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1、會(huì)計(jì)學(xué)1基因重組基因重組本章主要內(nèi)容本章主要內(nèi)容第1頁/共26頁 載體DNA(限制性內(nèi)切酶切開)目的基因宿主細(xì)胞重組體已轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞陽性克隆株繁殖表達(dá)第2頁/共26頁限制性核酸內(nèi)切酶切割DNADNA連接酶生成3- 5磷酸二酯鍵DNA聚合酶探針標(biāo)記、補(bǔ)平3末端反轉(zhuǎn)錄酶cDNA合成多聚核苷酸激酶5磷酸化、探針標(biāo)記末端轉(zhuǎn)移酶3末端多聚尾堿性磷酸酶切除末端磷酸基常用的工具酶：常用的工具酶：第3頁/共26頁53外切酶活性35外切酶活性5335第4頁/共26頁第5頁/共26頁第6頁/共26頁第7頁/共26頁末端脫氧核末端脫氧核苷酰轉(zhuǎn)移酶苷酰轉(zhuǎn)移酶(TDT)第8頁/共26頁第9頁/共26頁第10頁/共26
2、頁第11頁/共26頁第12頁/共26頁第13頁/共26頁RNA模板雜化雙鏈單鏈DNA雙鏈DNA反轉(zhuǎn)錄酶RNaseH堿水解DNA聚合酶整合S1核酸酶細(xì)胞內(nèi)復(fù)制試管內(nèi)合成反轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄酶第14頁/共26頁第15頁/共26頁第16頁/共26頁第17頁/共26頁第18頁/共26頁第19頁/共26頁第20頁/共26頁第21頁/共26頁第22頁/共26頁第23頁/共26頁第24頁/共26頁 重組重組DNA醫(yī)藥產(chǎn)品醫(yī)藥產(chǎn)品產(chǎn)產(chǎn) 品品功功 能能組織胞漿素原激活劑組織胞漿素原激活劑抗凝抗凝血液因子血液因子VIII促進(jìn)凝血促進(jìn)凝血顆粒細(xì)胞顆粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落剌激因子巨噬細(xì)胞集落剌激因子剌激白細(xì)胞生成剌激白細(xì)胞生成促紅細(xì)胞生成素促紅細(xì)胞生成素剌激白細(xì)胞生成剌激白細(xì)胞生成生長因子生長因子(bFGF, EGF)刺激細(xì)胞生長與分化刺激細(xì)胞生長與分化生長素生長素治療侏儒癥治療侏儒癥胰島素胰島素治療糖尿病治療糖尿病干擾素干擾素( 1b, 2a, 2b, )抗病毒感染及某些腫瘤抗病毒感染及某些腫瘤白細(xì)胞介素白細(xì)胞介素激活、剌激各類白細(xì)胞激活、剌激各類白細(xì)胞超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶抗組織損傷抗組織損傷單克隆抗體單克隆抗體利用其結(jié)合特異性進(jìn)行診斷試驗(yàn)、腫利用其結(jié)合特異性進(jìn)行診斷試驗(yàn)、腫瘤導(dǎo)向治療瘤導(dǎo)向治療乙肝疫苗乙肝疫苗(CHO, 酵母酵母)預(yù)防乙肝預(yù)防乙
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