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1、臨床檢驗(yàn)儀器的常用性能指標(biāo): 靈敏性,誤差,噪音,最小檢測(cè)量, 精確度,可靠性,重復(fù)性,分辨率,測(cè)量范圍和示值范圍,線性范圍,響應(yīng)時(shí)間,頻率響應(yīng)范圍。光學(xué)顯微鏡的工作原理:利用光學(xué)原理,把人眼所不能分辨的微小物體放大成像,供人們提取物質(zhì)微細(xì)結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。由兩組會(huì)聚透鏡組成光學(xué)折射成像系統(tǒng)。把焦距較短、靠近觀察物、成實(shí)像的透鏡組成為物鏡;焦距較長(zhǎng),靠近眼睛、成虛像的透鏡組稱為目鏡。 被觀察物體位于物鏡的前方,被物鏡作第一級(jí)放大后成一倒立的實(shí)像, 然后此實(shí)像再被目鏡作第二級(jí)放大,得到最大放大效果的倒立的虛像, 位于人眼的明視距離處。 相對(duì)于物鏡的成像條件及最后二次成像于觀察者的明視距離等條件

2、的滿足,是通過(guò)儀器的機(jī)械調(diào)焦系統(tǒng)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu):包括光學(xué)系統(tǒng)(物鏡、目鏡、聚光鏡及反光鏡)和機(jī)械系統(tǒng)(聚光鏡升降、 調(diào)焦系統(tǒng)、 載物臺(tái)和物鏡轉(zhuǎn)換器等運(yùn)動(dòng)夾持部件以及底座、鏡臂、鏡筒等支持部件)光學(xué)顯微鏡照明設(shè)置部件:光源、濾光器、聚光鏡、玻片。光的吸收定律:即郎伯 -比爾定律,是比色分析的基本原理。表達(dá)了物質(zhì)對(duì)單色光吸收程度與溶液濃度和液層厚度之間的函數(shù)關(guān)系。a=-lg i/i0=lg i0/i=lg 1/t=kbc 電阻抗型血細(xì)胞分析儀的計(jì)數(shù)原理:血細(xì)胞與等滲的電解質(zhì)溶液相比為不良導(dǎo)體,其電解質(zhì)比稀溶液大。 當(dāng)血細(xì)胞通過(guò)檢測(cè)器微孔的孔徑感受區(qū)時(shí),其內(nèi)外電極之間的恒流電路上的電

3、阻值瞬間增大,產(chǎn)生電壓脈沖信號(hào)。 脈沖信號(hào)數(shù)等于通過(guò)的細(xì)胞數(shù), 脈沖信號(hào)幅度大小與細(xì)胞體積成正比。根據(jù)歐姆定律, 在恒電流電路上,電壓變化與電阻變化成正比,電阻值又同細(xì)胞體積成正比,血細(xì)胞體積越大,電壓越高, 產(chǎn)生信號(hào)的脈沖幅度就越大。各種大小不同的細(xì)胞產(chǎn)生的脈沖信號(hào)分別被送入儀器的檢測(cè)通道,經(jīng)計(jì)算機(jī)處理后, 以體積直方圖顯示出特定細(xì)胞群中的細(xì)胞體積和細(xì)胞分布情況。最后得出wbc 、rbc 、plt 。 (該原理稱庫(kù)爾特血細(xì)胞檢測(cè)原理血細(xì)胞分析儀測(cè)定hb 的原理:除干式離心分層型、無(wú)創(chuàng)型外,各種bca對(duì)hb測(cè)定都采用光電比色原理。 血細(xì)胞懸液中加入溶血?jiǎng)┖螅?rbc溶解釋放出 hb,后者與溶血

4、劑中有關(guān)成分形成hb衍生物,進(jìn)入 hb 測(cè)試系統(tǒng)。在特定波長(zhǎng)(多為 530550nm)下進(jìn)行光電比色,吸光度值與所含hb 含量成正比。與不同型號(hào)bca配套的溶血?jiǎng)┎煌?,形成hb 衍生物也不同,吸收光譜也有差異,但最大吸收峰都接近 540nm, 因?yàn)閲?guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì) (icsh ) 推薦的氰化高鐵(hicn)法的最大吸收峰在540nm,儀器 hb 的校正必須以 hicn值為標(biāo)準(zhǔn)。尿液分析:是臨床診斷泌尿系統(tǒng)疾病的重要措施之一,通過(guò)對(duì)尿液的物理學(xué)檢查和化學(xué)檢查, 可觀察尿液物理性狀和化學(xué)成分的變化。在尿沉渣檢查中能夠看到的有形成分為紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型、巨噬細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、細(xì)菌、精

5、子以及由尿液中沉析出來(lái)的各種結(jié)晶(包括藥物結(jié)晶)等。這些檢查資料對(duì)腎和尿路疾患的診斷、 鑒別診斷以及疾病的嚴(yán)重程度和預(yù)后的判斷,都有極重要的意義。 隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,特別是電子技術(shù)及計(jì)算機(jī)的應(yīng)用,各種尿液分析儀、 特別是尿沉渣全自動(dòng)分析儀的相繼問(wèn)世,為尿液化學(xué)成分檢查和尿沉渣的自動(dòng)化檢查提供了可靠的手段。尿液分析儀的檢測(cè)原理:把試劑帶浸入尿液中后,除了空白塊外,其余的試劑塊都因和尿液發(fā)生了化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生了顏色的變化。試劑塊的顏色深淺與光的吸收和反射程度有關(guān),顏色越深,相應(yīng)某種成分濃度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小,反射率也越??;反之,反射率越大。因?yàn)轭伾纳顪\與光的反射率成比例

6、關(guān)系, 而顏色和深淺又與尿液中各種成分的濃度成比例關(guān)系,所以只要測(cè)得光的反射率即可以求得尿液中各種成分的濃度。流式全自動(dòng)尿有形成分分析儀工作原理:流式全自動(dòng)尿有形成分分析儀的測(cè)定是應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)和電阻抗的原理進(jìn)行的。一個(gè)尿液標(biāo)本被稀釋并經(jīng)染色液染色后, 靠液壓作用通過(guò)鞘液流動(dòng)池。 反應(yīng)樣品從樣品噴嘴出口進(jìn)入鞘液流動(dòng)室時(shí),被一種無(wú)粒子顆粒的鞘液包圍, 使每個(gè)細(xì)胞以單個(gè)縱列的形成通過(guò)流動(dòng)池的中心(豎直)軸線,在這里每個(gè)尿液細(xì)胞被氬激光光束照射。每個(gè)細(xì)胞有不同程度的熒光強(qiáng)度,從染色尿液細(xì)胞發(fā)出的熒光,主要反映細(xì)胞的定量特性(如細(xì)胞膜、核膜、線粒體和核酸)、前向散射光強(qiáng)度,它成比例地反映細(xì)胞的大小和電

7、阻抗的大?。娮杩闺娦盘?hào)與細(xì)胞的體積成正比)。儀器將這種熒光、散射光等光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào), 并對(duì)各種信號(hào)進(jìn)行分析, 最后得到每個(gè)尿液標(biāo)本產(chǎn)生出的直方圖和散射圖、通過(guò)分析這些圖形,即可區(qū)分每個(gè)細(xì)胞并得出有關(guān)細(xì)胞的形態(tài)。自動(dòng)生化分析儀的相關(guān)參數(shù):基本分析參數(shù)(1)終點(diǎn)分析法:又稱平衡法,是通過(guò)測(cè)定反應(yīng)開始至反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)的產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來(lái)求出待測(cè)物濃度或活性的方法??煞譃椋阂稽c(diǎn)法:指樣品和試劑混合后,反應(yīng)一定時(shí)間到達(dá)終點(diǎn)時(shí),通過(guò)吸光度的檢測(cè)計(jì)算待測(cè)物濃度。該法簡(jiǎn)便,但易受樣品、試劑顏色、血清濁度及干擾物的影響。 單試劑型的生化檢測(cè)項(xiàng)目需選用一點(diǎn)法,如鈣、磷、鎂的測(cè)定兩點(diǎn)法:常應(yīng)用于具有雙

8、試劑的檢測(cè)項(xiàng)目。加入樣品后分別讀取試劑 i 、ii吸光度值,即樣品空白值和實(shí)際呈色反應(yīng)值,計(jì)算待測(cè)物濃度。該法可在一定程度上消除樣品、試劑顏色、 血清濁度及干擾物的影響。 目前大多數(shù)生化檢測(cè)項(xiàng)目都可使用雙試劑,如血清總蛋白、白蛋白、總膽紅素、結(jié)合膽紅素、葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯等的測(cè)定。藥敏測(cè)試板:藥敏測(cè)試板分為常規(guī)測(cè)試板和快速熒光測(cè)試板。常規(guī)測(cè)試板原理為比濁法, 如 vitek 系統(tǒng),在含有抗菌藥物的培養(yǎng)基中,濁度的增加提示細(xì)菌生長(zhǎng),根據(jù)判斷標(biāo)準(zhǔn)解釋敏感或耐藥;快速熒光測(cè)試板原理為熒光法,如sensititre系統(tǒng),在每一反應(yīng)孔內(nèi)參與熒光底物,若細(xì)菌生長(zhǎng),表面特異酶系統(tǒng)水解熒光底物, 激發(fā)

9、熒光, 反之沒(méi)有熒光。 以最低藥敏濃度仍無(wú)熒光產(chǎn)生的濃度為最低抑菌濃度( mic )酶免疫分析儀性能指標(biāo):濾光片波長(zhǎng)精度檢查及其峰值測(cè)定、靈敏度和準(zhǔn)確度、通道差與孔間差檢測(cè)、零點(diǎn)漂移、精密度評(píng)價(jià)、線性測(cè)定、雙波長(zhǎng)評(píng)估。時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)原理:用鑭系三價(jià)稀土離子及其螯合物作為示蹤物標(biāo)記抗體、抗原、核酸探針等物質(zhì)。當(dāng)免疫反應(yīng)發(fā)生后,根據(jù)稀土離子螯合物的熒光光譜的特點(diǎn), 用時(shí)間分辨熒光分析儀延緩測(cè)量時(shí)間,排除標(biāo)本中非特異性熒光的干擾,所得信號(hào)完全是稀土元素螯合物發(fā)射的特異熒光,測(cè)定免疫反應(yīng)最后產(chǎn)物的特異熒光信號(hào)。 根據(jù)熒光強(qiáng)度判斷反應(yīng)體系中分析的濃度,達(dá)到定量分析的目的。目前國(guó)內(nèi)已經(jīng)生產(chǎn)出不同型號(hào)

10、的時(shí)間分辨熒光免疫強(qiáng)度測(cè)定儀,并有相應(yīng)配藥試劑盒可供臨床實(shí)驗(yàn)室選用。即時(shí)檢驗(yàn)儀器特點(diǎn):一臺(tái)理想的poct 儀器應(yīng)具備以下特點(diǎn): 1. 儀器小型化,便于攜。2. 操作簡(jiǎn)單化,一般 3-4 個(gè)步驟即可完成檢。 3. 縮短檢驗(yàn)周期,報(bào)告即時(shí)。4. 能獲得權(quán)威機(jī)構(gòu)的質(zhì)量認(rèn)證。5. 儀器和配套試劑中應(yīng)配有質(zhì)控品,可監(jiān)控儀器和試劑的工作狀態(tài)。 6. 儀器檢驗(yàn)項(xiàng)目具備臨床價(jià)值和社會(huì)學(xué)意義。7. 儀器的檢測(cè)費(fèi)用合理。8. 儀器試劑的應(yīng)用不會(huì)造成對(duì)患者和工作人員的健康損害或?qū)Νh(huán)境的污染等。pcr 核酸擴(kuò)增儀的性能指標(biāo):溫度控制:溫度的準(zhǔn)確性、溫度的均一性、升降溫的速度,升降溫速度快,能縮短反應(yīng)進(jìn)行的時(shí)間,提高工作效率,也縮短了可能的非特異性結(jié)合反應(yīng)的時(shí)間,提高了pcr反應(yīng)特異性( 4)不同模式下的相同溫度特性主要是針對(duì)梯度 pcr儀而言。現(xiàn)在的 pcr 儀已經(jīng)擁有更強(qiáng)大更靈活的功能, 可以進(jìn)行不同功能模式的轉(zhuǎn)換。帶梯度功能的 pcr 儀,不僅應(yīng)考慮梯度模式下不同梯度管排間

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