《理學(xué)生科實(shí)驗(yàn)》ppt課件

1、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)微生物與免疫學(xué)教研室微生物與免疫學(xué)教研室實(shí)驗(yàn)室規(guī)那么及實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書(shū)寫實(shí)驗(yàn)室規(guī)那么及實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書(shū)寫 一、實(shí)驗(yàn)室規(guī)那么及本卷須知一、實(shí)驗(yàn)室規(guī)那么及本卷須知進(jìn)實(shí)驗(yàn)室必需穿好任務(wù)服，離室時(shí)脫進(jìn)實(shí)驗(yàn)室必需穿好任務(wù)服，離室時(shí)脫下反折。非必需物品不要帶入實(shí)驗(yàn)下反折。非必需物品不要帶入實(shí)驗(yàn)室。室。用過(guò)的有菌器材要投入消毒缸，不得用過(guò)的有菌器材要投入消毒缸，不得放在桌上，亦不可沖洗于水槽內(nèi)。放在桌上，亦不可沖洗于水槽內(nèi)。用過(guò)的玻片也應(yīng)放于含消毒液的器用過(guò)的玻片也應(yīng)放于含消毒液的器皿內(nèi)。皿內(nèi)。維護(hù)公物，節(jié)約運(yùn)用實(shí)驗(yàn)資料。實(shí)驗(yàn)維護(hù)公物，節(jié)約運(yùn)用實(shí)驗(yàn)資料。實(shí)驗(yàn)終了后，整理桌面，需培育的物品終了后，整理桌面

2、，需培育的物品要放入培育箱。做好實(shí)驗(yàn)室清潔，要放入培育箱。做好實(shí)驗(yàn)室清潔，關(guān)好水電等，洗手后離室。關(guān)好水電等，洗手后離室。l實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如發(fā)生不測(cè)，應(yīng)進(jìn)展緊急處置。l皮膚破傷：先除盡異物，用蒸餾水或生理鹽水沖洗后，涂以2%碘酒。小傷口用創(chuàng)口貼，大的戴手套到教師處拿。另建議同窗們不要戴戒指，自我維護(hù)。l灼傷：涂以凡士林油、5%鞣酸。l菌液進(jìn)入口腔：應(yīng)立刻吐出，以大量清水漱口，必要時(shí)，根據(jù)菌類不同服用相關(guān)藥物進(jìn)展預(yù)防。l菌液流灑桌面：立刻報(bào)告，以抹布浸沾2%-3%來(lái)蘇兒后，蓋在污染部位半小時(shí)方可抹去。假設(shè)手上沾有活菌，亦應(yīng)浸泡于上述消毒液3分鐘后，再以肥皂水洗。二、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書(shū)寫二、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書(shū)寫l

3、目的和要求目的和要求l實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理l資料和試劑資料和試劑l步驟和方法步驟和方法l結(jié)果和討論結(jié)果和討論l思索題思索題實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 培育基的配制及消毒滅菌培育基的配制及消毒滅菌 一、目的要求一、目的要求1. 1. 掌握配制培育基的普通方法和步驟掌握配制培育基的普通方法和步驟2. 2. 了解常用的培育基及其作用了解常用的培育基及其作用3. 3. 掌握消毒，滅菌，防腐，無(wú)菌的概念掌握消毒，滅菌，防腐，無(wú)菌的概念4. 4. 掌握高壓滅菌的原理以及運(yùn)用方法掌握高壓滅菌的原理以及運(yùn)用方法5. 5. 熟習(xí)其他消毒、滅菌的方法以及原理熟習(xí)其他消毒、滅菌的方法以及原理二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及原理二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及原理第一部

4、分第一部分 根底培育基的制備根底培育基的制備一、培育基：一、培育基： 是人工配制的適宜微生物生長(zhǎng)繁衍或是人工配制的適宜微生物生長(zhǎng)繁衍或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。普通應(yīng)含有水分、積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。普通應(yīng)含有水分、碳源、氮源、能源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)要素等。碳源、氮源、能源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)要素等。所以配制培育基時(shí)，都要根據(jù)不同微生物的所以配制培育基時(shí)，都要根據(jù)不同微生物的要求將培育基的要求將培育基的pH pH 調(diào)到適宜的范圍。調(diào)到適宜的范圍。培育基營(yíng)養(yǎng)六要素v碳源：提供微生物繁衍所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。碳源：提供微生物繁衍所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。用途：糖、蛋白質(zhì)、核酸合成。用途：糖、蛋白質(zhì)、核酸合成。v氮

5、源：提供微生物繁衍所需氮元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。氮源：提供微生物繁衍所需氮元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。用途：蛋白質(zhì)、核酸合成。用途：蛋白質(zhì)、核酸合成。v能源：提供微生物生命活動(dòng)最初能量來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)能源：提供微生物生命活動(dòng)最初能量來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物或輻射能。物或輻射能。v生長(zhǎng)素：微生物生長(zhǎng)必需，但又不能自行合成的生長(zhǎng)素：微生物生長(zhǎng)必需，但又不能自行合成的有機(jī)物。有機(jī)物。v無(wú)機(jī)鹽：提供微生物繁衍所需各種重要元素。無(wú)機(jī)鹽：提供微生物繁衍所需各種重要元素。v水分：水是保證生命活動(dòng)重要的介質(zhì)。水分：水是保證生命活動(dòng)重要的介質(zhì)。培育基的分類 根據(jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡牟煌?，根?jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡牟煌?，培育基分類可以按以下方?/p>

6、：培育基分類可以按以下方式：1、按成分的不同分、按成分的不同分2、按培育基的物理形狀分、按培育基的物理形狀分3、按培育基的用途分、按培育基的用途分1、按照培育基的成分來(lái)分v天然培育基天然培育基v合成培育基合成培育基v半合成培育基半合成培育基天然培育基天然培育基v主要成分是復(fù)雜的天然有機(jī)物質(zhì)，是實(shí)驗(yàn)室和發(fā)主要成分是復(fù)雜的天然有機(jī)物質(zhì)，是實(shí)驗(yàn)室和發(fā)酵工廠常用的培育基。酵工廠常用的培育基。v主要原料有：牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、主要原料有：牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。等。v營(yíng)養(yǎng)全面豐富，運(yùn)用微生物的生長(zhǎng)

7、，來(lái)源廣泛，營(yíng)養(yǎng)全面豐富，運(yùn)用微生物的生長(zhǎng)，來(lái)源廣泛，價(jià)錢低廉價(jià)錢低廉,詳細(xì)成分不清楚或不恒定。詳細(xì)成分不清楚或不恒定。合成培育基合成培育基v用化學(xué)成分完全了解的純化合物藥品配制而成的用化學(xué)成分完全了解的純化合物藥品配制而成的培育基，因此也稱化學(xué)成清楚確的培育基。普通培育基，因此也稱化學(xué)成清楚確的培育基。普通用于研討微生物的形狀，營(yíng)養(yǎng)代謝，分類鑒定，用于研討微生物的形狀，營(yíng)養(yǎng)代謝，分類鑒定，育種選育，遺傳分析。育種選育，遺傳分析。半合成培育基v在以天然有機(jī)物作為微生物營(yíng)養(yǎng)來(lái)源的同時(shí)，適在以天然有機(jī)物作為微生物營(yíng)養(yǎng)來(lái)源的同時(shí)，適當(dāng)補(bǔ)充一些成分知的化學(xué)藥品所配制的培育基叫當(dāng)補(bǔ)充一些成分知的化學(xué)藥品

8、所配制的培育基叫半合成培育基。大多數(shù)微生物都能在此種培育基半合成培育基。大多數(shù)微生物都能在此種培育基上生長(zhǎng)，運(yùn)用廣泛。上生長(zhǎng)，運(yùn)用廣泛。2、按照培育基的物理形狀v固體培育基固體培育基v半固體培育基半固體培育基v液體培育基液體培育基固體培育基固體培育基v在液體培育基中參與凝固劑即為固體培育基。普在液體培育基中參與凝固劑即為固體培育基。普通參與通參與1.5%2.0%即可普通為即可普通為1.8%。v主要用于微生物的分別，鑒定，活菌計(jì)數(shù)，菌種主要用于微生物的分別，鑒定，活菌計(jì)數(shù)，菌種保藏等。保藏等。v固體培育基倒入平皿或者試管中，制成平板或者固體培育基倒入平皿或者試管中，制成平板或者斜面。斜面。半固體

9、培育基半固體培育基v在液體培育基中參與少量凝固劑即為半固體培育在液體培育基中參與少量凝固劑即為半固體培育基。例如用瓊脂做凝固劑時(shí)只需求參與基。例如用瓊脂做凝固劑時(shí)只需求參與0.2%0.7%普通參與普通參與0.5%v此種培育基常用來(lái)察看細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)特征、菌種保此種培育基常用來(lái)察看細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)特征、菌種保管和噬菌體的分別純化及制備等。管和噬菌體的分別純化及制備等。液體培育基液體培育基v不含任何凝固劑，配好后成液體形狀的培育基。不含任何凝固劑，配好后成液體形狀的培育基。v廣泛用于微生物的培育，生理生化代謝和遺傳學(xué)廣泛用于微生物的培育，生理生化代謝和遺傳學(xué)的研討以及工業(yè)發(fā)酵等。的研討以及工業(yè)發(fā)酵等。一、理

10、想的凝固劑一、理想的凝固劑不被培育的微生物分解利用不被培育的微生物分解利用在微生物生長(zhǎng)的溫度范圍堅(jiān)持固體形狀在微生物生長(zhǎng)的溫度范圍堅(jiān)持固體形狀凝固點(diǎn)溫度不能太低凝固點(diǎn)溫度不能太低對(duì)所培育的微生物無(wú)毒害作用對(duì)所培育的微生物無(wú)毒害作用凝固劑在滅菌過(guò)程中不易被破壞凝固劑在滅菌過(guò)程中不易被破壞透明度好，粘著力強(qiáng)透明度好，粘著力強(qiáng)配制方便且價(jià)錢低廉配制方便且價(jià)錢低廉凝固劑凝固劑二、常用的凝固劑1、常用： 瓊脂、瓊脂糖、明膠、硅膠等2.實(shí)驗(yàn)室中最常用： 瓊脂：凝固點(diǎn)40，熔點(diǎn)：96 3、按照培育基的用途分v根底培育基根底培育基v營(yíng)養(yǎng)培育基加富培育基營(yíng)養(yǎng)培育基加富培育基v鑒別培育基鑒別培育基v選擇培育基選擇

11、培育基根底培育基根底培育基l含有普通細(xì)菌生長(zhǎng)繁衍需求的根本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。含有普通細(xì)菌生長(zhǎng)繁衍需求的根本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。最常用的根底培育基是天然培育基中的牛肉膏蛋最常用的根底培育基是天然培育基中的牛肉膏蛋白胨培育基。白胨培育基。l這種培育基可作為一些特殊培育基的根底成分。這種培育基可作為一些特殊培育基的根底成分。營(yíng)養(yǎng)培育基加富培育基l在根底培育基中參與某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如血在根底培育基中參與某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如血液、血清、動(dòng)物或植物組織液，酵母浸膏或液、血清、動(dòng)物或植物組織液，酵母浸膏或生長(zhǎng)因子。生長(zhǎng)因子。l用以培育對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求苛刻的微生物。用以培育對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求苛刻的微生物。鑒別培育基l是一類含有特定化合

12、物或試劑的培育基。某種微是一類含有特定化合物或試劑的培育基。某種微生物在這種培育基上培育后，它所產(chǎn)生的某種代生物在這種培育基上培育后，它所產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與這種特定的化合物或試劑能發(fā)生某種明謝產(chǎn)物與這種特定的化合物或試劑能發(fā)生某種明顯的特征性反響，根據(jù)這一特征性反響可以將某顯的特征性反響，根據(jù)這一特征性反響可以將某種微生物與他種微生物區(qū)別開(kāi)來(lái)。種微生物與他種微生物區(qū)別開(kāi)來(lái)。l主要用于不同類型微生物的生理生化鑒定。主要用于不同類型微生物的生理生化鑒定。選擇培育基l利用微生物對(duì)某種化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培利用微生物對(duì)某種化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培育基中參與這類物質(zhì)，抑制不需求的微生物生長(zhǎng)，育基

13、中參與這類物質(zhì)，抑制不需求的微生物生長(zhǎng)，而利用所需分別的微生物生長(zhǎng)，從而到達(dá)分別或而利用所需分別的微生物生長(zhǎng)，從而到達(dá)分別或鑒別某種微生物的目的。鑒別某種微生物的目的。本次實(shí)驗(yàn)內(nèi)容本次實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1 1、配制牛肉膏蛋白胨培育基、配制牛肉膏蛋白胨培育基2 2、配制固體、半固體、液體培育基、配制固體、半固體、液體培育基3 3、消毒滅菌、消毒滅菌4 4、平皿、移液管、錐形瓶等的包扎、平皿、移液管、錐形瓶等的包扎三、實(shí)驗(yàn)器材三、實(shí)驗(yàn)器材 量筒、小試管、中試管、試管帽、量筒、小試管、中試管、試管帽、移液管、移液管、500mL500mL錐形瓶、玻璃棒、試錐形瓶、玻璃棒、試管架、電爐、搪瓷杯、滴管、管架、電爐、

14、搪瓷杯、滴管、NaOHNaOH溶液、溶液、HClHCl溶液、瓊脂、電子稱溶液、瓊脂、電子稱牛肉膏蛋白胨培育基的制備牛肉膏蛋白胨培育基的制備v牛肉膏蛋白胨培育基是一種運(yùn)用最廣泛和最普牛肉膏蛋白胨培育基是一種運(yùn)用最廣泛和最普通的細(xì)菌根底培育基；通的細(xì)菌根底培育基；v牛肉膏為微生物提供碳源、能源、磷酸鹽和維牛肉膏為微生物提供碳源、能源、磷酸鹽和維生素；生素；v蛋白胨主要提供氮源和維生素；蛋白胨主要提供氮源和維生素；vNaClNaCl提供無(wú)機(jī)鹽；提供無(wú)機(jī)鹽；v在配制固體培育基時(shí)還要參與一定量瓊脂作凝在配制固體培育基時(shí)還要參與一定量瓊脂作凝固劑；固劑；v用稀酸或稀堿將其用稀酸或稀堿將其pHpH調(diào)至中性或

15、微堿性。調(diào)至中性或微堿性。牛肉膏蛋白胨培育基配方牛肉膏蛋白胨培育基配方v牛肉膏：牛肉膏： 3.0gv蛋白胨：蛋白胨： 10.0gvNaCl ： 5.0gv蒸餾水蒸餾水 ： 1000mLvpH ： 7.47.6v瓊脂瓊脂 ： 1520g1.8%四、實(shí)驗(yàn)操作及步驟四、實(shí)驗(yàn)操作及步驟1 1、稱量、稱量2 2、溶化、溶化3 3、調(diào)、調(diào)pHpH4 4、過(guò)濾本次實(shí)驗(yàn)無(wú)需過(guò)、過(guò)濾本次實(shí)驗(yàn)無(wú)需過(guò)濾濾5 5、定容、定容6 6、分裝、分裝7. 7. 加塞加塞8. 8. 包扎包扎9. 9. 滅菌滅菌10. 10. 擱置斜面擱置斜面11. 11. 無(wú)菌檢查無(wú)菌檢查稱量稱量蛋白胨很易吸濕，在稱取時(shí)動(dòng)作要迅速。另外，稱藥

16、品時(shí)蛋白胨很易吸濕，在稱取時(shí)動(dòng)作要迅速。另外，稱藥品時(shí)嚴(yán)防藥品混雜，稱取一種藥品后，洗凈，擦干，再稱取另嚴(yán)防藥品混雜，稱取一種藥品后，洗凈，擦干，再稱取另一藥品。稱完后，馬上蓋好蓋子，瓶蓋不要蓋錯(cuò)。一藥品。稱完后，馬上蓋好蓋子，瓶蓋不要蓋錯(cuò)。溶化溶化l稱好后，加蒸餾水略微加熱，使其溶化。稱好后，加蒸餾水略微加熱，使其溶化。l在分裝半固體及斜面時(shí)，瓊脂溶化過(guò)程中，應(yīng)控在分裝半固體及斜面時(shí)，瓊脂溶化過(guò)程中，應(yīng)控制火力，以免培育基因沸騰而溢出容器。同時(shí)，制火力，以免培育基因沸騰而溢出容器。同時(shí)，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底燒焦，配制培育基時(shí)，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底燒焦，配制培育基時(shí)，不可用銅或鐵鍋加熱

17、溶化，以免離子進(jìn)入培育基不可用銅或鐵鍋加熱溶化，以免離子進(jìn)入培育基中，影響細(xì)菌生長(zhǎng)。中，影響細(xì)菌生長(zhǎng)。l假設(shè)定量時(shí)需補(bǔ)水假設(shè)定量時(shí)需補(bǔ)水調(diào)調(diào)pHpH、過(guò)濾、定容、過(guò)濾、定容l先先pH試紙測(cè)試一下培育液的原始酸堿度試紙測(cè)試一下培育液的原始酸堿度l根據(jù)情況用稀酸或者稀堿調(diào)理至所需的根據(jù)情況用稀酸或者稀堿調(diào)理至所需的pH值值l不要調(diào)過(guò)頭，以免回調(diào)而影響培育基內(nèi)各離子的不要調(diào)過(guò)頭，以免回調(diào)而影響培育基內(nèi)各離子的濃度。濃度。l調(diào)理好后假設(shè)培育液比較渾濁，有雜質(zhì)，先過(guò)濾調(diào)理好后假設(shè)培育液比較渾濁，有雜質(zhì)，先過(guò)濾定容。定容。(本次實(shí)驗(yàn)無(wú)需過(guò)濾本次實(shí)驗(yàn)無(wú)需過(guò)濾)l假設(shè)培育液廓清的，調(diào)理好假設(shè)培育液廓清的，調(diào)理

18、好pH值后定容至所需體值后定容至所需體積。積。1 1配制配制1010倍濃縮肉湯培育液已配好。倍濃縮肉湯培育液已配好。2 24 4人為一大組人為一大組 每大組取每大組取50mL 1050mL 10倍濃縮肉湯培育倍濃縮肉湯培育液液 稀釋成稀釋成480mL480mL，倒入搪瓷缸中，倒入搪瓷缸中 用用NaOHNaOH或或HClHCl溶液調(diào)整溶液調(diào)整pHpH到到7.2-7.6 7.2-7.6 用量筒定容至用量筒定容至500mL500mL。3 3每大組又分為每大組又分為A A組和組和B B組。組。 A A組：組：配半固體培育基：取配半固體培育基：取30mL30mL稀釋后培育液加稀釋后培育液加0.5%0.5

19、%瓊脂，瓊脂，加熱溶解，分裝至小試管中，每支加熱溶解，分裝至小試管中，每支3mL3mL。補(bǔ)水。補(bǔ)水配液體培育基：取配液體培育基：取30mL30mL稀釋后培育液分裝小試管，每稀釋后培育液分裝小試管，每支支3mL3mL。不加瓊脂。不加瓊脂 B B組：組：配斜面培育基：取配斜面培育基：取30mL30mL稀釋后培育液加稀釋后培育液加1.8%1.8%瓊脂，加瓊脂，加熱溶解，分裝中試管中，每支熱溶解，分裝中試管中，每支6mL6mL。補(bǔ)水。補(bǔ)水配液體培育基：取配液體培育基：取30mL30mL稀釋后培育液分裝小試管稀釋后培育液分裝小試管1010支，支，每支每支3mL3mL。不加瓊脂。不加瓊脂 分裝分裝4. 4

20、. 剩余剩余380mL380mL培育液置培育液置500mL500mL錐形瓶中錐形瓶中, ,加加1.8%1.8%瓊脂，瓊脂，配成固體培育基。瓊脂直接加到錐形瓶中配成固體培育基。瓊脂直接加到錐形瓶中5. 5. 分別對(duì)試管和錐形瓶加塞分別對(duì)試管和錐形瓶加塞, ,包扎包扎. .6. 6. 做好標(biāo)志：做好標(biāo)志： 標(biāo)志內(nèi)容：培育基稱號(hào)標(biāo)志內(nèi)容：培育基稱號(hào), ,班級(jí)及姓名班級(jí)及姓名, ,日期日期. .7. 7. 濕熱高壓滅菌：濕熱高壓滅菌：121,20min.121,20min.8. 8. 擺斜面擺斜面. .9. 9. 倒平板倒平板. .擺斜面培育基滅菌v配制培育基的各類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和容器等含有配制培育基的各類

21、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和容器等含有各種微生物各種微生物v微生物生長(zhǎng)繁衍：微生物生長(zhǎng)繁衍：v 耗費(fèi)營(yíng)養(yǎng)耗費(fèi)營(yíng)養(yǎng)v 改動(dòng)培育的酸堿度改動(dòng)培育的酸堿度v 產(chǎn)生毒素或者抑制物產(chǎn)生毒素或者抑制物第二部分第二部分 消毒滅菌消毒滅菌一常用術(shù)語(yǔ)一常用術(shù)語(yǔ)1.1.滅菌：殺滅物體上一切微生物的方法，滅菌：殺滅物體上一切微生物的方法，包括殺滅細(xì)菌芽孢在內(nèi)的全部病原微包括殺滅細(xì)菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。生物和非病原微生物。2.2.消毒：殺死物體上或環(huán)境中病原微生消毒：殺死物體上或環(huán)境中病原微生物、并不一定能殺死細(xì)菌芽孢或非病物、并不一定能殺死細(xì)菌芽孢或非病原微生物的方法。原微生物的方法。 3.3.防腐：防止或抑制皮

22、膚外表細(xì)菌生長(zhǎng)防腐：防止或抑制皮膚外表細(xì)菌生長(zhǎng)繁衍的方法。繁衍的方法。4.4.無(wú)菌：指不存在活菌，多是滅菌的結(jié)無(wú)菌：指不存在活菌，多是滅菌的結(jié)果。果。 滅菌能否徹底以殺死細(xì)菌的芽孢作為規(guī)范滅菌能否徹底以殺死細(xì)菌的芽孢作為規(guī)范消毒與滅菌方法消毒與滅菌方法v加熱滅菌加熱滅菌v干熱滅菌干熱滅菌v濕熱滅菌濕熱滅菌v過(guò)濾除菌過(guò)濾除菌v輻射滅菌輻射滅菌v放射線輻照滅菌放射線輻照滅菌v紫外線滅菌紫外線滅菌v化學(xué)藥品滅菌化學(xué)藥品滅菌巴氏消毒法巴氏消毒法煮沸消毒法煮沸消毒法間歇蒸汽滅菌法間歇蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌干熱滅菌干熱滅菌v干熱滅菌是利用高溫使微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝干熱滅菌是利用高溫使微生物細(xì)

23、胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而到達(dá)滅菌的目的。固變性而到達(dá)滅菌的目的。v細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固性與其本身的含水量有關(guān)，細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固性與其本身的含水量有關(guān)，在菌體受熱時(shí)，當(dāng)環(huán)境和細(xì)胞內(nèi)含水量越大，那在菌體受熱時(shí)，當(dāng)環(huán)境和細(xì)胞內(nèi)含水量越大，那么蛋白蛋凝固就越快，反之含水量越少，凝固緩么蛋白蛋凝固就越快，反之含水量越少，凝固緩慢。慢。v因此，與濕熱滅菌相比，干熱滅菌所需溫度要高因此，與濕熱滅菌相比，干熱滅菌所需溫度要高160170，時(shí)間要長(zhǎng)，時(shí)間要長(zhǎng)12h，但干熱，但干熱滅菌溫度不能超越滅菌溫度不能超越180，否那么，包器皿的紙，否那么，包器皿的紙或棉塞就會(huì)燒焦，甚至引起熄滅。或棉塞就會(huì)燒焦，甚至引起熄滅

24、。 濕熱滅菌濕熱滅菌1. 1. 高壓蒸汽滅菌：最常用、滅菌效高壓蒸汽滅菌：最常用、滅菌效果最好。果最好。1 1高壓蒸汽滅菌的安裝為高壓滅高壓蒸汽滅菌的安裝為高壓滅菌鍋；菌鍋；2 2原理：經(jīng)過(guò)加熱使水沸騰產(chǎn)生原理：經(jīng)過(guò)加熱使水沸騰產(chǎn)生蒸汽，待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷蒸汽，待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，封鎖排氣閥，空氣從排氣閥中驅(qū)盡，封鎖排氣閥，繼續(xù)加熱，此時(shí)由于水蒸汽不能溢繼續(xù)加熱，此時(shí)由于水蒸汽不能溢出，滅菌器內(nèi)的壓力添加，從而使出，滅菌器內(nèi)的壓力添加，從而使沸點(diǎn)增高，得到高于沸點(diǎn)增高，得到高于100100的溫度的溫度導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而到達(dá)滅導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而到達(dá)滅菌的

25、目的。菌的目的。3 3普通培育基用普通培育基用121121，15-15-30min30min可到達(dá)徹底滅菌的目的?？傻竭_(dá)徹底滅菌的目的。 高壓鍋高壓鍋干烤箱干烤箱 在同一溫度下，濕熱的殺菌效能比干熱大。在同一溫度下，濕熱的殺菌效能比干熱大。其緣由有三：其緣由有三：一、是濕熱中細(xì)菌菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固，一、是濕熱中細(xì)菌菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固，因蛋白質(zhì)含水量添加，所需凝固溫度降低。因蛋白質(zhì)含水量添加，所需凝固溫度降低。二、濕熱的穿透力比干熱大。二、濕熱的穿透力比干熱大。三、濕熱的蒸氣有潛熱存在。三、濕熱的蒸氣有潛熱存在。1g水在水在100時(shí)，由時(shí)，由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)可放出氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)

26、可放出2.26kJ(千焦千焦)的熱量。這的熱量。這種潛熱，能迅速提高被滅菌物體的溫度，從而添種潛熱，能迅速提高被滅菌物體的溫度，從而添加滅菌效能。加滅菌效能。2.2.巴氏消毒法：巴氏消毒法： 通常將待消毒的液體、飲料等在通常將待消毒的液體、飲料等在6060下加下加熱熱30 min30 min，既可殺死病原微生物又能堅(jiān)持原，既可殺死病原微生物又能堅(jiān)持原有的營(yíng)養(yǎng)和風(fēng)味。此法是巴斯德首先運(yùn)用故有的營(yíng)養(yǎng)和風(fēng)味。此法是巴斯德首先運(yùn)用故稱巴氏消毒法。稱巴氏消毒法。3.3.煮沸消毒法：煮沸消毒法： 普通微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中煮沸消毒時(shí)間為普通微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中煮沸消毒時(shí)間為10-10-15 min15 min，可以

27、殺死細(xì)菌一切營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分，可以殺死細(xì)菌一切營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽胞。如延伸煮沸時(shí)間，并在水中參與芽胞。如延伸煮沸時(shí)間，并在水中參與1 1碳碳酸氫鈉或酸氫鈉或2 25 5石炭酸，效果更好。石炭酸，效果更好。4.4.間歇蒸汽滅菌法：間歇蒸汽滅菌法：1 1經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的流動(dòng)蒸汽間歇加熱以到達(dá)經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的流動(dòng)蒸汽間歇加熱以到達(dá)滅菌的目的。滅菌的目的。2 2延續(xù)延續(xù) 3 d 3 d，每天，每天100100加熱加熱30 min30 min；第一；第一天加熱后，其中的繁衍體被殺死，取出天加熱后，其中的繁衍體被殺死，取出3737孵育過(guò)夜，使殘存的芽胞發(fā)育成繁衍體，第孵育過(guò)夜，使殘存的芽胞發(fā)育成繁衍體，第二天再二天再100100加熱加熱30min30min，如此延續(xù)三次，使，如此延續(xù)三次，使徹底滅菌。徹底滅菌。微孔濾膜過(guò)濾除菌微孔濾膜過(guò)濾除菌l過(guò)濾除菌是經(jīng)過(guò)機(jī)械作用濾去液體或氣體過(guò)濾除菌是經(jīng)過(guò)機(jī)械作用濾去液體或氣體中細(xì)菌的方法。根據(jù)不同的需求選用不同中細(xì)菌的方法。根據(jù)不同的需求選用不同的濾器和濾板資料。的濾器和濾板資料。l濾膜是用醋酸纖維酯和硝酸纖維酯的混合濾膜是用醋酸纖維酯和硝酸纖維酯的混合物制成的薄膜。有不同的孔徑，實(shí)驗(yàn)室中物制成的薄膜。有不同的孔徑，實(shí)驗(yàn)室中用于除菌的微孔濾膜孔徑普通為用于除菌的微孔濾膜孔徑普通為0.22m。紫外線輻射滅菌：紫外線輻射滅菌：1 1