【大學(xué)課件】畜牧微生物學(xué) 第五章 外界因素對(duì)微生物的影響

1、畜牧獸醫(yī)學(xué)院畜牧獸醫(yī)學(xué)院 馮馮 新新第五章第五章 外界因素對(duì)微生物的外界因素對(duì)微生物的影響影響- -2 2- - The processes used to control microorganisms are either physical or chemical, though a combination of both may be used. Physical methods include heat treatment, irradiation, filtration, and mechanical removal (washing) . Chemical methods use a

2、ny one of a variety of antimicrobial chemicals. The method chosen depends on the circumstances and resulting degree of control required. Definitions related to microbial control are summarized as follow:- -3 3- -1. 滅菌滅菌(sterilization) 殺死物體中殺死物體中所有所有微生物，叫做微生物，叫做滅菌滅菌。這里指。這里指的所有微生物中包括病原微生物和非病原微生物及其芽孢、霉

3、菌孢的所有微生物中包括病原微生物和非病原微生物及其芽孢、霉菌孢子等。子等。 The process of removing or destroying all microorganisms on or in a product is called sterilization. 2. 消毒消毒(disinfection) 殺死物體中的殺死物體中的病原微生物病原微生物，叫做，叫做消毒消毒。用于。用于消毒的化學(xué)藥品叫做消毒劑或殺菌劑。消毒的化學(xué)藥品叫做消毒劑或殺菌劑。 Disinfection is the process that eliminates most or alldisease-cau

4、sing microorganisms on or in a material.3. 防腐防腐(antisepsis) 阻止或抑制阻止或抑制微生物的生長(zhǎng)繁殖叫做微生物的生長(zhǎng)繁殖叫做防腐或抑防腐或抑菌菌。用于防腐的化學(xué)藥品稱為防腐劑或抑菌劑。用于防腐的化學(xué)藥品稱為防腐劑或抑菌劑。 Preservation is the process of delaying spoilage of foodsor other perishable products by adding growth-inhibitingingredients or adjusting storage conditions to

5、impede growth of microorganisms.- -4 4- -4. 無(wú)菌法無(wú)菌法(asepsis) 無(wú)菌是指無(wú)菌是指一定的空間范圍一定的空間范圍內(nèi)沒有內(nèi)沒有活的活的微生微生物。所謂無(wú)菌法是指在實(shí)際操作過程中，物。所謂無(wú)菌法是指在實(shí)際操作過程中，防止防止任何微生物進(jìn)入任何微生物進(jìn)入動(dòng)物機(jī)體或物體的方法。動(dòng)物機(jī)體或物體的方法。5. 抑菌作用抑菌作用(bacteriostasis) 是指抑制或阻礙微生物生長(zhǎng)繁殖是指抑制或阻礙微生物生長(zhǎng)繁殖的作用。的作用。6. 殺菌作用殺菌作用(bacteriocidal action) 是指能使菌體致死的作用。是指能使菌體致死的作用。7. 抗菌作

6、用抗菌作用(antibacterial action) 抗菌作用包括抑菌作用和殺抗菌作用包括抑菌作用和殺菌作用，是這兩者的總稱。菌作用，是這兩者的總稱。8. 某些藥物具有殺滅病毒的能力，稱有抗病毒作用。某些藥物具有殺滅病毒的能力，稱有抗病毒作用。- -5 5- -Contents第一節(jié) 物理因素 第二節(jié) 化學(xué)因素 第三節(jié) 生物因素 - -6 6- -第一節(jié)第一節(jié) 物理因素物理因素影響微生物的物理因素主要有：影響微生物的物理因素主要有： 干燥干燥 滲透壓滲透壓 溫度溫度 光線光線 射線射線 濾過濾過- -7 7- -一、一、 干干 燥燥水分是微生物新陳代謝過程中水分是微生物新陳代謝過程中不可缺少

7、的成分。微生物在干不可缺少的成分。微生物在干燥的環(huán)境中失去大量水分，新燥的環(huán)境中失去大量水分，新陳代謝便會(huì)發(fā)生障礙，甚至引陳代謝便會(huì)發(fā)生障礙，甚至引起菌體蛋白質(zhì)變性和由于鹽類起菌體蛋白質(zhì)變性和由于鹽類濃度的增高而逐漸導(dǎo)致死亡。濃度的增高而逐漸導(dǎo)致死亡。在實(shí)踐中常用干燥方法保存草在實(shí)踐中常用干燥方法保存草料、谷類、魚、皮張、蔬菜及料、谷類、魚、皮張、蔬菜及中草藥等。中草藥等。含水分含水分16以下以下含水分含水分25含水量在含水量在14以下，不高于以下，不高于30時(shí)時(shí)牧草收獲牧草收獲- -8 8- -二、二、 滲透壓滲透壓 在等滲溶液中，微生物的活動(dòng)保持正常，細(xì)在等滲溶液中，微生物的活動(dòng)保持正常，

8、細(xì)胞外形不變。胞外形不變。 在高滲溶液中，細(xì)胞易失水，脫水后發(fā)生質(zhì)在高滲溶液中，細(xì)胞易失水，脫水后發(fā)生質(zhì)壁分離，生長(zhǎng)受抑制或死亡（壁分離，生長(zhǎng)受抑制或死亡（10-15%濃度的鹽漬濃度的鹽漬和和50-70%濃度的糖漬保藏食品）。濃度的糖漬保藏食品）。 在低滲溶液中，細(xì)胞吸水膨脹，甚至導(dǎo)致細(xì)在低滲溶液中，細(xì)胞吸水膨脹，甚至導(dǎo)致細(xì)胞破裂死亡。胞破裂死亡。- -9 9- -三、三、 溫溫 度度溫度是影響微生物生長(zhǎng)的最重要因素之一。溫度是影響微生物生長(zhǎng)的最重要因素之一。溫度對(duì)微生物的影響具體表現(xiàn)在：溫度對(duì)微生物的影響具體表現(xiàn)在：影響酶活性，溫度變化影響酶促反應(yīng)速率，最影響酶活性，溫度變化影響酶促反應(yīng)速率

9、，最終影響細(xì)胞合成。終影響細(xì)胞合成。影響細(xì)胞膜的流動(dòng)性，溫度高，流動(dòng)性大，有影響細(xì)胞膜的流動(dòng)性，溫度高，流動(dòng)性大，有利于物質(zhì)的運(yùn)輸，溫度低，流動(dòng)性降低，不利于利于物質(zhì)的運(yùn)輸，溫度低，流動(dòng)性降低，不利于物質(zhì)運(yùn)輸，因此，溫度變化影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收物質(zhì)運(yùn)輸，因此，溫度變化影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收與代謝產(chǎn)物的分泌。與代謝產(chǎn)物的分泌。影響物質(zhì)的溶解度，對(duì)生長(zhǎng)有影響。影響物質(zhì)的溶解度，對(duì)生長(zhǎng)有影響。- -1010- -從微生物整體來看從微生物整體來看:生長(zhǎng)的溫度范圍一般在生長(zhǎng)的溫度范圍一般在-10 100 極端下限為極端下限為-30 ，極端上限為，極端上限為105300 但對(duì)于特定的某一種微生物：但對(duì)于特定的某

10、一種微生物：只能在一定溫度范圍內(nèi)生長(zhǎng)，在這個(gè)范圍內(nèi)，每種微生物都只能在一定溫度范圍內(nèi)生長(zhǎng)，在這個(gè)范圍內(nèi)，每種微生物都有自己的有自己的生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)，即，即最低、最適、最高生長(zhǎng)溫度最低、最適、最高生長(zhǎng)溫度（一）微生物生長(zhǎng)的三個(gè)溫度基點(diǎn)（一）微生物生長(zhǎng)的三個(gè)溫度基點(diǎn)- -1111- -根據(jù)微生物的最適生長(zhǎng)溫度的不同，可將微生物劃為根據(jù)微生物的最適生長(zhǎng)溫度的不同，可將微生物劃為三個(gè)類型三個(gè)類型：v低溫型微生物（嗜冷微生物）低溫型微生物（嗜冷微生物）v中溫型微生物（嗜溫微生物）中溫型微生物（嗜溫微生物）v高溫型微生物（嗜熱微生物）高溫型微生物（嗜熱微生物）- -1212- - （二）、低

11、溫對(duì)微生物的影響（二）、低溫對(duì)微生物的影響 當(dāng)環(huán)境溫度低于微生物的最適生長(zhǎng)溫度時(shí)，微當(dāng)環(huán)境溫度低于微生物的最適生長(zhǎng)溫度時(shí)，微生物的生長(zhǎng)繁殖停止，當(dāng)微生物的原生質(zhì)結(jié)構(gòu)并未生物的生長(zhǎng)繁殖停止，當(dāng)微生物的原生質(zhì)結(jié)構(gòu)并未破壞時(shí)，不會(huì)很快造成死亡并能在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持破壞時(shí)，不會(huì)很快造成死亡并能在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持活力，當(dāng)溫度提高時(shí)，可以恢復(fù)正常的生命活動(dòng)?；盍?，當(dāng)溫度提高時(shí)，可以恢復(fù)正常的生命活動(dòng)。 低溫保藏菌種就是利用這個(gè)原理。一些細(xì)菌、低溫保藏菌種就是利用這個(gè)原理。一些細(xì)菌、酵母菌和霉菌的瓊脂斜面菌種通?？梢蚤L(zhǎng)時(shí)間地保酵母菌和霉菌的瓊脂斜面菌種通常可以長(zhǎng)時(shí)間地保藏在藏在4的冰箱中。的冰箱中。 當(dāng)溫度過低

12、，造成微生物細(xì)胞凍結(jié)時(shí)，有的微當(dāng)溫度過低，造成微生物細(xì)胞凍結(jié)時(shí)，有的微生物會(huì)死亡，有些則并不死亡。生物會(huì)死亡，有些則并不死亡。- -1313- -造成死亡的原因：造成死亡的原因：凍結(jié)時(shí)細(xì)胞水分變成冰晶，冰晶對(duì)細(xì)胞膜產(chǎn)生機(jī)凍結(jié)時(shí)細(xì)胞水分變成冰晶，冰晶對(duì)細(xì)胞膜產(chǎn)生機(jī)械損傷，膜內(nèi)物質(zhì)外漏。械損傷，膜內(nèi)物質(zhì)外漏。凍結(jié)過程造成細(xì)胞脫水。凍結(jié)過程造成細(xì)胞脫水。 凍結(jié)速度對(duì)冰晶形成有很大影響，凍結(jié)速度對(duì)冰晶形成有很大影響，緩慢凍結(jié)緩慢凍結(jié)，形成的冰晶大，對(duì)細(xì)胞損傷大；形成的冰晶大，對(duì)細(xì)胞損傷大；快速凍結(jié)快速凍結(jié)，形成的，形成的冰晶小、分布均勻，對(duì)細(xì)胞的損傷小，因此，利用冰晶小、分布均勻，對(duì)細(xì)胞的損傷小，因此

13、，利用快速凍結(jié)可以對(duì)一些菌種進(jìn)行快速凍結(jié)可以對(duì)一些菌種進(jìn)行凍結(jié)保藏凍結(jié)保藏，一般情況，一般情況下在菌懸液中再加一些甘油、糖、牛奶、保護(hù)劑等下在菌懸液中再加一些甘油、糖、牛奶、保護(hù)劑等可對(duì)菌種進(jìn)行長(zhǎng)期保藏?？蓪?duì)菌種進(jìn)行長(zhǎng)期保藏。- -1414- -低溫低溫低溫是通過降低酶反應(yīng)速度使微生物生低溫是通過降低酶反應(yīng)速度使微生物生長(zhǎng)受到抑制。長(zhǎng)受到抑制。冷藏法：冷藏法：55，微生物斜面菌種放置冷藏箱中可保，微生物斜面菌種放置冷藏箱中可保存數(shù)周至數(shù)月而不衰竭死亡；食品保鮮存數(shù)周至數(shù)月而不衰竭死亡；食品保鮮冷凍法：食品工業(yè)中采用冷凍法：食品工業(yè)中采用-10-10左右的冷凍溫度較左右的冷凍溫度較長(zhǎng)時(shí)間地保藏食

14、品；冷凍法也可用作菌種保藏，但長(zhǎng)時(shí)間地保藏食品；冷凍法也可用作菌種保藏，但所需溫度更低，如所需溫度更低，如-80-80低溫冰箱、或低溫冰箱、或-78-78干冰、干冰、或或-196-196液氮中冷凍保存。液氮中冷凍保存。- -1515- -（三）、高溫對(duì)微生物的影響（三）、高溫對(duì)微生物的影響高溫下蛋白質(zhì)不可逆變性，膜受熱出現(xiàn)小孔，高溫下蛋白質(zhì)不可逆變性，膜受熱出現(xiàn)小孔，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（溶菌）。破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（溶菌）。微生物對(duì)熱的耐受力與以下因素有關(guān)微生物對(duì)熱的耐受力與以下因素有關(guān):微生物種類及發(fā)育階段微生物種類及發(fā)育階段 嗜熱菌比其它類型的菌體抗熱嗜熱菌比其它類型的菌體抗熱有芽孢的細(xì)菌比無(wú)芽孢的菌抗

15、熱有芽孢的細(xì)菌比無(wú)芽孢的菌抗熱微生物的繁殖結(jié)構(gòu)比營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)抗熱性強(qiáng)微生物的繁殖結(jié)構(gòu)比營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)抗熱性強(qiáng)老齡菌比幼齡菌抗熱老齡菌比幼齡菌抗熱- -1616- -高溫滅菌（消毒）高溫滅菌（消毒）法法是最常用的物是最常用的物理方法。高溫可引理方法。高溫可引起蛋白質(zhì)、核酸等起蛋白質(zhì)、核酸等活性大分子氧化或活性大分子氧化或變性失活而導(dǎo)致微變性失活而導(dǎo)致微生物死亡。生物死亡。 火焰灼燒法烘箱熱空氣滅菌法干熱滅菌法巴氏消毒法煮沸消毒法間歇滅菌法高壓蒸汽滅菌法濕熱滅菌（消毒）法高溫滅菌（消毒）法- -1717- -1. 1. 干熱滅菌法（干熱滅菌法（dry heat sterilizationdry heat s

16、terilization）火焰滅菌法（火焰滅菌法（incinerationincineration）：）：是將被滅菌物品在火是將被滅菌物品在火焰中燃燒，使所有的生物碳化。簡(jiǎn)單、徹底，但對(duì)被滅焰中燃燒，使所有的生物碳化。簡(jiǎn)單、徹底，但對(duì)被滅菌物品的破壞極大。適用于無(wú)經(jīng)濟(jì)價(jià)值的物品滅菌，及菌物品的破壞極大。適用于無(wú)經(jīng)濟(jì)價(jià)值的物品滅菌，及不怕燒的實(shí)驗(yàn)器具，如接種環(huán)、鑷子、試管或三角瓶口不怕燒的實(shí)驗(yàn)器具，如接種環(huán)、鑷子、試管或三角瓶口的滅菌等。的滅菌等。干燥熱空氣滅菌法干燥熱空氣滅菌法(hot-air oven)(hot-air oven)：將物品放入烘箱將物品放入烘箱內(nèi)，然后升溫至內(nèi)，然后升溫至15

17、0150170 170 ，維持，維持1 12 2小時(shí)。適用小時(shí)。適用于玻璃、陶瓷和金屬物品的滅菌，不適合液體樣品，及于玻璃、陶瓷和金屬物品的滅菌，不適合液體樣品，及棉花、紙張、纖維和橡膠類物質(zhì)的滅菌。棉花、紙張、纖維和橡膠類物質(zhì)的滅菌。特點(diǎn)：由于空氣傳熱穿透力差，菌體在脫水狀態(tài)下不易特點(diǎn)：由于空氣傳熱穿透力差，菌體在脫水狀態(tài)下不易殺死，所以溫度高、時(shí)間長(zhǎng)。殺死，所以溫度高、時(shí)間長(zhǎng)。 - -1818- -2. 2. 濕熱法濕熱法(moist heat sterilization) (moist heat sterilization) ：特點(diǎn)：溫度低、時(shí)間短、滅菌效果好特點(diǎn)：溫度低、時(shí)間短、滅菌效

18、果好 原因：原因： 1) 菌體內(nèi)含水量越高，則凝固溫度越低；菌體內(nèi)含水量越高，則凝固溫度越低； 2) 蒸汽冷凝會(huì)放出潛熱；蒸汽冷凝會(huì)放出潛熱； 3) 飽和水蒸汽穿透力強(qiáng)；飽和水蒸汽穿透力強(qiáng)； 4) 濕熱易破壞細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)大分子的穩(wěn)定濕熱易破壞細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)大分子的穩(wěn)定 性，主要破壞氫鍵結(jié)構(gòu)。性，主要破壞氫鍵結(jié)構(gòu)。- -1919- -（1 1）煮沸消毒法）煮沸消毒法將水加熱至將水加熱至100100，煮沸，煮沸15min15min30min30min，可殺死所有營(yíng)養(yǎng)細(xì)可殺死所有營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢，達(dá)到消毒物的目的。胞和部分芽孢，達(dá)到消毒物的目的。外科手術(shù)器械、注射器、針頭等，經(jīng)煮沸外科手術(shù)器械、注射

19、器、針頭等，經(jīng)煮沸151520min20min可殺死可殺死細(xì)菌的繁殖體；細(xì)菌的繁殖體；水中加入水中加入2 25 5石炭酸，能增強(qiáng)殺菌力，經(jīng)石炭酸，能增強(qiáng)殺菌力，經(jīng)15min15min的煮沸的煮沸可殺死炭疽的芽孢；可殺死炭疽的芽孢；若水中加入若水中加入1 1碳酸鈉，可使溶液碳酸鈉，可使溶液pHpH偏堿性，也增強(qiáng)殺菌力，偏堿性，也增強(qiáng)殺菌力，同時(shí)還具有減緩金屬氧化的防銹作用。同時(shí)還具有減緩金屬氧化的防銹作用。 - -2020- -（2 2）間歇滅菌法：）間歇滅菌法： 將待滅菌物品在將待滅菌物品在8080-100-100蒸煮蒸煮15-60min15-60min，冷卻后擱置室溫（冷卻后擱置室溫（28-

20、3728-37）下過夜，并重復(fù)以）下過夜，并重復(fù)以上過程三遍以上。上過程三遍以上。 其蒸煮過程可殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)體，但不其蒸煮過程可殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)體，但不能殺死芽胞，室溫過夜促使殘留的芽孢萌發(fā)成能殺死芽胞，室溫過夜促使殘留的芽孢萌發(fā)成營(yíng)養(yǎng)體，再經(jīng)蒸煮過程可殺死新的營(yíng)養(yǎng)體；循營(yíng)養(yǎng)體，再經(jīng)蒸煮過程可殺死新的營(yíng)養(yǎng)體；循環(huán)三次以上可保證徹底滅菌的目的。環(huán)三次以上可保證徹底滅菌的目的。 適用于不耐高溫的物品滅菌，如不適于高適用于不耐高溫的物品滅菌，如不適于高壓滅菌的特殊培養(yǎng)基、藥品的滅菌。壓滅菌的特殊培養(yǎng)基、藥品的滅菌。 缺點(diǎn)是麻煩、費(fèi)時(shí)。缺點(diǎn)是麻煩、費(fèi)時(shí)。- -2121- -（3 3）巴斯德消毒法（

21、）巴斯德消毒法（PasteurizationPasteurization）：）： 用較低的溫度來殺死其中的病原微生物，這樣用較低的溫度來殺死其中的病原微生物，這樣既保持食品的營(yíng)養(yǎng)風(fēng)味，又進(jìn)行了消毒既保持食品的營(yíng)養(yǎng)風(fēng)味，又進(jìn)行了消毒該法一般是將待消毒的液體食品置于該法一般是將待消毒的液體食品置于6262處理處理3030minmin，然后然后迅速冷卻。即可達(dá)到消毒目的。迅速冷卻。即可達(dá)到消毒目的。低溫長(zhǎng)時(shí)法低溫長(zhǎng)時(shí)法(Low temperature long (Low temperature long time,LTLTtime,LTLT) )： 62.930min62.930min處理牛奶處理牛

22、奶高溫瞬時(shí)法（高溫瞬時(shí)法（Hightemperatureshorttime,HTSTHightemperatureshorttime,HTST):): 71.615s71.615s處理牛奶處理牛奶超高溫巴斯德滅菌法超高溫巴斯德滅菌法( (UltrapasteurizationUltrapasteurization):): 讓液體食品停留在讓液體食品停留在140140左右左右1-2s1-2s，急劇冷卻至急劇冷卻至7575，經(jīng)勻質(zhì)化后冷卻至經(jīng)勻質(zhì)化后冷卻至2020。- -2222- -（4 4）高壓蒸汽滅菌法）高壓蒸汽滅菌法 利用水的沸點(diǎn)隨水蒸氣壓力的增加而上升，以達(dá)到利用水的沸點(diǎn)隨水蒸氣壓力的增

23、加而上升，以達(dá)到100 100 以上高溫滅菌的方法。以上高溫滅菌的方法。 方法：方法：121121（1kg/cm1kg/cm2 2或或1515磅磅/ /英寸英寸2 2）維持）維持1515-20min-20min。 11115 5（0.750.75kg/cmkg/cm2 2或或1111磅磅/ /英寸英寸2 2）2020- -3 30min0min。應(yīng)根據(jù)滅菌物品的性質(zhì)或成分選擇滅菌溫度應(yīng)根據(jù)滅菌物品的性質(zhì)或成分選擇滅菌溫度例如：例如：生理鹽水、營(yíng)養(yǎng)瓊脂等培養(yǎng)基用生理鹽水、營(yíng)養(yǎng)瓊脂等培養(yǎng)基用121 121 。 含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培養(yǎng)基用含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培養(yǎng)基用112 112 。適用：

24、適用：耐高溫物品，玻璃儀器、含水或不含水的物品。耐高溫物品，玻璃儀器、含水或不含水的物品。 - -2323- -高高 壓壓 蒸蒸 汽汽 滅滅 菌菌 鍋鍋?zhàn)⒁馐马?xiàng)：注意事項(xiàng)：排凈冷空氣；排凈冷空氣； 滅菌終了，緩慢降壓；滅菌終了，緩慢降壓； 滅菌結(jié)束，趁熱取出物品。滅菌結(jié)束，趁熱取出物品。- -2424- - -2525- -高溫對(duì)培養(yǎng)基的影響及其防止措施高溫對(duì)培養(yǎng)基的不利影響：高溫對(duì)培養(yǎng)基的不利影響：會(huì)產(chǎn)生混濁或形成不溶性沉淀會(huì)產(chǎn)生混濁或形成不溶性沉淀營(yíng)養(yǎng)成分被破壞（營(yíng)養(yǎng)成分被破壞（ POPO4 4-3-3存在，葡萄糖生成酮糖，存在，葡萄糖生成酮糖，菌不利用菌不利用）；）；色澤加深（褐變?nèi)绠a(chǎn)生

25、氨基糖等）；色澤加深（褐變?nèi)绠a(chǎn)生氨基糖等）；改變培養(yǎng)基的改變培養(yǎng)基的pH值值（通常下降（通常下降0.20.2） ；形成有害物質(zhì)，抑制微生物生長(zhǎng)；形成有害物質(zhì)，抑制微生物生長(zhǎng)；消除有害影響的措施消除有害影響的措施 采用特殊的加熱滅菌法采用特殊的加熱滅菌法 過濾除菌法過濾除菌法 加入螯合劑加入螯合劑- -2626- -四、光四、光 線線日光光譜包括紅外線、可見光線和紫外光。日光光譜包括紅外線、可見光線和紫外光?？梢姽鈱?duì)微生物的危害作用雖然不大，但長(zhǎng)時(shí)間作可見光對(duì)微生物的危害作用雖然不大，但長(zhǎng)時(shí)間作用也能妨礙微生物的新陳代謝。用也能妨礙微生物的新陳代謝。故培養(yǎng)和保存菌種都必須在陰暗處，常用箱內(nèi)無(wú)光故

26、培養(yǎng)和保存菌種都必須在陰暗處，常用箱內(nèi)無(wú)光線的恒溫箱培養(yǎng)微生物，用冰箱保存菌種。線的恒溫箱培養(yǎng)微生物，用冰箱保存菌種。- -2727- -四、光四、光 線線光感作用：光感作用：可見光具有微弱的殺菌作用，若將某些可見光具有微弱的殺菌作用，若將某些染料，如結(jié)晶紫、美藍(lán)、紅汞、伊紅及沙黃等加到培染料，如結(jié)晶紫、美藍(lán)、紅汞、伊紅及沙黃等加到培養(yǎng)基中或涂在外傷表面，能增強(qiáng)可見光的殺菌作用，養(yǎng)基中或涂在外傷表面，能增強(qiáng)可見光的殺菌作用，稱為光感作用稱為光感作用(photosensitization)。一般是在有氧的情況下才出現(xiàn)光感作用，這與染料一般是在有氧的情況下才出現(xiàn)光感作用，這與染料激活氧或染料氧化后

27、生成氧化物而起殺菌作用有關(guān)。激活氧或染料氧化后生成氧化物而起殺菌作用有關(guān)。一些病毒、細(xì)菌、毒素經(jīng)光感作用后，可失去活性，一些病毒、細(xì)菌、毒素經(jīng)光感作用后，可失去活性，但仍有抗原性，可制成滅活疫苗。但仍有抗原性，可制成滅活疫苗。- -2828- -紫外線滅菌紫外線滅菌 波長(zhǎng)波長(zhǎng)200320nm紫外線具有殺菌作用，其中紫外線具有殺菌作用，其中265266nm波長(zhǎng)的紫外線的殺菌力最強(qiáng)。波長(zhǎng)的紫外線的殺菌力最強(qiáng)。 使用紫外燈照射，可以根據(jù)使用紫外燈照射，可以根據(jù)1 1W/MW/M3 3來計(jì)算劑量，來計(jì)算劑量，若以面積若以面積計(jì)算，一般計(jì)算，一般3030W W的紫外燈可用于的紫外燈可用于1515M M2

28、 2的房間消毒，照射時(shí)間為的房間消毒，照射時(shí)間為2020-30-30分鐘，有效照射距離為分鐘，有效照射距離為1 1米左右。米左右。- -2929- -紫外線滅菌紫外線滅菌作用主要表現(xiàn)在兩個(gè)方面：作用主要表現(xiàn)在兩個(gè)方面： 一方面，細(xì)菌一方面，細(xì)菌DNADNA鏈吸收足夠劑量的、鏈吸收足夠劑量的、260nm260nm左右的左右的紫外線后，同一鏈中的相鄰兩個(gè)胸腺嘧啶形成二聚體，紫外線后，同一鏈中的相鄰兩個(gè)胸腺嘧啶形成二聚體，DNADNA分子不能進(jìn)行正常的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，發(fā)生致死性突變分子不能進(jìn)行正常的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，發(fā)生致死性突變而死亡。而死亡。 另一方面，紫外線使空氣中的氧變成臭氧，臭氧放另一方面，紫外線使

29、空氣中的氧變成臭氧，臭氧放出的原子氧，也具有強(qiáng)烈氧化殺菌作用。出的原子氧，也具有強(qiáng)烈氧化殺菌作用。- -3030- -五、射五、射 線線 X X、射線射線 ，波長(zhǎng)短，能量高，有較，波長(zhǎng)短，能量高，有較強(qiáng)的殺傷力。強(qiáng)的殺傷力。作用原理作用原理 ：可引起水和其他物質(zhì)的電離，產(chǎn)生游可引起水和其他物質(zhì)的電離，產(chǎn)生游離基，使核酸離基，使核酸、蛋白質(zhì)或酶發(fā)生變化，造成細(xì)胞損蛋白質(zhì)或酶發(fā)生變化，造成細(xì)胞損傷或死亡。傷或死亡。 特點(diǎn)：特點(diǎn)：穿透力強(qiáng)，非專一性，作用于一切穿透力強(qiáng)，非專一性，作用于一切細(xì)胞細(xì)胞成分，成分，對(duì)所有生物均有殺傷作用。對(duì)所有生物均有殺傷作用。 應(yīng)用：用于殺菌或菌種誘變。應(yīng)用：用于殺菌或

30、菌種誘變。- -3131- -采用濾孔比細(xì)菌還小的篩子或?yàn)V膜作成各種采用濾孔比細(xì)菌還小的篩子或?yàn)V膜作成各種過濾器，當(dāng)空氣或液體流經(jīng)篩子或?yàn)V膜時(shí)，過濾器，當(dāng)空氣或液體流經(jīng)篩子或?yàn)V膜時(shí)，微生物不能通過濾孔而被阻留在一側(cè)，從而微生物不能通過濾孔而被阻留在一側(cè)，從而達(dá)到滅菌的目的。但不能除去病毒。達(dá)到滅菌的目的。但不能除去病毒。濾器孔徑：濾器孔徑：常用常用0 0.22 .22 m 、0.45 m 。應(yīng)用：應(yīng)用：對(duì)于含酶、血清、維生素和氨基酸等對(duì)于含酶、血清、維生素和氨基酸等熱敏物質(zhì)除菌。熱敏物質(zhì)除菌。六、過濾除菌法六、過濾除菌法- -3232- -微波：微波：微波的范圍在微波的范圍在915915245

31、02450MHz/sMHz/s之間之間。機(jī)理：機(jī)理：微波產(chǎn)生熱效應(yīng)，使蛋白質(zhì)、酶等物質(zhì)變微波產(chǎn)生熱效應(yīng)，使蛋白質(zhì)、酶等物質(zhì)變性，導(dǎo)致微生物死亡。性，導(dǎo)致微生物死亡。 特點(diǎn)：特點(diǎn)：加熱均勻，熱能利用率高、加熱時(shí)間短。加熱均勻，熱能利用率高、加熱時(shí)間短。應(yīng)用：應(yīng)用：食品消毒、滅菌。食品消毒、滅菌。 七、七、微波與超聲波微波與超聲波- -3333- -超聲波：超聲波：每秒鐘振動(dòng)在每秒鐘振動(dòng)在16001600以上的聲波。以上的聲波。機(jī)理：機(jī)理：引起膜破壞，細(xì)胞破裂，內(nèi)涵物逸出。引起膜破壞，細(xì)胞破裂，內(nèi)涵物逸出。 應(yīng)用：應(yīng)用：o破碎細(xì)胞，提取胞內(nèi)物質(zhì)（代謝產(chǎn)物、酶等）破碎細(xì)胞，提取胞內(nèi)物質(zhì)（代謝產(chǎn)物、酶

32、等）o殺菌殺菌, ,超聲波殺菌效力大小與頻率、強(qiáng)度、處超聲波殺菌效力大小與頻率、強(qiáng)度、處理時(shí)間等多種因素有關(guān)。理時(shí)間等多種因素有關(guān)。七、七、微波與超聲波微波與超聲波- -3434- - -3535- -消毒劑消毒劑: :可以抑制或殺滅微生物，但對(duì)人體也可能可以抑制或殺滅微生物，但對(duì)人體也可能產(chǎn)生有害作用的化學(xué)試劑產(chǎn)生有害作用的化學(xué)試劑. .主要用于抑制或殺滅主要用于抑制或殺滅物體表面、器械、排泄物和環(huán)境中的微生物。物體表面、器械、排泄物和環(huán)境中的微生物。防腐劑防腐劑: :可以抑制或阻止微生物生長(zhǎng)，但對(duì)人體或可以抑制或阻止微生物生長(zhǎng)，但對(duì)人體或動(dòng)物體的毒性較低的化學(xué)藥劑動(dòng)物體的毒性較低的化學(xué)藥劑

33、. .用于肌體表面，用于肌體表面，如皮膚、粘膜、傷口等處防止感染，也有的用于食如皮膚、粘膜、傷口等處防止感染，也有的用于食品、飲料藥品的防腐作用。品、飲料藥品的防腐作用。消毒劑和防腐劑消毒劑和防腐劑第二節(jié)第二節(jié) 化學(xué)因素化學(xué)因素- -3636- -(一一)化學(xué)物質(zhì)的性質(zhì)化學(xué)物質(zhì)的性質(zhì) 化學(xué)消毒劑對(duì)微生物和動(dòng)物機(jī)體細(xì)胞化學(xué)消毒劑對(duì)微生物和動(dòng)物機(jī)體細(xì)胞都有毒性，故只能用于局部消毒。都有毒性，故只能用于局部消毒。(二二)化學(xué)物質(zhì)的濃度化學(xué)物質(zhì)的濃度 一般來說化學(xué)消毒劑的濃度愈大，其一般來說化學(xué)消毒劑的濃度愈大，其對(duì)微生物的作用愈強(qiáng)。對(duì)微生物的作用愈強(qiáng)。 (三三)作用時(shí)間與其他環(huán)境條件作用時(shí)間與其他環(huán)

34、境條件 化學(xué)消毒劑殺死微生物所需化學(xué)消毒劑殺死微生物所需時(shí)間的長(zhǎng)短，與其本身的性質(zhì)、濃度、溫度、作用時(shí)微生物時(shí)間的長(zhǎng)短，與其本身的性質(zhì)、濃度、溫度、作用時(shí)微生物所處的環(huán)境及微生物的種類等有密切關(guān)系。所處的環(huán)境及微生物的種類等有密切關(guān)系。(四四)微生物的種類微生物的種類 微生物由于形態(tài)結(jié)構(gòu)和代謝方式等生物微生物由于形態(tài)結(jié)構(gòu)和代謝方式等生物學(xué)特性的不同，對(duì)化學(xué)物質(zhì)所呈現(xiàn)的反應(yīng)亦有差異。學(xué)特性的不同，對(duì)化學(xué)物質(zhì)所呈現(xiàn)的反應(yīng)亦有差異。一、影響消毒劑作用的因素一、影響消毒劑作用的因素第二節(jié)第二節(jié) 化學(xué)因素化學(xué)因素- -3737- -(1)(1)消毒劑應(yīng)具有強(qiáng)大的殺菌力，穿透力，奏效快。消毒劑應(yīng)具有強(qiáng)大的

35、殺菌力，穿透力，奏效快。(2)(2)易溶于水，使用方便，價(jià)格低廉。易溶于水，使用方便，價(jià)格低廉。(3)(3)性質(zhì)穩(wěn)定，不易氧化分解，不易燃易爆，便于貯存。性質(zhì)穩(wěn)定，不易氧化分解，不易燃易爆，便于貯存。(4)(4)對(duì)動(dòng)物機(jī)體應(yīng)無(wú)毒性或毒性較小。對(duì)衣物、用具、金對(duì)動(dòng)物機(jī)體應(yīng)無(wú)毒性或毒性較小。對(duì)衣物、用具、金屬制品屬制品( (如鐵絲籠、儀器設(shè)備、器械等如鐵絲籠、儀器設(shè)備、器械等) )無(wú)腐蝕性。無(wú)殘無(wú)腐蝕性。無(wú)殘留，對(duì)環(huán)境無(wú)污染。留，對(duì)環(huán)境無(wú)污染。(5)(5)殺菌力不受或少受膿汁、血液、壞死組織、糞便、痰殺菌力不受或少受膿汁、血液、壞死組織、糞便、痰等有機(jī)物存在的影響。等有機(jī)物存在的影響。二、選擇消毒

36、劑時(shí)應(yīng)注意的問題二、選擇消毒劑時(shí)應(yīng)注意的問題第二節(jié)第二節(jié) 化學(xué)因素化學(xué)因素- -3838- -概念概念：是指那些是指那些能夠特異性地作用于某些微生物能夠特異性地作用于某些微生物并并具有選擇毒性具有選擇毒性的化學(xué)藥劑，它們與非特異的化的化學(xué)藥劑，它們與非特異的化學(xué)藥劑相比對(duì)人體幾乎沒有什么毒性或毒性很小，學(xué)藥劑相比對(duì)人體幾乎沒有什么毒性或毒性很小，可用作治療微生物引起的疾病?？捎米髦委熚⑸镆鸬募膊?。既適用于涂抹肌體表面，也始于通過口服或注射既適用于涂抹肌體表面，也始于通過口服或注射吸收到體內(nèi)。吸收到體內(nèi)。 種類：種類： 抗代謝藥物抗代謝藥物人工合成的人工合成的 抗生素抗生素微生物所產(chǎn)生的微生

37、物所產(chǎn)生的三、抗微生物藥物三、抗微生物藥物- -3939- -概念：概念：有些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體有些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝所必需的代謝物物很相似，以致于可以和特定的酶結(jié)合，從而阻礙很相似，以致于可以和特定的酶結(jié)合，從而阻礙酶的功能，干擾代謝的正常進(jìn)行，這些物質(zhì)叫酶的功能，干擾代謝的正常進(jìn)行，這些物質(zhì)叫抗代抗代謝物謝物，用于疾病治療，稱抗代謝類藥物，如：磺胺，用于疾病治療，稱抗代謝類藥物，如：磺胺類藥物。類藥物。機(jī)理：機(jī)理：作為菌細(xì)胞基本生長(zhǎng)因子的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑作為菌細(xì)胞基本生長(zhǎng)因子的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（與相應(yīng)酶競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合）（與相應(yīng)酶競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合）而阻止微生物對(duì)生長(zhǎng)因子而阻止微生物對(duì)生長(zhǎng)因

38、子的利用，因而可以抑制微生物的生長(zhǎng)。的利用，因而可以抑制微生物的生長(zhǎng)。只有當(dāng)正常只有當(dāng)正常代謝產(chǎn)物的量少或不存在時(shí)，抗代謝物才有用。代謝產(chǎn)物的量少或不存在時(shí)，抗代謝物才有用。 1、抗代謝類藥物（生長(zhǎng)因子類似物）、抗代謝類藥物（生長(zhǎng)因子類似物）:- -4040- - 二二氫蝶氫蝶啶啶 + +對(duì)氨基本甲酸對(duì)氨基本甲酸 二氫葉酸二氫葉酸 四氫葉酸四氫葉酸 輔酶輔酶F F磺胺藥磺胺藥 核酸合成核酸合成二氫葉酸合成酶二氫葉酸還原酶細(xì)菌需要利用對(duì)氨基本甲酸合成生長(zhǎng)所需的葉酸：細(xì)菌需要利用對(duì)氨基本甲酸合成生長(zhǎng)所需的葉酸：磺胺藥作用機(jī)理：磺胺藥作用機(jī)理：- -4141- -概念：概念：抗生素：抗生素：微生物在其生命過程中所產(chǎn)生的一類微生物在其生命過程中所產(chǎn)生的一類低分子低分子量量代謝產(chǎn)物，在代謝產(chǎn)物，在很低濃度下很低濃度下就能抑制或殺死其它微生就能抑制或殺死其它微生物的生長(zhǎng)。物的生長(zhǎng)。最小抑制濃度最小抑制濃度（Minimal Inhibitory Minimal Inhibitory Concentration,MICConcentration,MIC）: :表示抗生素的抗菌活性，單位表示抗生素的抗菌活性，單位是是