多種方法校準(zhǔn)血液分析儀結(jié)果比較與分析

1、.多種方法校準(zhǔn)血液分析儀結(jié)果比較與分析【摘要】目的探討血液分析儀校準(zhǔn)的正確方法。方法分別用配套校準(zhǔn)物、非配套校準(zhǔn)物和質(zhì)控物在4臺(tái)不同類型的血液分析儀上進(jìn)行儀器校準(zhǔn)后，再比較新鮮血用各儀器測(cè)定全血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果的可比性和偏差。結(jié)果用配套校準(zhǔn)物校準(zhǔn)的3臺(tái)儀器測(cè)定新鮮血的全血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果非常接近，無(wú)配套校準(zhǔn)物的一臺(tái)儀器測(cè)定新鮮血血小板時(shí)結(jié)果明顯偏低。用非配套校準(zhǔn)物或質(zhì)控物校準(zhǔn)儀器后，新鮮血的白細(xì)胞、血小板和血細(xì)胞比容的偏差明顯增大。結(jié)論血液分析儀的校準(zhǔn)應(yīng)使用配套的校準(zhǔn)物或可靠定值的新鮮血。為了了解用不同方法校準(zhǔn)血液分析儀后新鮮血在不同儀器上測(cè)定結(jié)果的差別，探討血液分析儀校準(zhǔn)的正確方法，我們用配套校準(zhǔn)物

2、、非配套校準(zhǔn)物和質(zhì)控物分別對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)后比較新鮮血在不同血液分析儀上測(cè)定結(jié)果的差別。材料和方法一、材料1.儀器及試劑：Sysmex F-820血液分析儀及進(jìn)口配套試劑；Abbott CD-3500血液分析儀及進(jìn)口配套試劑；Coulter JT血液分析儀及進(jìn)口配套試劑；MEK-6318血液分析儀及進(jìn)口配套試劑。2.校準(zhǔn)物及質(zhì)控物：Sysmex F-820血液分析儀的配套校準(zhǔn)物SCS-1000，日本Sysmex公司生產(chǎn)，批號(hào)90820525；Abbott CD-3500血液分析儀的配套校準(zhǔn)物CELL-DYN 3000系列校準(zhǔn)物，美國(guó)Abbott公司生產(chǎn)，批號(hào)CD3054；Coulter JT血液

3、分析儀的配套校準(zhǔn)物S-CAL，美國(guó)Coulter公司生產(chǎn)，批號(hào)5736；MEK-6318血液分析儀配套質(zhì)控物，日本光電公司生產(chǎn)，批號(hào)BO29W；JT血液分析儀的配套4C質(zhì)控物，美國(guó)Coulter公司生產(chǎn)，批號(hào)0075900。3. EDTA-K3真空抗凝管，美國(guó)BD公司生產(chǎn)，批號(hào)8E832。二、方法1.用1份正常人依地酸(EDTA)抗凝的新鮮血在各臺(tái)儀器上連續(xù)測(cè)定20次，分別計(jì)算血紅蛋白(Hb)、RBC、WBC、血小板(PLT)、血細(xì)胞比容(HCT)、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）和平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）8個(gè)參數(shù)20次重復(fù)測(cè)定結(jié)果的變異系數(shù)。2.分別用配套

4、的校準(zhǔn)物對(duì)F-820、JT和CD-3500儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，用MEK-6318儀器配套的質(zhì)控物對(duì)該儀器進(jìn)行校準(zhǔn)(MEK-6318儀器無(wú)配套校準(zhǔn)物)，按廠家規(guī)定用其配套質(zhì)控物進(jìn)行儀器校準(zhǔn)。3.取5份正常人EDTA抗凝的新鮮血，分別在校準(zhǔn)后的各臺(tái)儀器上進(jìn)行測(cè)定，每份標(biāo)本測(cè)定4次，計(jì)算出各臺(tái)儀器5份標(biāo)本20次測(cè)定結(jié)果的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。以F-820、JT和CD-3500 3臺(tái)儀器(使用配套校準(zhǔn)物的儀器)測(cè)定結(jié)果的均值為靶值，計(jì)算各儀器測(cè)定結(jié)果與靶值的偏差。4.用S-Cal校準(zhǔn)物分別對(duì)上述各臺(tái)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，計(jì)算出各臺(tái)儀器5份標(biāo)本20次測(cè)定結(jié)果的均值。以JT儀器測(cè)定結(jié)果的均值為靶值，計(jì)算其他3臺(tái)儀器測(cè)定結(jié)果與靶

5、值的偏差。5.用SCS-1000校準(zhǔn)物分別對(duì)上述各臺(tái)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，計(jì)算出各臺(tái)儀器5份標(biāo)本20次測(cè)定結(jié)果的均值。以F-820儀器測(cè)定結(jié)果的均值為靶值，計(jì)算其他3臺(tái)儀器測(cè)定結(jié)果與靶值的偏差。6.用4C質(zhì)控物分別對(duì)上述各臺(tái)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，計(jì)算出各臺(tái)儀器5份標(biāo)本20次測(cè)定結(jié)果的均值。以JT儀器測(cè)定結(jié)果的均值為靶值，計(jì)算其他3臺(tái)儀器測(cè)定結(jié)果與靶值的偏差。結(jié)果對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較時(shí)，我們用A、B、C、D分別代表所用的4種儀器。一、各儀器測(cè)定結(jié)果的重復(fù)性比較結(jié)果見(jiàn)表1。 表1各儀器重復(fù)測(cè)定結(jié)果的變異系數(shù)（%）儀器WBC RBCHbHCTMCVMCHMCHCPLTA1.61.21.11.20.30.70.62.7

6、B2.51.00.81.10.51.21.22.5C1.60.70.61.20.80.71.13.3D0.90.90.50.90.31.21.21.9二、各儀器測(cè)定結(jié)果的可比性1.用配套校準(zhǔn)物校準(zhǔn)后(D儀器除外)，5份不同含量新鮮血測(cè)定結(jié)果的均值及標(biāo)準(zhǔn)差見(jiàn)表2。 表25份不同含量的正常新鮮血測(cè)定結(jié)果（±S）儀器WBC (×109/L)RBC (×1012/L) Hb (g/L) HCT (%)A 6.0±1.4 4.6±0.4 144.1±10.9 40.7±3.2B 6.2±1.4 4.6±0.5 14

7、0.2±11.8 40.2±3.6C 6.3±1.6 4.5±0.5 138.4±12.2 41.5±3.7D 6.2±1.6 4.5±0.5 138.3±11.8 41.6±3.7儀器MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/L)PLT(×109/L)A89.0±3.031.4±1.235.3±0.4259.1±86.6B87.8±3.130.6±1.334.9±0.7251.4±74.2C93.3

8、77;3.331.0±1.433.3±0.5258.2±91.6D92.1±3.431.0±1.433.3±0.5217.2±75.62.用配套校準(zhǔn)物進(jìn)行校準(zhǔn)后(D儀器除外)，各儀器新鮮血測(cè)定結(jié)果與A、B、C 3臺(tái)儀器測(cè)定均值的偏差見(jiàn)表3。 表3用配套校準(zhǔn)物校準(zhǔn)后的偏差（%）儀器WBCRBCHbHCTMCVMCHMCHCPLTA-2.50.82.3-0.3-1.11.32.31.2B0.21.0-0.5-1.5-2.5-1.31.2-2.0C2.3-1.8-1.91.73.6-0.03-3.50.8D-0.3-0.3-1.9

9、2.02.30.1-3.5-15.2三、用非配套校準(zhǔn)物或質(zhì)控物校準(zhǔn)儀器后，各項(xiàng)目測(cè)定結(jié)果的偏差比較1.用S-CAL校準(zhǔn)非配套儀器后，3臺(tái)儀器新鮮血測(cè)定結(jié)果與JT儀器測(cè)定值的偏差見(jiàn)表4。表4用S-CAL校準(zhǔn)后的偏差（%）儀器WBCRBCHbHCTMCVPLTA1.41.101.90.9-15.1B56.30.90-4.1-5.3-15.9C-2.40.4-0.7-4.3-4.6-20.92.用SCS-1000校準(zhǔn)非配套儀器后，3臺(tái)儀器新鮮血測(cè)定結(jié)果與F-820儀器測(cè)定值的偏差見(jiàn)表5。表5用SCS-1000校準(zhǔn)后的偏差（%）儀器WBCRBCHbHCTMCVMCHMCHCPLTA-7.9-1.5-2

10、.8-12.3-3.5-1.02.8-7.7B-5.1-1.1-2.8-5.93.3-1.9-4.510.4C-6.6-2.0-2.8-13.5-4.50.34.0-13.13.用4C質(zhì)控物校準(zhǔn)儀器后，新鮮血測(cè)定結(jié)果與JT儀器測(cè)定值的偏差見(jiàn)表6。表6用4C質(zhì)控物校準(zhǔn)后的偏差（%）儀器WBCRBCHbHCTMCVMCHMCHCPLTA3.90.90.71.20.3-0.6-1.2-7.9B56.13.01.5-4.7-7.1-1.36.2-6.0C-4.9-0.9-0.7-6.6-5.51.35.9-17.9四、分別用配套校準(zhǔn)物和質(zhì)控物校準(zhǔn)儀器后的結(jié)果比較以S-CAL校準(zhǔn)儀器后JT儀器測(cè)定新鮮血

11、結(jié)果的均值為靶值，計(jì)算用4C質(zhì)控物校準(zhǔn)JT儀器后新鮮血測(cè)定結(jié)果與靶值的偏差，各測(cè)定項(xiàng)目的偏差為WBC -3.8%，RBC -1.3%，Hb -1.4%，HCT1.7%，MCV 2.8%，MCH 0，MCHC -2.7%，PLT 2.3%。討論血細(xì)胞計(jì)數(shù)自動(dòng)化程度的不斷提高為臨床提供了更多更可靠的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，也大大提高了工作效率，但一部分實(shí)驗(yàn)室在使用血液分析儀時(shí)仍存在一些問(wèn)題，影響了測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。在開展全國(guó)血液學(xué)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)活動(dòng)的過(guò)程中，我們了解到血液分析儀校準(zhǔn)方面存在的問(wèn)題較為突出1，主要表現(xiàn)在一些實(shí)驗(yàn)室未用任何方式校準(zhǔn)過(guò)儀器或使用非配套的校準(zhǔn)物、質(zhì)控物校準(zhǔn)儀器，一些儀器本身就沒(méi)有配套的校

12、準(zhǔn)物致使使用者不知用何種方法校準(zhǔn)儀器，為了說(shuō)明用不同方法校準(zhǔn)儀器后新鮮血測(cè)定結(jié)果的差別，與同道們共同探討血液分析儀校準(zhǔn)的正確方法，我們進(jìn)行了本次實(shí)驗(yàn)。表1的數(shù)據(jù)表明，本次實(shí)驗(yàn)所用的4臺(tái)儀器測(cè)定新鮮血結(jié)果的重復(fù)性良好，具備了進(jìn)行儀器校準(zhǔn)的前提條件。在比較各儀器測(cè)定結(jié)果的可比性時(shí)，表2和表3的數(shù)據(jù)表明，使用配套校準(zhǔn)物進(jìn)行校準(zhǔn)的3臺(tái)儀器，測(cè)定新鮮血8個(gè)參數(shù)的結(jié)果非常接近，而無(wú)配套校準(zhǔn)物的1臺(tái)儀器，在測(cè)定血小板時(shí)結(jié)果明顯偏低。用Coulter配套校準(zhǔn)物校準(zhǔn)其他3臺(tái)儀器時(shí)，有1臺(tái)儀器的WBC測(cè)定結(jié)果急劇增大，偏差達(dá)56.3%，3臺(tái)儀器PLT測(cè)定結(jié)果的偏差均有明顯增大。用Sysmex儀器的配套校準(zhǔn)物校準(zhǔn)其

13、他3臺(tái)儀器時(shí)，HCT、WBC和PLT測(cè)定結(jié)果的偏差均有明顯增大，其中以HCT測(cè)定結(jié)果的偏差增大最為明顯。用Coulter 4C質(zhì)控物校準(zhǔn)除JT以外的其他3臺(tái)儀器時(shí)，其中1臺(tái)儀器的WBC測(cè)定結(jié)果的偏差達(dá)56.1%，PLT和HCT測(cè)定結(jié)果的偏差也有明顯增大。JT儀器用4C質(zhì)控物校準(zhǔn)后的新鮮血測(cè)定結(jié)果與配套校準(zhǔn)物校準(zhǔn)后的測(cè)定結(jié)果比較存在一定的差別，但偏差在可接受的范圍內(nèi)?？梢?jiàn)在使用配套試劑和開展室內(nèi)質(zhì)控的前提下，用配套校準(zhǔn)物校準(zhǔn)儀器能保證新鮮血測(cè)定結(jié)果的可靠性。用非配套的校準(zhǔn)物或質(zhì)控物進(jìn)行校準(zhǔn)時(shí)，新鮮血測(cè)定結(jié)果的偏差增大，主要表現(xiàn)在WBC、PLT和HCT參數(shù)的偏差增大，不同的校準(zhǔn)物導(dǎo)致不同儀器和參數(shù)

14、偏差增大的程度不同，這主要是由于儀器的測(cè)定原理與校準(zhǔn)物的特性不匹配造成的。故在校準(zhǔn)血液分析儀時(shí)，我們建議有條件的實(shí)驗(yàn)室，用儀器生產(chǎn)廠家推薦使用的配套校準(zhǔn)物進(jìn)行儀器校準(zhǔn)，或取新鮮血直接用參考方法即氰化高鐵Hb分光光度法，校準(zhǔn)血紅蛋白參數(shù)2，用微量壓積離心法進(jìn)行壓積的校準(zhǔn)3。對(duì)于使用無(wú)配套校準(zhǔn)物儀器的實(shí)驗(yàn)室，可取新鮮血用經(jīng)配套校準(zhǔn)物校準(zhǔn)后的儀器（最好是使用配套試劑，正確開展室內(nèi)質(zhì)控的儀器）定值后，將定值的新鮮血作為校準(zhǔn)物進(jìn)行儀器校準(zhǔn)。國(guó)際公認(rèn)的質(zhì)量較好的儀器生產(chǎn)廠家提供的質(zhì)控物有一個(gè)相對(duì)可靠的定值范圍，但質(zhì)控物與校準(zhǔn)物仍是有差別的，校準(zhǔn)物的特性更接近新鮮血，且配套系列的不同型號(hào)儀器所用的靶值是不一

15、定相同的。用Coulter 4C質(zhì)控物或國(guó)產(chǎn)的所謂定值質(zhì)控物(廠家提供一種靶值用于各種儀器的校準(zhǔn))校準(zhǔn)各種不同系列不同型號(hào)儀器的校準(zhǔn)方法是不正確的。我們相信隨著各實(shí)驗(yàn)室管理和操作者認(rèn)識(shí)水平的不斷提高，血液分析儀測(cè)定結(jié)果的可比性和可靠性將得到較大提高。參考文獻(xiàn)1.Mingting PENG， Xiaolin GU， Wei WANG， et al. External quality assessment survey for hematological laboratories in china. Sysmex Journal International， 1998，8: 79-81.2.ICSH. Recommendations for reference method for haemoglobinometry in human blood (ICSH standard 1995) and