公開課動物細胞培養(yǎng)

1、編輯ppt1編輯ppt2動物細胞工程常用的技術(shù)手段：動物細胞工程常用的技術(shù)手段：動物細胞培養(yǎng)、動物細胞培養(yǎng)、 動物細胞核移植、動物細胞核移植、動物細胞融合、動物細胞融合、 單克隆抗體單克隆抗體思考：思考：植物細胞工程常用的技術(shù)手段有哪些？植物細胞工程常用的技術(shù)手段有哪些？植物組織培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)、 植物體細胞雜交植物體細胞雜交強調(diào)：強調(diào)：動物細胞培養(yǎng)技術(shù)動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細是其他動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。編輯ppt3 燒傷病人的治療通常燒傷病人的治療通常是取燒傷病人的健康皮膚是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植，但對于大進行自體移植，但對于大面積燒傷病人來講，健康面積燒

2、傷病人來講，健康皮膚很有限，請同學(xué)們想皮膚很有限，請同學(xué)們想一想如何來治療該病人？一想如何來治療該病人？ 取該患者的皮膚進行細胞培養(yǎng)取該患者的皮膚進行細胞培養(yǎng), ,獲得獲得足量的細胞后再移植足量的細胞后再移植編輯ppt4學(xué)習(xí)目標(biāo)：學(xué)習(xí)目標(biāo)：【知識能力知識能力】 1 1、動物細胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用、動物細胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用 2 2、應(yīng)用細胞的基礎(chǔ)知識，分析細胞工程的理論基礎(chǔ)、應(yīng)用細胞的基礎(chǔ)知識，分析細胞工程的理論基礎(chǔ)【情感態(tài)度與價值觀情感態(tài)度與價值觀】 1 1、討論細胞工程技術(shù)的社會意義、討論細胞工程技術(shù)的社會意義 2 2、認同細胞學(xué)基礎(chǔ)理論研究與技術(shù)開發(fā)之間的關(guān)系、認同細胞學(xué)基礎(chǔ)理論

3、研究與技術(shù)開發(fā)之間的關(guān)系一、動物細胞培養(yǎng)一、動物細胞培養(yǎng)編輯ppt5 概念：概念：從動物機體中取出相關(guān)組織，將它分從動物機體中取出相關(guān)組織，將它分散成單個細胞，然后在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些散成單個細胞，然后在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和繁殖。細胞生長和繁殖。 一、動物細胞培養(yǎng)一、動物細胞培養(yǎng)原理：原理：是細胞增殖是細胞增殖 （有絲分裂）（有絲分裂） 編輯ppt6一、動物細胞培養(yǎng)一、動物細胞培養(yǎng)閱讀閱讀P53-55“哺乳動物細胞培養(yǎng)技術(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)技術(shù)”并思考：并思考： 1、 動物細胞生長特點是什么？動物細胞生長特點是什么？ 2、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織、為什么選用動物胚

4、胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？做動物細胞培養(yǎng)材料？ 3、為什么要對取出的動物組織進行處理，使細胞、為什么要對取出的動物組織進行處理，使細胞分散？分散？ 4、用胰蛋白酶對動物組織進行處理是因為細胞間、用胰蛋白酶對動物組織進行處理是因為細胞間的物質(zhì)主要是什么？胰蛋白酶真的不會把細胞消化的物質(zhì)主要是什么？胰蛋白酶真的不會把細胞消化掉嗎？為什么？掉嗎？為什么？ 5、動物細胞培養(yǎng)的條件有哪些？、動物細胞培養(yǎng)的條件有哪些？ 6、簡述動物細胞培養(yǎng)的操作過程、簡述動物細胞培養(yǎng)的操作過程編輯ppt71、動物細胞生長、動物細胞生長特點特點：細胞貼壁：細胞貼壁： 懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，懸

5、液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。稱為細胞貼壁。要求：要求： 培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。易于貼附。 編輯ppt8接觸抑制：接觸抑制：細胞在貼壁生長過程中，隨著細胞分細胞在貼壁生長過程中，隨著細胞分裂，數(shù)量不斷增加，最后形成一個單層，此時細裂，數(shù)量不斷增加，最后形成一個單層，此時細胞間相互接觸，細胞分裂和生長停止，數(shù)量不再胞間相互接觸，細胞分裂和生長停止，數(shù)量不再增加。增加。50代以后代以后失去接觸抑制失去接觸抑制接觸抑制接觸抑制動物細胞生長特點動物細胞生長特點部分細胞突變，獲得部分細胞突變，獲得不死性，向癌細胞方不死性，向癌細胞

6、方向發(fā)展，糖蛋白減少，向發(fā)展，糖蛋白減少，失去接觸抑制（如腫失去接觸抑制（如腫瘤細胞）。瘤細胞）。接觸抑制接觸抑制編輯ppt9編輯ppt102、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？組織做動物細胞培養(yǎng)材料？動物胚胎或幼齡動物的組織、器官，它們動物胚胎或幼齡動物的組織、器官，它們的細胞分化程度低，增殖能力強，分裂旺的細胞分化程度低，增殖能力強，分裂旺盛，容易培養(yǎng)。盛，容易培養(yǎng)。一、動物細胞培養(yǎng)一、動物細胞培養(yǎng)編輯ppt11編輯ppt123、為什么要對取出的動物組織進行處理，、為什么要對取出的動物組織進行處理，使細胞分散？使細胞分散？ 分

7、散的單個細胞容易攝取所需的營養(yǎng)，排出代分散的單個細胞容易攝取所需的營養(yǎng)，排出代謝廢物。謝廢物。一、動物細胞培養(yǎng)一、動物細胞培養(yǎng)編輯ppt134、用胰蛋白酶對動物組織進行處理是因為細、用胰蛋白酶對動物組織進行處理是因為細胞間的物質(zhì)主要是什么？胞間的物質(zhì)主要是什么？胰蛋白酶真的不會把胰蛋白酶真的不會把細胞消化掉嗎？為什么？細胞消化掉嗎？為什么？ 細胞間的物質(zhì)主要是細胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)（膠原纖維）。蛋白質(zhì)（膠原纖維）。一、動物細胞培養(yǎng)一、動物細胞培養(yǎng)胰蛋白酶除了可以消化細胞間的蛋白外，胰蛋白酶除了可以消化細胞間的蛋白外，長時間的作用也會消化細胞膜蛋白，對長時間的作用也會消化細胞膜蛋白，對細胞有損

8、傷作用，因此細胞有損傷作用，因此必須控制好胰蛋必須控制好胰蛋白酶的消化時間。白酶的消化時間。 編輯ppt14編輯ppt155、動物細胞培養(yǎng)條件、動物細胞培養(yǎng)條件1 1、無菌、無毒的環(huán)境、無菌、無毒的環(huán)境 （添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）2 2、營養(yǎng)、營養(yǎng)（葡萄糖葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清動物血清等。）等。）3 3、溫度和、溫度和PHPH 36.5+ 36.5+（- -）0.50.5度度, 7.2-7.4, 7.2-7.44 4、氣體環(huán)境：、氣體環(huán)境： O O2 2和和COCO2 2（95%95%空氣和空氣和5%

9、CO5% CO2 2 ）保證細胞順利的生長增殖一、動物細胞培養(yǎng)一、動物細胞培養(yǎng)編輯ppt16一、動物細胞培養(yǎng)一、動物細胞培養(yǎng)6、過程：、過程：動物胚胎或幼齡動動物胚胎或幼齡動物的組織、器官物的組織、器官細胞懸浮液細胞懸浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代細胞代細胞原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)50代細胞代細胞傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞株細胞株無限傳代無限傳代細胞系細胞系單個細胞單個細胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)未改變未改變遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)已改變已改變（分解彈性纖維）（分解彈性纖維）從機體取出后立即培從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞為原代細胞。養(yǎng)的細胞為原代細胞。一般培養(yǎng)的一般培養(yǎng)的第第1 1代細代細胞與傳胞與傳1010代以

10、內(nèi)的細代以內(nèi)的細胞稱為原代細胞培養(yǎng)。胞稱為原代細胞培養(yǎng)。將原代細胞從培養(yǎng)瓶將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細胞中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，中繼續(xù)培養(yǎng)，一般一般培培養(yǎng)的第養(yǎng)的第1111代細胞與傳代細胞與傳4040代或代或5050代代稱為傳代稱為傳代培養(yǎng)。培養(yǎng)。編輯ppt17植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較比較項目比較項目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理原理細胞的全能性細胞的全能性細胞增殖細胞增殖培養(yǎng)基狀態(tài)培養(yǎng)基狀態(tài) 固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有培養(yǎng)基

11、特有成分成分蔗糖蔗糖 植物激素植物激素 葡萄糖葡萄糖 動物血清動物血清培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果植物體植物體細胞株、細胞系細胞株、細胞系培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的快速繁殖、培育快速繁殖、培育無病毒植株無病毒植株獲得細胞或細胞分獲得細胞或細胞分泌蛋白泌蛋白細胞的全能性細胞的全能性細胞增殖細胞增殖固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基蔗糖蔗糖 植物激素植物激素葡萄糖葡萄糖 動物血清動物血清植物體植物體細胞株、細胞系細胞株、細胞系快速繁殖、快速繁殖、培育無病毒植株培育無病毒植株獲得細胞獲得細胞或細胞分泌蛋白或細胞分泌蛋白編輯ppt18編輯ppt19 1.用動、植物成體的體細胞進行離體培養(yǎng)，下用動、植物成體的體細胞進行

12、離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是列敘述正確的是 A都需用培養(yǎng)箱都需用培養(yǎng)箱 B都須用液體培養(yǎng)基都須用液體培養(yǎng)基 C都要在無菌條件下進行都要在無菌條件下進行 D都可體現(xiàn)細胞的全能性都可體現(xiàn)細胞的全能性C鞏固練習(xí)鞏固練習(xí)：編輯ppt20 2、下列屬于動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要、下列屬于動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)別的是區(qū)別的是 A.培養(yǎng)基成分不同培養(yǎng)基成分不同 B.動物細胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行動物細胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行 C.動物細胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細胞不能動物細胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細胞不能 D.動物細胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細胞只能培動物細胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細胞只能培養(yǎng)成植

13、株養(yǎng)成植株A 3、動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是、動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是A.動物細胞融合動物細胞融合 B.單克隆抗體單克隆抗體 C.胚胎移植胚胎移植 D.動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)D編輯ppt21 4、細胞株的特點是、細胞株的特點是A遺傳物質(zhì)沒有改變，可以無限傳代遺傳物質(zhì)沒有改變，可以無限傳代B遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，不可無限傳代遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，不可無限傳代C遺傳物質(zhì)沒有改變，不可無限傳代遺傳物質(zhì)沒有改變，不可無限傳代D遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，且有癌變特點，可以遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，且有癌變特點，可以無限傳代無限傳代 5、在動物細胞培養(yǎng)中有部分細胞可能在培養(yǎng)、在動物細胞培養(yǎng)中有部分細胞可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代

14、下去，這種傳代細胞稱之為條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱之為: A原代培養(yǎng)原代培養(yǎng) B傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng) C細胞株細胞株 D細胞系細胞系CD編輯ppt226 6、用于動物細胞培養(yǎng)的組織和細胞大都取自胚、用于動物細胞培養(yǎng)的組織和細胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細胞原因是這樣的組織細胞 A.A.容易產(chǎn)生各種變異容易產(chǎn)生各種變異 B B.具有更強的全能性具有更強的全能性 C.C.取材十分方便取材十分方便 D D.分裂增殖的能力強分裂增殖的能力強D編輯ppt23回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題：回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題： 在動物細胞培養(yǎng)的過程中，當(dāng)貼壁細胞分裂在動物細胞培養(yǎng)的過程中，當(dāng)貼壁細胞分裂生長到細胞表面生長到細胞表面 時，細胞會停止分裂時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的 。此時，瓶。此時，瓶壁上形成的細胞層數(shù)是壁上形成的細胞層數(shù)是 ，要使貼壁的細胞從，要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是是 。 隨著細胞傳代次數(shù)