2022年2022年《儀器分析》實(shí)驗(yàn)講義

1、精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載儀器分析試驗(yàn)講義制藥與生命科學(xué)學(xué)院2021精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載前言儀器分析為分析科學(xué)的重要組成部分,近半個(gè)世紀(jì)以來(lái), 隨著現(xiàn)代物理學(xué). 電子學(xué).運(yùn)算機(jī)科學(xué)的快速進(jìn)展,儀器分析有了突飛猛進(jìn)的進(jìn)展；分析測(cè)定的靈敏度.精確性大大提高, 分析測(cè)定的對(duì)象日益擴(kuò)大, 分析測(cè)定的自動(dòng)化程度極大地提高；因此,儀器分析在各個(gè)領(lǐng)域的應(yīng)用越來(lái)越多, 學(xué)好儀器分析, 可為將來(lái)的科學(xué)爭(zhēng)論打下良好的基礎(chǔ)；儀器分析課程的教學(xué)既要使同學(xué)獲得扎實(shí)的理論和技能基礎(chǔ),又要緊跟國(guó)內(nèi)外學(xué)科進(jìn)展的要求；試驗(yàn)課教學(xué)為儀器分析課程的重要組成部分,旨在

2、引導(dǎo)同學(xué)將理論聯(lián)系實(shí)際,提高動(dòng)手才能,培養(yǎng)創(chuàng)新精神；本儀器分析試驗(yàn)指導(dǎo)中精選了紫外-可見分光光度法.氣相色譜法.高效液相色譜法等分析方法的典型試驗(yàn)；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載總就1.檢驗(yàn)方法中所采納的名詞及單位制均應(yīng)符合國(guó)家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)；2.檢驗(yàn)方法中所使用的水,在沒有注明其他要求時(shí),系指其純度能滿意分析要求的蒸餾水或去離子水；3.檢驗(yàn)方法中所使用的砝碼.滴定管.移液管.容量瓶.刻度吸管及分光光度計(jì)等均須按國(guó)家有關(guān)規(guī)定及規(guī)程進(jìn)行校正；4.液體的滴,系指蒸餾水至標(biāo)準(zhǔn)管流下的一滴的量,在 20時(shí) 20 滴相當(dāng)于 lml；5.化學(xué)試劑的等級(jí)標(biāo)志和符號(hào)化學(xué)試劑在瓶簽上

3、注明的等級(jí).標(biāo)志.符號(hào)及瓶簽顏色都為按國(guó)家統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的；見下表；我國(guó)化學(xué)試劑的等級(jí)標(biāo)志級(jí)別一級(jí)品二級(jí)品三級(jí)品純度分類優(yōu)級(jí)純 保證試劑 分析純 分析試劑 化學(xué)純?cè)囼?yàn)試劑生物試劑符號(hào)g·ra· rc· pl·rr 或 r瓶簽顏色綠色紅色藍(lán)色棕色或其它色黃色或其它色但為,近年來(lái)由于化學(xué)試劑的品種規(guī)格進(jìn)展繁多,其他規(guī)格的試劑包裝顏色各異,主要應(yīng)依據(jù)文字和符號(hào)來(lái)識(shí)別化學(xué)試劑的等級(jí)；6.試劑分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)"按國(guó)家統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),規(guī)定了各級(jí)化學(xué)試劑的純度及雜質(zhì)含量；試驗(yàn)室最常見的試劑規(guī)格為:基準(zhǔn)試劑為一類用于標(biāo)定容量分析標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)準(zhǔn)參考物,可精確稱 量后直接配制標(biāo)準(zhǔn)

4、溶液；主成分含量一般99.95%100.05%,雜質(zhì)含量略低于 一級(jí)品或與一級(jí)品相當(dāng)；優(yōu)級(jí)純?yōu)橐患?jí)品,又稱保證試劑,成分高,雜質(zhì)含量低,主要用于精密的科學(xué)爭(zhēng)論和測(cè)定工作；分析純?yōu)槎?jí)品, 質(zhì)量略低于優(yōu)級(jí)純,雜質(zhì)含量略高,主要用于一般的科學(xué)爭(zhēng)論和重要的測(cè)定；化學(xué)純?yōu)槿?jí)品,質(zhì)量較分析純差,但高于試驗(yàn)試劑,用于工廠.教精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載學(xué)試驗(yàn)的一般分析工作；試驗(yàn)試劑為四級(jí)品,雜質(zhì)含量更多,但比工業(yè)品純度高,主要用于一般的試驗(yàn)或爭(zhēng)論；化學(xué)試劑除上述四級(jí)外," 高純?cè)噭?" 又可分為超純.特純.高純.光譜純 及色譜純或色譜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等試劑；

5、這一類化學(xué)試劑主成分含量可達(dá)四個(gè) 999.99% 到五.六個(gè) 9 不等；光譜純?cè)噭? 雜質(zhì)含量用光譜分析法己測(cè)不出或低于某一限度 ; 色譜純或色譜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),為指用于色譜分析的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),其雜質(zhì)含量用色譜分析法測(cè)不出或低于某一限度；應(yīng)依據(jù)對(duì)分析結(jié)果的不同要求確定所選用的化學(xué)試劑的規(guī)格；純度高.雜質(zhì)含量少的試劑因制造或提純過程復(fù)雜,價(jià)格較高；7.配制溶液的要求7.1 一般試劑及提取用的溶劑可用化學(xué)純?cè)噭?如遇試劑空白高或?qū)y(cè)定有干擾時(shí),就需采納更純的試劑或經(jīng)純化處理的試劑；7.2 配制微量物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí),所用試劑純度應(yīng)在分析純以上；7.3 作為標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度用的試劑純度應(yīng)為基準(zhǔn)級(jí)或優(yōu)級(jí)純；7

6、.4 溶液未指明何種溶液配制時(shí),均指水溶液；7.5 一般試劑用硬玻璃瓶存放,堿液和金屬溶液用聚乙烯瓶存放,需避光試劑儲(chǔ)于棕色瓶中；8.在檢驗(yàn)方法中," 精密稱取 " 系指在稱量操作中必需按所列數(shù)值稱取," 精密稱取約 " 系指必需稱至0.lmg ,但稱取量可接近所列數(shù)值,以上兩種稱量一般用 分析天平； " 稱取" 系指要求稱至0.1g ,可用架盤藥物天平 托盤天乎 稱量；9.配制溶液濃度精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載9.1 容量百分比溶液% , v/v ,系指 1oom溶l液中含有該化合物如干毫升；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)

7、資料 - - - 歡迎下載9.2 質(zhì)量容量百分比溶液% ,m/v,系指 1ooml溶液中含有該化合物如干克,在檢驗(yàn)方法中,一般百分比濃度即指質(zhì)量百分比濃度；9.3 溶液的比例濃度,系指液體溶質(zhì)體積與溶劑體積的比；9.4 硫酸.鹽酸.硝酸,系指濃硫酸.濃鹽酸.濃硝酸；1o.檢驗(yàn)的有關(guān)要求10.1數(shù)據(jù)的運(yùn)算方法和取值應(yīng)遵循有效數(shù)字法就及數(shù)字修約規(guī)章；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載1o.2 檢驗(yàn)時(shí)必需做平行試驗(yàn)；10.3檢驗(yàn)結(jié)果的表示方法有以下幾種表示形式:毫克百分含量 :每百克 或每百毫升 樣品中所含被測(cè)物質(zhì)的毫克數(shù)；百分含量 %:每百克 或每百毫升 樣品中所含被測(cè)

8、物質(zhì)的克數(shù)； 千分含量 :每公斤 或每升 樣品中所含被測(cè)物質(zhì)的克數(shù)；百萬(wàn)分含量 ppm: 每公斤 或每升 樣品中所含被測(cè)物質(zhì)的毫克數(shù),或每克 或每毫升 樣品中所含被測(cè)物質(zhì)的微克數(shù)；十億分含量ppb:每公斤 或每升 樣品中所含被測(cè)物質(zhì)的微克數(shù),或每克 或每毫升 樣品中所含被測(cè)物質(zhì)的納克數(shù)；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載試驗(yàn)一分光光度法測(cè)定樣品中的總鐵一.試驗(yàn)?zāi)康呐c要求1.明白鄰二氮菲比色法測(cè)定鐵的基本原理；2.熟識(shí)分光光度計(jì)的使用；3.把握分光光度法分析條件挑選的方法；二.試驗(yàn)原理紫 外 可 見 分 光 光 度 法 （ ultraviolet-visiblemol

9、ecularabsorption spectrometry）為依據(jù)溶液中物質(zhì)的分子或離子對(duì)紫外和可見光譜區(qū)輻射能（ 200800nm）的吸取來(lái)爭(zhēng)論物質(zhì)的組成含量和結(jié)構(gòu)的方法；它廣泛用于無(wú)機(jī)和有機(jī)物的定性和定量測(cè)定,為常用的分析方法；朗伯比爾定律為吸取光度法的基本定律,為說(shuō)明物質(zhì)對(duì)單色光吸取的強(qiáng)弱與吸光物質(zhì)的濃度及厚度間關(guān)系的定律；a=abc即在肯定條件下吸光度與吸取層厚度和吸光物質(zhì)的濃度成正比；4鄰二氮菲為測(cè)定鐵的較好顯色劑,在 ph39 的介質(zhì)中,它與 fe 形成紅橙色絡(luò)合物（ lgk 穩(wěn)21.3 ,最大吸取波長(zhǎng) 508nm, 1.1 × 10 ）,在肯定濃度范疇內(nèi), fe 的濃度

10、與吸光度遵守吸取定律；樣品中如有 fe ,可用仍原劑（如鹽酸羥胺）將其仍原成 fe ,就本方法可測(cè)出總鐵含量；4fe3+2nhoh4fe2+no +4h+ho2222+nnfe2+ +3fenn3用可見分光光度法分析時(shí),為了得到正確的測(cè)量靈敏度.精確度及重現(xiàn)性,在含量測(cè)定前應(yīng)進(jìn)行條件試驗(yàn),挑選正確分析條件；2+3+2+2+2+2-方法的挑選性很高, 相當(dāng)于鐵含量40 倍 的 sn .al.ca . mg .zn .sio3 ,420 倍的 cr3+.mn2+.v5+.po3- , 5 倍的 co2+.cu2+等均不干擾測(cè)定；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載三.試驗(yàn)

11、儀器1.可見分光光度計(jì)；2.分析天公平；四.試驗(yàn)試劑所用試劑均為分析純（ar級(jí)）,水為蒸餾水；1.硫酸亞鐵銨2.鄰二氮菲3.濃鹽酸4.鹽酸羥胺5.醋酸鈉6.ph 試紙（ 1-14 ） 五.試驗(yàn)步驟（一）試劑的配制1.鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液：精確稱取硫酸亞鐵銨0.3500 g ,加熱溶解,移入50 ml 容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻；此溶液濃度為1 mg/ml,使用時(shí)配制成濃度為 100 g/ml 標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液；2.鄰二氮菲溶液： 0.1 水溶液,需加熱溶解；臨用時(shí)配制；3.鹽酸羥胺溶液： 10水溶液,臨用時(shí)配制；4.鹽酸溶液： 10（ v/v）水溶液；5.醋酸緩沖溶液（ ph=4.6）：將 68g 醋酸鈉

12、溶于約500ml蒸餾水中,加入29ml冰醋酸,稀釋定容至1l；（二）試驗(yàn)條件的選取1.繪制吸取曲線取兩個(gè) 50ml容量瓶,其中一個(gè)加入0.6ml 鐵標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液,然后在兩個(gè)容量瓶中各加入1.0ml 鹽酸羥胺溶液,搖勻,放置約2min；各加入 5.0ml 醋酸緩沖溶液和 2.0ml0.1 鄰二氮菲溶液,用水稀釋至刻度,搖勻,得溶液（含鐵標(biāo)準(zhǔn)液）和溶液（不含鐵標(biāo)準(zhǔn)液） ；(1) 用水作參比溶液,分別繪制上述兩種溶液的吸取曲線(2) 用溶液作參比溶液,繪制有色協(xié)作物的吸取光譜精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載比較上述三種吸取光譜,選取合適的測(cè)定波長(zhǎng)；2.顯色劑用量的挑選取

13、6 個(gè) 50ml容量瓶,各加入100g/ml 鐵標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液1.0ml,加 10鹽酸溶液 1ml,10鹽酸羥胺溶液1ml,醋酸緩沖溶液5ml,搖勻,再加入 0.00 .0.25 .0.50 .1.00 .2.00 .3.00 ml0.1 鄰二氮菲溶液,定容,搖勻；在選定波特長(zhǎng),用未加顯色劑溶液管作參比,測(cè)量溶液吸光度值；以顯色劑體積為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制吸光度顯色劑用量曲線,確定正確顯色劑用量；（三）水樣中鐵含量的測(cè)定1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精確吸取 100 g/ml 鐵標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液0.0 .0.20 .0.40 .0.60 .0.80 .1.0ml于 50ml容量瓶中,加入10鹽酸溶液1ml,

14、10鹽酸羥胺溶液1ml,醋酸緩沖溶液 5ml及鄰二氮菲溶液適量,用水稀釋至50ml,搖勻,測(cè)定溶液的吸光度； 2.水樣中鐵含量的測(cè)定精確吸取上述處理好的樣品溶液2.0ml 于 50ml容量瓶中,以下操作依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線制作的步驟進(jìn)行,測(cè)定樣品的吸光度；（四）數(shù)據(jù)處理1.繪制吸取曲線試驗(yàn)數(shù)據(jù)波長(zhǎng) nm492496500504508512516520524530水溶液 a波長(zhǎng) nm492496500504508512516520524530溶液 a波長(zhǎng) nm492496500504508512516520524530溶液 a做參 比溶液做參比相宜的檢測(cè)波長(zhǎng)以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo), 對(duì)應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),將測(cè)得

15、值逐個(gè)描畫在坐標(biāo)紙上,并連成光滑曲線,即得吸取光譜；從曲線上查得溶液的最大吸取波長(zhǎng)nm,得精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載測(cè)量鐵的測(cè)量波長(zhǎng)（又稱工作波長(zhǎng)）；（ 2）顯色劑用量的挑選試驗(yàn)數(shù)據(jù)鄰二氮菲溶液（ml）0.000.250.501.002.003.00吸光度 a相宜的顯色劑用量以顯色劑鄰二氮菲溶液的加入量（ml）為橫坐標(biāo), 相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),繪制吸光度顯色劑用量曲線；從中找出相宜的顯色劑用量；1234560.00.200.400.600.801.0（ 3）標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制（終體積50ml） 試驗(yàn)點(diǎn)加入鐵標(biāo)準(zhǔn)液量 （ml）鐵 含 量 （ g） 鐵濃度（ mg/l

16、） 吸光度值以鐵標(biāo)準(zhǔn)的濃度為橫坐標(biāo),相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),繪制吸光度鐵濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線；4 水樣測(cè)定六.摸索題1.醋酸鈉.鄰二氮菲.鹽酸羥胺在試驗(yàn)中各起什么作用？2.什么為吸取曲線？什么為標(biāo)準(zhǔn)曲線？標(biāo)準(zhǔn)曲線和吸取曲線有何區(qū)分？3.參比溶液的作用？4.如需測(cè)定樣品中fe3+的含量,如何操作？如測(cè)定一般鐵鹽的總鐵量為否要加鹽酸羥胺？5.試驗(yàn)的各項(xiàng)測(cè)定中, 哪種試劑加入量的體積要比較精確,而其它試劑就可不必,為什么？6.依據(jù)自己的試驗(yàn)數(shù)據(jù), 運(yùn)算在最大吸取波長(zhǎng)下鄰二氮菲鐵絡(luò)合物的摩爾吸取光系數(shù)；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載試驗(yàn)二雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定復(fù)方新諾明片中磺胺甲

17、基異噁唑及甲氧芐氨嘧啶的含量一.試驗(yàn)?zāi)康囊?.把握雙波長(zhǎng)分光光度法的基本原理,混合組分不經(jīng)分別直接測(cè)定各組分含量的方法；2.熟識(shí)用單波長(zhǎng)型分光光度計(jì)進(jìn)行雙波長(zhǎng)法測(cè)定；二.基本原理1.雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)法排除干擾吸取的基本原理在干擾組分的吸取光譜上吸取系數(shù)相同的兩個(gè)波特長(zhǎng),如被測(cè)組分的吸取系數(shù)有顯著差異,就可用于排除干擾吸取,即直接測(cè)定混合物在此兩波特長(zhǎng)的吸取度之差值,該差值與待測(cè)定物濃度成正比,而與干擾物濃度無(wú)關(guān)；用數(shù)學(xué)表達(dá)式如下：混a ba baabbab精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載b（ 1 2）121212c alc bl精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載精品

18、學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載如 b 為干擾物,所選波長(zhǎng)12 處的 eb 相等,所以e0精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載混a就acl 與待測(cè)物濃度成正比,與干擾物濃度無(wú)關(guān)；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載2.雙波長(zhǎng)法測(cè)定復(fù)方新諾明片中磺胺甲基異噁唑（smz）含量的基本原理復(fù)方新諾明片為含磺胺甲基異噁唑（smz）和甲氧芐氨嘧啶（tmp）的復(fù)方片劑；在0.1mol/l的氫氧化鈉溶液中,smz在 257nm波特長(zhǎng)有一最大吸取峰,精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載tmp在 257nm和 3

19、04nm波特長(zhǎng)為等吸取點(diǎn),而smz在這兩波特長(zhǎng)的吸取度差異大,所以測(cè)得樣品在257nm和 304nm波特長(zhǎng)的吸取度差值與 smz濃度成正比,與 tmp濃度無(wú)關(guān)；smz的標(biāo)準(zhǔn)曲線及回來(lái)方程繪制精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載cs6.46710 20.002c :g / ml精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載r=0.9999、線性范疇 015 g/ml3.tmp含量測(cè)定原理以 tmp的 max=287nm為測(cè)定波長(zhǎng),利用光吸取具有加和性測(cè)得吸取值,運(yùn)算 tmp的含量；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載a287 nmasmzatmp1 %、 smziec1cm、

20、 287nms1%、 tmpiec1 cm、287 nmt精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載smz.tmp在 287nm處的吸取系數(shù) :1% smz1cm287 nm109 .6 ；1%tmp1cm287 nm247.4精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載三.試驗(yàn)儀器1.可見分光光度計(jì)2.分析天公平四.試驗(yàn)試劑1.方新諾明片2.0.1mol/l的氫氧化鈉溶液3.95乙醇五.試驗(yàn)步驟精密稱取粉末約0.140 0 g,置于250ml容量瓶中,加入95乙醇50ml 振搖 10min 溶解, 以 0.1mol/lnaoh溶液稀釋至刻度

21、；用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,取10ml濾液置 100ml容量瓶中,以0.1mol/lnaoh 溶液稀釋至刻度得 液；精密吸取液25ml置另一 100ml容量瓶中,以0.1mol/lnaoh 溶液稀釋至刻度得溶液液；測(cè)定液在287nm處的吸取度, 測(cè)定液在 257nm和 304nm波特長(zhǎng)的吸取度差值,按工作曲線或回來(lái)方程吸取系數(shù)運(yùn)算二組分的含量；（由于處方中smz 為 0.4g/ 片, tmp為 0.08g/ 片,即 smz為 tmp的 5 倍；假如采納同一濃度的濃溶液,就smz的吸取度大大超過測(cè)定值范疇（吸取值在0.3 0.7 之間）,致使精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必

22、備歡迎下載測(cè)定讀數(shù)不準(zhǔn)；假如采納稀溶液,由于tmp吸取度太小而使試驗(yàn)誤差增大；為 此采納濃稀兩溶液使smz.tmp均有合適的測(cè)定范疇） ；六.數(shù)據(jù)處理測(cè)定波長(zhǎng) nm吸取值 a溶液287257精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載溶液smz含量的運(yùn)算參考回來(lái)方程s6.467304c210 s0.002精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載scs0 .002g / ml精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載6 .467102tmp含量的運(yùn)算精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載287 109.6c s247.4c t（c

23、s c t：g/100ml ）,得 tmp的濃度 ct精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載試驗(yàn)三色譜參數(shù)的測(cè)試及運(yùn)算一.試驗(yàn)?zāi)康?.通過本試驗(yàn)基本色譜參數(shù)的測(cè)定與運(yùn)算, 明白各色譜參數(shù)的意義及其相互關(guān)系；2.通過本試驗(yàn)進(jìn)一步把握柱效.柱挑選性.分別才能.保留值等性質(zhì),使之能挑選出正確色譜操作條件,得到牢靠的定性.定量結(jié)果；二.試驗(yàn)原理（一）氣相色譜法以氣體作為流淌相的色譜法稱為氣相色譜法；氣相色譜法適用于分別有肯定揮發(fā)性和熱穩(wěn)固性的化合物；目前已廣泛用于化工.醫(yī)藥衛(wèi)生.環(huán)境及食品監(jiān)測(cè)等方面；1.流程氣相色譜法為采 用氣體作為流淌相的 一種色譜法；在此法 中：載氣（不與

24、被測(cè)物作用,用來(lái)載送試樣的惰性氣體, 如氫氣.氮?dú)獾龋┹d著待分別的試樣通過色譜柱中的固 定相,使試樣中各組分分別,然后分別檢測(cè)；其簡(jiǎn)潔流程如圖1 所示；載氣由高壓鋼瓶1 供應(yīng),經(jīng)減壓閥2 減壓后,進(jìn)入載氣凈化干燥管3 以除去載氣中的水分；由針形閥4 掌握載氣的壓力和流量；流量計(jì)5 和壓力表6 用以指示載氣的柱前流量和壓力；再經(jīng)過進(jìn)樣口（包括氣化室）7,試樣就在進(jìn)樣口注入（如為液體試樣, 經(jīng)氣化室瞬時(shí)氣化為氣體） ；由載氣攜帶進(jìn)入色譜柱8, 將各組分分別后依次進(jìn)入檢測(cè)器9 后放空；檢測(cè)器信號(hào)由記錄儀10 記錄,就可得到色譜圖；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載氣相色譜

25、儀組成：從色譜流程圖可知道,氣相色譜儀一般由五部分組成：（1） ）載氣系統(tǒng),包括氣源.氣體凈化.氣體流速掌握和測(cè)量；（2） ）進(jìn)樣系統(tǒng),包括進(jìn)樣口.氣化室；（3） ）色譜柱和柱溫箱,包括恒溫掌握裝置；（4） ）檢測(cè)系統(tǒng),包括檢測(cè)器及控溫裝置；（5） ）記錄系統(tǒng),包括放大器.記錄儀,有的儀器仍有數(shù)據(jù)處理裝置；2.氣相色譜法特點(diǎn)：（1） ）分別分析連貫性強(qiáng),方法簡(jiǎn)便；（2） ）分別效能高,挑選性好；（3） ）分析速度快；（4） ）靈敏度高；（5） ）應(yīng)用范疇廣；在規(guī)定的色譜條件下,測(cè)定惰性組分的死時(shí)間（t m ）及被測(cè)組分的保留時(shí) 間（ t r）.半高峰寬（ w1/2 ）.及峰高（ h）等參數(shù),便

26、可運(yùn)算出基本色譜參數(shù)值； 三.儀器與試劑1.儀器：氣相色譜儀一套； dnp柱 1m×3mm；tcd檢測(cè)器；微量注射器（5-10 l）2.試劑：純樣： 苯.甲苯.二甲苯混合樣：苯.甲苯.二甲苯的混合洋四.試驗(yàn)步驟1.色譜條件：溫度掌握： 柱溫 120；檢測(cè)器溫度： 100；氣化器溫度120 載氣：氮?dú)饬魉?40ml/min進(jìn)樣量：空氣 :50 l, 苯.甲苯.二甲苯混合樣1l；信號(hào)衰減視靈敏度而定；2.測(cè)試：待儀器開啟運(yùn)行至基線平穩(wěn)后,進(jìn)樣進(jìn)混合樣,每次1l,重復(fù)三次進(jìn)純樣,每種純樣進(jìn)一次,每次進(jìn)0.4 l進(jìn)空氣,用微量注射器進(jìn)50l 空氣,測(cè) t m,重復(fù)三次3.記錄數(shù)據(jù)精品學(xué)習(xí)資料

27、精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載五.數(shù)據(jù)處理1.記錄數(shù)據(jù)組分空氣苯甲苯二甲苯純樣t r（min）空氣苯甲苯二甲苯t r（min）（ 1）精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載混合樣t r（min）（ 2）t r（min）（ 3）平均值（min）精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載偏差調(diào)整保留時(shí)間：相對(duì)保留值：容量因子：理論塔板數(shù)：有效塔板數(shù)：有效塔板高度：空氣t r（min）（ 1） t r（min）（2） t r（ min）（ 3） 平均值（ min） 2.各基本參數(shù)運(yùn)算：3.數(shù)據(jù)處理精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載調(diào)整保留時(shí)間相對(duì)保留值容量

28、因子理論塔板數(shù)有效塔板數(shù)有效塔板高度精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載苯 甲苯二甲苯六.問題爭(zhēng)論1. 兩種方法測(cè)定的t m 何者精確？為什么？精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載2. 色譜基本參數(shù)測(cè)量與運(yùn)算的關(guān)鍵問題為什么？氣相色譜儀操作規(guī)程一.載氣鋼瓶的使用規(guī)程 1.鋼瓶必需分類保管,直立因定,遠(yuǎn)離熱源,防止暴曬及劇烈震驚,氫氣室內(nèi)存放量不得超過二瓶； 2.氧氣瓶及專用工具嚴(yán)禁與油類接觸；3.鋼瓶上的氧氣表要專用,安裝時(shí)螺扣要上緊；4.操作時(shí)嚴(yán)禁敲打,發(fā)覺漏氣須立刻修好；5.用后氣瓶的剩余殘壓不應(yīng)少于980 kpa；6.氫氣壓力表系 反螺紋 ,安裝拆卸時(shí)

29、應(yīng)留意防止損壞螺紋；二.減壓閥的使用及留意事項(xiàng) 1.在氣相色譜分析中,鋼瓶供氣壓力在9.8 14.7 mpa；2.減壓閥與鋼瓶配套使用,不同氣體鋼瓶所用的減壓閥為不同的；氫氣減壓閥接頭為反向螺紋 ,安裝時(shí)需當(dāng)心；使用時(shí)需緩慢調(diào)劑手輪,使用后必需旋松調(diào)劑手輪和關(guān)閉鋼瓶閥門； 3.關(guān)閉氣源時(shí),先關(guān)閉減壓閥,后關(guān)閉鋼瓶閥門,再開啟減壓閥,排出減壓閥內(nèi)氣體,最終松開調(diào)劑螺桿；三.微量注射器的使用及留意事項(xiàng) 1.微量注射器為易碎器械,使用時(shí)應(yīng)多加當(dāng)心,不用時(shí)要洗凈放入盒內(nèi),不要任憑玩弄,來(lái)回空抽,否就會(huì)嚴(yán)峻磨損,損壞氣密性,降低精確度； 2.微量注射器在使用前后都須用丙酮等溶劑清洗；3.對(duì) 10 100

30、 微升的注射器,如遇針尖堵塞,宜用直徑為0.1 mm 的細(xì)鋼絲耐心 穿 通 、 不 能 用 火 燒 的 方 法 ；4.硅橡膠墊在幾十次進(jìn)樣后,簡(jiǎn)潔漏氣,需準(zhǔn)時(shí)更換；5.用微量注射器取液體試樣,應(yīng)先用少量試樣洗滌多次,再漸漸抽入試樣,并稍多于需要量；如針管內(nèi)有氣泡就將針頭朝上,使氣泡上升排出,再將過量的試樣排出,用濾紙吸去針尖外所沾試樣；留意切勿使針頭內(nèi)的試樣流失； 6.取好樣后應(yīng)立刻進(jìn)樣,進(jìn)樣時(shí),注射器應(yīng)與進(jìn)樣口垂直,針尖刺穿硅橡膠墊精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載圈,插究竟后快速注入試樣,完成后立刻拔出注射器,整個(gè)動(dòng)作應(yīng)進(jìn)行得穩(wěn)當(dāng),連貫,快速；留意：針尖在硅橡膠

31、墊圈上的位置.插入速度.停留時(shí)間和拔出速度等都會(huì)影響進(jìn)樣的重復(fù)性,操作時(shí)應(yīng)留意；四.熱導(dǎo)池檢測(cè)器的使用及留意事項(xiàng) 1.開啟熱導(dǎo)池檢測(cè)器電源前,必需先通載氣,試驗(yàn)終止時(shí),把橋電流調(diào)到最小值,再關(guān)閉熱導(dǎo)池檢測(cè)器電源,最終關(guān)閉載氣；2.穩(wěn)壓閥.針形閥的調(diào)劑須緩慢進(jìn)行；穩(wěn)壓閥不工作時(shí),必需放松調(diào)劑手柄；針形閥不工作時(shí),應(yīng)將閥門處于“開”的狀態(tài)； 3.各室升溫要緩慢,防止超溫；4.更換汽化室密封墊片時(shí),應(yīng)將熱導(dǎo)電源關(guān)閉；如流量計(jì)浮子突然下落究竟,也應(yīng)第一關(guān)閉該電源； 5.橋電流不得超過答應(yīng)值；五.氫火焰檢測(cè)器的使用及留意事項(xiàng)1.通氫氣后,待管道中殘余氣體排出后,應(yīng)準(zhǔn)時(shí)點(diǎn)火,并保證火焰為點(diǎn)著的；2.使用

32、fid 時(shí),離子室外罩須罩住,以保證良好的屏蔽和防止空氣侵入；假如離子室積木,可將端蓋取下,待離子室溫度較高時(shí)再蓋上；工作狀態(tài)下,取下 檢測(cè)器罩蓋,不能觸及極化極,以防觸電； 3.離子室溫度應(yīng)大于100 度,待層析室溫度穩(wěn)固后,再點(diǎn)火,否就離子室易積水,影響電極絕緣而使基線不穩(wěn)；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載試驗(yàn)四高效液相色譜的定性定量方法一.試驗(yàn)?zāi)康?1.明白并熟識(shí)高效液相色譜儀的流程；2.把握液相色譜定性及外標(biāo)定量方法；3.明白液相色譜檢測(cè)器及色譜柱的分類；二.試驗(yàn)原理（一）高效液相色譜高效液相色譜儀的主要部件：貯液器.高壓泵.梯度洗提裝置.進(jìn)樣器.色譜柱.

33、檢測(cè)器.恒溫器.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等；儀器流程： 貯液器中貯存的載液（常需除氣） 經(jīng)過過濾后由高壓泵輸送到色譜柱入口； 當(dāng)采納梯度洗提時(shí)一般需用雙泵系統(tǒng)來(lái)完成輸送；樣品由進(jìn)樣器注入載液系統(tǒng), 而后送到色譜柱進(jìn)行分別； 分別后的組分由檢測(cè)器檢測(cè),輸出信號(hào)供應(yīng)記錄儀或數(shù)據(jù)處理裝置；假如需收集餾分作進(jìn)一步分析,就在色譜柱一側(cè)出口將樣品餾分收集起來(lái)；各部分功能：1.高壓泵：往復(fù)式柱塞泵：為一種恒流泵,這種泵的特點(diǎn)為不受整個(gè)色譜體系中其余部分阻力稍有變化的影響,連續(xù)供應(yīng)恒定體積的流淌相；更換溶劑便利,很適用于梯度洗提；不足之處為輸出有脈沖波動(dòng),會(huì)干擾某些檢測(cè)器（如差示折光檢測(cè)器）,但對(duì)紫外檢測(cè)器的影響不大；精

34、品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載2.進(jìn)樣裝置：高壓定量進(jìn)樣閥： 這為通過進(jìn)樣閥（常用六通閥）直接向壓力系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)樣而不必停止流淌相流淌的一種進(jìn)樣裝置； 3.色譜柱：目前液相色譜法常用的標(biāo)準(zhǔn)柱型為內(nèi)徑為4.6mm,長(zhǎng)度為 25cm的直形不銹鋼柱；填料顆粒度510m,色譜柱的填料種類主要有-c18.-c8 .-nh2.-cn.-so3 - .-cooh 等等；4.檢測(cè)器：紫外光度檢測(cè)器：紫外光度檢測(cè)器為液相色譜法廣泛使用的檢測(cè)器,它的作用原理為基于被分析樣品組分對(duì)特定波長(zhǎng)紫外光的挑選性吸取,組分濃度與吸光度的關(guān)系遵守比耳定律；紫外光度檢測(cè)器有固定波長(zhǎng)（單波長(zhǎng)和多波長(zhǎng)）.可

35、變波長(zhǎng)（紫外分光和紫外可見分光）和二極管陣列檢測(cè)器；這種檢測(cè)器的特點(diǎn)：靈敏度高；最小檢測(cè)濃度可達(dá)10-9 g/ml；對(duì)溫度和流速不敏銳,可用于梯度洗提；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔；缺點(diǎn)為不適用于對(duì)紫外光完全不吸取的試樣；示差檢測(cè)器為通過對(duì)物質(zhì)的物理常數(shù)折光指數(shù)的測(cè)量來(lái)進(jìn)行檢測(cè)的,它為一種通用型檢測(cè)器,但為,它的缺點(diǎn)為對(duì)溫度變化特別敏銳,不能用于梯度洗脫；熒光檢測(cè)器為通過檢測(cè)被測(cè)物在肯定波長(zhǎng)紫外光激發(fā)下發(fā)出的熒光量來(lái)對(duì)被測(cè)物進(jìn)行定量的,但并不為全部有機(jī)物都能發(fā)出熒光,在紫外光照耀下會(huì)產(chǎn)生熒光的有機(jī)物,絕大多數(shù)為環(huán)狀化合物,像某些代謝物.食品.藥物.氨基酸.多肽.胺類；維生素.石油高沸點(diǎn)餾分.生物堿.膽堿和甾族化合

36、物等；（二）分別原理苯.萘.聯(lián)苯.菲分別屬于單環(huán),多環(huán)及稠環(huán)芳烴,且極性強(qiáng)度和分子量均有差別,因此,它們?cè)趶?qiáng)極性的流淌相與非極性固定相之間的安排系數(shù)k 就不同,保留時(shí)間也就不相同,混合樣品因此而得以在色譜體系中被分別開；由于苯.萘.聯(lián)苯.菲都對(duì)紫外波長(zhǎng)有吸取,因此選用紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢 測(cè)；在反相色譜系統(tǒng)里、 固定相為非極性的、 流淌相為極性的；在化學(xué)鍵合相色譜中,固定相的協(xié)作基常為鏈長(zhǎng)2-18 碳原子的烷基； 流淌相一般為極性有機(jī)溶劑和水的混合溶液；以溶質(zhì)極性減弱的次序洗脫；隨著移動(dòng)相極性的增強(qiáng)；保精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載留值亦隨之增大；反相色譜的分別為以溶質(zhì)的疏水結(jié)構(gòu)的差異為基礎(chǔ)的,溶質(zhì)極性越大,保留值越小,對(duì)于同系物,其保留值隨碳數(shù)的增加而增大；溶劑的組成對(duì)樣品的保留有特別深刻的影響,溶質(zhì)保留值的大小為隨洗脫 液的極性的降低而下降的, 當(dāng)流淌相組成肯定時(shí)、 樣品在較長(zhǎng)烷基協(xié)作基的固定相上的保留值較大；在高效液相色譜中 、 定性方法有已知標(biāo)準(zhǔn)物定性,保留值體會(huì)定性. 用不同色譜體系定性.離析色譜峰后用其他方法定性等；本次試驗(yàn)采納已知標(biāo)準(zhǔn)物根據(jù)保留值定