中藥復(fù)雜組份藥代動(dòng)力學(xué)與整體藥效研究的探索-ppt課件

1、中藥復(fù)雜組份藥代動(dòng)力學(xué)與整體藥效研討的探求王廣基王廣基 教授教授中國(guó)藥科大學(xué)中國(guó)藥科大學(xué)體體 內(nèi)內(nèi) 處處 置置中藥藥代動(dòng)力學(xué)研討可以闡明中藥多組分體內(nèi)處置過(guò)程、中藥藥代動(dòng)力學(xué)研討可以闡明中藥多組分體內(nèi)處置過(guò)程、解釋中藥的體內(nèi)藥效物質(zhì)根底等問(wèn)題。解釋中藥的體內(nèi)藥效物質(zhì)根底等問(wèn)題。藥效學(xué)藥效學(xué)藥效目的藥效目的起起 效效植物植物化學(xué)化學(xué)中藥效應(yīng)中藥效應(yīng)組分組分中藥復(fù)方中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研討藥代動(dòng)力學(xué)研討中藥復(fù)雜組份藥代動(dòng)力學(xué)研討中藥復(fù)雜組份藥代動(dòng)力學(xué)研討經(jīng)典藥代動(dòng)力學(xué)經(jīng)典藥代動(dòng)力學(xué)細(xì)胞分子細(xì)胞分子生物學(xué)的介入生物學(xué)的介入中藥復(fù)雜體系中藥復(fù)雜體系藥代動(dòng)力學(xué)藥代動(dòng)力學(xué) 數(shù)學(xué)模型與數(shù)學(xué)模型與動(dòng)力學(xué)參數(shù)動(dòng)力

2、學(xué)參數(shù)代謝酶與代謝酶與轉(zhuǎn)運(yùn)體轉(zhuǎn)運(yùn)體符合中醫(yī)藥實(shí)際符合中醫(yī)藥實(shí)際的整體動(dòng)力學(xué)的整體動(dòng)力學(xué) 中藥藥效物質(zhì)根底研討：體內(nèi)與體外的結(jié)中藥藥效物質(zhì)根底研討：體內(nèi)與體外的結(jié)合，藥代與藥效研討的結(jié)合；合，藥代與藥效研討的結(jié)合； 中藥藥代動(dòng)力學(xué)研討：多組份藥代動(dòng)力學(xué)中藥藥代動(dòng)力學(xué)研討：多組份藥代動(dòng)力學(xué)的整體表征；的整體表征； 中藥藥效研討：整體綜合效應(yīng)的表征中藥藥效研討：整體綜合效應(yīng)的表征 三者應(yīng)為有機(jī)聯(lián)絡(luò)的整體三者應(yīng)為有機(jī)聯(lián)絡(luò)的整體中藥中藥PK/PD研討的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題研討的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題整體研討想象整體研討想象國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)工程國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)工程 30630076 、面上工程、面上工程 30572

3、228 及及“十一五支撐方案中醫(yī)藥專項(xiàng)十一五支撐方案中醫(yī)藥專項(xiàng) 2006BAI08B04-05 資助資助報(bào)告內(nèi)容報(bào)告內(nèi)容 中藥體內(nèi)外物質(zhì)組的初步探求中藥體內(nèi)外物質(zhì)組的初步探求 中藥整體藥效作用的代謝組學(xué)研討中藥整體藥效作用的代謝組學(xué)研討 中藥多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)研討中藥多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)研討基于體內(nèi)外物質(zhì)組思想的基于體內(nèi)外物質(zhì)組思想的中藥藥效物質(zhì)根底研討中藥藥效物質(zhì)根底研討 根本假設(shè)：中藥藥效作用取決于進(jìn)入體循根本假設(shè)：中藥藥效作用取決于進(jìn)入體循環(huán)及靶器官的原構(gòu)成分與代謝產(chǎn)物的組合，環(huán)及靶器官的原構(gòu)成分與代謝產(chǎn)物的組合，即體內(nèi)物質(zhì)組；即體內(nèi)物質(zhì)組； 中藥的藥效物質(zhì)根底研討應(yīng)從單純的中藥中藥的

4、藥效物質(zhì)根底研討應(yīng)從單純的中藥/制劑成分分別挑選轉(zhuǎn)向體內(nèi)成分組的研討，制劑成分分別挑選轉(zhuǎn)向體內(nèi)成分組的研討，并建立體內(nèi)外成分組的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系。并建立體內(nèi)外成分組的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系。脈絡(luò)寧注射液體內(nèi)外脈絡(luò)寧注射液體內(nèi)外物質(zhì)組的初步討論物質(zhì)組的初步討論 脈絡(luò)寧注射液的制劑成分組分析脈絡(luò)寧注射液的制劑成分組分析 動(dòng)態(tài)血漿成分組分析動(dòng)態(tài)血漿成分組分析 體外成分組與體內(nèi)成分組的關(guān)聯(lián)分析體外成分組與體內(nèi)成分組的關(guān)聯(lián)分析脈絡(luò)寧注射液的制劑成分分析 目前，脈絡(luò)寧注射液中所含成分知的僅有目前，脈絡(luò)寧注射液中所含成分知的僅有綠原酸，咖啡酸等幾種有機(jī)酸類成分，難綠原酸，咖啡酸等幾種有機(jī)酸類成分，難以解釋其臨床療效；以解釋其臨床

5、療效； 對(duì)于中藥制劑中所含未知成分的快速分析，對(duì)于中藥制劑中所含未知成分的快速分析，目前尚缺乏相應(yīng)的戰(zhàn)略和技術(shù)；目前尚缺乏相應(yīng)的戰(zhàn)略和技術(shù)； 我們基于高分辨我們基于高分辨LC-MS-IT-TOF技術(shù)，建技術(shù)，建立了一種具有普適性的中藥制劑立了一種具有普適性的中藥制劑/提取物中提取物中復(fù)雜成分的快速分析鑒定方法。復(fù)雜成分的快速分析鑒定方法。u根本分析思想包括：根本分析思想包括：u利用利用TOF的準(zhǔn)確分子量功能，預(yù)測(cè)成分的的準(zhǔn)確分子量功能，預(yù)測(cè)成分的化學(xué)式，在網(wǎng)絡(luò)化學(xué)式，在網(wǎng)絡(luò)/光盤(pán)成分庫(kù)中進(jìn)展查尋符光盤(pán)成分庫(kù)中進(jìn)展查尋符合的構(gòu)造式幾十個(gè)合的構(gòu)造式幾十個(gè)幾百個(gè)不等；幾百個(gè)不等；u基于一切碎片離子，

6、運(yùn)用自編的基于基于一切碎片離子，運(yùn)用自編的基于Matlab平臺(tái)的共有離子搜索軟件，根據(jù)平臺(tái)的共有離子搜索軟件，根據(jù)共有離子信息對(duì)化合物進(jìn)展分類與橋接；共有離子信息對(duì)化合物進(jìn)展分類與橋接；u確定共有離子化學(xué)構(gòu)造，根據(jù)亞構(gòu)造信息，確定共有離子化學(xué)構(gòu)造，根據(jù)亞構(gòu)造信息，對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù)中所獲得的候選構(gòu)造進(jìn)展再挑選，對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù)中所獲得的候選構(gòu)造進(jìn)展再挑選，進(jìn)而根據(jù)碎裂規(guī)律推測(cè)化合物構(gòu)造。進(jìn)而根據(jù)碎裂規(guī)律推測(cè)化合物構(gòu)造。脈絡(luò)寧注射液的制劑成分分析脈絡(luò)寧注射液的制劑成分分析分析戰(zhàn)略分析戰(zhàn)略Anal Chem,2021;80:8187-94 脈絡(luò)寧注射液的制劑成分分析LC-MS-IT-TOF技術(shù)從脈絡(luò)寧中檢出技術(shù)從脈

7、絡(luò)寧中檢出87種成分種成分脈絡(luò)寧注射液的制劑成分分析OOOHOR2OR1GlcOO R1 R2 64 H H87 Glc-Glc X5X5=R1R2OR3OH R1 R2 R3 1 CH2 H H 2 O H H 3 O OH H28 O OH GlcOOHR R 69 H73 FormylR1OR2 R1 R2 Double bonds49 Xyl-Glc H 3,450 Xyl-Glc H 62 Glc-Glc OH 3,434O-Glc-Ara R1 R2 R3 R4 Double bonds 7 H H H OH - 10 OH H H OH 2,334 H Glc CH3 H -R2

8、OR423OHOR1R3OR3R4OR1 R1 R2 R3 R4 R5 R6 Double bonds14 H H OH H OH H 7,841 Glc H H H OH H 7,844 Glc H H OH H H 47 Glc H OH H OH H 7,851 Glc CH3 OH H OH H 7,853 Glc CH3 OH H CH2OH H 7,854 Glc H OH Vinyl OH CH3 7,858 Glc H H OH CH2COOH H 61 Glc CH3 OH OCH3 OH H 71 Glc H OH 3,4-dihydroxyl phenyl OH H 7,

9、8R5R6OOR278OR2R1R3HOR434 R1 R2 R3 R4 Double bonds20 H H H CHCOOH 3,422 OH H H CHCOOH 3,431 H COOH Ethynyl CHCOOH 3,457 OH CH2OH H O-Glc OOOR5OR1OR3OHR2OOR4 R1 R2 R3 R4 R529 H H H H H65 H H Rha H H68 H H Rha CH3 H82 H Caffeoyl Rha H H83 H Caffeoyl Rha CH3 H84 H Feruloyl Rha CH3 H 86 Ara Feruloyl Rha

10、H CH3OOHOR3R2OR1OOOHR4 R1 R2 R3 R4 Double bonds32 H H H H 1,233 H OH H H 36 H OH H OH 39 H OH H OCH3 75 H OH Caffeoyl OH 12 R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 Double bonds38 OH OH CH3 OH Vinyl H H -48 OH CH3 CH3 H OCH3 CH3 OCH3 -55 H H Glc H H H H 2,363 H H Glc H OH H H 2,380 H H Glc-Rha H H H H 2,381 H H Glc-Rha

11、 H OH H H 2,385 H X4 H H OH Glc H 2,3OOHOR3OOR6R5R1R2R4R723OOOHOHOHOHOX4=OHOHOOOHOHHOOHOHR45 R Double bonds74 H 4,577 OH -脈絡(luò)寧注射液成分分類脈絡(luò)寧注射液成分分類脈絡(luò)寧注射液的制劑成分分析成分類別成分類別個(gè)數(shù)個(gè)數(shù)有機(jī)酸類有機(jī)酸類30糖苷類糖苷類17環(huán)烯醚萜類環(huán)烯醚萜類10黃酮類黃酮類10苯乙醇苷類苯乙醇苷類7醌類醌類4生物堿類生物堿類3甾酮類甾酮類3脈絡(luò)寧注射液動(dòng)態(tài)血漿成分分析脈絡(luò)寧注射液動(dòng)態(tài)血漿成分分析從血漿中共鑒從血漿中共鑒定出定出175175種成分，種成分，包括包括6

12、060種原構(gòu)種原構(gòu)成分及成分及115115種代種代謝產(chǎn)物，其中謝產(chǎn)物，其中一半以上成分一半以上成分具有明確的血具有明確的血漿移行消長(zhǎng)規(guī)漿移行消長(zhǎng)規(guī)律律脈絡(luò)寧注射液動(dòng)態(tài)血漿成分分析脈絡(luò)寧注射液動(dòng)態(tài)血漿成分分析為原構(gòu)成分，為代謝產(chǎn)物，為原構(gòu)成分，為代謝產(chǎn)物，4h后體內(nèi)可檢出成分多為代謝物后體內(nèi)可檢出成分多為代謝物脈絡(luò)寧注射液血漿中原構(gòu)成分的動(dòng)態(tài)移行規(guī)律脈絡(luò)寧注射液血漿中原構(gòu)成分的動(dòng)態(tài)移行規(guī)律脈絡(luò)寧注射液動(dòng)態(tài)血漿成分分析脈絡(luò)寧注射液動(dòng)態(tài)血漿成分分析脈絡(luò)寧注射液動(dòng)態(tài)血漿成分分析脈絡(luò)寧注射液動(dòng)態(tài)血漿成分分析脈絡(luò)寧注射液血漿中代謝物的動(dòng)態(tài)移行規(guī)律脈絡(luò)寧注射液血漿中代謝物的動(dòng)態(tài)移行規(guī)律體內(nèi)外成分組的關(guān)聯(lián)分析

13、戰(zhàn)略體內(nèi)外成分組的關(guān)聯(lián)分析戰(zhàn)略藥后血漿藥后血漿指紋譜指紋譜空白血漿空白血漿指紋譜指紋譜藥源性藥源性指紋譜指紋譜制劑制劑指紋譜指紋譜原形原形成分組成分組代謝代謝產(chǎn)物組產(chǎn)物組制劑制劑成分組成分組代謝物歸屬與代謝物歸屬與確定代謝途徑確定代謝途徑不同時(shí)相不同時(shí)相藥效物質(zhì)組藥效物質(zhì)組現(xiàn)正在編寫(xiě)相應(yīng)的化學(xué)信息處置軟件，包括差示譜分析現(xiàn)正在編寫(xiě)相應(yīng)的化學(xué)信息處置軟件，包括差示譜分析軟件及代謝物與原構(gòu)成分關(guān)聯(lián)分析軟件軟件及代謝物與原構(gòu)成分關(guān)聯(lián)分析軟件脈絡(luò)寧注射液體內(nèi)外物質(zhì)組關(guān)聯(lián)分析脈絡(luò)寧注射液體內(nèi)外物質(zhì)組關(guān)聯(lián)分析代謝物代謝物代謝物化學(xué)結(jié)構(gòu)代謝物化學(xué)結(jié)構(gòu)代謝途徑代謝途徑M15-Hydroxymethyl-2-f

14、urancarboxylic acidY(5-Hydroxymethyl furaldehyde)+OM23-Methyl-1H-pyrrole-2,4-dicarboxylic acidY11_C2H4_CH2M3Oospolide?M42-(1-Hydroxypropan-2-yl)-4-oxocyclopentanecarboxylic acidY7_2 HM5Glucuronic acid?M64-Hydroxybenzamidoacetic acidY3_O+GlyM72-Hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)propanoic acidY4+2 H+O+CH2M84

15、-(Methoxycarbonyl)-3-(hydroxymethyl)-1H-pyrrole-2-carboxylic acidY11_C2H4+OM92-(1-Formylethyl)-2-hydroxy-4-oxocyclopentanecarboxylic acidY10_2 HM102,4-Bis(hydroxymethyl)-6-methylenecyclohexanecarboxylic acidY13_H2OY代表相應(yīng)的原構(gòu)成分代表相應(yīng)的原構(gòu)成分M11 Vanillactic acidY9+H2OM121,4a,5,6,7,7a-Hexahydro-1-hydroxy-7-(h

16、ydroxymethyl)cyclopentacpyran-4-carboxylic acidY14_O+2 HM13 6,11-Dihydroxy-2,8-undecadienoic acid?M14 Homononactinic acid?M15 4-Hydroxy-3,5-dimethoxycinnamic acidY9+O+CH2M161,4a,5,6,7,7a-Hexahydro-1-hydroxy-6-methoxy-7-methylcyclopentacpyran-4-carboxylic acidY44_Glc+CH2M171,4a,5,6,7,7a-Hexahydro-1,4

17、a-dihydroxy-7-(hydroxymethyl)cyclopentacpyran-4-carboxylic acidY14+2 HM18 (2E,4E)-6,8,11-Trihydroxyundeca-2,4-dienoic acid?M19 (E)-8,12-Dihydroxydodec-2-enoic acidY16_O+2 HM20 (E)-6,10,11-Trihydroxyundec-2-enoic acid?脈絡(luò)寧注射液體內(nèi)外物質(zhì)組關(guān)聯(lián)分析脈絡(luò)寧注射液體內(nèi)外物質(zhì)組關(guān)聯(lián)分析M100Methyl 6-(hexadecahydro-2,3,5,14-tetrahydroxy-1

18、0,13-dimethyl-6-oxo-1H-cyclopentaaphenanthren-17-yl)-2,5,6-trihydroxy-2-methylheptanoateEDS+O+O+CH2M1013,6,7,8-Tetramethoxy-3-O-glucopyranoside-4,5-heptahydroxyflavone?M1027-O-E-Feruloylloganic acidY44+Y9_H2OM10311-Cinnamoyl-20-Ac-2,3,11,14,20-pentahydroxypregn-6-oneY74_-+2 H+AC+Y4M10410-(3,4-Dimeth

19、oxy-E-cinnamoyl) geniposidic acidY41+Y9+CH2M1052,22-O-Diacetyl-2,3,14,20,22,25-Hexahydroxycholest-7-en-6-oneEDS+2 ACM1067-FeruloylloganinY44+Y9_H2O+CH2M1071-O-Acetyl-3,5-Di-O-feruloylquinic acidY75+2 CH2+ACM108Osmanthuside BY82_2 OM109Pregnane-3,5,6,8,11,12,14,20-octolY74+4 H_-M1105-O-Glucuronopyran

20、oside-3,4,7-trimethoxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-6-methylchroman-5-olY48+2 H+2 CH2+GAM1112-(1-Hydroxyethyl)-3-hydroxy-5,7-dimethoxy-1,4-naphthoquinone +2 GAY67_-+2 GAM1124-Methoxy-5-O-acetyl scolymosideY81+CH2+O+ACM113Oleanolic acid +2 GA ?Y(Oleanolic acid)+2 GAM114CandidosideY(Oleanolic acid)_O+2

21、H+2 Glc+Ara+XylM1153-O-Glucopyranosyl-glucopyranosyl-glucopyranosyl-glucopyranoside-12-oleanene-3,28-diolY(Oleanolic acid)_O+2 H+4 Glc脈絡(luò)寧注射液體內(nèi)外物質(zhì)組關(guān)聯(lián)分析脈絡(luò)寧注射液體內(nèi)外物質(zhì)組關(guān)聯(lián)分析對(duì)其中對(duì)其中80%以上的代謝物勝利地進(jìn)展了代謝途徑推斷及與原構(gòu)成分的關(guān)聯(lián)分析以上的代謝物勝利地進(jìn)展了代謝途徑推斷及與原構(gòu)成分的關(guān)聯(lián)分析小小 結(jié)結(jié) 建立了一種具有普適性的體內(nèi)外中藥復(fù)雜建立了一種具有普適性的體內(nèi)外中藥復(fù)雜組份鑒定方法脈絡(luò)寧，生脈等；組份鑒定方法脈絡(luò)寧，生

22、脈等； 初步建立了中藥體內(nèi)外物質(zhì)組的信息處置初步建立了中藥體內(nèi)外物質(zhì)組的信息處置技術(shù)，嘗試了體內(nèi)外物質(zhì)組的關(guān)聯(lián)研討；技術(shù)，嘗試了體內(nèi)外物質(zhì)組的關(guān)聯(lián)研討； 如何進(jìn)展體內(nèi)物質(zhì)組的藥效評(píng)價(jià)，需求探如何進(jìn)展體內(nèi)物質(zhì)組的藥效評(píng)價(jià)，需求探求新的研討思緒求新的研討思緒中藥多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)研討中藥多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)研討與臨床合理用藥與臨床合理用藥 關(guān)鍵難點(diǎn)：中藥含有多個(gè)有效組份，各自有不同關(guān)鍵難點(diǎn)：中藥含有多個(gè)有效組份，各自有不同的藥代動(dòng)力學(xué)特征，單一成分特征不能用于的藥代動(dòng)力學(xué)特征，單一成分特征不能用于表征中藥的整體行為；表征中藥的整體行為； 如何定量描畫(huà)中藥組份的整體藥代動(dòng)力學(xué)特征，如何定量描畫(huà)中藥

23、組份的整體藥代動(dòng)力學(xué)特征，是中藥藥代動(dòng)力學(xué)研討的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題之一；是中藥藥代動(dòng)力學(xué)研討的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題之一； 我們?cè)谖覀冊(cè)?006年國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)工程年國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)工程 30630076 中明確提出了中明確提出了“中藥多組份整中藥多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)研討的創(chuàng)新思緒。合藥代動(dòng)力學(xué)研討的創(chuàng)新思緒。中藥多組份藥時(shí)曲線擬合04812162024020406080100 A B C D E Fc(ng/ml)t(h)t(h)c(ng/ml)04812162024081624324048藥代模型擬合藥代模型擬合各成分各成分PK參數(shù)參數(shù)整合整合PK參數(shù)參數(shù)中藥多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)研討中藥多組份整

24、合藥代動(dòng)力學(xué)研討中藥多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)研討中藥多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)研討TCMIdentifying Multiple markersCombined analytical, PK and PD methodsDeveloping bioanalytical methodStandards: abundant content, exact PD effects and satisfied plasma concentrationsPK and PD studies PK and PD properties for each markerIntegrated ModelsHolistic PK

25、properties for TCMClinical PK studies and dosage regimen design血塞通注射液的多組份整合血塞通注射液的多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)研討與臨床給藥方案設(shè)計(jì)藥代動(dòng)力學(xué)研討與臨床給藥方案設(shè)計(jì)臨床順應(yīng)癥臨床順應(yīng)癥: 腦中風(fēng)腦中風(fēng), 冠冠心病心病藥理活性藥理活性: 抗凝血，抗氧抗凝血，抗氧化，擴(kuò)張血管，添加腦化，擴(kuò)張血管，添加腦血流量等；血流量等；給藥方案給藥方案: 靜滴靜滴, 200-400 mg/天天實(shí)踐臨床給藥劑量實(shí)踐臨床給藥劑量200-1600mg/天不等，天不等，醫(yī)生多根據(jù)臨床閱歷判別醫(yī)生多根據(jù)臨床閱歷判別血塞通注射液主要活性成分血塞通注射

26、液主要活性成分MarkersMarkers確實(shí)定確實(shí)定定性定量分析所含成分定性定量分析所含成分 藥效活性挑選評(píng)價(jià)藥效活性挑選評(píng)價(jià)體內(nèi)外抗血小板聚集作用體內(nèi)外抗血小板聚集作用 血管內(nèi)皮細(xì)胞維護(hù)作用血管內(nèi)皮細(xì)胞維護(hù)作用 血塞通主要活性成分的定量分析血塞通主要活性成分的定量分析Li X Y, Wang GJ, Sun JG,et al. Biol. Pharm. Bull. 30(5):847-51(2007)5種成分含量占總量的種成分含量占總量的80%以上以上血塞通及主要成分的體外血塞通及主要成分的體外抗血小板聚集作用抗血小板聚集作用 TPNS and ginsenoside Rd, Rb1 sh

27、ow good and concentration dependent inhibitory effect on platelet aggregation induced by ADP-2Na (n=6)MTT study show TPNS and its major components except Re possess protecting role on rBMECs damaged by hydrogen peroxidePretreatmentPost damage血塞通及主要成分的血管內(nèi)皮血塞通及主要成分的血管內(nèi)皮細(xì)胞維護(hù)作用細(xì)胞維護(hù)作用LDH determination re

28、ached same resultsLi X Y, Sun JG, Wang GJ, et al. Chin. Pharm. Bull. 23(8):1030-34, (2007)PretreatmentPost damage血塞通及主要成分的血管內(nèi)皮血塞通及主要成分的血管內(nèi)皮細(xì)胞維護(hù)作用細(xì)胞維護(hù)作用人參皂苷人參皂苷 Rb1,Rg1,Rd, Re Rb1,Rg1,Rd, Re 和三七皂苷和三七皂苷 R1 R1 為血塞通為血塞通所含的主要組份，且具有與血塞通注射液類似的所含的主要組份，且具有與血塞通注射液類似的藥效活性。藥效活性。人參皂苷人參皂苷 Rb1,Rg1,Rd, Re Rb1,Rg1,R

29、d, Re 和三七皂苷和三七皂苷 R1R1可作為血可作為血塞通注射液藥代動(dòng)力學(xué)研討的塞通注射液藥代動(dòng)力學(xué)研討的 MarkersMarkers。小小 結(jié)結(jié)LC-MS法同時(shí)測(cè)定血漿中法同時(shí)測(cè)定血漿中5種皂苷成分種皂苷成分Li X Y, Sun JG, Wang GJ, et al. Chromatogr. 21(7):735-46(2007)定量下限定量下限: 2.77-4.00 ng/mLLC-MS法同時(shí)測(cè)定血漿中法同時(shí)測(cè)定血漿中5種皂苷成分種皂苷成分iv: 10mg/kg 靜注給藥后各成分藥代動(dòng)力學(xué)靜注給藥后各成分藥代動(dòng)力學(xué)ig: 300mg/kg 灌胃給藥后各成分藥代動(dòng)力學(xué)灌胃給藥后各成分藥

30、代動(dòng)力學(xué)各成分各成分PK參數(shù)各異參數(shù)各異基于基于AUC0- AUC0- 自定義權(quán)重系數(shù)的自定義權(quán)重系數(shù)的三七總皂苷多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)研討三七總皂苷多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)研討原理與根據(jù)原理與根據(jù)* *評(píng)價(jià)藥物在吸收機(jī)體內(nèi)吸收的重要目的評(píng)價(jià)藥物在吸收機(jī)體內(nèi)吸收的重要目的AUC0-* *反映了藥物在機(jī)體內(nèi)的曝露程度反映了藥物在機(jī)體內(nèi)的曝露程度* *符合中藥藥代動(dòng)力學(xué)研討的符合中藥藥代動(dòng)力學(xué)研討的“整體觀思想整體觀思想* *多數(shù)情況下與藥效作用呈正相關(guān)多數(shù)情況下與藥效作用呈正相關(guān)權(quán)重系數(shù)的計(jì)算權(quán)重系數(shù)的計(jì)算0101RbRAUCjjAUC j 分別代表三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、Rd、Re和Rb110

31、010100Re011RbRRgRdRbRAUCAUCAUCAUCAUCAUC 1111ReRe11*TRRRgRgRdRdRbRbCCCCCC其中：其中：整合濃度計(jì)算公式為：整合濃度計(jì)算公式為：基于基于AUC0- AUC0- 自定義權(quán)重系數(shù)的自定義權(quán)重系數(shù)的三七總皂苷綜合濃度的計(jì)算方法三七總皂苷綜合濃度的計(jì)算方法結(jié)果結(jié)果1 1、基于、基于AUC0-AUC0-自定義的整合權(quán)重系數(shù)自定義的整合權(quán)重系數(shù)jj 受試對(duì)象給藥方式項(xiàng)目R1Rg1RdReRb1大鼠口服AUC0-(mg/L*h)6.0214.122.463.0737.66j0.0720.1690.2700.0370.452靜注AUC0-(m

32、g/L*h)2.167.7631.721.45106.44j0.0140.0520.2120.0100.712人靜滴AUC0-(mg/L*h)3.355.4523.562.66102.77j0.0240.0400.1710.0190.746血塞通注射液在大鼠及安康志愿者體內(nèi)的血塞通注射液在大鼠及安康志愿者體內(nèi)的AUC0-及相應(yīng)的權(quán)重系數(shù)及相應(yīng)的權(quán)重系數(shù)(j) 結(jié)果結(jié)果2、整合前后的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)及藥、整合前后的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)及藥-時(shí)曲線時(shí)曲線大鼠口服給予大鼠口服給予300mg/kg300mg/kg的三七總皂苷后整合前后藥時(shí)曲線圖的三七總皂苷后整合前后藥時(shí)曲線圖藥動(dòng)學(xué)參數(shù)整合前整合后R1Rg1RdReR

33、b1T1/2(h)1.115.0118.151.8120.1518.88Tmax(h)0.710.750.880.790.830.79Cmax(g/mL)2.9376.4242.3561.5145.0854.11AUC(0-)( g/mL*h)6.01814.10422.4583.07437.66225.33大鼠口服給予大鼠口服給予300mg/kg300mg/kg三七總皂苷后各成份整合前后藥動(dòng)學(xué)參數(shù)三七總皂苷后各成份整合前后藥動(dòng)學(xué)參數(shù) 大鼠靜脈注射大鼠靜脈注射10mg/kg10mg/kg的血塞通注射液后整合前后藥時(shí)曲線圖的血塞通注射液后整合前后藥時(shí)曲線圖藥動(dòng)學(xué)參數(shù)整合前整合后R1Rg1RdRe

34、Rb1T1/2(h)1.674.0319.250.7222.1622.40CL(L/h/kg)5.221.910.4610.720.120.14AUC(0-)( g/mL*h)2.1617.76431.7261.449106.43684.83大鼠靜脈給予大鼠靜脈給予10mg/kg10mg/kg血塞通注射液后各成份整合前后藥動(dòng)學(xué)參數(shù)血塞通注射液后各成份整合前后藥動(dòng)學(xué)參數(shù) 結(jié)果結(jié)果 大鼠大鼠PK/PD 相關(guān)性分析相關(guān)性分析Good PK/PD match 血塞通注射液臨床藥代動(dòng)力學(xué)血塞通注射液臨床藥代動(dòng)力學(xué)研討及給藥方案設(shè)計(jì)研討及給藥方案設(shè)計(jì)安康志愿者整合藥代動(dòng)力學(xué)研討安康志愿者整合藥代動(dòng)力學(xué)研討

35、腦中風(fēng)病人群體藥代腦中風(fēng)病人群體藥代/ /藥效研討藥效研討安康志愿者靜脈注射安康志愿者靜脈注射400mg/kg400mg/kg的血塞通注射液整合前后藥時(shí)曲線圖的血塞通注射液整合前后藥時(shí)曲線圖藥動(dòng)學(xué)參數(shù)整合前整合后R1Rg1RdReRb1T1/2(h)1.972.0625.491.3031.3728.1CL(L/h/kg)9.5724.641.368.031.690.068AUC(0-)( g/mL*h)3.355.4523.562.66102.77100.81安康志愿者靜脈給予安康志愿者靜脈給予400mg400mg血塞通注射液后三七總皂苷各成份整合前后藥動(dòng)學(xué)參數(shù)血塞通注射液后三七總皂苷各成份整

36、合前后藥動(dòng)學(xué)參數(shù) 結(jié)果結(jié)果 倫理委員會(huì)論證，倫理委員會(huì)論證，57個(gè)腦中風(fēng)病人，搜集流行病學(xué)數(shù)據(jù)個(gè)腦中風(fēng)病人，搜集流行病學(xué)數(shù)據(jù)800 mg/天，延續(xù)給藥天，延續(xù)給藥14天，于第天，于第7, 14天藥后天藥后1 h或或3 h取取血血5mL，測(cè)定血藥濃度，并于藥后第，測(cè)定血藥濃度，并于藥后第14天取全血測(cè)定凝血四天取全血測(cè)定凝血四項(xiàng)項(xiàng)PT, TT, APTT and FibR1, Rg1, Rd, Re 及及 Rb1 血藥濃度數(shù)據(jù)血藥濃度數(shù)據(jù)腦中風(fēng)病人血塞通注射液整合血藥濃度數(shù)據(jù)腦中風(fēng)病人血塞通注射液整合血藥濃度數(shù)據(jù)腦中風(fēng)病人血塞通注射液群體藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)腦中風(fēng)病人血塞通注射液群體藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)血塞

37、通注射液藥動(dòng)血塞通注射液藥動(dòng)/ /藥效相關(guān)性分析藥效相關(guān)性分析 Index 1 PT prolong ratio (PT%) TT prolong ratio (TT%) APTT prolong ratio (APTT%) Fib inhibit ratio (Fib%) Index 2 Dosage (mg/kg) Integrated concentration PT(%), Fib(%), TT(%), APTT(%) With the r values were of 0.598, 0.551, 0.590 and 0.505 (p0.01). Data transformation

38、 to determine the ideal therapeutic windows15-40g/mL can make good results, 25-35 g/ml are the best整合濃度與藥效作用的相關(guān)性整合濃度與藥效作用的相關(guān)性 PT(%), Fib(%), TT(%), APTT(%) With the r values were of 0.560, 0.438, 0.593 and 0.351). 12-17mg/kg can make good resultsData transformation to determine the ideal dosage給藥劑量與

39、藥效作用的相關(guān)性給藥劑量與藥效作用的相關(guān)性 基于SAAM軟件的藥代動(dòng)力學(xué)建模與預(yù)測(cè)根據(jù)前述結(jié)果，根據(jù)前述結(jié)果， 建立靜注二房室模型建立靜注二房室模型所用數(shù)據(jù)所用數(shù)據(jù): PPK 參數(shù)參數(shù):k10, k12, k21;靜滴速率靜滴速率; 整合濃度整合濃度;給給藥劑量藥劑量: 200, 400, 800 and 1200mg/天天不同給藥劑量與滴注速率的擬合曲線不同給藥劑量與滴注速率的擬合曲線Best infusion ratioOptimized Dosage: 12-17mg/kg (800-1200mg/day) Optimized Infusion ratio: 10-14mg/min多劑量

40、給藥藥代動(dòng)力學(xué)模型預(yù)測(cè)多劑量給藥藥代動(dòng)力學(xué)模型預(yù)測(cè)The actual determined concentrations correlated well with the predicted concentrations中藥制劑中藥制劑臨床療效評(píng)價(jià)臨床療效評(píng)價(jià)多組份藥代評(píng)價(jià)多組份藥代評(píng)價(jià)PK-PD結(jié)合結(jié)合整合整合PK參數(shù)參數(shù)調(diào)整給藥方案調(diào)整給藥方案臨床療效終點(diǎn)評(píng)價(jià)臨床療效終點(diǎn)評(píng)價(jià)模型擬合模型擬合中藥多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)與臨床合理用藥中藥多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)可以定量描畫(huà)中藥多組份整合藥代動(dòng)力學(xué)可以定量描畫(huà)中藥的整體藥代動(dòng)力學(xué)特征，在指點(diǎn)臨床給中藥的整體藥代動(dòng)力學(xué)特征，在指點(diǎn)臨床給藥方案設(shè)計(jì)中具

41、有實(shí)踐意義；藥方案設(shè)計(jì)中具有實(shí)踐意義； 需求探求更多的整合建模方法。需求探求更多的整合建模方法。George E. P Box: All models are wrong, but some are useful!小小 結(jié)結(jié)基于代謝組學(xué)的中藥整體藥效研討基于代謝組學(xué)的中藥整體藥效研討代謝組是生物體整體功能形狀的代謝組是生物體整體功能形狀的“生化表型，因此對(duì)于表征中藥生化表型，因此對(duì)于表征中藥“多組份、多靶點(diǎn)弱效應(yīng)協(xié)同、有機(jī)整合整體效應(yīng)具有突出優(yōu)勢(shì)多組份、多靶點(diǎn)弱效應(yīng)協(xié)同、有機(jī)整合整體效應(yīng)具有突出優(yōu)勢(shì)多成分多成分多靶點(diǎn)效應(yīng)多靶點(diǎn)效應(yīng)血管維護(hù)血管維護(hù) 擴(kuò)張冠脈擴(kuò)張冠脈 降低耗氧量降低耗氧量 強(qiáng)心作

42、用強(qiáng)心作用 綜協(xié)作用評(píng)價(jià)綜協(xié)作用評(píng)價(jià) 特異藥效特異藥效作用弱作用弱臨床療效確切臨床療效確切 ？國(guó)家自然科學(xué)基金面上工程國(guó)家自然科學(xué)基金面上工程 30572228 及及“十一五支撐方案中醫(yī)藥專項(xiàng)十一五支撐方案中醫(yī)藥專項(xiàng) 2006BAI08B04-05 資資助助基于GC/MS測(cè)定技術(shù)的代謝組學(xué)研討方法衍生化衍生化氣相質(zhì)譜分析氣相質(zhì)譜分析轉(zhuǎn)換為數(shù)據(jù)文件轉(zhuǎn)換為數(shù)據(jù)文件MCR或積分或積分多變量數(shù)多變量數(shù)據(jù)分析據(jù)分析SIMCA三維數(shù)據(jù)譜圖。三維數(shù)據(jù)譜圖。 X(左左_右右):保管時(shí)間保管時(shí)間,Y(前前_后后):荷質(zhì)比數(shù)荷質(zhì)比數(shù), Z(上上_下下): 峰強(qiáng)度峰強(qiáng)度.提取提取模型識(shí)別模型識(shí)別數(shù)學(xué)模型數(shù)學(xué)模型 分

43、類、預(yù)測(cè)、診斷分類、預(yù)測(cè)、診斷 生物標(biāo)志物生物標(biāo)志物 GC-TOF/MS代謝組學(xué)研討方法代謝組學(xué)研討方法GC-TOF/MS代謝組學(xué)研討技術(shù)代謝組學(xué)研討技術(shù),可在可在15min內(nèi)鑒內(nèi)鑒定出定出600個(gè)以上的內(nèi)源性小分子化合物個(gè)以上的內(nèi)源性小分子化合物Anal Chem. 2005;77(24):8086-94. 的數(shù)個(gè)峰經(jīng)校正、重新陳列、解析和拆分后情的數(shù)個(gè)峰經(jīng)校正、重新陳列、解析和拆分后情形，不同的顏色表示不同化合物，包含最終化形，不同的顏色表示不同化合物，包含最終化合物鑒定的信息的。合物鑒定的信息的。專業(yè)數(shù)據(jù)處置方法專業(yè)數(shù)據(jù)處置方法人參總皂苷調(diào)理血壓作用的人參總皂苷調(diào)理血壓作用的代謝組學(xué)研討

44、代謝組學(xué)研討自發(fā)性高血壓大鼠模型自發(fā)性高血壓大鼠模型SHR：延續(xù)給予人參：延續(xù)給予人參總皂苷總皂苷8周，研討動(dòng)態(tài)代謝周，研討動(dòng)態(tài)代謝組變化，并與相應(yīng)的化學(xué)降組變化，并與相應(yīng)的化學(xué)降壓藥相比較。壓藥相比較。人參總皂苷和西藥的降壓作用以及停藥后續(xù)效果人參總皂苷停藥后具有較明顯的繼續(xù)降壓和后續(xù)降壓效果人參總皂苷停藥后具有較明顯的繼續(xù)降壓和后續(xù)降壓效果10周停藥周停藥給藥給藥10周后停藥周后停藥黃芪黃芪人參總皂苷人參總皂苷卡托普利卡托普利氨氯地平氨氯地平-10-8-6-4-20246810-10010t2t10S0S0S0S0S0S0S0S2S2S2S2S2S2S4S4S4S4S4S4S6S6S6S6S6S8S8S8S8S8S8S0W0W0W0W0W0W2W2W2W2W2W2W4W4W4W4W4W4W6W6W6W6W6W6W8W8W8W8W8W8W2G2G2G2G2G2G2G4G4G4G4G4G4G4G6G6G6G6G6G6G8G8G8G8G8G8GSIMCA-P 11 - 2008-4-8 13:24:36正常組正常組 高血壓組高血壓組 人參組人參組 人參總皂苷治療后對(duì)SHR代謝組的影響W W表示正常對(duì)照表示正常對(duì)照WKYWKY；G G為人參治療組；為人參治療組；S S為模型為模型組組SHRSHR大鼠人參總皂苷治療第大鼠人參總皂苷治療第2 2、4 4、6 6、8 8周周中西藥對(duì)