藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)下肝癌及肝癌腹腔積液治療的療效觀察

1、藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)下肝癌及肝癌腹腔積液治療的療效觀察摘耍冃的:觀察藥皺試驗(yàn)指導(dǎo)下的肝病及肝癌腹腔積液化學(xué)治療的治療效果。方法： 將性別、年齡與腫瘤類型、分期、腹腔積液錄相同的肝癌患者配對(duì)，并將配對(duì)病例隨機(jī)分入 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組。釆用mtt法體外檢測(cè)腹腔積液腫瘤細(xì)胞的藥物敏感性，實(shí)驗(yàn)組選用含腫瘤 抑制率較高藥物的聯(lián)合化療方案，對(duì)照組釆用聯(lián)合應(yīng)用5-氟尿咳喘、順舘、表阿霉素方案， 對(duì)兩組患者進(jìn)行全身化療和腹腔內(nèi)化療。結(jié)果：24對(duì)配對(duì)患者的研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組腹腔 積液治療有效率為87. 50%,對(duì)照紐腹腔積液治療有效率為70. 83%,兩紐腹腔積液治療有效 率無(wú)顯著性卷異(p>0. 05)；實(shí)驗(yàn)纟r

2、腫瘤治療有效率為5& 33%,對(duì)照組腫瘤治療有效率為 33. 33%,實(shí)驗(yàn)組腫瘤治療冇效率高于對(duì)照組(p0.05)。結(jié)論：藥物敏感性試驗(yàn)指導(dǎo)下的肝 癌化療其腫瘤治療的有效率高于常規(guī)方法用藥。關(guān)鍵詞藥敏試驗(yàn)；肝癌；癌性腹腔積液中圖分類號(hào)r735. 7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼a 文章編號(hào)11673-7210 (2009) 02 (a) -033-03observation on the effect of the treatment with the chemotherapy selected by drug sensitivity assay in liver cancer and m alignan

3、t ascitesyuan xiao-linl, li zhi-min2, jin shi-yul, zhang chun-leil, zhang xiu-lin3, yang zhenl(1. the affi 1 iated zhongshanhospital of dalian univorsity, dalianl 16001, china; 2. dalian central hospital, dalianll6023, china; 3. dalian no. 3 hospital, dalianl16011, china)abstract objective: to obser

4、ve the effect of the treatment with the chemotherapy selected by drug sensitivity assay in liver cancer and m alignant ascites. methods: the criteria of a matched-pair included patients，age, sex, stage of cancer and the amount of ascites. patients of a matched-pair were selected into experimental gr

5、oup and control group randomly. drug sensitivity was tested with mtt method. patients of experimental group were treated with the chemotherapy selected by drug sonsitivity assay, and the patients of control group were treated with combination therapy of 5-fu, ddp and epirubicin. results: among the 2

6、4 matched-pair patients, the ascites response rates of experimental group and control group were 87.50% and 70.83% respectively, it showed no statistical difference between the two groups (p>0. 05). meanwhile the tumor response rate of experimental group was 58. 33%, which was significantly highe

7、r than 33.33% of control group (p<0.05) . conclusion: the response rate of chemotherapy selected by drug sensitivity assay is higher than that of combination therapy of 5-fu,ddp and epirubicin in liver cancer treatmentkey words drug sensitivity assay; liver cancer; m alignant ascites腹腔積液是晚期肝癌的并發(fā)癥

8、，目前普遍認(rèn)為脫落的癌細(xì)胞在腹腔內(nèi)的增殖或腹膜上的 種植所形成的癌性腹膜炎是腹腔積液產(chǎn)牛的主要原因，殺傷腫瘤細(xì)胞或抑制腫瘤細(xì)胞的增殖 是肝癌腹腔積液治療的重耍內(nèi)容z。臨床多采用腹腔閉式引流巧腔內(nèi)化療或腔內(nèi)腫瘤細(xì)胞 殺傷笏物輸注聯(lián)合應(yīng)川等手段殺傷腹腔內(nèi)的腫瘤細(xì)胞。腔內(nèi)化療的全身毒副作川較弱，但時(shí) 常因腫瘤細(xì)胞對(duì)所使川的化療藥物敏感性較低，而使治療效果受到很人彩響。釆川腹腔積液 中分離到的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，選擇敏感的化療藥物進(jìn)行腔內(nèi)和全身治療對(duì)于癌 性腹腔積液治療和延長(zhǎng)患者的生存期具啟重要意義。木文對(duì)藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)下的晚期肝癌治療 的臨床效果進(jìn)行觀察。1資料與方法1.1 一般資料病例均取白

9、20032007年大連市第三人民醫(yī)院和本院收治的肝癌并發(fā)腹腔積液的患者 48例，年齡4176歲，平均58歲。所有病例均為細(xì)胞學(xué)檢查診斷為肝癌。將性別、年齡、 腫瘤的類型、腫瘤的tnm分期和腹腔積液量相同的患者配為一対，并隨機(jī)地將:其分入対照組 和實(shí)驗(yàn)紐。實(shí)驗(yàn)紐治療方法：根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，選用含腫瘤抑制率較高藥物的聯(lián)合化療方 案，進(jìn)行全身化療和腹腔內(nèi)化療；對(duì)照組治療方法：聯(lián)合應(yīng)用5-氟尿唏噪、順鉗、表阿霉素 進(jìn)行整體化療和腹腔內(nèi)化療。對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組的藥物應(yīng)用劑量均按標(biāo)準(zhǔn)用量執(zhí)行。配對(duì)病例 腹腔積液的排放量排放次數(shù)、利尿劑的使用及其用量等背景治療均相同。1. 2腹腔積液的采集與腫瘤細(xì)胞的分離腹腔積

10、液患者在局麻卜行腹腔閉式引流，將腹腔積液引流至無(wú)菌的容器中，加肝索至終 濃度10 u/mlo取50 ml腹腔積液于ependorf離心管中,1 000 rpm離心10 min,棄上清。 在沉淀中加入5 ml hanks液混勻,并將細(xì)胞懸液緩慢加入到裝有2 ml ficol 1-hypque淋巴 細(xì)胞分離液的離心管中,2 000 r/min離心20 min,取腫瘤細(xì)胞層加入到另一離心管中,hanks 液洗3遍，rpmi1640全基（含10%胎牛血清、100 u/ml青霉素和100 u/ml鏈霉素）調(diào)成 lx105cell/ml 備用。1. 3化療藥物敏感性試驗(yàn)方法1將細(xì)胞懸液加于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板

11、，100 口1/孔。實(shí)驗(yàn)孔分別加入i卩氨蝶吟、氏春新堿、 表阿霉素、順鈉、卡鉗、vp16、5-氟尿唏嚨及紫杉醇等化療藥物（藥物用rpmi1640培基稀釋）, 5 p1/孔，并使上述藥物的終濃度分別為 1、0.003 5、0.875、1.5、0. 005、1. 5、1. 5、0. 002 7 mg/ml；對(duì)照孔每孔加5 ul rpmi 1640培基。培養(yǎng)板置于5% c02、37°c條件下培養(yǎng)56 h。 每孔加入20 ul mtt （5 mg/ml）,繼續(xù)培養(yǎng)4 ho 1 000 r/min離心10 min培養(yǎng)板，吸棄上 清100 p1/孔,加入二甲基亞m 100 u1/孔,混勻。540

12、、640 run雙波長(zhǎng)測(cè)0d值，計(jì)算抑 制率。抑制率二（1-實(shí)驗(yàn)孔0d值/對(duì)照孔0d值）x100%o14療效評(píng)價(jià)4腹腔積液治療效果的評(píng)價(jià)，根據(jù)who療效判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定，顯效（cr）：滲液消失，持 續(xù)4周以上；冇效（pr）:滲液顯著減少，持續(xù)4周以上；無(wú)效（nc）：未達(dá)上述指標(biāo)者即滲液 無(wú)減少或增加。幣體治療效果評(píng)價(jià)：分別于治療前和用藥后4周行ct檢查，療效按who標(biāo)準(zhǔn) 判定，即完全緩解（cr）、部分緩解（pr）、無(wú)變化（nc）和進(jìn)展（pd）。1. 5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用x2檢驗(yàn)。2結(jié)果2. 1腹腔積液治療的臨床療效24例患者采用依據(jù)藥敏試驗(yàn)選擇的化療方案治療以后，腹腔積液完全緩解8例，部分緩 解1

13、3例，無(wú)效3例，有效率為87.50%。常規(guī)藥物治療組，腹腔積液完全緩解10例，部分 緩解7例，無(wú)效7例，有效率為70.83%,兩組有效率無(wú)顯著性差異（p>0. 05）,見(jiàn)表1。表1癌性腹腔積液的治療效果比較（例）2. 2腫瘤治療效果評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)組中，無(wú)腫瘤完全緩解病例，腫癇部分緩解14例，無(wú)效8例，進(jìn)展2例，冇效率為 5& 33%。對(duì)照組屮，無(wú)腫瘤完全緩解病例，腫瘤部分緩解8例，無(wú)效11例，進(jìn)展5例，有 效率為33. 33%0實(shí)驗(yàn)組有效率高于對(duì)照組，有顯著性差片(p<0. 05),詳見(jiàn)表2。表2全身治療效果比較(例)3討論腹腔積液2, 3的出現(xiàn)是肝癌進(jìn)入晚期的重要標(biāo)，忐z-。肝

14、功能允許的條件下，此期肝 癌的治療仍可以病因治療為主同時(shí)輔以対癥治療方案進(jìn)行治療。目而多采用聯(lián)合藥物腹腔內(nèi) 化療和全身化療，這種治療方法能最人程度地殺滅原發(fā)病灶、腹腔內(nèi)和轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞，從 而達(dá)到抑制腫瘤的生長(zhǎng)和控制病情進(jìn)一步發(fā)展的目的。由于腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的敏感性爰異很 大，采用相同化療方案治療同類型腫瘤的不同患者時(shí)，其治療效果冇明顯不同。對(duì)患者的腫 瘤進(jìn)行體外腫瘤細(xì)胞藥物敏感性試驗(yàn),根據(jù)腫瘤細(xì)胞的化療藥物敏感譜制定個(gè)體化化療方案, 必然是腫瘤化療的發(fā)展趨勢(shì)4。從本項(xiàng)研究結(jié)果nj見(jiàn)，約敏試驗(yàn)指導(dǎo)下的個(gè)體化化療方案與 常規(guī)方案治療的有效率分別為5& 33%和33. 33%,個(gè)體化方案治療

15、的有效率明顯高于常規(guī)方案 (p0. 05),在腫瘤的治療上個(gè)體化方案的治療效來(lái)優(yōu)于常規(guī)治療方案。在腹腔積液的控制上, 兩種方案治療都冇較好的治療效果，個(gè)體化化療方案與常規(guī)治療方案的腫瘤治療的冇效率分 別為83. 33%和75. 00%,個(gè)體化化療方案與常規(guī)方案治療腹腔積液的有效率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)羌異(p >0. 05),提示肝癌患者腹腔積液的產(chǎn)牛不單是山于癌細(xì)胞在腹腔中的分裂增殖造成的，在肝 癌腹腔積液的治療上殺傷腫瘤細(xì)胞不是唯一的手段。影響常規(guī)化療方案治療效果的因素主要是腫瘤細(xì)胞的化療藥物敏感性的差異引起的，而 臨床使用的腫瘤化療常規(guī)方案,大多是經(jīng)過(guò)臨床循證研究獲得的對(duì)某種腫瘤冇效的治療方案,

16、 這些方案對(duì)多數(shù)腫瘤患者有一定程度的療效，而對(duì)有的患者卻毫無(wú)效果5。腫瘤的界質(zhì)性很 強(qiáng)，不同患者的同一類型的腫瘤以及同一個(gè)腫瘤內(nèi)的細(xì)胞其細(xì)胞的牛物學(xué)特性也不盡相同， 這些特性包括細(xì)胞的表型和藥物的嫩感性。腫瘤對(duì)各種化療藥物存在著明顯的個(gè)體差異，不 同的腫瘤類型、同一腫瘤類型的不同患者以及同一患者在不同的發(fā)病階段，對(duì)化療藥物的敏 感性并不完全相同，采用同一方案對(duì)同一腫瘤類型的不同患者治療勢(shì)必產(chǎn)生不同的治療效果, 導(dǎo)致總有效率降低。采用藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)下的化療在一定程度上減少了約物選擇的盲口性，最 大限度地殺傷腫瘤細(xì)胞、減輕臨床癥狀，從而使治療的冇效率提高。本項(xiàng)研究谿敏試驗(yàn)的方 法采用的是mtt法，該

17、法是國(guó)內(nèi)外普遍采用的腫瘤化療藥物的敏感性檢測(cè)方法，多屮心的臨 床研究證實(shí)該法有較高的臨床符合率，實(shí)體瘤的體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果和體內(nèi)藥物治療效果上的一致 性大，檢測(cè)的結(jié)果準(zhǔn)確性高。同時(shí)腹腔積液中腫瘤細(xì)胞的存活條件與體外細(xì)胞培養(yǎng)的條件相 近，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更能夠反映體內(nèi)的實(shí)際情況，藥敏試驗(yàn)結(jié)果的指導(dǎo)性更強(qiáng)。肝癌患者腹腔積液 的產(chǎn)牛機(jī)制比較復(fù)雜，腫瘤細(xì)胞腹膜種植形成癌性腹膜炎導(dǎo)致淋巴管通透性加強(qiáng)6,可導(dǎo)致 液體的滲岀加強(qiáng)；肝癌導(dǎo)致肝功能障礙使蛋口質(zhì)合成減少，血液的膠體滲透壓降低也可引起 腹腔積液形成，同時(shí)山于腫瘤壓迫，使淋巴循環(huán)障礙都可導(dǎo)致腹腔積液形成。在腹腔積液形 成的初期，采用排放腹腔積液、口服利尿藥物及控制

18、液體攝入等手段都會(huì)起到較好的治療效 果。初步研究結(jié)果顯示，根據(jù)腫瘤細(xì)胞化療藥物敏感性試驗(yàn)制定的個(gè)體化化療方案的腫瘤治 療的有效率高于常規(guī)化療方案,預(yù)示約物敏感性試驗(yàn)指導(dǎo)下的化療將可能有良好的應(yīng)用前景。 木項(xiàng)研究是一個(gè)階段性報(bào)道，存在觀察病例少、時(shí)間短等缺陷，進(jìn)一步的深入研究將為該方 法應(yīng)用可行性的準(zhǔn)確評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。參考文獻(xiàn)1yamaue h, tanimura h, tsunoda t, et al. chemosensitivity testing and highly purified fresh human tumor cell with the mtt colorimetrie assayjeur jcancer, 1991,27:1258-1263.2 盧玉梅.難治性門脈高壓腹水的治療j.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生,2008, 46(10) :31-32.3 孫彥，姜彬，倪立新，等.難治性腹水超濾濃縮靜脈回輸36例報(bào)道j.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī) 生,2008,46(7) : 156.4 von hoff dd, sandboach jf, clark gm, et a