范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致6.試驗(yàn)材料:6.1. 被驗(yàn)證產(chǎn)品：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基6.2. 儀器設(shè)備：6.2.1. YXQ-LS-100G 型立式壓力蒸汽滅菌器6.2.2. GHT-00雙人凈化工作臺6.2.3. BSC-110011A2-X

11、 生物安全柜6.2.4. MJ-250I 型霉菌培養(yǎng)箱（20? 25C）6.2.5. LRH-250 生化培養(yǎng)箱 （30? 35C）6.2.6. 電熱恒溫干燥箱6.2.7微波爐6.3.驗(yàn)證用培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家批號6.4.驗(yàn)證用菌株：（第代）驗(yàn)證菌株鋰傘甘培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間(小時)7. 菌液制備按6.4規(guī)定程序培養(yǎng)各試驗(yàn)菌株。取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌、白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物，用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液制成約為50100cfu / ml的菌懸液；取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入3? 5ml含0.05%( ml/ml )聚山 梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，將

12、抱子洗脫。然后，采用適宜的方法吸出抱子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05% ( ml/ml )聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋 白胨緩沖液制成約為 50100cfu / ml的黑曲霉抱子懸液。8. 適用性檢查：8.1. 取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的菌液(50? 100cfu/ml )各1ml，每株試驗(yàn)菌平行制備2個平皿，分別注入 2個無菌平皿中，立即傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，并作陰性對照，混勻，凝固，置30? 35C培養(yǎng)24小時，計數(shù)；取白色念珠菌的菌液(50? 100cfu/ml )各1ml，分別注入2個無菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，并作陰性對照，混勻，凝固，

13、置20? 25C培養(yǎng)72小時，計數(shù)；取黑曲霉菌 的菌液(50? 100cfu/ml ) 1ml，注入無菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備 2個平皿，并作陰性對照，混勻，凝固，置20? 25C培養(yǎng)168小時，計數(shù)。8.2.取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的菌液(50? 100cfu/ml )各1ml，分別注入無菌平皿中，立即傾注胰酪大豆胨瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個平皿，并作陰性對照，混勻，凝固，置30? 35E培養(yǎng)24小時，計數(shù)；取白色念珠菌的菌液(50?100cfu/ml )各1ml，分別注入無菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)

14、菌平行制備2個平皿，并作陰性對照，混勻，凝固，置20? 25E培養(yǎng)72小時，計數(shù)；取黑曲霉菌的菌液(50? 100cfu/ml )各1ml，分別注入無菌平皿 中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個平皿，并作陰性對照，混勻，凝固，置 20? 25C培養(yǎng)168小時，計數(shù)9. 驗(yàn)證記錄10.驗(yàn)證結(jié)論及綜合評價附表1:計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證記錄驗(yàn)證菌株平皿號驗(yàn)證培養(yǎng)基組陰性對照對照培養(yǎng)基組陰性對照菌落平均數(shù)的比值(cfu / ml)(cfu / ml)(cfu / ml)(cfu / ml)（應(yīng)在0.5? 2范圍內(nèi)）大腸埃布困12（培養(yǎng)3天計數(shù)）平均值金黃色葡萄球菌12（培養(yǎng)3天計數(shù)）平均值1枯草芽抱桿菌2（培養(yǎng)3天計數(shù)）平均值1白色念珠菌2（培養(yǎng)5天開始計數(shù)）平均值黑曲霉菌1試驗(yàn)時間 年 月 日完成時間年_月_日（培養(yǎng)5天開始計數(shù)）2平均值結(jié)論復(fù)核人 試驗(yàn)人復(fù)核人試驗(yàn)人制藥有限公司驗(yàn)證證書驗(yàn)證文件名稱計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查的驗(yàn)證驗(yàn)證文件編號TS-YZ