發(fā)酵工藝學：第二章 生產(chǎn)中常用菌種的分離、選育和保藏

1、第一節(jié)第一節(jié) 菌種的分離篩選菌種的分離篩選第二節(jié)第二節(jié) 培養(yǎng)分離培養(yǎng)分離第三節(jié)第三節(jié) 工業(yè)微生物育種工業(yè)微生物育種第四節(jié)第四節(jié) 菌種的保藏菌種的保藏三、菌種分離與篩選的步驟三、菌種分離與篩選的步驟從自然界篩選從自然界篩選從永凍冰層分離微生物從永凍冰層分離微生物德國科學家德國科學家H. N. Schulz等等1999年在納米比亞海岸的海底沉積物中年在納米比亞海岸的海底沉積物中發(fā)現(xiàn)的一種硫細菌（發(fā)現(xiàn)的一種硫細菌（sulfur bacterium），），其大小可達其大小可達0.75 mm，Thiomargarita namibiensis，-“納米比亞硫磺珍珠納米比亞硫磺珍珠”2.平皿劃線分離法 a

2、. 連續(xù)劃線分離法 b. 分區(qū)劃線分離法金黃色葡萄球菌的生長為本來在平板上不能生長的嗜血流感菌提供生長因子，后者在其菌苔周圍形成衛(wèi)星菌落。本來不能在含青霉素的平板上生長的受體菌在轉化子（含有Ampr質粒）周圍形成衛(wèi)星菌落（b-內酰胺酶分泌到胞外所致）用剛果紅染色法鑒定篩選降解纖維素的菌株用剛果紅染色法鑒定篩選降解纖維素的菌株 抗生素篩選抗生素篩選放線菌菌落形態(tài)小型小型X射線衍射儀射線衍射儀Co60射線機出發(fā)菌株的選擇出發(fā)菌株的選擇處理菌懸液的制備處理菌懸液的制備誘變處理誘變處理中間培養(yǎng)中間培養(yǎng)分離和篩選分離和篩選帶玻璃珠的三角瓶內,加無菌水搖搖床床復復篩篩降解降解纖維纖維素產(chǎn)素產(chǎn)生透生透明圈明

3、圈野生型野生型：自然界分離到的任何微生物，在其自然界分離到的任何微生物，在其發(fā)生營養(yǎng)缺陷突變前的原始菌株，為該微發(fā)生營養(yǎng)缺陷突變前的原始菌株，為該微生物的野生型。生物的野生型。原養(yǎng)型原養(yǎng)型 ：指營養(yǎng)缺陷型突變菌株回復突變或指營養(yǎng)缺陷型突變菌株回復突變或重組后產(chǎn)生的菌株，與野生型的表型相同。重組后產(chǎn)生的菌株，與野生型的表型相同。 步驟（以氨基酸缺陷型的鑒定為例）：步驟（以氨基酸缺陷型的鑒定為例）：a. 將多種營養(yǎng)因子編組；將多種營養(yǎng)因子編組；b. 將組合液的紙片放在涂菌的基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)；將組合液的紙片放在涂菌的基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)；c. 結果分析；結果分析；如：如： 一組：一組：1 2 3 4 5 二組：二組：2 6 7 8 9 三組：三組：3 7 10 11 12 四組：四組：4 8 11 14 五組：五組：5 9 12 14 15營養(yǎng)因子分組編排時注意；營養(yǎng)因子分組編排時注意；1）每組內無重復的營）每組內無重復的營 養(yǎng)因子養(yǎng)因子 2）每組中應包含只出）每組中應包含只出 現(xiàn)一次的因子現(xiàn)一次的因子 定向培養(yǎng)的富集方法1、底物2、pH條件3、培養(yǎng)時間4、培養(yǎng)溫度等一切能提高目的微生物相對生長速度的手段，培養(yǎng)（固體、液體；分批連續(xù)）后使目的微生物在種群中占優(yōu)勢。 一組：一組：1 2 3 4 5 二組：二組：2