腎病及其生化檢測

1、前言腎臟是人體的重要器官，腎病在檢驗(yàn)科的檢測主要是通過生化來完成，通過一系列血清物質(zhì)的檢測，來判斷腎功能及其損害情況。我室現(xiàn)在開展的項(xiàng)目主要有:BUN,UA,CREA,CO2,CYSC（最新開展），內(nèi)生肌酐清除率，24小時(shí)尿蛋白 二）腎小球?yàn)V過膜的通盤性和濾過面積二）腎小球?yàn)V過膜的通盤性和濾過面積 此為腎小球本身的問題。炎癥，使管此為腎小球本身的問題。炎癥，使管腔狹窄或完全阻塞，使濾過面積減少，腔狹窄或完全阻塞，使濾過面積減少，濾過率減少。濾過率減少。三）腎小球血流量。三）腎小球血流量。 流量減少可使濾出減少：劇烈活動、流量減少可使濾出減少：劇烈活動、大失血、缺氧，致交感大失血、缺氧，致交感N

2、N興奮。興奮。 。 三）內(nèi)生肌酐清除率（三）內(nèi)生肌酐清除率（CCrCCr） 體表面積的計(jì)算：體表面積的計(jì)算：logA(m2)0.425log體重體重kg0.725log身高身高cm2.144參考值：參考值：根據(jù)體表面積校正后，根據(jù)體表面積校正后，范圍為范圍為80-120ml/min/1.73m2。 臨床意義臨床意義 尿素是蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的最終產(chǎn)物。尿素是蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的最終產(chǎn)物。 一）一） 尿素的代謝過程。尿素的代謝過程。 AAAA經(jīng)脫氨基作用生成氨經(jīng)脫氨基作用生成氨+CO2+CO2（全身（全身各組織），經(jīng)血液運(yùn)至肝臟，加上腸道各組織），經(jīng)血液運(yùn)至肝臟，加上腸道吸收的氨一起在肝臟經(jīng)鳥氨

3、酸循環(huán)而生吸收的氨一起在肝臟經(jīng)鳥氨酸循環(huán)而生成尿素。成尿素。三）臨床意義BUN為尿毒癥診斷指標(biāo)之一。為尿毒癥診斷指標(biāo)之一。 腎功能不全的代償期腎功能不全的代償期BUN輕度增高（輕度增高（7.0mmol/L），），腎功能衰竭失代償期，腎功能衰竭失代償期，BUN中度增高中度增高（17.9-21.4mmol/L；尿毒癥時(shí)尿毒癥時(shí)BUN21.4mmol/L， 腎小球?yàn)V過率與血肌酐、尿素濃度的關(guān)系腎小球?yàn)V過率與血肌酐、尿素濃度的關(guān)系 血肌酐和尿素濃度測定血肌酐和尿素濃度測定血肌酐和尿素濃度測定 尿素的測定方法可分為兩大類：尿素的測定方法可分為兩大類： 1)尿素酶法（直接法）：尿素酶法利尿素酶法（直接法）

4、：尿素酶法利用尿素酶催化尿素水解生成銨鹽，銨鹽用尿素酶催化尿素水解生成銨鹽，銨鹽可用納氏試劑直接顯色、酚可用納氏試劑直接顯色、酚-次氯酸鹽顯次氯酸鹽顯色或酶偶聯(lián)反應(yīng)顯色。色或酶偶聯(lián)反應(yīng)顯色。 尿素測定目前多采用尿素酶偶聯(lián)法：尿素測定目前多采用尿素酶偶聯(lián)法： 2）酚）酚-次氯酸鹽顯色法：次氯酸鹽顯色法：尿素酶水解尿素生成氨尿素酶水解尿素生成氨3)納氏試劑顯色法：納氏試劑顯色法： 尿素經(jīng)尿素酶作用后生成氨，氨可尿素經(jīng)尿素酶作用后生成氨，氨可與納氏試劑（與納氏試劑（HgI2.2KI的強(qiáng)堿溶液）作的強(qiáng)堿溶液）作用，生成棕黃色的碘化雙汞銨。用，生成棕黃色的碘化雙汞銨。 二乙酰一肟法（直接法）：二乙酰一肟

5、法（直接法）： 二乙酰不穩(wěn)定，用二乙酰一肟代替，二乙酰不穩(wěn)定，用二乙酰一肟代替，后者遇酸水解成二乙酰。后者遇酸水解成二乙酰。 試劑中加入試劑中加入Fe3+或或Cd2+及及硫氨脲，可提高靈敏度，增加顯色硫氨脲，可提高靈敏度，增加顯色穩(wěn)定性，還能消除羥胺的干擾作用。穩(wěn)定性，還能消除羥胺的干擾作用。提高酸的濃度可增加靈敏度。二乙提高酸的濃度可增加靈敏度。二乙酰一肟與瓜氨酸也有顯色。酰一肟與瓜氨酸也有顯色。 尿素濃度常用尿素中含有的氮來表尿素濃度常用尿素中含有的氮來表示，稱為尿素氮。如換算成尿素，可根示，稱為尿素氮。如換算成尿素，可根據(jù)據(jù)60g 尿素含有尿素含有28g氮計(jì)算，即氮計(jì)算，即1g尿尿素相當(dāng)

6、于素相當(dāng)于0.467g尿素氮，或是尿素氮，或是1g尿素尿素氮相當(dāng)于氮相當(dāng)于2.14g尿素。尿素。 正常參考值：正常參考值： 血清尿素氮為血清尿素氮為2.8-7.1 mmol/L，相，相當(dāng)于尿素當(dāng)于尿素1.8-6.8 mmol/L。 肌酐測定。肌酐測定。 1)Jaffe反應(yīng)法：測定肌酐最常用的反應(yīng)法：測定肌酐最常用的方法是尿、血清中的肌酐與苦味酸方法是尿、血清中的肌酐與苦味酸鹽作用，生成黃紅色的苦味酸肌酐鹽作用，生成黃紅色的苦味酸肌酐復(fù)合物。復(fù)合物。 此法的缺點(diǎn)是此法的缺點(diǎn)是 特異性不高，維生素特異性不高，維生素C、丙酮酸、丙酮、丙酮酸、丙酮、葡萄糖、乙酰醋酸、果糖、氨基馬尿酸、葡萄糖、乙酰醋酸

7、、果糖、氨基馬尿酸、蛋白質(zhì)、胍基醋酸酰胺及許多化合物也能蛋白質(zhì)、胍基醋酸酰胺及許多化合物也能與堿性苦味酸鹽生成紅色。這些能起反應(yīng)與堿性苦味酸鹽生成紅色。這些能起反應(yīng)的物質(zhì)稱為假肌酐，相當(dāng)數(shù)量的假肌酐存的物質(zhì)稱為假肌酐，相當(dāng)數(shù)量的假肌酐存在于紅細(xì)胞中。在于紅細(xì)胞中。 為去除假肌酐的影響，現(xiàn)在常用為去除假肌酐的影響，現(xiàn)在常用速率法來測定血肌酐。速率法來測定血肌酐。 乙酰乙酸在乙酰乙酸在20s內(nèi)已與堿性苦內(nèi)已與堿性苦味酸反應(yīng)完成，其他多數(shù)干擾物則味酸反應(yīng)完成，其他多數(shù)干擾物則在在80s后才與苦味酸有較快的反應(yīng)，后才與苦味酸有較快的反應(yīng)，而而20-80s之間主要是肌酐的反應(yīng)。之間主要是肌酐的反應(yīng)。因此

8、，血清與苦味酸混合后，分別因此，血清與苦味酸混合后，分別讀取讀取510nm在在20s及及80s時(shí)的吸光時(shí)的吸光度檢驗(yàn)肌酐濃度度檢驗(yàn)肌酐濃度. 2）酶聯(lián)法：）酶聯(lián)法： 此法特異性高，標(biāo)本不需去蛋白，此法特異性高，標(biāo)本不需去蛋白，特別適用于自動分析。但工具酶過特別適用于自動分析。但工具酶過多、價(jià)格昂貴。多、價(jià)格昂貴。 正常參考值：血漿肌酐正常參考值：血漿肌酐44-133 mol/L。 尿酸測定方法可分為兩大類尿酸測定方法可分為兩大類 磷鎢酸法：是利用在堿性環(huán)境中尿酸具磷鎢酸法：是利用在堿性環(huán)境中尿酸具有還原性，無蛋白血濾液中的尿酸可使有還原性，無蛋白血濾液中的尿酸可使磷鎢酸還原生成藍(lán)色的鎢藍(lán)，可進(jìn)

9、行比磷鎢酸還原生成藍(lán)色的鎢藍(lán)，可進(jìn)行比色測定，反應(yīng)如下：色測定，反應(yīng)如下： 尿酸磷鎢酸尿酸磷鎢酸尿囊素尿囊素CO2+鎢藍(lán)鎢藍(lán) 此法的不足之處是特異性不高，顯色此法的不足之處是特異性不高，顯色褪色速率變化不定，靈敏度低。褪色速率變化不定，靈敏度低。 尿酸酶法：尿酸酶測定方法可分為三種尿酸酶法：尿酸酶測定方法可分為三種類型：類型： 1)紫外分光法：尿酸在紫外分光法：尿酸在282-292nm處有特異吸收峰，當(dāng)其經(jīng)尿酸酶作用后，處有特異吸收峰，當(dāng)其經(jīng)尿酸酶作用后，產(chǎn)物在此波長范圍無吸收峰，測量酶作產(chǎn)物在此波長范圍無吸收峰，測量酶作用前后吸光度之差，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)品、測定樣用前后吸光度之差，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)品、測定樣品同時(shí)處理，可計(jì)算尿酸含量。品同時(shí)處理，可計(jì)算尿酸含量。 該法靈敏度高，特異性強(qiáng)，其它該法靈敏度高，特異性強(qiáng)，其它物質(zhì)無干擾，可用血清直接測定，物質(zhì)無干擾，可用血清直接測定，不需沉淀蛋白，易于自動化，具有不需沉淀蛋白，易于自動化，具有簡單、快速的優(yōu)點(diǎn)。簡單、快速的優(yōu)點(diǎn)。 2）酶聯(lián)比色法：）酶聯(lián)比色法： 3)酶聯(lián)酶聯(lián)-紫外分光法：紫外分光法： 此反應(yīng)第一步是特異的，但后面此反應(yīng)第一步是特異的，但后面的氧化還原反應(yīng)易受干擾，因體內(nèi)的氧化還原反應(yīng)易受干擾，因體內(nèi)有許多脫氫酶反應(yīng)，亦可氧化內(nèi)源有許多脫氫酶反應(yīng)，亦可氧